Анализ на инфекции отрицательный что это значит
К сожалению, такие ситуации вполне возможны, причем старые методы – микроскопическое исследование мазка, бакпосевы – ошибаются гораздо чаще современных ПЦР и ИФА. Но и при применении новых методик могут быть единичные ложноположительные или ложноотрицательные результаты. Причины этого явления – неправильная подготовка к сдаче и погрешности при проведении анализа.
Причины ошибок при микроскопическом исследовании мазка
Этот анализ на ЗППП проводится довольно просто – берется мазок из половых путей, который окрашивается и осматривается. Метод был достаточно информативным много лет назад, когда выявлялись инфекции, вызываемые микробами и простейшими.
Однако со временем количество венерических инфекций увеличилось, и теперь они вызываются не только микробами, но и вирусами, определить которые с помощью мазка невозможно. Поэтому герпес, папилломавирус и цитомегаловирус такой анализ не покажет.
Однако и традиционные инфекции в мазках выявляются далеко не всегда. Например, если мужчина помочится перед обследованием, он смоет всех возбудителей из мочеиспускательного канала, и в мазке их не будет. Такая же ситуация произойдет, если женщина перед сдачей анализов проспринцуется. Ложноотрицательный результат регистрируется и на фоне приема антибиотиков.
Плохо определяются скрытые инфекции, не имеющие симптомов, особенно если поражаются глубокие органы, например простата у мужчин или яичники и матка у женщин. При взятии материала вне периода обострения возбудители, скорее всего, не обнаружатся.
Чтобы добиться более достоверных результатов при сдаче мазков, используется метод провокации. Для этого перед анализом с вечера нужно выпить небольшое количество алкоголя, поесть копченой или солёной пищи. Иногда делаются специальные провоцирующие уколы. Как правило, после этого возбудители регистрируются лучше.
Чем обусловлены неправильные результаты бакпосева
Ложноотрицательные результаты в этом случае также получаются при приёме антибиотиков, местном использовании антибактериальных средств и неправильном взятии материала. Некоторые виды возбудителей просто не дают роста.
Ложноположительный результат может регистрироваться при попадании микробов в образец извне – например, при погрешности в проведении анализа.
Ошибки при проведении ИФА-обследования
И при этом обследовании тоже бывают ошибки. Чаще всего их причинами являются:
- неправильный забор материала;
- нарушение обмена веществ у пациентов;
- приём медикаментов, влияющих на работу иммунной системы;
- иммунодефицит;
- беременность, при которой также меняется работа иммунной системы. Поэтому при положительных результатах обследования назначают другие методы, подтверждающие или опровергающие диагноз.
ПЦР-диагностика – ошибки практически исключены
Самый достоверный метод лабораторных обследований, вычисляющий возбудителей даже по небольшому количеству материала, – ПЦР. Но иногда и он дает ошибки, если, например, забор образцов был проведен неправильно.
Порой возбудители не обнаруживаются, поскольку их просто нет в выделениях, а они находятся в более глубоких тканях, например внутри простаты у мужчин или в яичниках и матке у женщин. В этом случае делается мазок с провокацией. Если в качестве образца используется кровь, провоцирование не проводится. В результате точность обследования при проведении ПЦР-реакции доходит до 100%.
Точность лабораторной диагностики также зависит от применяемого оборудования и реактивов. Поэтому сдавая анализы в современной клинике или диагностическом центре, пациенты значительно уменьшают вероятность ложноположительного или ложноотрицательного результата.
Что такое бактериурия и когда она возникает
Бактериурией называется наличие бактерий в урине. Часто это состояние не вызывает клинических симптомов, проявляясь случайно при сдаче анализов мочи. Присутствие микроорганизмов в мочевыводящих путях всегда говорит о серьезном воспалительном или инфекционном процессе.
Причины бактериурии
- Инфекции, в том числе ЗППП. В этом случае в урине обнаруживаются бактерии, попавшие из мочевого пузыря и уретры.
