Инфекционная патология животных а я самуйленко

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Самуйленко А.Я., Федорова О.Ю., Мельник Н.В., Гринь С.А., Мельник Р.Н.

A COMPARATIVE STUDY OF THE INFLUENCE OF VARIOUS INACTIVATED ON THE VIRUS OF AUJESZKYS DISEASE IN THE INDUSTRIAL PRODUCTION OF THE VACCINE

сравнительное изучение Влияния различных инактивантов на вирус болезни ауески при промышленном производстве вакцины

1А.Я.Самуйленко - доктор ветеринарных наук, профессор, академик РАН;

1О.Ю.Федорова - соискатель; 1Н.В.Мельник - доктор ветеринарных наук, профессор;

1С.А.Гринь - доктор биологических наук, профессор, член-корреспондент РАН;

1Р.Н.Мельник - кандидат биологических наук; 2И.Ю.Литенкова - кандидат ветеринарных наук.

тел.: +7(496) 567-32-63, е-mail: [email protected]).

клюЧЕВЫЕ СлоВА: вакцина, вирус болезни Ауески, монослойно-суспензионная сублиния клеток, инактивация, маркированный штамм, формальдегид, димерэтиленимин, В-пропиолактон, аттенуиро-ванный штамм, питательные среды, диспергирующие смеси, растворы.

Болезнь Ауески (БА, псевдобешенство) - высоко контагиозное заболевание продуктивных и непродуктивных животных. Заболевание вызывается вирусом, относящимся к семейству Негрезу^ае, подсемейству МрИаИегрезуИпае. Инфицирование ВБА молодняка животных, приводит к 80-90% гибели, инфицирование взрослых свиней не приводит к гибели животных, но сопровождается установлением длительного или пожизненного вирусоносительства [2, 4].

Вакцинопрофилактика является основным методом защиты от этого заболевания, снижая клиническое проявление заболевания и достаточно эффективно препятствуя его распространению [3].

В настоящее время для борьбы с этой инфекцией широко используются как лиофилизированные - живые вакцины, содержащие аттенуированные штаммы вируса болезни Ауески (ВБА), так и инактивированные [5].

Используемые в РФ для профилактической вакцинации против ВБА биопрепараты иммуногенны, обеспечивают выработку напряженного иммунного ответа у вакцинированных животных, однако, учитывая широкое распространение этой инфекции и скрытое течение болезни, для профилактической вакцинации пред-

Цель работы - Подбор инактиванта и отработка методики инактивации ВБА при промышленном производстве инактивированной эмульгированной маркированной вакцины.

Материалы и методы. Для получения вирусного материала использовали перевиваемую культуру мо-нослойно-суспензионную линию клеток ВНК-21/13-13.

Культуру клеток выращивали пристеночным способом в культуральных флаконах, площадью 25 см2, 75 см2 или 300 см2 или в роллерных флаконах 0,5 л; 1,0 л; 2,0 л; 5,0 л в термостатах при температуре 37,5±0,50С, используя ростовую среду Игла ДМЕМ (рН 7,2) с добавлением 10% эмбриональной сыворотки крови крупного рогатого скота. Посевная концентрация клеток составляла 200 тыс./см3. Время формирования монослоя 48 ч, индекс пролиферации составлял 1:4. Концентрацию клеток в суспензии подсчитывали с помощью камеры Горяева для подсчета форменных элементов крови. Процент жизнеспособности клеток в суспензии определяли при подсчете клеток с, окрашиванием по общепринятой методике.

Для получения посевных расплодок вируса использовали 2-х суточную культуру клеток с полным монослоем. Из роллерных флаконов или матрасов со сформированным монослоем сливали ростовую среду, однократно отмывали монослой клеток раствором Хенксс рН 7,4.

Предварительно лиофилизированный вирус из 3-х ампул с активностью 1080 ТЦД50/см3 растворяли поддерживающей средой, и заражали монослойную культуру клеток вирус содержащей жидкостью. Два матраса с культурой клеток оставляли не зараженными для контроля.

Для адсорбции вируса зараженные культуры помещали в термостат при температуре 37,50С на 40 мин, после чего в культуральные флаконы добавляли 250 см3 поддерживающей среды. Зараженную и контрольную культуру клеток инкубировали при температуре 37,50С.

