Хромогенная прозрачная среда для возбудителей инфекций мочевого тракта
Наименование и артикул
Описание
Необходимая селективная добавка Oxoid к питательной среде
(Артикул/Наименование)
Хромогенный агар для Candida 0,1 кг
Артикул: CM1002A
Диагностика 5-ти клинически значимых видов Candida
(название и цвет колоний):
1) C. albicans - зелёные
2) C. tropicalis – тёмно-голубые
3) C. krusei – розово-коричневые
4) C. glabrata - бежевые/жёлтые
5) C. parapsilosis - коричневые
Молочно-белый фон позволяет удобно и чётко дифференцировать виды Candida.
Результат – в течение 24-48 ч.
SR0231
Селективная
добавка для
хромогенной среды для Candida,
10 флаконов/упаковка
Хромогенный агар для Candida 0,5 кг
Артикул: CM1002B
Хромогенная прозрачная среда для возбудителей инфекций мочевого тракта 0,5 кг
Артикул: CM1106B
Среда для изоляции, количественного учета и предварительной идентификации основных возбудителей инфекций мочевыводящих путей за 18-24 часа.
Среда Brilliance UTI Clarity позволяет дифференцировать coliforms и enterococci, идентифицировать Proteus, Morganella и Providencia spp., отличить Staphyloccus saprophyticus от других стафилококков, минимизируя затраты на подтверждающие тесты.
Цветные колонии на прозрачном фоне.
__
Селективная хромогенная среда для E.coli/колиформ 0,5 кг
Артикул: CM1046B
Селективное выделение и подсчет E.coli / колиформ из воды и продуктов питания
Селективная хромогенная среда для Cronobacter sakazakii 0,1 кг
Артикул: CM1055A
Для дифференциации и количественного подсчёта Cronobacter sakazakii из образцов пищи и др.
Селективная хромогенная среда для Cronobacter sakazakii 0,5 кг
Артикул: CM1055B
Селективная хромогенная среда для листерий 0,5 кг (основа)
Артикул: CM1080B
Изоляция, количественный учёт, предварительная идентификация Listeria sp и Listeria monocytogenes за 2 дня !
SR0227
Селективная добавка для хромогенной среды для листерий, 1х10 флаконов
SR0228 Дифференциальная добавка для хромогенного агара для листерий, 10 флаконов
Селективная хромогенная среда для листерий ISO (основа) 0,5 кг
Артикул: CM1084B
Изоляция, количественный учёт, предварительная идентификация Listeria sp и Listeria monocytogenes
SR0226
Селективная добавка OCLA (ISO)
SR0244
Дифференциальная добавка OCLA (ISO)
SR0228
Дифференциальная добавка для хромогенного агара для листерий, 10 флаконов
Селективная хромогенная среда для сальмонелл 0,5 кг Артикул: CM1092B
Предварительная идентификация и дифференциация сальмонелл за 2 дня !
SR0194
Селективная добавка для сальмонелл, 10 (на 500 мл среды)
Хромогенная среда для E.coli / колиформ 0,1 кг
Артикул: CM0956A
Селективное выделение и подсчет E.coli и колиформных бактерий
__
Хромогенная среда для E.coli / колиформ 0,5 кг
Артикул: CM0956B
Хромогенный агар для B.cereus 0,1 кг
Артикул: CM1036А
Селективное выделение и дифференциация B.cereus из продуктов питания
SR0230Е
Хромогенная селективная добавка для Bacillus сereus, 10 флаконов/упаковка
Хромогенный агар для B.cereus 0,5 кг
Артикул: CM1036B
Хромогенный агар для сальмонелл (основа) 0,1 кг
Артикул: CM1007A
Дифференциация видов сальмонелл от других микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae. Селективное выделение и предварительная идентификация сальмонелл из клинического материала и пищевых продуктов.