- Односторонний или двухсторонний пиелонефрит – инфекционное поражение почек.
- Острые и хронические воспалительные заболевания женской половой сферы. При этих патологиях микробы проникают в мочеполовую систему с током лимфы или крови.
- Камни, возникающие примочекаменной болезни, затрудняющие отток урины и провоцирующие застойные явления в мочеполовой системе.
- Гломерулонефрит – в этом случае поражается гломерулярный фильтр и бактерии попадают с током крови в мочу.
- Новообразования предстательной железы, мешающие оттоку мочи и провоцирующие размножение бактериальной флоры.
- Прямокишечные свищи, при которых в мочу проникают микроорганизмы из кишечника.
Типы бактериурии
- Бессимптомная, при которой, кроме появления микроорганизмов в урине, ничего не беспокоит.
- Истинная – сопровождается затрудненным болезненным мочеиспусканием. Урина вытекает мутная, с хлопьями, гноем, иногда примесью крови. Наблюдается повышение температуры, боль в пояснице, озноб. У мужчин может наблюдаться выделение гноя из уретры.
- Восходящая – бактерии проникают из нижних отделов мочевыводящих путей в верхние. Часто наблюдается при ЗППП.
- Нисходящая – в этом типе бактериурии микробы проходят из почек вниз по мочеточникам, попадая в мочевой пузырь и уретру. Такая ситуация возникает при пиелонефрите и закупорке мочевых путей камнем.
Какие микроорганизмы чаще всего обнаруживаются в моче
Стрептококки появляются в анализах урины после перенесенных ангины, бронхита, пневмонии, скарлатины. В мочевыводящую систему они чаще всего проникают с током крови. Состояние обычно провоцируется низким иммунитетом.
Кишечная палочка проникает в мочевыделительную систему при несоблюдении правил гигиены и кишечных свищах. Колибациллярная бактериурия часто регистрируется при снижении защитных сил организма, вызванных диабетом и иммунными нарушениями.
Гонококк – при гонорее в моче обнаруживаются гонококки. Если заболевание перешло в хроническую форму, симптомы инфекции могут отсутствовать.
Брюшнотифозные сальмонеллы – при брюшном тифе в 30% случаев у больных наблюдается бессимптомное выделение микробов с мочой. Это состояние может сохраняться и после выздоровления.
Бактерии бруцеллеза – у 10% больных наблюдается выделение этого микроба с мочой. При этой инфекции часто наблюдается бессимптомная форма бактериурии.
Как проводится лечение
При регистрации микроорганизмов в моче делается ее посев с определением типа микроорганизмов и их чувствительности к антибиотикам.
Выясняются причины бактериурии. Пациентам назначается УЗИ почек, предстательной железы, малого таза, показывающее состояние этих органов. Дается направление на биохимический и общий анализы крови.
Назначается трехстаканная проба мочи. Урина собирается в три стакана и по повышенному количеству лейкоцитов в одной из проб судят о месте, где возникла инфекция:
- в первой пробе – поражён мочеиспускательный канал;
- в третьей – причина кроется в предстательной железе;
- во всех трёх – инфекция находится в почках;
- в первой и третьей – возможен простатит и уретрит, а также сочетание двух заболеваний.
Пациенты сдают анализы на половые инфекции – мазки из половых путей и предстательной железы, бакпосев, ПЦР, ИФА.
Делается ПСА-тест – анализ на рак предстательной железы. Этот маркер появляется в самом начале заболевания, поэтому выявлять злокачественные опухоли можно до начала клинических симптомов.
Для лечения назначаются антибиотики, противовоспалительные препараты, обезболивающие средства, инстилляции (введение антисептических растворов в уретру через мочевой пузырь). При обнаружении свищевых ходов показано хирургическое лечение.
При подозрении на носительство бактерий, вызванное инфекцией, больного направляют к врачу-инфекционисту, а при обнаружении опухолей – к онкологу.
Бактериурия – опасный симптом, говорящий о возможных тяжелых заболеваниях. Поэтому при появлении бактерий в моче нужно обратиться к урологу, обследоваться и вылечить выявленные патологии.