Контроль за интенсивностью размножения вируса в культуре клеток осуществляли путем учета цитопати-ческого действия (ЦПД) вируса под световым микроскопом. ЦПД вируса появлялось через 24-48 ч в виде округления клеток и появления в них зернистости.

Инфекционную активность вируса устанавливали методом титрования по цитопатическому действию /ТЦД50/см3/ на перевиваемых культурах клеток ВНК-21/13-13.

Титрование вируса проводили микрометодом в десятикратном разведение на 96-ти луночных микро-плашкахс сформированном монослое клеток.

На каждое разведение использовали по 4 лунки, в каждую лунку вносили по 100 мкл вируса начиная с наименьшего разведения. Для контроля использовали 4 лунки незараженной культуры клеток.

Планшеты с зараженными и контрольными клетками помещали в СО2 термостат и выдерживали при тем-

пературе 37,50С в течение 5 сут, ежедневно просматривая их под микроскопом на наличие ЦПД вируса.

Учет инфекционной активности аттенуированного штамма ВБА проводили по методу Рида и Менча.

Режимы инактивации вируса отрабатывали с разными концентрациями инактивантов (формальдегид, димерэтиленимин, 6-пропиолактон).

Полноту инактивации проверяли на культуре клеток ВНК-21/13-13 в 3-х последовательных пассажей, оценивая полноту инактивации вируса по цитопатиче-скому действию на культуре клеток.

Культуральные флаконы с полностью сформированным монослоем, предварительно отмывали от ростовой среды, вносили проверяемый инактивиро-ванный вирус болезни Ауески и ставили на контакт в течение часа при температуре 370С, затем клеточный монослой заливали поддерживающей средой и инкубировали при 370С в течение 7 дней, ежедневно проводя микроскопию для выявления цитопатогенного действия вируса. Для подтверждения эффективности инактивации вируссодержащей суспензиии для исключения неспецифической дегенерации монослоя использовали по 3 культуральных флакона на одну пробу и по 3 культуральных флакона брали для контроля культуры клеток. Для проведения последующего пассажа, культуру клеток, инфицированную инакти-вированным вирусом, замораживали при минус 200С в течение 24 ч, для более полного выхода вируса из клеток и затем размораживали и заражали культуру клеток вирусной суспензией, проводя 2 последовательных пассажа.

Для обработки результатов использовали статистические методы, используемые в биологии.

Результаты исследований. Приготовив посевные расплодки вируса, отработав дозу заражения и определив способ культивирования, приступили к массовой наработке материала для подбора инакти-ванта и отработки методики инактивации вируса.

Для инактивации использовали вирусный материал с титром инфекционной активности 8,0 1д ТЦД50/см3.

Отрабатывали режим инактивации вируса БА с использованием инактивантов:

Для инактивации вируса БА формальдегидом, формалин вносили в вирусную суспензию до конечного содержания в продукте 0,12% и 0,3%. Инактивацию вируса проводили при рН 7,6 и температуре 37,00С в течение 72 ч с периодическим перемешиванием суспензии. После окончания инактивации суспензию охлаждали до (4-6)0С, и брали пробы на выявление полноты инактивации.

При проверке полноты инактивации инактивиро-ванного в концентрации 0,3% формальдегидом ВБА на первом пассаже в культуре ВНК-21/13-13 было выявлено ЦПД вируса, дальнейшие пассажи не проводили. Инактивация вируса формальдегидом в концентрации 0,12% на культуре клеток ВНК-21/13-13 в 3-х последовательных пассажей ЦПД не было обнаружено.

Для инактивации вируса из 15% раствора ДЭИ готовили непосредственно перед применением 5% водный раствор инактиванта с рН 7,8. Вирусную суспензию тщательно перемешивали, устанавливали рН в пределах 7,6 и вносили ДЭИ в концентрации конечного продукта: 0,01%, 0,02%, 0,03%. Инактивацию вели с периодическим перемешиванием при температуре 20±0,50С; 37,00С; рН 7,6 в течение 24 часов. После окончания инактивации суспензию охлаждали до (4-6)0С, и брали пробы на выявление полноты инактивации на культуре клеток ВНК-21/13-13.

При проверке инактивированного ВБА ДЭИ в концентрации 0,01% на первом пассаже в культуре ВНК-21/13-13 было выявлено ЦПД, дальнейшие пассажи не проводили. При проверки инактивированного ВБА ДЭИ в концентрации 0,02% и 0,03% на культуре клеток ВНК-21/13-13 в 3-х последовательных пассажей ЦПД было не выявлено.