SR0194
Селективная добавка для сальмонелл, 1х10 флаконов
Хромогенный агар для сальмонелл (основа) 0,5 кг
Артикул: CM1007B
| HiCrome UTI Agar Хромогенный агар для обнаружения и подсчета уропатогенных бактерий | M1353 |
| HiCrome UTI Agar Modified Хромогенный агар для обнаружения и подсчета уропатогенных бактерий модифицированный | M1418 |
Эти хромогенные среды рекомендуются для идентификации и дифференциации энтеробактерий из мочи и других субстратов, которые могут содержать большое количество протеев и других условно-патогенных бактерий. Особые характеристики этих сред позволяют использовать их вместо агара МакКонки.
Рост на среде HiCrome UTI Agar (M1353):
Enterococcus faecalis (мелкие синие), Pseudomonas aeruginosa (бесцветные),
Staphylococcus aureus (золотисто-желтые), Kelbsiella pneumoniae (сине-фиолетовые, слизистые)
и Escherichia coli (розово-красные)
Рост на среде HiCrome UTI Agar, Modified (M1418):
Escherichia coli (розово-красные), Pseudomonas aeruginosa (бесцветные),
Enterococcus faecalis (мелкие голубые), Proteus mirabilis (светло-коричневые)
и Kelbsiella pneumoniae (сине-фиолетовые, слизистые)
*Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 32,45 г порошка M1353 или 55,44 г порошка M1418 в 1000 мл дистиллированной воды. Осторожно прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С. Перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Хромогенный агар для обнаружения и подсчета уропатогенных бактерий разработан на основе результатов исследований, опубликованных Pezzlo (1), Wilkie и соавт. (2), Friedman и соавт. (3), Murray и соавт. (4), Soriano и Ponte (5) и Merlino и соавт. (6). Эту среду рекомендуют для обнаружения уропатогенных бактерий и как питательную среду общего назначения, поскольку она облегчает и ускоряет идентификацию некоторых грамотрицательных и грамположительных бактерий по различной окраске колоний. Характер окраски определяется взаимодействием родо- и видоспецифичных ферментов бактерий (Enterococcus spp, Esherichia coli и других колиформных бактерий) с двумя хромогенными субстратами.
Содержащиеся в пептоне аминокислоты (триптофан и фенилаланин) помогают выявить триптофандезаминазную активность, характерную для Proteus spp, Morganella spp и Prividencia spp. Один из хромогенных субстратов расщепляется β-глюкозидазой энтерококков, что приводит к образованию ими синих колоний. Кишечные палочки образуют розовые или красные колонии вследствие активности другого фермента- β-D-галактозидазы. Колиформные бактерии ввиду гидролиза обоих хромогенных субстратов обычно образуют фиолетовые колонии. У некоторых штаммов Enterobacter cloacae фермент β-глюкозидаза отсутствует, поэтому они образуют такие же по цвету колонии, как у кишечных палочек. Для подтверждения принадлежности к виду E. coli можно использовать тест на индол (реактив DMACA, R035). Тест на индол лучше проводить на фильтровальной бумаге; он позволяет различить колонии E. coli и Enterobacter cloacae, а также Proteus mirabilis и других видов.
Ферментативный гидролизат казеина, пептический перевар животной ткани и говяжий экстракт удовлетворяют потребности бактерий в источниках азота, углерода и необходимых факторах роста.
Гомогенный сыпучий порошок светло-желтого цвета.
По плотности соответствует 1,5 % агаровому гелю.
В чашках Петри формируется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
При 25°С 3,24 %-й (вес/об) водный раствор М1353 имеет рН 6,8 ± 0.2, а 5,54 %-й (вес/об) водный раствор М1418 - 7,2 ± 0.2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24 ч при 35-37°С.
[youtube.player]Больше полувека миру известна технология создания хромогенных питательных сред для микробиологии. Но полноценное ее использование для анализа образцов началось только в последнее десятилетие.
- Уменьшить время получения результата по сравнению с традиционными методами
- Идентифицировать несколько микроорганизмов на одной среде
- Проводить анализ визуально, без использования оборудования
- Выполнять подтверждающие тесты без пересева на дополнительные среды
Давайте познакомимся с хромогенными питательными средами ближе.
Это питательные среды для микробиологии со специальными хромогенными субстратами, которые в присутствии целевых микроорганизмов вызывают появление специфического окрашивания колоний. Хромогенные питательные среды подходят для культивирования, дифференциации и селекции микроорганизмов.
Как работают хромогенные питательные среды?
Рассмотрим принцип работы хромогенных питательных сред на примере хромогенного агара для Enterobactersakazakii (ENTEROBACTER SAKAZAKII ISOLATION CHROMOGENIC AGAR (ESIA) ISO 22964). Enterobactersakazakii считается причиной возникновения менингитов и некротических колитов у детей со смертностью на уровне 40–80%. Именно поэтому контроль наличия Enterobactersakazakii в детском питании особенно важен.
В состав хромогенной среды входят:
- Пептонная смесь
- Факторы роста
- Ингибиторы грамотрицательной флоры
- Агар
- Хромогенный субстрат, который расщепляется ферментом Enterobactersakazakii, окрашивая колонии в синий цвет
 |
| Селективная среда для предварительного обнаружения и подсчета E.coli |
| Селективная среда для одновременного обнаружения E.coli и других колиформ |
| Для быстрого выделения видов Pseudomonas |
| Выделение Enterobacter sakazakii из детских молочных продуктов |
| Обнаружение и выделение Vibrio cholerae, V. parahaemolitycus и Vibrio alginolyticus |
| Выделение сальмонелл из клинических проб, пищевых продуктов и воды |
| Одновременное обнаружение E.coliи колиформ с помощью флуоресценции |
| Одновременное обнаружение E.coliи колиформ с помощью флуоресценции |
| Дифференциальная среда для одновременного обнаружения E.coliи энтеробактерий |
| Селективная и дифференциальная среда для обнаружения E.coli 0157:H7 |
| Выделение и дифференциация Enterococcus faecalis и E. faecium |
| Выделение и подсчет энтерококков из воды методом одноступенчатой мембранной фильтрации |
| Селективная среда для обнаружения и подсчета Listeriamonocytogenes |
| Обнаружение и дифференциация видов Staphylococcus |
| Подсчет Escherichia coli и колиформ в воде |
Чего ждать в будущем?
Соединение классической микробиологии и знаний о биохимических особенностях микроорганизмов позволило создать мощный инструмент для быстрого и удобного анализа в микробиологии – хромогенные питательные среды. Полагаю, это далеко не полный перечень хромогенных питательных сред, ведь исследовательские лаборатории продолжают трудиться над созданием новых, более совершенных формул.
На сегодня существует несколько групп субстратов, с которыми проводят исследования:
Получение формулы питательной среды – дело кропотливое и длительное, ведь необходимо не только подобрать субстрат и фермент, но и исключить возможность ложных результатов, влияние на ростовые качества. Также важно, чтоб состав оставался стабильным продолжительное время и не требовал особых условий хранения.
К сожалению, не многие формулы оказываются жизнеспособными в условиях производства в промышленных масштабах. Но те, что прошли проверку, со временем завоевывают благосклонность пользователей и даже становятся международными стандартами. Так, например, на сегодня среди стандартов ISO уже четыре хромогенные среды:
- Хромогенный агар для E.coli и колиформ (ISO 9308)
- Хромогенный агар TBX для горизонтального подсчета Escherichia coli (ISO 16649-2)
- Основа хромогенного агара для Listeria (ISO 11290)
- Агар для изоляции Enterobactersakazakii (ISO 22964)
Несмотря на то, что хромогенные питательные среды дороже традиционных, все больше пользователей в Украине выбирают именно их. А Вы пользуетесь хромогенными средами?
[youtube.player]Возможность ПЦР-диагностики инфекций мочевыводящих путей, вызванных бактериальными возбудителями.