О враче
Запишитесь на прием к врачу урологу-андрологу высшей категории - Клокову Андрею Николаевичу уже сегодня. Мы сделаем все, чтобы принять вас как можно быстрее. Клиника Радуга расположена в Выборгском районе Санкт-Петербурга, всего в нескольких минутах ходьбы от станций метро Озерки, Проспект Просвещения и Парнас. Смотрите карту проезда.
Результаты ПЦР и особенности их расшифровки интересуют многих людей, чьим диагнозом является подозрение на ЗППП.
Как отмечают доктора, метод обладает высокой результативностью и минимальным процентом ошибок. Поэтому зачастую используется как контрольный в диагностике инфекционных процессов.
В чем состоит суть ПЦР методики, хотят знать больные люди, и благодаря чему обеспечивается высокая вероятность получения верных результатов. Как расшифровываются полученные итоги, и есть ли связь между этим методом и другими способами диагностики?
- Суть метода ПЦР
- Какие материалы можно использовать для ПЦР
- Что значит положительный результат ПЦР
- Что значит отрицательный результат ПЦР
- Кто из докторов выполняет расшифровку результатов ПЦР
- Когда показатели ПЦР становятся положительными после заражения
- Вид бланка анализов на ПЦР
- Вероятность ошибочных итогов при ПЦР
- Связь ПЦР с другими методиками
Суть метода ПЦР
ПЦР-методика – исследование, используемое довольно широко в современном мире. Диагностика позволяет поставить диагноз не только при инфекционных процессах, но и при генетических патологиях, некоторых онкологических недугах. Изначально ПЦР изобреталась не для применения в медицине.
В отрасль здравоохранения метод пришел из области молекулярной биологии, в которой активно использовался после своего открытия. Ученый, создавший ПЦР, получил нобелевскую премию.
Прежде чем разбираться, как расшифровывать результаты анализов ПЦР, необходимо понять, в чем основная суть методики.
На самом деле на словах все выглядит довольно просто. У пациента берется биологический материал. Затем он обрабатывается особым образом с помощью специальных химических реагентов.
Затем получившуюся смесь помещают в особую машину, которая проводит процесс амплификации.
То есть многократного умножения определенных фрагментов ДНК или РНК, что удалось выявить с помощью добавления реагентов.
Когда процесс амплификации подойдет к концу, доктору остается только идентифицировать полученные результаты, чтобы поставить верный диагноз.
Главное – проявить внимательность на этапе идентификации. Но учитывая, что сегодня большую часть работы делает компьютер, все сильно упрощается.
ПЦР отличается высокой эффективностью. Ее широко применяют для того, чтобы определять наличие в организме скрытых инфекционных процессов, которые не дают положительных серологических реакций. Также скрытые инфекции обычно нельзя выявить с помощью посева или микроскопии. Поэтому зачастую ПЦР – единственный достоверный способ постановки диагноза в этом случае.
Какие материалы можно использовать для ПЦР
Часто удачность исследования зависит от того, как и какой материал брался для выполнения анализа. Однако в случае с полимеразной цепной реакцией расшифровка результатов ПЦР исследований мало зависит от биологического материала, который брался у пациента. Гораздо большее значение имеет подготовка к обследованию с помощью метода.
В качестве материала могут служить:
- кровь, сдаваемая в соответствии со стандартными рекомендациями из вены на локтевом сгибе
- мокрота, собираемая при откашливании
- налет с ротовой полости, собираемый доктором в утреннее время, пока пациент еще не завтракал и не чистил зубы
- мазок с половых органов, дающий хорошие результаты в том случае, если больной не мочился в течение нескольких часов, отказывался от сексуальных контактов несколько дней и соблюдал ряд других рекомендаций
- исследование мочи, при котором биоматериал также предпочтительно собирать с утра, не проводя накануне гигиену половых органов
биоптаты органов или тканей, получаемые с помощью специальных инструментов и др.