Для инактивации антигена 13-пропиолактоном при температуре 4-60С ВБА предварительно охлаждали до 40С и при непрерывном помешивании добавляли инакти-вант в конечной концентрации 0,025% и 0,5%. Инактивацию проводили при температуре 4-60С в течение 20 часов. После окончания инактивации брали пробы на выявление полноты инактивации на культуре клеток ВНК-21/13-13.

При проверке инактивированного ВБА 6-пропи-олактономв концентрации 0,5% на первом пассаже в культуре ВНК-21/13-13 было выявлено ЦПД, дальнейшие пассажи не проводили. При проверки инакти-вированного ВБА 6-пропиолактоном в концентрации 0,025%на культуре клеток ВНК-21/13-13в 3-х последовательных пассажей ЦПД было не выявлено.

Проведенные испытания показали, что для инак-тивацииВБА можно использовать формалин в концентрации в продукте 0,12%, 6-пропиолактоном в концентрации в продукте 0,025%, а для ДЭИ оптимальной концентрацией инактиванта является 0,02%.

В результате проведенных исследований было

Получение опытно-промышленных серий вакцины. Подбор адъювантов. Компоновка вакцины. Испытание клинической эффективности.

Для получения опытных серий вакцины, инактиви-рованный вирус БА с инфекционной активностью до инактивации 8,0 1д ТЦД50/см3 эмульгировали в масляном адъюванте Монтанид 1БД-206 (серии вакцин №1 и №2).

Испытания проводили на клинически здоровых подсвинках массой не менее 35-40 кг из хозяйств, в которых не проводилась вакцинация против болезни Ауески. До вакцинации животных выдерживали в карантинных условиях до 4 дней.

1. Иммуногенные свойства концентрат-вакцины против болезни Ауески, делеционного по гликопротеину дЕ / М.Н.Гусева, В.В.Михайлишин, О.С.Моренков, Н.С.Мамков // Производство и контроль медицинских ветеринарных препаратов, опыт применения и реализация их в странах СНГ: тез. докл. конф. - Владимирская обл., п. Вольгинский: ФГУППЗП, 1999. - С. 56-58.

3. Сюрин, В.Н. Диагностика вирусных болезней животных: справочник / В.Н.Сюрин, Р.В.Белоусова, Н.В.Фомина. - М.: Агропромиздат, 1991. - 528 с.

4. Сергеев, В.А. Вирусы и вирусные вакцины / В.А.Сергеев, Е.А.Непоклонов, Т.И.Алипер - М.: Библионика, 2007. - 523 с.

5. Основы промышленной иммунобиотехнологии: учеб. пособие / В.М.Безгин, Н.Н.Быкова, В.Е.Козлов [и др.]. - Курск: Изд-во КГСХА, 2011 - 288 с.

6. Цион, Р.А. Дифференциальная диагностика болезней свиней / Р.А.Цион. - Л.: Колос, 1970. - 96 с.

7. Оценка вирусвакцины для профилактики болезни Ауески свиней / А.А.Коломыцев, В.А.Бабаян, И.Ф.Вишняков [и др.] // Ветеринария. - 1991. - № 1 - С. 31-33.

8. The Role of Viral and Host MicroRNAs in the Aujeszky's Disease Virus during the Infection Process / O.Timoneda [et al.] // PLoS ONE. - 2014. - № 9 (1). - January. - P. 86-96.

A COMPARATIVE STUDY OF THE INFLUENCE OF VARIOUS INACTIVATED ON THE VIRUS OF AUJESZKY'S DISEASE IN THE INDUSTRIAL PRODUCTION OF THE VACCINE

1Samuilenko A.Ya. - Doctor of Veterinary Sciences, professor, Academician of RAS;

1Fedorova O.Y. - applicant; 1Melnik N.V. - Doctor of Veterinary Sciences; 1Grin S.A. - Doctor of Biological Sciences, professor, Corresponding member of RAS; 1Melnik R.N. - Candidate of Biological Sciences;

2Litenkova I.Y. - Candidate of Veterinary Sciences.

1All-Russian Research and Technological Institute of Biological Industry, Moscow region

KEYWORDS: vaccine virus of Aujeszky's disease, monolayer-suspension subline cells, inactivation, marked strain, the formaldehyde dimer, ethylenimine, B-propiolacton; uses an attenuated strain, nutrient medium, dispersing the mixture, solutions.