Инфекции мочевыводящих путей (ИМП) продолжают оставаться одними из самых распространенных бактериальных инфекций человека. Наиболее частыми возбудителями являются Escherichia coli, реже встречаются другие представители семейства Enterobacteriaceae, бактерии родов Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus, Pseudomonas, Acinetobacter. Роль грамположительной флоры увеличивается при развитии хронических заболеваний или госпитальных инфекций. Более чем у 20% больных наблюдается ассоциация микробов, при этом грамотрицательные бактерии чаще сочетаются с грамположительными (например: E. сoli и E. faecalis).
ИМП у женщин встречаются гораздо чаще, чем у мужчин, что обусловлено анатомическим строением мочевыделительной системы. В год в среднем 8–15% взрослых женщин страдают от ИМП, тогда как встречаемость ИМП у мужчин той же возрастной группы примерно 1% в год. Серьезную проблему представляет ОИМП (осложненные инфекции мочевыводящих путей), к которым относятся заболевания, характеризуемые наличием функциональных или анатомических патологий в организме. Пациенты, страдающие ОИМП, более остальных склонны к быстрому развитию инфекционного процесса, который, в свою очередь, требует принятия быстрого решения о назначении адекватной терапии.
Диагноз ИМП ставится на основании клинических симптомов и результатов лабораторной диагностики. В качестве методов диагностики ИМП в клинических лабораториях используют проточные цитометры, микроскопию с окрашиванием по Граму, микробиологические методы исследования мочи. Посев мочи на наличие бактерий остается референсным методом исследования, давая представление о качественном и количественном составе микрофлоры, а также чувствительности выделенного микроорганизма к антибиотикам. Однако, данный метод является достаточно длительным и трудоемким, помимо того существует ряд возбудителей (анаэробная флора, L-формы микроорганизмов), культивирование которых представляет особенную сложность и часто не доступно для клинических лабораторий.
С диагнозом ИМП в микробиологическую лабораторию для рутинной обработки поступает большое количество анализов, требующих разработки и применения быстрых и чувствительных методов обнаружения бактерий в моче. В первую очередь это относится к таким группам пациентов, как беременные, пациенты с бессимптомной бактериурией, дети. Для сокращения времени выдачи результатов актуальной задачей является разработка нового скринингового метода, который позволит быстро выявить отрицательные образцы мочи и даст представление о видовом составе патогенов в исследуемом материале. В этой связи наиболее перспективным выглядит метод полимеразной цепной реакции (ПЦР), который позволяет быстро и точно проводить идентификацию бактерий путем анализа генетического материала микроорганизмов.
Целью данной работы была оценка возможности нового скринингового метода идентификации патогенов в моче путем количественной ПЦР в режиме реального времени и сравнение полученных результатов с микробиологическими методами исследования.
Материалы и методы
Микробиологические исследования. Образцы мочи поступали в микробиологическую лабораторию для посева на микрофлору. Посев производили на неселективную среду Уриселект 4 (Bio-Rad, США) для изолирования и подсчета микроорганизмов из мочевого тракта; прямой идентификации E. coli (розовые колонии), Enterococcus spp (синие колонии), Proteus mirabilis (коричневые колонии); предварительной идентификации KES-группы (Klebsiella, Enterobacter, Serratia). Также посев производили на 5% кровяной агар для выделения бактерий рода Streptococcus и определения гемолитических свойств микроорганизмов.
Культивировали при 37 °С в течение 24 часов при аэробных условиях. Выросшие бактерии, количество которых на чашке превышало 10*4 КОЕ/мл, считались возбудителями инфекции. При наличии роста проводили идентификацию выросших микроорганизмов методом MALDI ToF масс-спектрометрии с применением анализатора Autoflex III Smartbeam (Bruker Daltonics, Германия)и программного пакета MALDI Biotyper 3.1 (Bruker Daltonics, Германия).