Как отмечают врачи, материалом для ПЦР может быть совершенно любая жидкая среда организма человека.
При выборе главное помнить о том, что предпочтение отдают той среде, где с большей долей вероятности будет присутствовать возбудитель. Например, при половых инфекциях целесообразнее брать мазок с половых органов или кровь, чем мазок из ротовой полости.
Решать вопрос о том, какие материалы используются для получения результатов ПЦР в том или ином случае, лучше всего с лечащим врачом на приеме. Доктор сделает оптимальный выбор, исходя из предполагаемого у пациента заболевания.
Что значит положительный результат ПЦР
ПЦР – метод, который может похвастаться своей высокой специфичностью.
Предположим, доктор поставил себе цель обнаружить какой-то патогенный микроорганизм в теле пациента. И если тот на самом деле присутствует в теле, он будет обнаружен. При этом спутать его с каким-либо другим патогеном благодаря уникальному коду ДНК будет невозможно.
Если ПЦР положительный, значит, в организме с вероятностью почти в 100% находится возбудитель, поиск которого проводился врачом. Ведь методика рассчитана, в отличие от многих других диагностических методов, именно на поиск самих возбудителей, а не их следов.
Как отмечают доктора, при данном исследовании вероятность случайно принять один возбудитель за другой сводится к нулю. Зато существует вероятность получения положительных результатов после терапии.
Если в организме будут оставаться обломки нуклеиновых кислот. Однозначно положительной реакция чаще всего бывает, если пациент предъявляет жалобы на какие-то конкретные симптомы инфекционного процесса. Причем результат будет сохраняться даже в течение нескольких месяцев после того, как возбудитель будет полностью побежден и удален из организма.
Что значит отрицательный результат ПЦР
Если ПЦР результат отрицательный, значительное число пациентов автоматически считают, что они здоровы.
Это практически правильное решение.
Ведь если итоги оказались отрицательными, значит фрагменты патогенного микроорганизма не были определены тест-системой. Из этого следует логичный вывод, что микроорганизма в теле нет.
Однако стоит учитывать, что несмотря на всю свою высокую чувствительность и специфичность, методика имеет определенный порог чувствительности. Если концентрация возбудителя на момент обследования не переходит границу этого порога, результат будет расцениваться, как отрицательные. Хотя на самом деле окажется ложным до поры до времени.
Доктора акцентируют особое внимание на том, что отрицательный результат не всегда означает отсутствие патологии. Чтобы на 100% быть уверенным в своем здоровье, пройти исследование повторно рекомендуется через несколько недель, а порой и месяцев.
Кто из докторов выполняет расшифровку результатов ПЦР
Часто среди пациентов звучит вопрос о том, какой врач будет проводить расшифровку ПЦР исследования.
В первую очередь необходимо запомнить, что доверять результаты стоит тому же медицинскому работнику, что первоначально давал направление на исследование.
Связана эта рекомендация с тем, что в этом случае доктор будет представлять себе, что он ожидает увидеть в анализах. Сможет грамотно интерпретировать итоги, соотнося их с клинической картиной.
Получить направление наиболее часто можно от уролога, гинеколога или венеролога. Соответственно, после получения итогов относить бланк с результатами стоит кому-то из них. Важно помнить, что ПЦР – довольно дорогой метод диагностики. Его не принято использовать просто так, без специальных показаний к обследованию.
Среди них:
- появление специфических для ЗППП симптомов
- обследование перед планированием беременности или процедурой искусственного оплодотворения
- поиск причин бесплодия и другие показания
Когда показатели ПЦР становятся положительными после заражения
Часто пациенты задают на приеме у медицинского работника вопрос о том, когда результаты ПЦР крови и мазков становятся положительными после заражения. Все зависит от того, насколько быстро конкретная инфекция сможет, размножаясь, пройти пороговую для теста концентрацию в материале.
Преимуществом ПЦР является то, что порог чувствительности у теста довольно низкий. Это значит, что выявить признаки заражения можно даже в том случае, если количество возбудителя в биологическом материале будет минимальным.