ПЕРСПЕКТИВЫ РАЗВИТИЯ ВЕТЕРИНАРНОЙ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ И ВОПРОСЫ НАУЧНОГО ОБЕСПЕЧЕНИЯ

А. Я. Самуйленко, В. И. Еремец, А. А. Раевский

(Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности)

Развитие биотехнологии в XXI в. является приоритетом высшего порядка. Биотехнология во многом стала определять развитие научно-технологического прогресса и благосостояние общества в мире. В Концепции долгосрочного социально-экономического развития Российской Федерации биотехнология включена в основные приоритеты. В перечне критических технологий из 34 16 технологий являются сферой ответственности биотехнологии. В 2012 г. Правительством страны утверждены Комплексная программа развития биотехнологий в Российской Федерации на период до 2020 года и Программа развития сельского хозяйства и регулирования рынков сельскохозяйственной продукции, сырья и продовольствия на 2013-2020 годы. В данных Программах определены основные ориентиры по выходу Российской Федерации на лидирующие позиции в биотехнологической отрасли. При этом основное внимание уделяется увеличению физических объемов производства биотехнологической продукции в 33 раза и сокращению импорта на 50 %.

Основной целью биотехнологических разработок в области ветеринарной медицины является разработка методов, средств, техники и технологий диагностики, лечения и профилактики болезней животных на основе новейших достижений молекулярной биологии и генетической инженерии и создание условий, обеспечивающих возможность сохранения устойчивого ветеринарного благополучия, продовольственной и экологической безопасности страны.

В сельском хозяйстве биологические препараты для лечения, профилактики и диагностики заболеваний животных и растений представлены широким ассортиментом продуктов как импортного, так и отечественного производства. Однако дальнейший рост объемов отечественной продукции имеет серьезные ограничения, обусловленные отставанием от лучшего мирового уровня в разработке и внедрении в производство биотехнологических процессов, основанных на использовании достижений клеточной биологии, генетики и молекулярной биологии и необходимостью модернизации технологической базы промышленного производства.

В настоящее время в агробиологической промышленности отсутствует система масштабирования новых биотехнологических процессов для промышленного производства биопрепаратов, а также ряд документов интегрированной системы менеджмента в соответствии с международными требованиями и координация между организациями, занимающимися научными биотехнологическими исследованиями и реализацией их результатов в промышленности.

Все эти трудности и недостатки в развитии отечественной биотехнологии являются причинами того, что многочисленные новые высокоэффективные биопрепараты, созданные научными учреждениями страны, еще не нашли широкого применения в производстве и практике.

Институты Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии подготовили предложения в Комплексную программу развития биотехнологий в Российской Федерации на период до 2020 года по следующим разделам: 1 - биофармацевтика, 5 - сельскохозяйственная и пищевая биотехнология, 8 - природоохранная биотехнология, 9 - морская биотехнология.

Ключевым элементом реализации Программы выступает создание современной гибкой экспериментальной базы, ориентированной на массовое внедрение биотехнологических продуктов и решение комплекса задач по формированию производственно-технологической базы по всем основным видам продукции промышленной биотехнологии.

В соответствии с задачами Комплексной программы рядом НИИ Россельхозакадемии (ВНИТИБП, ВИЭВ, Краснодарский НИВИ и др.) подготовлены предложения по научному обеспечению развития агробиотехнологии и модернизации предприятий по производству биотехнологической продукции, включающие создание пилотных предприятий и центров прототипирования, нацеленных на малотоннажное производство, отработку промышленных регламентов производства биопрепаратов, про-ведение производственных испытаний, клинических исследований и наработку партий продукции для тестовых продаж.

Новизна этих исследований заключается в теоретическом и экспериментальном обосновании нового подхода к модернизации агробиологической промышленности за счет создания инновационных уни-фицированных технологий с использованием современного оборудования (в модульном исполнении), позволяющих организовать многопрофильные производства биологических препаратов (в том числе средства защиты животных, растений, восстановления почв). Результаты фундаментальных исследований и технологических разработок по проекту могут быть базовыми для организации производства препаратов широкого спектра действия.