Количественная ПЦР в режиме реального времени. Для определения концентрации микробной ДНК в исследуемом образце использовали плазмидные конструкции с клонированной последовательностью целевого продукта ДНК соответствующего возбудителя, растворенные в ТЕ-буфере (10mM Tris-HCl, pH 8,0; 1mM EDTA). Количество копий (геном-эквивалентов) плазмидной ДНК в стоковом растворе соответствовали концентрации 10*10 копий/мл. Затем путем 10-кратных разведений были приготовлены растворы с концентрацией ДНК 10*8—10*2 копий/мл, которые использовали для построения калибровочных кривых. Постановку ПЦР и интерпретацию полученных данных проводили на приборе iCycler IQ5 (BioRad, США) по следующей программе: 94 °С – 1,5 минуты, затем 40 циклов: 95 °С – 10 секунд (денатурация), 64 °С – 11 секунд (отжиг праймеров), 72 °С – 20 секунд (элонгация). Детекция продуктов прибором осуществляется автоматически в каждом цикле амплификации. На основе этих данных управляющая программа строит кривые накопления флуоресцентного сигнала по каждому из заданных для образцов каналу. Для расчета количества геном-эквивалентов соответствующих микроорганизмов в клинических образцах параллельно проводили реакцию амплификации с калибровочными образцами в концентрации от 10*8 до 10*2 копий/мл гена 16S rRNA.
Перерасчет количества геном-эквивалента в анализируемых образцах проводили с учетом копийности гена 16S rRNA для каждого детектируемого микроорганизма: Enterococcus sp, Streptococcus sp , Pseudomonas aeruginosae – 4 копии гена, Staphylococcus aureus – 5 копий, E. coli, Proteus sp, Serratia sp – 7 копий и Enterobacter sp – 8 копий гена. Все образцы, цикл выхода которых был ниже 35, считались отрицательными. По завершении всех действий программа автоматически рассчитывает точки пересечения кривых накопления флуоресцентного сигнала каждого образца с пороговой линией, строит калибровочную кривую и рассчитывает концентрацию ДНК в исследуемых образцах.
Результаты
Согласно результатам микробиологических посевов в 95 образцах мочи (95/200, 47,5%) роста микроорганизмов не наблюдалось, в 70 образцах (70/200, 35%) обнаружен один бактериальный возбудитель. В 35 образцах мочи (35/200, 17,5%) выявлены полимикробные инфекции, из них в 7 образцах (7/35, 20%) обнаружено более двух патогенов. В случаях мономикробной инфекции наиболее часто выявлялись Escherichia coli (27/70, 38,6%), Enterococcus faecalis (20/70, 28,6%) и Enterococcus faecium (8/70, 11,4%). В 4,3% (3/70) единственным выявленным возбудителем были коагулазонегативные стафилококки, в 2,9% (2/70) — Streptococcus spp. Бактерии KES-группы (Klebsiella, Enterobacter, Serratia) в моноинфицированных образцах обнаруживались в 10% случаев (7/70). В оставшихся образцах 4,3% выделенных возбудителей пришлось на долю Candida spp (2/70, 2,9%) и Pseudomonas mosselii (1/70, 1,4%). Среди образцов с полимикробными инфекциями в случаях выявления двух возбудителей доминировало сочетание E. сoli и E. faecalis (11/35, 31,4%). В 6 случаях обнаруживались сочетания бактерий E. coli/K. pneumonia (4/35, 11,4%), и E . faecаlis /Streptococcus spp. (2/35, 5,7%). При выявлении трех и более возбудителей сочетание E. coli / E. faecalis /Staphylococcus spp. было наиболее часто встречаемым (3/7, 42,9%).
Результаты ПЦР. Методом количественной ПЦР в режиме реального времени в 123 образцах (123/200, 61,5%) возбудителей не обнаружено. Из 77 положительных образцов (77/200, 38,5%) один бактериальный возбудитель выявлен в 48 образцах мочи (48/77, 62,3%), два возбудителя — в 16 образцах (16/77, 20,8%), три и более — в 13 образцах (13/77, 16,9%). Среди мономикробных образцов мочи согласно результатам ПЦР бактерии E. coli детектированы в 28 образцах (28/48, 58,3%), в 10 образцах (10/48, 21,8%) обнаружены бактерии рода Enterococcus, в 8 — бактерии группы KES (8/48, 16,7%), в 1 — Staphylococcus aureus (1/48, 2,1%), в 1 – Pseudomonas aeruginosa (1/48, 2,1%). При полимикробных инфекциях методом ПЦР сочетания E. coli и бактерий рода Enterococcus выявлены в 6 образцах (6/16, 37,5%). Сочетания E. coli и бактерий родов Enterobacter/Klebsiella, а также Enterobacter spp/Klebsiella spp и Enterococcus spp обнаруживались с одинаковой частотой – 3/16, 18,75%. При выявлении трех возбудителей одновременно доминирующим сочетанием было E. coli/Enterococcus spp/(Enterobacter spp/Klebsiella spp) – 7/13, 53,8%.
Обсуждение результатов
В последнее время появляется все больше информации об успешном применении метода ПЦР в качестве быстрой диагностики заболеваний, причиной которых являются бактериальные возбудители. В представленном исследовании рассмотрена возможность применения количественной ПЦР в режиме реального времени для быстрого обнаружения патогенов в моче пациентов с ИМП и бактериурией. Сравнение нового скринингового и традиционного культурального методов исследования мочи показало как сравнительное преимущество, так и ограничения в применимости обоих методов.
Основным недостатком стандартного бактериологического метода диагностики является длительность его исполнения, иногда превышающая 48 часов. В связи с долгосрочностью анализов зачастую пациентам назначается эмпирическая, часто неадекватная антибактериальная терапия либо до получения результатов идентификации патогена в моче, либо вообще без проведения каких-либо процедур, направленных на выявление возбудителя, а также установления его лекарственной чувствительности. Подобная терапия может увеличивать риск развития осложнений. Например, проведенные ранее исследования доказали, что каждый час задержки адекватной противобактериальной терапии пациентов с септическим шоком снижает уровень выживаемости на 8 %. Особенно критично данное положение у пациентов пожилого возраста, детей и лиц с иммунодефицитом.
В сравнении с культуральным методом получение результатов идентификации патогенов методом ПЦР занимает 4–5 часов, что может способствовать раннему назначению этиотропного лечения.
Важным критерием для постановки правильного диагноза является точность идентификации и подсчет количества микроорганизмов в клиническом материале. При подозрении на ИМП и бактериурию нередко в моче обнаруживается полиинфекция. Культуральный метод с применением селективных сред при полимикробной инфекции не лишен погрешностей в связи с невозможностью подбора оптимальных условий культивирования всех возбудителей инфекции, а проведение дополнительных биохимических тестов для определения видовой принадлежности бактерии является процессом трудоемким, дорогостоящим и долговременным.
Enterobacteriaceae. При дальнейшем исследовании культура была идентифицирована как Escherichia coli в первом случае и Klebsiella pneumoniae во втором методом масс-спектрометрии.
Традиционно, клинически значимым количеством патогенов в моче является 10*4 КОЕ/мл. В последние годы согласно рекомендациям Американского Сообщества Микробиологов (ASM, American Society for Microbiology) и European urinalysis guideline количество патогенов в моче ≥103 КОЕ/мл может интерпретироваться как причина возникновения ИМП или бактериурии, особенно если в моче присутствуют грамотрицательные бактерии (E. coli, Enterobacter spp, P. mirabilis, P. aeruginosa, Serratia marcescens, K. pneumoniae и др.). Мы также проверили значимость полученных данных, принимая во внимание содержание клеток в моче от 10*3 КОЕ/мл и выше.
Более значимые изменения в результатах наблюдались при исследовании полимикробных образцов с учетом снижения порога до 10*3. Частота обнаружения ДНК E. coli в смешанных образцах возросла с 21 до 29, тогда как результаты микробиологических посевов мочи не изменились. Значительно увеличилось количество детектированных бактерий рода Enterococcus (с 22 до 34 методом ПЦР), Enterobacter spp и Klebsiella spp (с 16 до 25 методом ПЦР) в полимикробных пробах. Также почти в 2 раза возросла частота обнаружения бактерий рода Serratia (с 3 до 7).
В 29 образцах при отсутствии роста микроорганизмов на питательных средах методом ПЦР-диагностики дополнительно было выявлено 42 патогена в количестве 10*3 – 10*4 геном-эквивалентов/мл. Из них 13 были мономикробные образцы и 16 - полимикробные. Среди моноинфицированных проб чаще всего выявляли представителей семейства Enterobacteriaceae (3 E. coli, 6 бактерий KES-группы), энтерококки детектировали в 3 случаях, стрептококки — в 2 случаях, P. aeruginosa – 1, и S. aureus – 1. При анализе 16 полимикробных образцов мочи дополнительно методом ПЦР выявлены бактерии семейства Enterobacteriaceae (E. coli – в 4 случаях, бактерии группы KES – в 9), Enterococcus spp – в 6 случаях, P. aeruginosa — в 3, S. aureus – в 2, Proteus spp — в 1 и стрептококки – в 1. Согласно данным, представленным в ASM
Опираясь на количественные данные, мы сопоставили количество КОЕ/мл, полученные при культуральном методе идентификации, и количество геном-эквивалентов/мл каждого микроорганизма, полученных при пересчете данных после ПЦР. В 11 случаях количество геном-эквивалентов E. coli в мл превышало количество КОЕ, выросших на чашках, на 1,5–2 порядка, других патогенов семейства Enterobacteriaceae — в 9 пробах, энтерококки — в 8 образцах мочи, Proteus spp — в 2, S. aureus и P. aeruginosa – в 1. Мы полагаем, что подобные результаты могут быть получены вследствие начала приема антибактериальных препаратов, назначенных до сдачи мочи на анализ и получения результатов выделения патогенов в моче. При наличии инфекции прием антибактериальных препаратов приводит к уменьшению количества заселяющих мочевыводящий тракт микроорганизмов, вследствие чего титр жизнеспособных клеток в моче при микробиологическом посеве будет ниже. Так как при выделении ДНК все бактериальные клетки подвергаются лизису, количество геном-эквивалентов рассчитывается, исходя из тотального количества ДНК в пробе, что не отражает жизнеспособности бактерий. Принимая во внимание, что моча является достаточно агрессивной средой, не пригодной для нормальной жизнедеятельности микроорганизмов, количество мертвых клеток в моче могло увеличится также вследствие несоблюдения правил хранения и транспортировки проб мочи с момента взятия материала до момента проведения анализа. Полагая, что бактерии могли погибнуть в моче вследствие длительной транспортировки или при неправильном хранении пробы, можно ожидать, что первоначальный титр жизнеспособных клеток в моче был выше, что дает основания рассматривать результаты ПЦР как истинные, а результаты посевов как ложноотрицательные или заниженные. Особенно актуальным остается этот вопрос при выявлении грамотрицательной флоры. В 12 образцах при наличии роста микроорганизмов на питательных средах методом ПЦР искомых патогенов обнаружено не было. В 8 случаях преобладала грамположительная флора: в 1 полимикробной пробе мочи, поступившей от беременной, были детектированы 2 патогена в количестве 10*4 КОЕ/ мл: E. faecalis и Streptococcus agalactiae, у 6 пациентов обнаружен энтерококк в титре от 10*4 до 10*5, в 2 пробах детектированы S. agalactiae 10*5 КОЕ/ мл.
[youtube.player]Читайте также:
- Реамберин при ротавирусной инфекции
- Чем лечить стрептококковую инфекцию у женщин
- Инфекция гонококковая у новорожденных
- Стихи про инфекционное отделение шуточные
- Инфекция после укуса осы