Подобная особенность дает возможность постановки диагноза даже в период инкубации, когда симптомы еще полностью отсутствуют.
Однако осечка возможна и при применении ПЦР методики. Это происходит, например, если пороговая концентрация все же не успела достичь определяемых тестом значений. В этом случае велика вероятность получения далеких от правды результатов.
Вид бланка анализов на ПЦР
Вопрос о том, как выглядит бланк результатов анализов ПЦР, весьма актуален.
В первом случае пациенту рекомендуется озаботиться собственным здоровьем. Так как анализ расценивается как положительный, а человек, как зараженный. Следовательно, ему требуется терапия.
Во втором случае чаще всего состояние пациента оценивают, как здоровое, хотя могут быть и исключения. Важно помнить, что количество возбудителей, указанных на бланке, зависит во многом от того, какое конкретно вид анализа применялся.
Если проводился поиск только одного патогенного микроорганизма, в результате будет фигурировать только его название с соответствующей пометкой. Если ПЦР проводилось сразу на несколько инфекций, что тоже возможно, в бланке будет список патологий с пометками.
Сегодня в лабораториях при комплексном анализе на группу инфекций не принято выдавать на каждый патогенный микроорганизм отдельный бланк. Их все указывают на одном листе.
Вероятность ошибочных итогов при ПЦР
Часто пациенты интересуются вопросом о том, возможно ли получение ложных результатов обследования при использовании методики. К сожалению, как отмечают врачи, ошибки хоть и редко, но случаются.
Существует, например, вероятность получить ложноположительные результаты ПЦР сразу после лечения. Объясняется это очень просто.
Терапия уже окончена, возбудитель удален из организма и не может заражать новые ткани. Однако остатки ДНК или РНК еще могут циркулировать в крови или ином диагностическом материале. В этом случае тест-система будет улавливать их и воспринимать за полноценную патологию, выдавая ложноположительный итог.
Именно поэтому рекомендуется после терапии сдавать исследование несколько раз с разными промежутками времени. Только в этом случае итоги будут достаточно объективными.
Ложноотрицательные результаты анализов ПЦР после приема антибиотиков также возможны. Происходит это в том случае, если пациент, неверно используя препараты антибактериального ряда, смазал симптомы болезни.
Не позволил микроорганизму активно размножаться в теле, но при этом и не довел его уничтожение до конца. В этом случае количество возбудителей может упасть ниже пороговой концентрации чувствительности. Это и даст неверные результаты тестирования.
Связь ПЦР с другими методиками
С помощью метода ПЦР доктора нередко подтверждают или, напротив, опровергают результаты других методов обследования, используемых для диагностики ИППП.
Например, с этой целью может использоваться ИФА.
Бывает так, что ПЦР отрицательный, а ИФА положительный. Тогда больной оказывается в замешательстве относительно своего состояния.
Доктора рекомендуют не теряться, а сначала провести оба теста повторно. Если ИФА останется положительным, а ПЦР отрицательным, с большой вероятностью заболевание в организме пациента отсутствует.
Ведь иммуноферментный анализ направлен на реакцию антиген-антитело. И порой может принимать сходные по структуре антигены других возбудителей за искомый, выдавая ложноположительные результаты.
Вероятность того, что ИФА дало верный результате на второй раз, а ПЦР, напротив, выдало ошибку, например, из-за низкого титра возбудителя, сведена к минимуму. Это скорее казуистика, чем реальная клиническая практика.
Результаты ПЦР диагностики обладают высокой ценностью в диагностике большого количества различных патологий. В первую очередь методика является незаменимой при подозрении на различные ЗППП.
Если вам нужно сдать получить комментарии по результатам ПЦР, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.