Анализ научно-исследовательских программ головных институтов Россельхозакадемии показал, что будут разработаны инновационные технологии изготовления диагностических и вакцинных препаратов против опасных и особо опасных инфекционных заболеваний сельскохозяйственных животных, не имеющие аналогов на рынке ветеринарных препаратов страны.

Большое внимание уделяется разработке средств и методов ранней диагностики и индикации инфекционных и инвазионных болезней животных. ВНИИВВиМ планирует разработку новых средств и методов молекулярной диагностики трансмиссивных вирусных болезней продуктивных животных (блютанг, ЭГБО, Ибараки, ЛДР, Найроби, Акабане, болезнь Шмаленберга). Данные о нуклеотидных последовательностях вариабельных фрагментов геномов штаммов различных серотипов вирусов будут использованы при разработке генноинженерных вакцин. Тест-системы будут применяться при массовых исследованиях проб от импортируемых животных и животноводческой продукции, в эпизоотологических исследованиях проб от домашних и диких животных, насекомых, а также для индикации вирусов в объектах ветеринарного надзора.

Научными сотрудниками ВИГИСа будут разработаны и использованы молекулярно-генетические подходы для создания рекомбинантных и культуральных антигенных компонентов и разработки диагностических систем и биопрепаратов для защиты животных от тканевых паразитарных зоонозов -трихинеллеза, цистного и альвеолярного гидатидозов, тенуикольного цистицеркоза.

Борьба с лейкозом крупного рогатого скота не потеряла актуальности в России. Особое значение это заболевание имеет в настоящее время - при вступлении РФ в ВТО. Сотрудниками ВИЭВ будет разработана усовершенствованная программа борьбы и профилактики лейкоза крупного рогатого скота на территории РФ и стран-участников СНГ. Уральский НИВИ планирует разработку тест-систем для диагностики лейкоза крупного рогатого скота.

Во ВНИИВВиМ будет проведен нуклеотидный анализ гена CD2v белка вируса африканской чумы свиней (АЧС) ответственного за вирулентность, протективность и гемадсобирующие свойства и создан научно-технический задел для разработки генно-инженерных защитных препаратов против АЧС. Будут разработаны универсальные подходы изготовления ДНК-вакцин против особо опасных болезней человека и животных на основе нанопротекторов и генетических адъювантов.

Будет проведена инвентаризация, поддержание и обновление криобиологического геномного банка клеток (ВИЭВ) и создан национальный банк возбудителей инфекционных болезней животных, культур клеток, тканей и сывороток животных, вакцинных и иммуностимулирующих препаратов, диагностических ДНК и РНК-препаратов. (ВНИИВВиМ). ВНИВИП планирует создание коллекции высоковирулентных и апатогенных штаммов эймерий, циркулирующих в птицеводческих хозяйствах, специализирующихся на выращивании кур, индеек, уток, гусей.

В настоящее время интенсивно развивается такое направление в экобиотехнологии, как создание пробиотиков, пребиотиков, синбиотиков и биологически активных кормовых добавок, которые обладают не только питательной ценностью, но и защитным действием на организм животных. Разработку пробиотических препаратов с использованием современных биотехнологических методов проводят ВНИТИБП, Краснодарский НИВИ, Саратовский НИВИ, НИВИ НЗРФ и другие научные организации.

ВНИВИПФТ планирует получить новые биологически активные субстанции и создать на их основе новые лекарственные препараты против акушерско-гинекологических заболеваний маточного поголовья, желудочно-кишечных и респираторных болезней молодняка, нарушения обмена веществ у животных.

Переход на ускоренные селекции сельскохозяйственных животных обусловлен внедрением промышленной технологии трансплантации эмбрионов. Центр экспериментальной эмбриологии и репродуктивных биотехнологий (ЦЭЭРБ) работает над созданием и формированием базы данных генетических паспортов животных, на основе которых будут внедрены промышленные технологии геномной селекции. ДальЗНИВИ дал обоснование необходимости создания научно-производственного и сервисного биотехнологического репродуктивного центра крупного рогатого скота. Освоение технологии репро-дукции сельскохозяйственных животных на основе инновационных методов молекулярной и клеточной биотехнологии позволят увеличить в 2-4 раза поголовье племенного и высокопродуктивного скота с сохранением генетического потенциала роста и развития животных.

Большое внимание уделяется инновационным разработкам новых бактерицидных и дезинфицирующих средств, технологических процессов обеззараживания кормов, контаминированных патогенной микрофлорой и вирусами, утилизации и переработки отходов на предприятиях АПК с использованием технологии микробиологической конверсии, над чем плодотворно работают сотрудники ВНИИВСГЭ, ВНИТИБП, Уральского НИВИ.

Таким образом, приоритетное направление развития инновационных биотехнологий в ветеринарии приведет к созданию в стране современных промышленных производств биопрепаратов нового поколения для профилактики, диагностики и лечения особо опасных и наиболее распространенных экономически значимых болезней животных. Создание гибкой экспериментальной базы, ориентированной на внедрение в промышленность биотехнологических продуктов разного назначения, позволит сформировать конкурентоспособный рынок данной отрасли.

1. Гулюкин М. И. Итоги научно-исследовательских работ по программе фундаментальных и приоритетных прикладных исследований по научному обеспечению развития АПК на 2006-2010 гг. // Труды ВИЭВ. 2010. Т. 76. С. 7-23.

4. Инфекционная патология животных: в 3 т. / под ред. А. Я. Самуйленко, М. И. Гулюкина, И. М. Донник [и др.]. М.: РАСХН, 2009. Т. 3. 881 с.

5. Концепция научного обеспечения создания и развития региональных биологических предприятий по производству препаратов для защиты животных, растений и средств, повышающих эффективность функционирования агропромышленного комплекса Российской Федерации. М.: РАСХН, 2011. 11 с.

6. Отчет о работе отделения ветеринарной медицины за 2012 г. М., 2013. 256 с.

7. Самуйленко А. Я., Беро И. Л., Гринь С. А. Научное обоснование создания и развития региональных биофармпредприятий для повышения эффективности АПК РФ // Фармацевтические и медицинские биотехнологии: материалы междунар. науч.-практ. конф. М., 2012. С. 285-286.

Мищенко В.А., Думова В.В., Мищенко А.В., Киселев М. Ю. ФГУ"ВНИИЗЖ",г. Владимир
Черных О.Ю. Госветупровление Краснодарского края

Введение. В последнее время в Россию из разных стран мира (Австралия, Франция, Канада, Казахстан) завозят крупный рогатый скот (КРС) мясных пород (герефордская, лимузинская, шаролезская, абердин-ангусская, казахская белоголовая, симментальская). Скот мясных пород, по сравнению с молочными, отличается следующими биологическими особенностями: устойчив к неблагоприятным факторам внешней среды, эффективно перерабатывает низкопитательные грубые корма в продукцию. Единственная продукция мясной коровы - теленок. Обычно коровы мясных пород содержатся совместно с телятами в течение определенного времени (6-8 месяцев). За это время теленок достигает живой массы 200-280 кг. Естественная резистентность и иммунологическая реактивность организма крупного рогатого скота мясных пород зависит от возраста, условий содержания и кормления. У мясного КРС часто регистрируют заболевания органов пищеварения и дыхания, вызванные ротавирусом. коронавирусом. возбудителями вирусной диареи (ВД). парагриппа-3 (ПГ-3). инфекционного ринотра-хеита (ИРТ) и респираторно-синцитиальной инфекции (РСИ). а также Mannheimia haemolytica и Pasteurella multocida [1. 2. 3].

В данной работе представлены результаты эпизоотологического обследования хозяйств и лабораторных исследований патологического материала и сывороток крови от КРС мясных пород.

Результаты исследований и их обсуждение. В одном из регионов РФ был проведен анализ сохранности и причин выбытия завезенного КРС герефордской породы (табл. 1)

Таблица 1 Основные причины выбытия КРС герефордской породы

Из-за травм выбыло 11 животных (3.3%). Патология органов пищеварения была выявлена у 7 (2.1%). а патология органов дыхания и сердечнососудистой системы у - 8 животных (2.4%) Послеродовые осложнения отмечены у 3 коров (0.9%).

При эпизоотологическом обследовании установлено, что одной из причин возникновения патологии органов пищеварения являются нарушения технологии кормления, а также плохое качество кормов В сыворотках крови животных с патологией органов дыхания и сердечно-сосудистой системы были выявлены антитела к коронавирусу и вирусу ПГ-3. а в пробах патологического материала - Mannheimia haemolytica.

В одном из хозяйств, специализирующихся на выращивании КРС шаролезской породы, была зарегистрирована диарея новорожденных телят. В пробах фекалий и слизистой оболочки кишечника был выявлен коронавирус (РГА/РТГА). По клинической картине и патологоанатомическим изменениям коронавирусная диарея у телят мясных пород не отличалась от подобной патологии у телят молочных пород. Двукратная иммунизация глубокостельных коров инактивированной вакциной (ФГУ "ВНИИЗЖ") против коронавирусной инфекции позволила существенно снизить заболеваемость и предотвратить гибель новорожденных телят.

В пробах фекалий от больных диареей новорожденных телят абердин-ангусской породы были обнаружены антигены ротавируса (ИФА) и коронавируса (РГА/ РТГА) Применение с лечебной целью полиспецифической гипериммунной сыворотки против болезней КРС позволило снизить уровень заболеваемости, тяжесть клинических признаков и предотвратить гибель новорожденных телят. В ряде хозяйств у завезенных животных герефордской и абердин-ангусской пород были зарегистрированы вспышки острых респираторных заболеваний При эпизоотологическом обследовании хозяйств и лабораторных исследованиях было установлено что респираторные заболевания взрослого КРС указанных пород обусловлены сочетанным воздействием на организм животных "абиогенных" и "биогенных" факторов. Возникновению заболеваний органов дыхания предшествовали длительная транспортировка перегруппировка, содержание животных в помещениях, не соответствующих зоогигиеническим нормам, нарушения микроклимата, сквозняки, высокая влажность, загазованность, резкие колебания температуры При лабораторных исследованиях была доказана роль возбудителей ПГ-3 КРС. ИРТ. ВД. РСИ. коронавируса. Mannheimia haemolytica. Pasteurella multocida в развитии патологии органов дыхания Наиболее часто встречается следующая ассоциация коронавирус - вирус ПГ-3 - Mannheimia haemolytica.

В отдельных хозяйствах была проведена вынужденная иммунизация инактивированными сорбированными вакцинами против коронавирусной инфекции и ПГ-3. а также инактивирован-ной эмульсионной вакциной против ПГ-3. ИРТ и ВД. В результате проведенного комплекса лечебных вынужденной иммунизации и общих ветеринарных мероприятий были ликвидированы вспышки заболеваний

В результате лабораторных исследований (табл 2) положительными к коронавирусу КРС оказались 60-100% исследованных проб сывороток крови к возбудителям ВД. ПГ-3 ИРТ и РСИ - 57.3-90 %. 94.3- 100 %. 6.7-100 % 50.1-100 % проб, соответственно. Анализ результатов исследований позволяет сделать вывод, что антитела к возбудителям ВД. ИРТ и РСИ можно считать поствакцинными, т.к. животные были вакцинированы в стране-поставщике а антитела к коронавирусу и вирусу ПГ-3 - постинфекционными.

Таблица 2 Результаты исследований сыворотки крови КРС мясных пород на наличие вирусспецифических антител

Заключение. Представленные данные свидетельствуют о том, что в обследованных хозяйствах выбытие взрослого КРС мясных пород было обусловлено

травмами вследствие размещения животных в неподготовленные помещения послеродовыми осложнениями:
патологией органов пищеварения вследствие использования некачественных кормов и нарушения технологии кормления
патологией органов дыхания и сердечно-сосудистой системы, обусловленной воздействием на организм животных ассоциации "абиогенных" (нарушения зоогигиенических норм содержания и кормления животных) и"биогенных- (коронавирус возбудители ВД. ИРТ. ПГ-3 и РСИ. а также - Mannheimia haemolytica. Pasteurella multocida) факторов.

Основными причинами гибели новорожденных телят были ро-тавирусная и коронавирусная диареи Вакцинация глубокостельных коров инактивированной вакциной против ротавирусной и коронавирусной инфекций позволила снизить заболеваемость и предотвратить гибель новорожденных телят мясных пород от ротавирусной и коронавирусной диареи. Применение в лечебных дозах полиспецифической гипериммунной сыворотки против болезней крупного рогатого скота, вызываемых вирусами ИРТ. ПГ-3. рота- и коронавирусами возбудителем ВД-БС и антибиотиков привело к снижению уровня заболеваемости и смертности.

Обработка больных и контактировавших животных лечебной сывороткой и антибиотиками широкого спектра действия последующая двукратная иммунизация инактивированной вакциной против актуальных вирусов позволили ликвидировать респираторные заболевания взрослого КРС мясных пород в обследованных хозяйствах.

Список литературы

Самуйленко. А Я. Инфекционная патология животных / А.Я. Самуйленко. Б В Соловьев Е.А Непоклонов. ЕС. Воронин//М ; ИКЦ "Академкнига". 2006.
Этиопатогенез респираторных заболеваний КРС / В А. Мищенко. ДК Павлов В В Думова [и др.] // Ветеринарный консультант - 2008. - N° 11. - С. 3 - 5
Respiratory viral infections in a herd beef calves/A. Jonasson. M. Tornquist S Alenius [et al] // XXII World Buiartrics Congress/ -Honnover 2002. - P. 127 - 369

У новорожденных телят мясных пород были зарегистрированы ротавирусная и коронавирусная инфекции. Заболевания органов дыхания взрослого КРС обусловлены воздействием коронавируса. возбудителями вирусной диареи парагриппа-3 инфекционного ринотра-хеита респираторно-синцитиальной инфекции а также Mannheimia haemolytica и Pasteurella multocida

Ключевые слова: мясной скот ротавирус. коронавирус вирусы ВД ИРТ. ПГ-3. РСИ

U DC 619616 98:578 636.28/. 28

CHARACTERISTIC FEATURES OF MASS MORBIDITY AMONG BEEF BREED CATTLE

Mlschenko V.A., Dumova V.V., Mlschenko A.V., Klselyov M.Yu., Chernykh O.Yu. Summary

Rotavirus and coronavirus infections were registered among newborn calves of beef breed Coronavirus. viral diarrhea virus. parainfluenza-3 virus, infectious rhinotracheitis virus, respiratorysyncytial infection virus as well as Mannheimia haemolytica and Pasteurella multocida are responsible for respiratory diseases of adult cattle.

Keywords: beef cattle, rotavirus coronavirus VDV IRTV. PI-3 virus. RC infection virus.

About the authors

Mischenko Vladimir A.. D.Sc. in Veterinary Medicine, professor chief expert for bovine diseases of Federal State Establishment "All-Russian Scientific Research Institute of Animal Health" (Vladimir), mcrd. Yurjevets Vladimir. Russia, 600901: phone: (4922) 26-17-65 20-83 e-mail: [email protected]

Mischenko AlekseyV. PhD in Veterinary Medicine senior scientific researcher of laboratory of foot-and-mouth diseases and vesicular diseases of Federal State Establishment "АН-Russian Scientific Research Institute of Animal Health" (Vladimir), mcrd. Yurjevets. Vladimir. Russia 600901. phone: (4922) 26-17-65-20-83 e-mail [email protected]

Kiselyov Mikhail Yu.. leading veterinarian of laboratory for bovine diseases of Federal State Establishment "АН-Russian Scientific Research Institute of Animal Health" (Vladimir), mcrd. Yurjevets. Vladimir. Russia 600901. phone: (4922) 26-17-65-20-83 e-mail [email protected]

Chernykh Oleg Yu.. D Sc in Veterinary Medicine, chief of the section of organization and control of laboratory diagnostics, veterinary drugs turnover and registration of the State Veterinary Department of Krasnodar Territory, director of the Kropotkin territorial veterinary laboratory 303. Krasnoarmejskaya St. Kropotkin 352380: phone: 8 (86138) 6-23-14: e-mail: [email protected].

Responsible for correspondence with the editorial board:

Dumova Vlktorlya V., Ph.D. In Biology, senior scientific researcher of laboratory for bovine diseases of Federal State Establishment •'All-Russian Scientific Research Institute of Animal Health" (Vladimir), mcrd. Yurjevets, Vladimir, Russia, 600901; phone: (4922) 26-17-65-20-83; e-mail: [email protected].

Сведения об авторах

Мищенко Владимир Александрович, доктор ветеринарных наук профессор главный эксперт по болезням крупного рогатого скота ФГУ ¦ВНИИЗЖ": 600901 Россия. г Владимир, мкр Юрьевец: телефон (4922) 26-17-65 20-83 e-mail: [email protected]

Черных Олег Юрьевич, доктор ветеринарных наук, начальник отдела организации и контроля лабораторной диагностики оборота ветеринарных препаратов и регистрации директор ГУ КК "Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория" 352380. г. Кропоткин ул. Красноармейская, д 303 телефон 8 (86138) 6-23-14: e-mail gukkvl50@kubanvet ru.

Читайте также: