Диагностика инфекционных заболеваний крс

Респираторные болезни молодняка крупного рогатого скота наносят огромный экономический ущерб промышленному скотоводству. Наиболее часто этиологическую роль в возникновении данной патологии играют вирусы, содержащие в своем составе РНК: респираторно-синцитиальная инфекция, Она способна вызывать поражение респираторного тракта и лимфоидной системы восприимчивых животных.

При планировании профилактических мероприятий большая роль принадлежит оперативной и точной лабораторной диагностике, направленной на расшифровку этиологической структуры конкретной вспышки респираторных болезней и выяснения этиологической роли каждого инфекционного агента.

Для диагностики вирусных инфекций наиболее пригодны простые методы, позволяющие быстро исследовать большое число проб биоматериала. Помимо установления этиологии заболевания, лабораторная диагностика имеет существенное значение в организации противоэпизоотических мероприятий. Ранняя диагностика первых случаев проявления вирусных болезней позволяет своевременно организовать и провести профилактические мероприятия. Реализация программ вакцинации вирусных инфекций, а также программ их эрадикации, которые реализуются в некоторых странах Европы, невозможны без тщательно спланированных программ диагностических исследований, роль которых при респираторных болезнях животных постоянно возрастает.

В связи с тем, что многие возбудители вирусной природы могут постоянно присутствовать в популяции восприимчивых животных, в лабораторной диагностике вирусных инфекций используются три основных принципа:

• 1. Выявление антигенов вируса или его нуклеиновых кислот непосредственно в исследуемом материале от животных;
• 2. Выделение и идентификация вирусов из проб биоматериала от больных животных;
• 3. Ретроспективная серологическая диагностика болезней, основанная на установлении диагностического (4-х и более кратного) прироста титров специфических антител к вирусам при исследовании парных проб сыворотки крови (сероконверсиия), свидетельствующая об активной вирусной инфекции.

При любом выбранном подходе к лабораторной диагностике вирусных инфекций основным требованием являются сроки отбора и качество биоматиериала, отобранного от животных. Для прямого анализа проб биоматериала или выделения вируса исследуемый материал должен быть получен в самом начале заболевания, когда возбудитель еще выделяется от инфицированного животного в относительно больших количествах и не связан с антителами. Объем проб должен быть достаточен для проведения прямого исследования. Важно также определить источник отбора проб биоматериала в соответствии с предполагаемым заболеванием, т. е. тех органов или тканей организма, в которых, исходя из патогенеза болезни, вероятность присутствия вируса наиболее высока. Большую роль в успешной диагностике играют условия транспортировки биоматериала, вид транспортной среды и его хранение. Пробы биоматериала должны отбираться не позднее 4-х часов после гибели или вынужденного убоя животных и транспортироваться в диагностическую лабораторию в замороженном состоянии в термосе со льдом.

Для установления сероконверсии первая проба сыворотки крови должна отбираться на ранних стадиях проявления болезней (не позднее 3-5 дней после появления первых клинических признаков), а вторая в период выздоровления или реконвалесценции через 3-4 недели после отбора первой пробы. Первая проба хранится в замороженном виде до взятия второй, транспортируются они в лабораторию вместе, где исследуются одномоментно. Пробы сыворотки крови должны отбираться в стерильные пробирки, не должны быть гемолизированы, контаминированы бактериальной флорой и не содержать консервантов. Транспортировка их должна осуществляться в замороженном виде в термосе со льдом.

Прямые методы диагностики вирусных болезней -- это методы, позволяющие обнаружить вирус, его антиген или нуклеиновую кислоту непосредственно в пробах биологического материала, являющиеся наиболее быстрыми (2--24 ч). К ним относятся: электронная микроскопия, метод флуоресцирующих антител (МФА), иммуноферментный анализ (ИФА), радиоиммунный анализ (РИА) и полимеразная цепная реакция (ПЦР). Однако эти методы имеют свои ограничения, поскольку существует возможность получения ложноположительных и ложноотрицательных результатов. Поэтому они требуют подтверждения непрямыми методами. Как правило, использование этих методов регламентируется массовыми (скрининговыми) исследованиями, а результаты их носят предварительный характер. вирусный инфекция иммуноферментный антиген

Непрямые методы диагностики вирусных болезней. К ним относятся: выделение и идентификация вирусов в чувствительных биологических системах (культуры клеток, куриные эмбрионы, лабораторные животные), а также реакция нейтрализации вируса, проводимая с использованием этих же систем.

Выделение вируса по-прежнему остается стандартным или референтным методом вирусологической диагностики и дает информацию для решения многих вопросов. С использованием этого метода удается расшифровать этиологию болезни, установить циркуляцию вирусов среди обследуемой популяции крупного рогатого скота, получить информацию об эпизоотической ситуации в стаде животных на конкретной территории. Однако он является дорогостоящим и трудоемким.

Для исследования от больных животных отбирают носовые выделения, смывы и соскобы с носовой полости, сыворотку крови, от погибших -- кусочки слизистой носа, трахеи, бронхов, легких, а также регионарные лимфоузлы. Патологический материал направляют в термосе со льдом. Из соскобов слизистой оболочки носа, трахеи, бронхов делают мазки, а из кусочков легкого -- мазкиотпечатки для иммунофлюоресцентного исследования. Из кусочков органов готовят суспензию для заражения культур клеток и приготовления комплемент связывающего и преципитирующего антигенов.

ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ, ИФА (Enzyme immunoassay) -- метод выявления антигенов и антител, основанный на определении комплекса антиген-антитело за счет введения в один из компонентов реакции ферментативной метки с последующей ее детекцией с помощью соответствующего субстрата, изменяющего свою окраску. Основой проведения любого варианта ИФА служит определение продуктов ферментативных реакций при исследовании тестируемых образцов в сравнении с негативными и позитивными контролями.

Для определения антигенов и антител применяются твердофазный (гетерогенный) вариант иммуноферментного анализа. Использование твердой фазы позволяет упростить процесс разделения компонентов реакции за счет иммобилизации одного из компонентов на твердой фазе и удаления субстанций, не участвующих в реакции.

Иммуноферментный анализ по сравнению с другими методами детекции антигенов и антител обладает следующими преимуществами:

• -- высокой чувствительностью, позволяющей выявлять концентрации до 0,05 нг/мл. Такая чувствительность метода определяется способностью одной молекулы фермента катализировать превращение большого числа молекул субстрата;
• · возможностью использовать минимальные объемы исследуемого материала;
• -- стабильностью при хранении всех ингредиентов, необходимых для проведения ИФА (до года и более);
• -- простотой проведения реакции;
• -- наличием как инструментального (в качественном и количественном варианте), так и визуального учета;
• -- возможностью автоматизации всех этапов реакции
• -- относительно низкой стоимостью диагностических наборов.

Вышеперечисленные преимущества определили широкое применение ИФА во всех областях медицины, в том числе и при диагностике, профилактике и изучении вирусных гепатитов . Диагностические препараты для ИФА, предназначенные для выявления большинства серологических маркеров инфицирования вирусами гепатитов А, В, С и D выпускаются различными предприятиями и фирмами как у нас в стране, так и за рубежом.

В качестве твердой фазы в большинстве коммерческих диагностических препаратов используют полистироловые 96-ти луночные планшеты или полистироловые шарики [фирмы “ДИА-плюс”, “Рош” (“ROCHE”), “ЭББОТТ” (“АВВОТТ”)]. Основные требования, предъявляемые к твердой фазе при проведении ИФА, включают: устойчивость к растворам, используемым в реакции;

наличие высокой специфической емкости, т. е. способности сорбировать на своей поверхности антитела или антигены в количествах, необходимых для проведения реакции в сочетании с как можно меньшей неспецифической сорбцией белков из исследуемых образцов и коньюгатов.

Наиболее распространенным способом иммобилизации антител или антигенов является адсорбция, когда часть молекул за счет ионных и гидрофобных взаимодействий, а также образования водородных связей присоединяется к поверхности твердой фазы.

В настоящее время разработаны различные варианты твердофазного иммуноферментного анализа, и практически все они были апробированы или применены для выявления маркеров инфицирования вирусами гепатитов А, В, С, D и Е. Наиболее простой схемой проведения ИФА является “сэндвич”-метод. Общая схема проведения метода заключается в следующем . На твердой фазе адсорбированы антитела к исследуемому антигену После инкубации исследуемого материала и образования комплекса антитело -- антиген проводится удаление несвязавшихся компонентов, добавляется коньюгат, т. е. антитела к искомому антигену, меченые ферментом. По завершении инкубации с последующим удалением непрореагировавшего коньюгата промывкой образуется комплекс, в котором антиген как бы заключен между двумя слоями антител. Наличие меченных ферментом антител определяется при помощи соответствующего субстрата. “Сэндвич”-метод используется для выявления HBsAg, HBeAg, антигена вируса гепатита А. Для ускорения “сэндвич”-метода, применяется его модификация -- “одностадийный сэндвич-метод”, при которой добавление исследуемого материала и коньюгата проводится одновременно. При использовании диагностических наборов ИФА, основанных на этой схеме проведения реакции, необходимо помнить, что в исследуемом образце не должно быть веществ, ингибирующих активность фермента, т. н. ферментных ядов, (например, азида натрия, применяемого в качестве консерванта). Одной из особенностей этого метода является снижение оптической плотности ферментативной реакции с образцами, имеющими крайне высокую концентрацию исследуемого антигена за счет образования комплекса HBsAg и коньюгата в растворе. Однако тщательный подбор концентрации меченых антител в коньюгате представляемого диагностического набора устраняет возможность получения ложнонегативных результатов с образцами, имеющими высокую концентрацию HBsAg.

Для выявления антител к различным антигенам вирусов гепатитов А, В, С и D применяются разнообразные варианты постановки ИФА, основными из которых являются:

• 1. Метод с использованием меченых вторичных антител (антител против иммуноглобулинов человека) и иммобилизированных антигенов на твердой фазе. Метод применяется для определения антител к вирусу гепатита С. Общая схема проведения реакции заключается в следующем (рис. 21): на твердой фазе иммобилизуют антиген, после инкубации исследуемого материала и удаления несвязавшихся компонентов добавляют меченые ферментом антитела к иммуноглобулинам человека класса IgG, которые взаимодействуют с Fc-фрагментом анти-ВГС. После проведения субстрат-ферментативной реакции проводят учет полученных результатов. При наличии антител уровень оптической плотности прошедшей реакции превосходит показатели отрицательных образцов. Для уменьшения возможных неспецифических реакций вводится специальный коэффициент, указанный в наставлениях, прилагаемых к диагностическим наборам.
• 2. Метод с использованием меченого антигена и иммобилизованного на твердой фазе антигена. Метод используется для выявления анти-HBs в диагностическом наборе “AUSAB” EIA фирмы “ЭББОТТ”. Общая схема проведения реакции заключается в следующем (рис. 22): на полистироловом шарике адсорбирован HBsAg субтипа ad и ау, после инкубации с исследуемым материалом и удаления непрореагировавших компонентов добавляется HBsAg, меченный ферментом, который взамодействует со свободными центрами связывания антител к HBsAg, провзаимодействовавшими с антигеном, сорбированным на твердой фазе. При наличии антител в исследуемой пробе уровень оптической плотности прошедшей реакции превосходит показатели отрицательных контрольных образцов.
• 3. Метод с использованием меченых и иммобилизованных антител, а также стандартного антигена. Этот вариант метода применяют для выявления анти-HBs и анти-НВе с диагностикумами фирмы (“ДИАплюс”). Общая схема проведения реакции заключается в следующем (рис. 23 ): на первом этапе реакции исследуемый образец смешивают с раствором, содержащим фиксированное количество антигена. После завершения инкубации добавляют шарик с сорбированными на нем антителами и коньюгат. После удаления непрореагировавших компонентов реакции проводится ферментативная реакция, интенсивность которой обратно пропорциональна содержанию исследуемых антител в образце. Вариантом этой схемы может служить определение анти-НВе и анти-дельта с диагностикумами фирмы “ЭББОТТ”, когда компоненты реакции добавляются последовательно.
• 4. Метод с использованием меченых антител и иммобилизованного антигена (конкурентный метод). Данная схема широко применяется для выявления анти-HBs, анти-НВс и анти-ВГА. Общая схема проведения реакции заключается в следующем (рис. 24): к антигену, иммобилизованному на твердой фазе одновременно добавляют исследуемый материал и коньюгат. При проведении реакции меченые и исследуемые антитела конкурируют за активные центры антигена, иммобилизованного на твердой фазе. После завершения инкубации и удаления не прореагировавших компонентов проводится ферментативная реакция, результаты которой обратно пропорциональны количеству антител в исследуемом образце. При использовании набора фирмы (“ДИАплюс”) при выявлении анти-HBs, в случае наличия HBsAg уровень ферментативной реакции будет превосходить результаты реакции в негативных образцах, что позволяет косвенно судить о наличии антигена.
• 5. Метод выявления антител класса IgM - многослойный “сэндвич” метод. Этот метод применяется для выявления анти-НВс IgM и анти-ВГА IgM. Общая схема проведения реакции заключается в следующем (рис. 25): на твердой фазе адсорбированы антитела к мю-цепям иммуноглобулинов класса М, которые взаимодействуют с антителами класса IgM, находящимися в исследуемой сыворотке. После удаления непрореагировавших компонентов добавляется стандартное количество антигена, антитела против которого определяются. Удалив непрореагировавшие компоненты реакции, добавляют меченые антитела, реагирующие с антигеном. Также, как и в обычном “сэндвич”-методе, чем больше количество антител, тем интенсивней ферментативная реакция. Для уменьшения ложнопозитивных результатов исследование сывороток крови проводится после их разведения в 1000 раз.

ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ

Методы диагностики. Чтобы распознать инфекционную болезнь и выявить больных животных, проводят клинический осмотр, аллергические, серологические, микроскопические, бактериологические исследования, биологическую пробу и патологоанатомпческие вскрытия.

Клиническому осмотру подвергают все поголовье животных в хозяйстве, где появилось заболевание. Животных с явно выраженными ь неясными клиническими признаками выделяют для уточнения диагноза.

Аллергические исследования заключаются в введении в организм животного (на конъюнктиву глаза, подкожно или внутрикожно) специфических препаратов, вызывающих у больного животного характерную реакцию. Имеются препараты для выявления лошадей, больных сапом (маллеин), животных, больных туберкулезом (туберкулин), бруцеллезом (бруцеллизат) и другие. Эти препараты называются аллергенами. При введении двух-трех капель маллеина в глаз больной сапом лошади у нее через несколько часов начинается слезотечение из этого глаза, с выделением гноя. У здоровой лошади такой реакции не наблюдается.

Серологическим исследованием называется исследование сыворотки крови животных, позволяющее выявить зараженных животных. В ветеринарной практике широко применяют исследование сыворотки крови по реакции агглютинации (РА) и реакции связывания комплемента (РСК).

Микроскопическому исследованию подвергают мазки крови или отпечатки из органов животных. При этом удается увидеть возбудителей болезни под микроскопом. Бактериологическим исследованием выделяют из органов павшего животного культуру возбудителя болезни посевами зараженного материала на специальные питательные среды. Биологическая проба позволяет воспроизвести заболевание у здоровых животных заражением их материалом, взятым от больного животного, или культурой возбудителя.

Патологоанатомическое вскрытие трупа животного нередко помогает подтвердить прижизненный диагноз. Иногда кусочки органов посылают в лабораторию для гистологического исследования, т. е. исследования под микроскопом ткани, ее характера и строения.

Взятие и пересылка материала для исследования на инфекционные болезни. Взятие патологического материала. Патологический материал берут в стерильную посуду стерильным инструментом, строго соблюдая меры личной предосторожности. Место на трупе или органе, от которых необходимо взять материал на исследование, прижигают горячей металлической пластиной (шпателем).

Жидкий материал - кровь, желчь, мочу, эксудат, слизь, гной и пр. - насасывают в тоЕпше стеклянные пастеровские пипетки, которые запаивают с обоих концов. Его можно также взять стерильным шприцем с иглой в стерильный флакон или стерильную пробирку с плотной резиновой или корковой пробкой, залив ее сверху расплавленным парафином пли воском. Тот же материал, но для микроскопического исследования наносят тонким слоем на чистое предметное, предварительно обезжиренное и профламбированное на огне стекло, которое затем подсушивают на воздухе; стекла связывают попарно мазками внутрь, вложив между ними перекладины из спичек. Вместо предметного можно использовать кусочек оконного стекла, чисто вымыв его в теплом 2-3%-ном растворе питьевой соды и обезжирив в спирте с эфиром или в бензине. Такое стекло высушивают на воздухе и обжигают пламенем спиртовки, после чего на него наносят тонким слоем подлежащий исследованию материал,

Гной из глубоких полостей берут стерильным ватным тампоном на кусочке тонкой проволоки или на небольшой деревянной палочке, вделанной в ватную пробку стерильной пробирки. ,

Гной из невскрывшихся глубоких абсцессов берут проколом стенки абсцесса тонкой, длинной иглой, в стерильный 5-20-граммовый шприц. Затем гной сливают через эту же иглу в стерильную пробирку (или флакон), плотно закрыв ее стерильной ватной или корковой пробкой и залив сверху расплавленным парафином или воском. Место прокола предварительно выстригают и дезинфицируют, после взятия гноя .смазывают настойкой йода.

Кал берут из прямой кишки в небольшом количестве в стерильные пробирки или в такие же стеклянные баночки, плотно закрывающиеся пробками.

Мочу у большинства животных берут через катетер в стерильные флакончики емкостью 100-200 мл. Ее можно взять и без катетера, массажируя рукой мочевой пузырь через прямую кишку и вызывая этим мочеиспускание.

Для исследования на бешенство берут аммоновы рога, а на болезнь Ауески - продолговатый мозг. Их кладут в стерильные баночки и консервируют: для бактериологического исследования - 33%-ным водным раствором глицерина, для гистологического исследования - 10%-ным водным раствором формалина.

Если невозможно вскрыть черепную коробку с соблюдением всех мер предосторожности, в лабораторию посылают голову, целиком отделив ее от трупа. Отпрепарированную голову необходимо завернуть в марлю, пропитанную дезинфицирующим раствором, а затем в пергамент или клеенку, запаковать в плотный ящик и срочно отправить с нарочным в ветеринарную лабораторию. Руки необходимо защитить резиновыми перчатками или брезентовыми (кожаными) рукавицами и после этой работы вымыть и тщательно продезинфицировать, помня, что в слюне бешеных животных содержится вирус.

Внутренние органы - сердце, легкие, печень, селезенку, почки, лимфатические узлы, желудок, а также пораженные мышцы и др. ткани - для бактериологического и гистологического исследования берут маленькими кусочками в местах с наиболее типическим поражением на границе со здоровой тканью в стерильные баночки с плотно притертыми пробками. Части пораженного желудка, кишечника или кусочки некротизированных тканей вначале обмывают водой, затем просушивают ватными тампонами и также помещают в стерильные баночки.

Материал, взятый для бактериологического исследования в зимнее время, не консервируют, в теплое же время года заливают 33%-ным водным раствором глицерина; для гистологического исследования - 10%-ным водным раствором формалина.

Материал не следует консервировать при быстрой доставке его в лабораторию. Банки с материалом герметически закупоривают пробками, закрепляя их тонкой проволокой или шпагатом, а затем заливают сургучом или замазывают смесью воска с парафином.

Трубчатые кости отделяют от трупа, стремясь не повредить их концы, освобождают от мышц и сухожилий, заворачивают в марлю, смоченную раствором сулемы или фенола, и упаковывают в плотный ящик.

Ухо (для исследования па сибирскую язву) берут с той стороны, на которой лежал труп. Предварительно ухо перевязывают у основания в двух местах шпагатом и отрезают между перевязками. Участок кожи на трупе, где отрезано ухо, прижигают каленым железом. Отделенное ухо сначала заворачивают в марлю, смоченную раствором сулемы или фенола, а затем в пергаментную бумагу, после чего упаковывают в плотный ящик. Для проведения бактериологического исследования на сибирскую язву вместо уха можно послать кровь, взятую из него толстой иглой. Можно сделать небольшой, но глубокий надрез кожи, взять кровь и нанести ее толстыми мазками на несколько предметных стекол. Мазки высушивают на открытом воздухе и, не фиксируя их пламенем спиртовки, складывают на перекладинки спичек, затем заворачивают в пергамент и упаковывают в плотный ящик или коробку, в которой и отправляют с нарочным в лабораторию. Место надреза (или укола иглой) прижигают раскаленным железом.

Трупы поросят, ягнят, птиц, телят и жеребят, а также плоды абортировавших животных отправляют в лабораторию в целом виде в тех случаях, когда на месте невозможно стерильно взять материал.

Трупы и плоды животных предварительно обтирают и завертывают в мешковину, смоченную раствором фенола или креолина, а затем упаковывают в металлический или плотный деревянный ящик со стружками и опилками.

Пчелиный сот с погибшим расплодом заворачивают в пергамент или вощеную бумагу и плотно укладывают в деревянный * ящик на планки (чтобы сот не соприкасался с дном и крышкой ящика). Погибших пчел и маток пересылают в стеклянных, плотно закрывающихся баночках, наполненных медом.

Патологический материал пересылают в лабораторию с нарочным. Плотный материал (например, трубчатую кость) можно послать почтой, обеспечив надежную упаковку, исключающую возможность рассеивания инфекции. Верх посылки обозначают надписью. При подозрении на особо опасные инфекции (сибирская язва, сап, эмфизематозный карбункул, туляремия, бруцеллез, чума свиней и птиц, инфекционная анемия, инфекционный энцефаломиелит и бешенство) материал, взятый в стеклянную посуду, помещают в металлическую коробку, которую запаивают, пломбируют или опечатывают и упаковывают в деревянный ящик.

При отправке нарочным следует герметически упакованную посуду с патологическим материалом опечатать, завернуть в вату и уложить в деревянный ящик.

В лабораторию отправляют вместе с посылкой сопроводительный документ (направление), в котором указывают: 1) адрес лаборатории; 2) какой материал направляют для исследования и в чем он законсервирован; 3) от какого животного и кому оно принадлежит; 4) клинические признаки у больного животного; 5) основные патологоанатомические изменения, обнаруженные при вскрытии трупов на месте; 6) имеются ли еще в хозяйстве больные животные со сходными признаками (сколько); 7) предполагаемые причины падежа; 8) на какие заболевания необходимо произвести исследование. Сопроводительное письмо подписывает ветеринарный работник, направляющий материал. В письме указывают дату взятия и отправления материала.

Взятие крови для серологического исследования. Кровь животных берут стерильными иглами у лошадей, крупного рогатого скота, верблюдов и у других крупных животных, а также у овец, коз из яремной вены, у свиней - из копчика хвоста или из ушной вены. На месте взятия пробы шерсть выстригают и кожу протирают дезинфицирующим раствором или денатурированным спиртом. При взятии крови следят, чтобы капли ее не попали на землю; для этого на муфту иглы надевают небольшую резиновую трубку, конец которой опускают в пробирку. С этой же целью используют специальный прибор, в который с одного конца вставляют иглу, а с противоположной стороны - пробирку. Струю крови нужно направлять по стенке пробирки, чтобы избежать распада эритроцитов (гемолиза). Гемолизированная кровь для исследования непригодна.

Кровь, взятую зимой, сразу же ставят в теплое место для свертывания кровяного сгустка и отстаивания сыворотки. Кровь доставляют в лабораторию не позднее чем на 2-3-й день после ее взятия. Сохранять ее следует в темном и прохладном месте. В жаркую погоду при невозможности своевременной отправки крови для исследования ее необходимо консервировать 0,5%-ным раствором карболовой кристаллической кислоты на физиологическом (0,85?о-ном) растворе поваренной соли. С этой целью отстоявшуюся сыворотку крови пипеткой отсасывают и переносят в чистые пробирки, оставив в первоначальной пробирке кровяной сгусток. К 9 мл сыворотки крови добавляют 1 мл 5%-ного раствора карболовой кристаллической кислоты, пробирку тщательно встряхивают, плотно закрыв ватной пробкой. При малом количестве исследуемой сыворотки к 1 мл ее добавляют 0,1 мл указанного раствора карболовой кислоты. Консервированная сыворотка может сохраняться длительное время.

Пробирки с кровью упаковывают в вертикальном положении и отправляют в лабораторию с нарочным, предохраняя от замораживания и встряхивания. Гемолизированная, проросшая и покрытая сверху пленкой плесени кровь, а также помутневшая сыворотка давно взятой крови для серологического исследования непригодны.

На каждой пробирке с кровью ставят номер или кличку животного. Бумажную этикетку надписывают простым карандашом и прикрепляют ее резиновым колечком, плотно надетым на пробирку. Пробы с кровью направляют в сопровождении списка, составленного в 2 экземплярах. Одни из них с обозначением полученных результатов лаборатория возвращает лицу, направившему кровь на исследование.

Название болезни	Возбудитель	Источник возбудителя инфекции	Пути передачи возбудителя инфекции	Основные поражаемые группы животных	Длительность инкубационного периода	Носительство возбудителя	Важнейшие клинические признаки	Патологоанатомические изменения	Лабораторные и другие исследования	Заболевания, от которых следует дифференцировать
Брадзот овец	Clostridium septicum	Больные животные	Алиментарный с кормом или водой	Главным образом овцематки, реже бараны, валухи, ягнята с 2—3-недельного возраста	10—15 мин, реже 2—12 ч	Пожизненное	Здоровое на вид животное погибает с явлениями судорог, иногда поноса и тимпании. При более длительном течении — понос, одышка, истечения из глаз и носа	Вздутие трупа, серозно-геморрагический инфильтрат в подкожной клетчатке, экссудат в полостях, изменения печени, почек и сердца	Бактериологическое исследование	Сибирская язва, энтеротоксемия, кормовые отравления
Вирусная диарея	Вирус семейства Togaviridae, род Pestivirus	Больные животные и вирусоносители	Алиментарный, через обслуживающий персонал	Чаще телята в возрасте от 6 месяцев до 2 лет	6—9 суток	Длительное	Три остром течении — t 40—42°C, депрессия, потеря аппетита, истечение из носа, эрозии и язвы на слизистой оболочке носовой полости, изъязвления кожи на венчике; кал зловонный, жидкой консистенции, с пеной и слизью; гибель на 2—3-и сутки. У коров и молодняка старшего возраста — абортивная форма	Эрозии и язвы на слизистых оболочках пищеварительного тракта, геморрагический диатез, пневмония	Реакция преципитации в агаровом геле, РН в культуре тканей, иммунофлюоресценция, биопроба на телятах	Чума, злокачественная катаральная горячка, ящур, инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота, парагрипп, паратуберкулез
Вирусный энцефаломиелит овец	Вирус семейства Togaviridae, род Flavivirus	Больные животные	Трансмиссивный, переносчики — клещи; возможны аэрогенный и алиментарный	Овцы	5—14 сут	—	Протекает в 2 фазы: первая — повышение температуры, нервные расстройства; вторая — неуравновешенное состояние, лихорадка постоянного типа, t до 41,5°C, судороги, конвульсии, обильное слюнотечение, зуд, искривление спины, парезы, параличи. Продолжительность болезни 14—20 суток	Энцефаломиелит	Выделение вируса и его идентификация; РН, РДП, РЗГА	Бешенство, болезнь Ауески, листериоз
Злокачественная катаральная горячка	Вирус семейства Herpesviridae, род Herpesvirus	Больные животные, овцы; предполагаемые природные резервуары — дикие копытные, грызуны	Не установлены	Крупный. рогатый скот и буйволы независимо от породы, чаще в возрасте 1—4 лет, редко овцы	От нескольких недель до 3—4 месяцев	—	Лихорадка постоянного типа, t 40—42°C, местная температура в области лобных пазух повышена, угнетение, фибриллярное дрожание мышц, беспокойство, гибель через 12—20 ч. При развитии болезни — светобоязнь, слезотечение, ирит, кератит, прободение склеры, отпадение рогов, кашель, язвы на дёснах и губах, запор сменяется поносом	Истощение, труп запачкан испражнениями, быстро разлагается, поражения глаз, кишечника	Электронная микроскопия	Чума, ящур, бешенство, лептоспироз, листериоз, вирусная диарея
Инфекционная агалактия овец и коз	Mycoplasma agalactiae	Больные животные, микробоносители	Алиментарный с молоком и кормом	Лактирующие овцы и козы, новорождённые ягнята, сосуны до 20—30-суточного возраста	От нескольких дней до 2 месяцев	5—8 месяцев	При остром течении (5—10 суток), чаще у лактирующнх животных, — повышение t до 41,5°C, паренхиматозный мастит, атрофия молочной железы. В осложнённых случаях — гнойный мастит, полиартриты, тендовагиниты, бурситы, аборты. Бывает атипичное течение	Мастит, бурситы, артриты, синовиты, кератит, панофтальмит	Бактериологическое исследование	Инфекционный мастит, риккетсиозный кератоконъюнктивит, хламидозный полиартрит
Инфекционная катаральная лихорадка овец	Вирус семейства Reovirilae, род Orbivirus	Больные и переболевшие овцы, вирусоносители; козы, крупный рогатый скот, дикие животные	Трансмиссивный	Овцы	6—9 суток	50—120 суток, у крупного рогатого скота более 1 года	Три остром течении (1—8 суток) — t до 42°C, через 2—4 суток катаральное воспаление слизистых оболочек языка, глотки, носа, наружных половых органов; язык резко увеличен и цианотичен, язвенный или гангренозный стоматит, хромота, аборты, истощение. Бывает подострое течение	Истощение, геморрагии, воспалительный процесс в ротовой полости, в полостях тела обилие экссудата	Выделение вируса, РН, РДП, РСК, биопроба	Контагиозная эктима овец и коз, болезнь Найроби, лихорадка долины Рифт, злокачественная катаральная горячка, ящур, некробактериоз
Инфекционная (контагиозная) плевропневмония коз	Mycoplasma mucoides Var. Capri	Больные животные	Аэрогенный	Козы всех возрастов	5—20 суток	Не установлено	Внезапное повышение t до 41—42°C, лихорадка 2—8 суток, угнетение, кашель, экссудативный плеврит, серознослизистые истечения из носа, бронхиальное дыхание. Прогноз неблагоприятный	Серозно-фибринозный выпот в грудной полости, студенистые зеленоватые наложения на плевре и перикарде, уплотнение лёгочной ткани, некротические очаги	Бактериологическое исследование, РСК, биопроба	Пастереллёз, инфекционная агалактия овец и коз
Инфекционная энтеротоксемия овец	Clostridium perfringens типа D и С	Больные овцы и бактерионосители	Алиментарный с кормом и водой	Овцы	Несолько часов	Длительное	При сверхостром течении — внезапная смерть при явлениях клонических и тонических судорог, одышка, истечение серозно-геморрагической жидкости из носа. При остром течении — t до 41°C, понос, поражение центральной нервной системы, судороги, слабость, гибель через 24—25 ч	Характерно быстрое разложение трупа, под кожей экхимозы, нефрит, одна или обе почки размягчены, геморрагический энтерит, язвы	Бактериологическое исследование	Сибирская язва, брадзот, пастереллёз
Инфекционный мастит овец	Стафилококк, Bacterium mastitidis ovis	Больные овцематки	Через кожные покровы, особенно при участии ягнят в период лактации	Лактирующие овцематки	10—14 ч	—	Угнетение, t до 41°C и выше; поражённая часть вымени горячая, болезненная, секреция молока уменьшается, в дальнейшем из соска гнойные выделения с примесью крови. При гангренозной форме процесс распространяется на часть живота, другую долю вымени, грудь; при явлениях септикопиемии гибель на 4—6-е сутки. При хроническом течении симптомы выражены слабо	Паренхима вымени рыхлая, тёмно-красная с ихорозным запахом, признаки септикопиемии	Бактериологическое исследование	Инфекционная агалактия
Инфек-ционный ринотрахеит крупный рогатый скота	Вирус семейства Herpesviridae, род Herpesvirus	Больные и переболевшие животные	Аэрогенный	Крупный рогатый скот	4—6 суток	2—4 недели	Ринит, трахеит, ларингит, вульвовагинит. Для острого течения характерны высокая температура, истечения из носа, кашель, одышка, истощение, для атипичной формы — менингоэнцефалит и аборты	Катаральнофибринозное воспаление слизистых оболочек носовой полости, гортани, трахеи, бронхов, эмфизема лёгких	Выделение вируса и идентификация его в культуре клеток, РН, РДП, РИГА, иммунофлюоресценция, биопроба	Вирусная диарея, ящур, злокачественная катаральная горячка, пастереллёз, некробактериоз
Кампилобактериоз (вибриоз)	Vibrio fetus	Больные животные	Чаще половым путём, при искусственном осеменении, через объекты внешней среды; у овец алиментарный	Крупный. рогатый скот, овцы (взрослые животные)	От 3 суток до нескольких недель	Пожизненное	У коров — яловость 20—60%, аборты, вагинит, задержание последа, удлинение фазы полового покоя. У овец — массовые аборты во 2-й половине суягности	Участки плаценты покрыты желтоватыми хлопьями творожистой консистенции; на хорионе бляшки до 11 мм. У абортированных плодов отёки, кровоизлияния, разжиженное, мутное содержимое сычуга	Бактериологическое исследование	Бруцеллёз, вирусный аборт, сальмонеллёз, трихомоноз, листериоз
Контагиозная эктима овец и коз	Вирус семейства Poxviridae, род Parapoxvirus	Больные и переболевшие животные	Через слизистые оболочки и кожу. Факторы передачи — корма, вода, предметы ухода	Овцы и козы, чаще молодняк от 1,5 до 3 месяцев	6—8 суток	Поражаются губы и бесшёрстные участки на ушах, вымени, анусе, в области половых органов, межкопытной щели; вначале опухание и покраснение, затем везикулы, пустулы, струпья, которые через 2—3 недели отпадают; некрозы, секундарная инфекция, хромота	Истощение, поражение кожи, слизистой оболочки преджелудков, некротические очажки в печени и лёгких	Биопроба, микроскопия элементарных телец, РН, РСК, преципитация в геле, электронная микроскопия	Ящур, оспа, некробактериоз, везикулярный стоматит
Найроби болезнь	Вирус семейства Bunyaviridae, род Bunyavirus (ранее не был классифицирован)	Больные животные, вирусоносители	Трансмиссивный	Молодняк овец	До 6 суток	Длительное	В течение 2—3 суток t 41—41,5°C, депрессия, слизисто-гнойные истечения с примесью крови из носа, непроизвольное выделение водянистых, с примесью крови каловых масс, аборты. Обычна гибель животных через 12 суток после падения температуры	Геморрагическое воспаление и кровоизлияния во внутренних органах, увеличение селезёнки в 5—6 раз, уплотнение ее пульпы	РН, РСК, РДП	Лихорадка долины Рифт, инфекционный гидроперикардит
Паратуберкулёз	Mycobacterium paratuberculosis	Больные животные	Алиментарный. Факторы передачи — корма, вода, предметы ухода	Крупный рогатый скот, а также овцы, козы, буйволы, верблюды, олени и другие жвачные	До 2 лет	Длительное	Течение хроническое или латентное; бессимптомный период может длиться годы. У крупного рогатого скота — потеря упитанности и удоев, усиление линьки, затем профузный понос с примесью крови, газа, при дефекации — поза мочеиспускания, вялость, отёки в межчелюстном пространстве и области подгрудка, лейкопения. У овец — течение латентное, при обострении — исхудание, отёки. Прогноз неблагоприятный	Истощение, кровь плохо свёртывается, поражение тощей, особенно подвздошной кишки (утолщение стенки, продольные и поперечные складки, увеличение лимфатических узлов брыжейки; набухание пейеровых бляшек)	Гистологическое, бактериологическое, серологическое исследования, аллергическая проба	Туберкулёз, гельминтозы, кокцидиоз
Чума рогатого скота	Вирус сем Paramyxoviridae, род Morbillivirus	Больные переболевшие животные	Алиментарный, аэрогенный. Факторы передачи — корма, вода, предметы ухода	Крупный рогатый скот, 6уйволы, зебу, реже овцы, козы, верблюды, дикие жвачные	3—17 суток У крупного рогатого скота; 2—14 суток у овец; 5—7 суток у верблюдов	—	При остром течении — лихорадка постоянного типа, t 41—42°C с незначительными ремиссиями, в первые сутки сухой кашель, возбуждение, затем угнетение, потеря аппетита, взъерошенность шерсти, воспаление слизистых оболочек глаз, носа рта (очаги гиперемии), серо-жёлтые узелки, превращающиеся после распада в кашицеобразную массу в форме плёнки с ихорозным запахом, на месте узелков язвы с неровными краями. К 5-м суткам слизистая оболочка рта имеет эрозированную, кровоточащую поверхность, покрытую некротизированной тканью с фибрином; слюнотечение, конъюнктивит, гнойный вагинит, на 4—6-е сутки профузный понос, непроизвольный акт дефекации, истощение. Летальность 90—100%	Истощение, геморрагический диатез, некроз слизистых оболочек и лимфоидных тканей, некроз и эрозии в ротовой полости, гнойно-фибринозный налёт и язвы в кишечнике, жировое перерождение печени, лимфатические узлы воспалены, гиперемированы, в них очаги некроза, жёлчь бурая с ихорозным запахом	Биопроба, вы деление возбудителя в культуре клеток, РСК, РДП, РН. иммунофлюоресценция	Ящур, злокачественная катаральная горячка, вирусная диарея, пастереллёз, пироплазмидозы, кокцидиоз
Эмфизематозный карбункул	Clostridium chauvoei	Больные животные	Алиментарный, при повреждении покровов. Фактор передачи — почва	Молодняк крупного рогатого скота от 3 месяцев до 4 лет, овцы, буйволы	1—5 суток	—	У крупного рогатого скота чаще t 41—42°C, хромота; на местах с хорошо развитой мускулатурой (бедро, круп, поясница) ограниченные болезненные отёки (вначале плотные и горячие крепитирующие); угнетение, отказ от корма; слюнотечение, увеличение регионарных лимфатических узлов. У овец — хромота, напряжение, не всегда крепитирующие отёки. Прогноз неблагоприятный	Труп при подозрении на эмфизематозный карбункул не вскрывают. Труп вздут, из носа и рта вытекает пенистая жидкость, из анального отверстия и влагалища — кровянистая жидкость, геморрагический отёк подкожной клетчатки, мышцы, на срезе пористые с прогорклым запахом, геморрагические поражения внутренних органов	Бактериологическое исследование	Сибирская язва, злокачественный отёк
Энзоотический гепатит рогатого скота (лихорадка долины Рифт)	Вирус семейства Togaviridae, род Flavivirus	Больные животные, вирусоносители	Трансмиссивный, переносчики — комары, москиты, клещи	Молодняк овец и коз	От нескольких часов до 4 суток	—	При молниеносном течении — внезапный коллапс, летальность 95—100%; при остром — лихорадка, угнетение, прекращение жвачки, слизистое или гнойное течение из носа, кровавый понос, аборты; при подостром — лихорадка, слабость, аборты, сокращение молокоотделения; при абортивном — кратковременная лихорадка	Особенно выражены у ягнят в виде многочисленных некрозов печени, массовых кровоизлияний, геморрагические воспаления слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, нефрита	Выделение вируса, биопроба, РН, РСК, РНГА	Инфекционная катаральная лихорадка овец, болезнь Найроби
Эфемерная лихорадка крупного рогатого скота	Вирус семейства Rhabdoviridae	Больные животные	Трансмиссивный	Крупный рогатый скот старше 1 года	2—9 суток	—	Течение острое, реже подострое, t 41—42°C, отсутствие аппетита, отказ от воды, слабость, угнетение, слизистое или слизисто-гнойное истечение из носа, пенистое слюнотечение, тремор, кашель, хрипы, перемежающаяся хромота, эмфизема; у некоторых животных на слизистых оболочках эрозии и изъязвления. Язвы на венчике, вымени, половых органах самок. Через 3—5 суток признаки исчезают. В 90% случаях прогноз благоприятный	Изъязвления видимых слизистых оболочек, застойные явления в серозной оболочке брюшной полости, признаки эмфиземы, полисиновиты, полиартриты	Вирусологические исследования, РСК, МФА, биопроба, реакция нейтрализации с инактивированной сывороткой и серийными разведениями вируса	Ящур, вирусная диарея, чума крупного рогатого скота, злокачественная катаральная горячка крупного рогатого скота

Ветеринарный энциклопедический словарь. — М.: "Советская Энциклопедия" . Главный редактор В.П. Шишков . 1981 .