- ВИЧ
- Гарднереллез
- Кондиломатоз
- Молочница
- Сифилис
- Трихомониаз
- Баланопостит
- Герпес
- Гонорея
- Микоплазмоз
- Уреаплазмоз
- Уретрит
- Хламидиоз
- ЗППП
Высокотехнологичные лабораторные методы диагностики дают возможность выявить множество заболеваний на самых ранних стадиях. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) — один из самых новых и точных способов диагностики. За его разработку ученый Кэри Муллис получил в 1993 году Нобелевскую премию. Сегодня этот метод хотя и считается экспериментальным, но уже широко и успешно применяется в медицине.
ПЦР-диагностика: суть подхода
Метод ПЦР использует принципы молекулярной биологии. Его суть заключается в применении особых ферментов, которые многократно копируют фрагменты РНК и ДНК возбудителей болезни, которые находятся в пробах биоматериала, например в крови.
После этого работники лаборатории сверяют полученные фрагменты с базой данных, выявляют тип возбудителя болезни и его концентрацию.
ПЦР проводят в амплификаторе — приборе, охлаждающем и нагревающем пробирки с пробами биоматериала. Нагрев и охлаждение необходимы для проведения репликации. Точность температурного режима влияет на точность результата.
Диагностические возможности метода ПЦР огромны, с его помощью можно выявить самые разные инфекции. Чаще всего ПЦР-метод применяют для диагностики:
- ВИЧ;
- герпеса;
- различных половых инфекций, в частности хламидиоза, уреаплазмоза, гарднереллеза, микоплазмоза и трихомониаза;
- кандидоза;
- гепатитов;
- мононуклеоза;
- листериоза;
- цитомегаловируса;
- туберкулеза;
- вируса папилломы человека;
- клещевого энцефалита.
Это далеко не полный список, метод ПЦР-анализа используется в разных областях медицины.
У диагностики методом ПЦР много плюсов:
Высокая чувствительность. Метод позволяет выявить возбудителя болезни даже при наличии нескольких молекул его ДНК, то есть на очень ранних стадиях, при хронической форме заболевания, а так же в случаях, когда болезнь никак себя не проявляет, протекая латентно.
Универсальность. Для проведения ПЦР анализа подходит почти любой биоматериал — от крови и слюны до клеток кожи.
Широкий охват. Исследование одного образца может выявить сразу нескольких возбудителей болезни.
Оперативность. Результат, как правило, готов через 5–7 часов, то есть получить заключение можно уже на следующий день после забора биоматериала.
Точность. Метод ПЦР практически никогда не дает ложноположительных или ложноотрицательных результатов, если была соблюдена технология проведения этого анализа.
Невысокая стоимость. По цене ПЦР-анализ сравним с любыми другими лабораторными анализами крови.
Однако следует понимать, что совершенных методов анализа не бывает. У ПЦР есть и минус — высокие требования к соблюдению технологии и к профессионализму лаборантов. Если образец был загрязнен, анализ может дать ложный результат. Поэтому проводить ПЦР-диагностику лучше только в самых лучших лабораториях, где внедрены системы контроля качества работы.
Для ПЦР-диагностики заболеваний на анализ берут разные виды биоматериала. Выбор зависит от типа инфекции. При анализе на ЗППП методом ПЦР берут соскоб или мазок из шейки матки или уретры, а также мочу. Для выявления герпеса, цитомегаловируса, гепатита, токсоплазмоза и ВИЧ на анализ берут кровь. При анализе на мононуклеоз и цитомегаловирус берут мазок из зева. Спинномозговая жидкость используется для анализа при поражениях нервной системы, для диагностики внутриутробных инфекций исследуются ткани плаценты, для выявления легочных инфекций — мокрота или плевральная жидкость.
Подготовка к ПЦР-диагностике напрямую зависит от типа биоматериала. Кровь сдается натощак утром. Моча также сдается утром, в лабораторных условиях, в стерильный контейнер. Перед сдачей мазка или соскоба из урогенитальной области нельзя вступать в половые контакты за несколько дней до исследования, не следует проводить спринцевания. Мазок или соскоб нельзя сдавать во время менструации и в течение 2-х дней после ее окончания.
Существует немало различных методик ПЦР-диагностики: ПЦР в реальном времени, секвенирование, пиросеквенирование, микрофлюидные технологии. Сейчас наиболее распространенным способом проведения анализа является ПЦР в реальном времени — этот метод практически не допускает ложноположительных результатов, к тому же срок обработки образцов при исследовании таким способом сокращается — результат можно получить уже через час.
Для пациента результат ПЦР-анализа может быть либо положительным, либо отрицательным. Отрицательный означает, что следов враждебной ДНК не обнаружено и человек здоров. Положительный подразумевает наличие фрагментов ДНК возбудителя болезни — это значит, что человек заражен и ему требуется лечение.
Нередко ПЦР-диагностика дает положительный результат, но пациент не чувствует никакого недомогания, а признаки болезни отсутствуют. Однако это означает не ошибку, а очень раннюю стадию заболевания. В этом случае необходимы дополнительные исследования и лечение. Если заболевание было диагностировано на столь ранней стадии, следует начинать терапию как можно скорее, ведь чем дальше зайдет болезнь, тем сложнее будет ее вылечить.
ПЦР-диагностика инфекций невероятно точна — она позволяет обнаружить возбудителя болезни, даже если в пробе находится всего одна-единственная молекула его ДНК. Именно это качество сделало ПЦР-анализ одним из эффективнейших диагностических инструментов как для определения наличия инфекции, так и для контроля за ходом лечения.
ПЦР-исследования уже долгое время входят в спектр лабораторно-диагностических исследований различных заболеваний.
За несколько десятилетий развития и совершенствования, методика стала для дерматовенерологической службы незаменимой.
В данной статье вы узнаете
Что представляют из себя ПЦР исследования и их результаты.
Полимеразная цепная реакция - это метод диагностики, позволяющий идентифицировать возбудителя того или иного заболевания.
Искомым фактором служат уникальные последовательности генетического материала, которые присутствуют в микробной клетке только одного вида или штамма патогенных микроорганизмов.
Чаще всего целью исследования является ДНК бактерии или вируса, но метод ПЦР предоставляет результаты и по РНК микроорганизмов.
Для чего используются различные биологические материалы:
- слюна
- биоптат ткани
- моча
- спинномозговая жидкость
- кровь
- соскобы со слизистых оболочек
Результаты ПЦР диагностики представляют собой
данные о наличии или отсутствии заболевания это – наиболее простая, доступная информация.
Есть такие методики ПЦР, результаты анализов которых кроме установления самого факта инфицирования, позволяют оценить активность инфекции, динамику болезни и отклик на проводимое лечение.
Главное преимущество методики – высочайшая чувствительность и специфичность.
Такие анализы быстро проводятся и очень точны.
Представляя достоверные данные, позволяют начать лечение как можно раньше.
ПЦР исследование состоит из трех этапов:
- Подготовка образца после взятия материала.
- Собственно полимеразная реакция, которая состоит в многократном копировании фрагментов материала.
- Интерпретация результатов.
Результаты анализов ПЦР положительны, если предполагаемый возбудитель обнаружен.
Если же нет - результат отрицательный.
Как таковой, утвержденной формы бланка результатов анализов нет.
Это связано с тем, что исследование и фиксацию данных проводит компьютер.
Соответственно, графы и данные в бланк вносятся так, как предусматривает программное обеспечение, под управлением которого работает аппарат.
Поэтому расшифровка результатов анализов требует от врача особой подготовки и опыта.
В случае, когда проводится полимеразно-цепная реакция в реальном времени, в бланке результатов анализов еще отдельно указывается количество выявленных копий генетического материала искомого микроорганизма.
Разумеется, если таковые будут выявлены в принципе.
Все возбудители венерических заболеваний и гемотрансмиссивных инфекций (гепатиты, ВИЧ), попав в организм человека начинают размножаться, но при этом никак себя не проявляют.
Здесь имеет место так называемый инкубационный период или торпидное, скрытое течение инфекции.
В подобных случаях ПЦР все равно находит в диагностическом материале генетические маркеры возбудителей уже через несколько дней от момента заражения.
Для того, чтоб анализ стал положительным, достаточно одной молекулы ДНК или РНК патогенного микроорганизма в собранном диагностическом материале.
Для многих ранних аппаратов существует технологический порог чувствительности в 40 микробных тел.
Но, как правило, если человек действительно заражен той или иной венерической болезнью или ЗППП, то у него возбудителей в пробах бывает больше этого числа и анализ будет положительный.
По большому счету, такой вариант возможен в двух случаях: человек не заражен или неправильно собран диагностический материал.
Конечно, нельзя исключать, что концентрация возбудителей в исследуемой пробе может оказаться ниже, чем порог чувствительности аппарата.
Но такая ситуация встречается крайне редко, и если у доктора есть сомнения, то анализ всегда можно повторить спустя некоторое время.
Если результаты диагностики ПЦР останутся отрицательными, то человек здоров.
В противном случае, при получении вторых анализов положительными, это значит, что пациент заражен и необходимо начинать его лечение.
Расшифровывать результаты ПЦР анализа должен лечащий врач
Расшифровывать результаты ПЦР анализа должен лечащий врач , которому известен ход лечения.
Идеально, чтоб это был тот же специалист, который проводит сбор диагностического материала для проведения исследования, может наблюдать пациента и отслеживать все изменения в здоровье человека.
К сожалению, клиническое течение современных венерических заболеваний и инфекций сильно отличается от классического.
В таких случаях даже результаты анализов ПЦР необходимо подкреплять данными других исследований:
- микроскопия мазка отделяемого половых органов, из уретры
- серологические реакции крови на антитела к определенным возбудителям (ИФА, РПГА и другие)
- культуральный посев
Ситуации, когда данные разных методик противоречат друг другу, встречаются, к счастью, не часто. Например – ПЦР положительно, а ИФА положительно.
Такое бывает в конце лечения пациента, когда патогенные микроорганизмы уже уничтожены и в организме человека их нет.
Но антитела (иммуноглобулины) к антигенам возбудителей инфекции еще циркулируют в крови несколько недель или даже месяцев, лет.
При клиническом выздоровлении, такое несоответствие трактуется в пользу ПЦР, так как его результаты более точные, чем исследования на основании антител.
Культуральный посев считается наиболее чувствительным, но для получения его результатов приходится ждать несколько дней или даже недель.
Поэтому бактериологическое исследование проводится только тогда, когда ПЦР не может предоставить гарантированного точного ответа.
Важно уметь сопоставлять полученные данные анализов и клинические особенности протекания инфекции.
Так, в некоторых случаях результат ПЦР положителен, хотя возбудитель успешно элиминируется иммунной системой.
Так как пациент только что завершил лечение в его организме еще сохраняются погибшие патогенные микроорганизмы.
Их геном будет обнаружен, но все равно тогда положительный результат не означает наличие заболевания.
- при неправильном подходе к пациенту
- взятии материала не из нужной биологической среды
Очень большое значение имеет тщательное выяснение всех деталей и нюансов заболевания.
Особое внимание необходимо уделять тому, что и как применял человек от момента появления первых симптомов до обращения за квалифицированной медицинской помощью.
Например – антибиотики, которые можно купить в любой аптеке.
Самолечение часто приводит к значительному сокращению числа микробов из-за чего может случиться ложноотрицательный результат ПЦР анализа.
То есть роль человека, врача, сводится только к тому, чтоб правильно собрать диагностический материал и затем расшифровать полученные результаты.
Этот способ лабораторных исследований очень универсален.
Существует ПЦР диагностика:
- инфекций, передаваемых половым путем.
- Также некоторых возбудителей респираторных заболеваний (коклюш, бронхосептикоз)
- особо опасных инфекций (ВИЧ), гепатитов
- возбудителей кишечных инфекций (ротавирусы, сальмонелла, Helicobacter pylori)
- вирусов гриппа и др
Читайте также: