Инфекционный бронхит кур диссертация

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Дандал Али Шилбли, Сухарев Олег Иванович, Макаров Владимир Владимирович

The Infectious Bronchitis Pathogenesis. Part 1. The Reproduction of Virus Genotype “QX” with Different Modes of Infection in Chickens

An infectious bronchitis virus (IBV) genotype “QX” strain RF08-10 causes the infectious process with severe clinical signs in the bird’s organism. The virus effectively develops in the body regardless whether the way of infection was oculonasal or cloacal. It has a tropism to the tissues of the respiratory tract, kidneys, ovaries and lymphoid tissues of blind and large intestines.

Дандал А. Ш., Сухарев О. И., Макаров В. В.

THE INFECTIOUS BRONCHITIS PATHOGENESIS. PART 1. THE REPRODUCTION OF VIRUS GENOTYPE "QX" WITH DIFFERENT MODES OF INFECTION IN CHICKENS

Дандал Али Шилбли, аспирант / Dandal Ali Sh., Postgraduate Сухарев Олег Иванович, д. в. н., проф. каф. клинической ветеринарии Sukharev Oleg I., Doctor of Veterinary Medicine, Professor of the Dept. of Clinical Veterinary Medicine Макаров Владимир Владимирович, д. б. н., проф. каф. клинической ветеринарии

Makarov Vladimir V., Doctor of Biology Science, Professor of the Dept. of Clinical Veterinary Medicine

Summary. An infectious bronchitis virus (IBV) genotype "QX" strain RF08-10 causes the infectious process with severe clinical signs in the bird's organism. The virus effectively develops in the body regardless whether the way of infection was oculonasal or cloacal. It has a tropism to the tissues of the respiratory tract, kidneys, ovaries and lymphoid tissues of blind and large intestines.

Инфекционный бронхит кур (ИБК) является одной из наиболее экономически значимых болезней промышленного птицеводства. Заболевание было впервые описано Schalk и Hawn [5] как респираторная болезнь цыплят, и считалось, что ей подвержена только молодая птица. Однако дальнейшие исследования показали, что ИБК встречается как у молодняка, так и у кур-несушек [6].

В настоящее время болезнь распространена практически во всех странах мира, где развито промышленное птицеводство. В последние годы вспышки ИБК регистрируются в птицеводческих хозяйствах многих стран, в том числе в Российской Федерации и странах СНГ [1, 7]. Биологические особенности возбудителя (высокая контагиозность и восприимчивость популяции хозяина, длительная персистенция) способствуют стационарности и широкому распространению заболевания [9]. Клинические проявления болезни зависят от ряда факторов, среди

которых следует отметить вирулентность и тропизм циркулирующего штамма вируса. Считается [8], что ткани дыхательной системы - ворота инфекции и главная патогенетическая мишень вируса.

Однако в последние годы вирус ИБК был выделен из клоакальных мазков и тканей кишечника [10]. При этом есть сообщение о возможности инфицирования цыплят вирусом ИБК клоакальном способом. Предполагают, что возможен перенос материала окружающей среды (в том числе инфекционного) через анальное отверстие в клоаку. Далее перистальтика нижних отделов кишечника может способствовать распространению инфекции в организме птицы [11]. В связи с этим допустимо считать, что проникновение возбудителя ИБК таким способом возможно.

Цель настоящего исследования заключается в сравнении патогенного действия вируса ИБК для СПФ цыплят при использовании окуло-назального и клоакального способов.

Материалы и методы

Для постановки полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР-РВ) использовали систему праймеров и флуоресцентно-меченого олигонуклеотидного зонда, выбранных для амплификации фрагмента нетранслируе-мой области генома вируса (UTR) согласно Методическим указаниям [4]. Учет результатов реакции проводили при помощи прибора Corbett Research Real-Time PCR System (Rotogene, Австралия), где регистрировали количество циклов амплификации.

У подопытных и контрольных цыплят после эвтаназии извлекали почки. Кусочки тканей удаленных органов фиксировали 10%-м раствором формалина и заливали парафином. Готовили срезы парафинизированных тканей толщиной 5 мкм, окрашивали гематоксилином и эозином.

Результаты и обсуждение

Были образованы две подопытные группы (А и Б) по 50 цыплят в каждой и контрольная группа птиц из 30 голов. Цыплят за сутки до заражения не кормили. Цыплята группы А были заражены вирусом ИБК окуло-на-зально. Заражение выполняли с помощью дозатора по 104 ЭИД50. Цыплят группы Б инфицировали в клоаку с помощью катетера в дозе 104 ЭИД50. Во всех группах проводили ежедневный клинической осмотр птиц.

Через заданные интервалы времени (указаны на рисунке 2) из групп А и Б отбирали по 3 цыпленка, а также по одному цыпленку из контрольной группы. Материал от ото-

бранных цыплят после эвтаназии подвергали патологоанатомическому исследованию. При вскрытии у каждого цыпленка асептически отбирали дыхательные органы (трахею и легкие), миндалины слепой кишки, почки, репродуктивные органы, бурсу. Пробы замораживали при -35 °С и использовали для выделения вирусного генома в ПЦР и гистологических исследований.

Было установлено, что проявление клинических признаков болезни у птиц при двух использованных методах заражения было неодинаковым. У цыплят группы А через 3 суток после заражения наблюдали характерный для бронхита респираторный сим-птомокомплекс. На 7-8 сутки регистрировали слабо выраженную почечную патологию (отечность и анемию).

У цыплят группы Б признаков респираторного синдрома не отмечено. Однако гистологические изменения в почках наблюдали уже на 3 сутки после заражения, на 5 сутки были зарегистрированы очевидные признаки нефрозо-нефрита. Вирус вызывал дистрофию, вакуолизацию и десквамацию эпителия канальцев. Поражения отмечались в основном в собирательных протоках, прямых канальцах и дистальных извитых канальцах мозгового вещества почки. К 5 суткам поражения почек были более выражены как в коре, так и мозговом веществе органа. Дегенерацию клеток и некрозы обнаруживали в канальцах и протоках коркового и мозгового вещества. Также наблюдали интерстициаль-ный отек с инфильтрацией из лимфоцитов и макрофагов (рис. 1).

По результатам ПЦР определяли количество циклов амплификации праймирован-ного участка вирусного генома. Количество циклов амплификации находится в обратной зависимости от концентрации генетического материала вируса в пробах. В связи с тем, что известная модель связи между пороговым циклом амплификации и величиной титра вируса ИБК [2] не является штаммоспеци-фичной, это позволило использовать ее для прогноза накопления возбудителя в исследуемых образцах инфицированных тканей птиц. Полученные результаты представлены в виде хронологических диаграмм на рисунке 2.

Рис. 1. Микрофотографии образцов мозговой ткани почек, взятых в контрольной и опытной (7 суток после заражения) группах цыплят. У инфицированных птиц наблюдается интерстициальный отек почечных канальцев с выраженной инфильтрацией лимфоцитами и макрофагами.

Рис. 2. Динамика накопления вируса ИБК (прогнозируемая величина титра по данным ПЦР, Т) в пробах тканей различных органов птиц в зависимости от способов заражения (окуло-назальный - •, ♦ и клоакальный - ■) и времени после заражения (сут.).

Представленные на рисунке 2 распределения показателей для обоих способов заражения демонстрируют наличие начального периода развития инфекционного процесса, кратковременный максимум накопления вируса и продолжительное монотонное снижение его концентрации. Наиболее высокий ожидаемый титр вируса для каждого типа ткани почти во всех случаях приходился на 4-6 сутки после заражения. При обоих способах инфицирования величины максимальных титров были близкими.

Однако в зависимости от использованного способа присутствовали определенные раз-

личия. При окуло-назальном заражении вирус интенсивнее развивался в респираторной системе и кишечнике, тогда как его проникновение в почки и яичники птицы происходило медленнее. При клоачном способе вирус интенсивнее диссеминировался в почки и репродуктивную систему птицы. При этом его накопление в тканях почек было заметно выше.

Продолжительность присутствия вируса в титрах выше 0,5 ^ в респираторной и репродуктивной системах при обоих способах заражения составляло около 20-25 суток. При этом присутствие вируса в почках (клоачный способ заражения) и кишечнике

за аналогичный период соответствовало более высоким титрам. Например, в почках при клоачном способе на 25 сутки ожидаемый титр вируса составлял не менее 2 в миндалинах слепой и толстой кишок - более 3

Заслуживает внимания тот факт, что при одинаковой интенсивности развития возбудителя в тканях респираторного тракта клиническая картина процесса в случае окуло-назального заражения была более выражена. Патологоанатомические изменения в почках, наблюдаемые в большей степени при клоачном заражении, совпадали с хронологией накопления вируса в тканях указанных органов.

Рассмотренные результаты свидетельствуют, что исследуемый вирус инфекционного бронхита кур генотипа

Номер работы: 362368

Без учета скидки. Вы получаете файл формата pdf

Вы получаете первые страницы диссертации в формате txt

Просмотр 1 страницы = 3 руб

Оглавление диссертации:

2.1. Инфекционный бронхит кур

Инфекционный бронхит кур (ИБК) является высококонтагиозным заболеванием, которое наносит значительный экономический ущерб птицеводческой промышленности многих стран. Заболевание впервые было зарегистрировано в 1931 году в США в Северной Дакоте, а этиологический агент впервые был выделен в 1937 г (53). В нашей стране изучение ИБК было начато в 1950-е годы, когда на крупных птицеводческих комплексах яичной яичного направления (15). Это, у цыплят вероятно, стали было наблюдаться связано с респир

В 1933 году Bushnell и Brandly, изучая респираторную болезнь цыплят, впервые выяснили, что возбудителем ее является фильтрующийся вирус (60). Дальнейшие исследования Beach и Schalm в 1936 году показали, что этот этиологический агент отличается от ларинготрахеита, открытого ранее (51). Инфекционный бронхит кур вызывается РНК- содержащим вирусом сем. Coronaviridae, рода Coronavirus. Вирионы представляют собой частицы сферической формы, диаметром 80-160 нм, имеют липопротеиновую оболочку

2.1.3. Антигенная вариабельность вируса инфекционного бронхита кур Первым штаммом вируса ИБК был Beaudette, который был выделен на развивающихся куриных эмбрионах (53). Этот штамм и выделенный в 1941 году в США штамм Mass 41 обладали сходными антигенными 9 свойствами и были классифицированы в первый серотип ИБК Massachusetts (Mass). В результате некоторое время считалось, что вирус ИБК однороден по своей антигенной структуре (172). Но уже в 1958 году исследования Hofstad и соавт. (101) показа

2.1.4. Антигенные свойства пепломерного белка S 1 вируса ИБК Сравнение аминокислотных последовательностей вирусных белков у разных штаммов вирусов используется для локализации консервативных * доменов белков, которые могут быть значимы для их структуры и функции, а также для идентификации эпитопов, вовлеченных в нейтрализацию вируса, и изучения антигенного дрейфа. Гликопротеин S1 служит мишенью для серотипоспецифических и вируснейтрализующих определили с гипервариабельный * Последовательность

2.1.5. Характеристика изолятов вируса ИБК, выделенных на ^ птицефабриках России Хотя заболевание впервые было зарегистрировано в 1931 году в США, в нашей стране изучение ИБК было начато в 1950-е годы, когда на крупных птицеводческих комплексах яичного направления у цыплят стали наблюдаться респираторные нарушения, а у взрослой птицы отмечалось снижение яичной продуктивности. Основными научными центрами по ^ изучению ИБК в России стали Московская ветеринарная академия (МВА), Всесоюзный институ

2.2.1 Патогенез и эпизоотология инфекционного ларинготрахеита птиц Инфекционный ларинготрахеит птиц (ИЛТ) - контагиозная вирусная болезнь кур, индеек, цесарок, фазанов, характеризующаяся поражением слизистых оболочек верхних дыхательных путей и глаз. Заболевание впервые было описано в 1925 году, Бодеттом в а этиологический агент выделен как ларинготрахеит, 1937 (52). Его идентифицировали инфекционный бронхит и дифтерия птиц. В настоящее время ИЛТ встречается повсеместно во всех странах мира.

2.2.2.Классификация и физико-химические свойства вируса ИЛТ Возбудителем ИЛТ является фильтрующийся вирус, открытый Бодеттом, который относится к семейству Herpesviridae и подсемейству # Alphaherpesvirinae (60). Таксономически вирус идентифицируют как Gallid herpesvirus 1. Нуклеокапсид вируса ИЛТ имеет гексагональную форму, диаметром 80-100 нм, с икосаэдрической симметрией и состоит из 162 удлиненных полых капсомеров. Полная вирусная частица диаметром 195трипсинизированнои культуре печени кур

Репликация вируса ИЛТ сходна с той, что имеет место у других • вирусов, относящихся к роду с Alpfaherpesvirus, прикрепления таких к как вирус псевдобешенства и вирус простого герпеса (175,176). Инфекция начинается вируса клеточным рецепторам и последующим проникновением вируса путем виропексиса. В процессе виропексиса клетками могут захватываться как частицы с оболочками, так и без них. Благодаря оболочке, возможно, облегчается адсорбция вируса на клетках, но ее присутствие не является обязат

Ларинготрахеит может быть точно диагностирован по клиническим * симптомам только в случае острой формы заболевания с высокой смертностью и отхаркиванием крови. Однако сходные клинические симптомы и повреждения могут присутствовать и при других респираторных заболеваниях домашних птиц. Поэтому диагноз на ларинготрахеит ставится на основании обобщения эпизоотологических данных, клинических признаков и результатов лабораторных исследований. Лабораторная диагностика ИЛТ включает выделение вируса

2.5. Дифференциация вакциннных штаммов ИЛТ от полевых * изолятов Защита цыплят от заражения вирусом ИЛТ осуществляется путем создания высокого уровня трансовариального иммунитета у цыплят раннего возраста иммунизацией ремонтного молодняка кур инактивированными вакцинами и применением живых вирусвакцин по мере снижения титров пассивных Ф антител (80). Применение живых вакцин обеспечивает достаточно надежную защиту от заболевания ИЛТ, однако существует ряд проблем: распространение вакцинного ви

В работе использовались следующие ферменты: Р1-1К-зависимая Д1НК0 полимераза (ревертаза) вируса миелобластоза птиц (Promega), Taq ДНКполитмераза (Promega), полинуклеотидкиназа (Promega).

В работе использовались две системы праймеров: для вируса ИБК для индикации генома вируса ИБК (на консервативную область UTR ^ (UTR1-4); для штаммовой дифференциации изолятов (на вариабельную область гена S1(S1-S4) (структура праймеров рассчитана Бочковым Ю.А. (4)); для вируса ИЛТ две системы праймеров на ген тимидинкиназы ((ТК1-2)структура приведена в статье Keller C.Letal.(117)); щ на область инвертированных повторов, ограничивающих ген ICP4 ((1СР1-5)расчитана нами). Расчет вирусспецифическ

Очистку и концентрирование материала вируса ИБК проводили методом жидкость центрифугирования в градиенте плотности хлористого цезия. В качестве вируссодержащего использовали аллантоисную куриных эмбрионов. Заражение КЭ проводили в аллантоисную полость, заражающая доза составляла - 2 Ig ЭИД50/МЛ. Схема очистки и концентрирования включала следующие этапы: 1. Аллантоисную жидкость, собранную через 72 часа после инфицирования 9-дневных КЭ различными штаммами и изолятами вируса 1/1БК, осветляли ц

3.2.2. Очистка и концентрирование вируса ИЛТ Очистку и концентрирование вируса ИЛТ проводили методом центрифугирования через слой сахарозы. В качестве вируссодержащего материала использовали 30% суспензию хориоаллантоисных оболочек • (ХАО) инфицированных КЭ. Схема очистки и концентрирования включала следующие этапы: 1. 30% суспензию ХАО готовили на дистиллированной воде, затем при комнатной ее дважды замораживали при -ZO'^C и оттаивали температуре. Осветляли суспензию центрифугированием при

В качестве 9-10 чувствительных дневные КЭ. тест-объектов Применяли для определения препаратов концентрации ежедневно десятикратных инфекционной использовали активности полученных вируссодержащих метод последовательных Инкубировали разведений. Для испытания каждой при 37°С в течение использовали не менее 4 эмбрионов, для контроля - не менее двух. эмбрионы 7 дней, овоскопируя. При титровании вакцинного штамма ЦНИИПП кл.НТ вируса ИЛТ эмбрионы инкубировали при 32° С. Гибель эмбрионов в теч

Контроль проводили в соответствии с ГОСТ 28085-89. Для этого производили высевы контрольной меланжированнои пробы на питательные среды МПА, МПБ, МППБ под вазелиновым маслом и Сабуро (среды производства ВНИИЗЖ). Использовали по 3 пробирки кахщой из указанных сред для посева и по одной пробирке оставляли в качестве контроля. 61 Объем посева в каждую пробирку составлял 0,1 см^. Засеянные контрольные пробирки со средами (кроме Сабуро) выдерживали при температуре 37°С в течение 14 суток. Контро

Для 4,5 исключения контаминации PPLO-бульона вирусологических (производства образцов микоплазмами проводили высевы по 0,5 мл в 3 пробирки, содержащие по см' стандартного ВНИИЗЖ) (20% лошадиной сыворотки, 1,47% PPLO основы, 2,5% аутолизата дрожжей, 0,5% глюкозы, 0,25% аргинина, 0,01% никотинамида динуклеотида и L-цистеина, 0,05% ацетата таллия, индикатор - феноловый красный), одну пробирку оставляли незасеянной в качестве контроля. Инкубацию проводили при температуре 37°С в течение 72 часов.

Для обнаружения антигена вирусов ИБК и ИЛТ в вируссодержащих суспензиях применяли блокирующий вариант ИФА. Реакцию проводили по разработанной ранее схеме, описанной в литературе (135). Реакцию проводили в два этапа:

2) твердая фаза. Вначале проводили сенсибилизацию полистиролового планшета антигеном в разведении 1:50 в течение 18 часов при 4°С. Затем щ блокировали 10% лошадиной сывороткой в течение 1 часа при 25°С с последующей 4-краТной отмывкой лунок планшета. Пр

Выделение суммарной РНК и ДНК проводили по модифицированному методу Грибанова и соавт. (11) с использованием стекловолокнистых фильтров GF/F (Whatman, Англия). Для исследования полевых проб на наличие генома вируса ИБК готовили 20% суспензию органов (легкие, трахеи, почки, кишечник) в STE буфере (0,01 М Трис-НС1; 0,1 М NaCI; 1 мМ EDTA. рН 7,2 7,4), лиофилизированные вакцинные препараты разводили бидистиллированной водой. Для выделения РНК к 50 мкл исследуемой пробы добавляли 0,5 мл 4 М раство

3.2.10. Прямое секвенирование амплифицированных фрагментов KflHK Очистку амплифицированных в ПЦР фрагментов кДНК проводили с использованием стекловолокнистых фильтров GF/F. Для этого раствор кДНК из-под масла отбирали, смешивали с 0,45 мкл 4 М ГГЦ, инкубировали в течение 15 минут при комнатной температуре, а затем пропускали через фильтр GF/F с помощью вакуумного насоса. Сушили фильтры центрифугированием в течение 1 мин. на центрифуге Eppendorf, затем элюировали фрагменты кДНК с фильтров дист

3.3). Для выявления вариабельных участков геномов вирусов ИБК и ИЛТ использовали программу "SQ-MAX", разработанную (ВНИИЗЖ)(16). Зинковским Ю.В. выборе оптимальных для праймеров участков генома использовали программы "ALIGN" (Scientlfic& Educational Software), "OLIGO" Для сравнения установленных нуклеотидных последовательностей и предсказания филогенетических отношений штаммов вирусов ИБК и ИЛТ использовали пакет прикладных программ «SeqPro

Гипериммуиные специфические сыворотки крови кроликов против вирусов ИБК и ИЛТ получали при введении животным препаратов вирусов с инфекционной активностью не менее 6,0 Ig ЭИДБО/МЛ, очищенных по приведенным выше схемам. Концентрация общего белка в препаратах составляла около 100 мкг/мл. Заражение проводили трижды с интервалом в 21 день

введением суспензии очищенного вирусного препарата в смеси 1:2 с синтетическим маслом-адъювантом ISA-70 в три точки - в обе лапы в/м и в холку п/к. При пе

Реакцию нейтрализации для вирусов ИБК и ИЛТ проводили на куриных эмбрионах, а также в органной культуре трахеи по стандартной методике (38). Перед постановкой РН предварительно определяли титр антител в полученных сыворотках при нейтрализации ими специфического действия гомологичных вирусов, а также определяли титры используемых вирусов. Для постановки РН на КЭ использовали следующие компоненты: типоспецифические сыворотки ко всем эталонным серотипам, нормальные сыворотки (не содержащие ант

Для постановки реакции использовали раствор 1% агарозы с 2% ПЭГ, содержащий 8% NaCi и 1% азида натрия в дистиллированной воде. 10 мл расплавленной агарозы помещали в чашки Петри диаметром 10 см. В застывшей агарозе вырезали лунки. Расстояние от центральной лунки до периферических составляло 0,5 см. Центральную лунку заполняли гипериммунной сывороткой, 6 окружающих лунок разведениями исследуемого вируса. Исследуемые препараты, содержащие вирус, концентрировали по разработанной нами методике,

проб Инфекционный бронхит кур наносит серьезный экономический ущерб птицеводческим хозяйствам. Основной причиной проявления заболевания у вакцинированных птиц считается появление изолятов вируса ИБК, антигенно отличающихся от используемых вакцинных штаммов (5,105). За период с 1999 -2004 гг. было проанализировано более 250 проб из 149 птицехозяйств. Причиной направления материалов на исследование в основном являлось наличие у птицы респираторных симптомов, снижение яйценоскости или проявление

3.2.12). Активность полученнных сывороток определяли

Инфекционный ларинготрахеит птиц (ИЛТ) широко распространенное острое респираторное заболевание среди птиц отряда куриных (кур, индеек, фазанов, цесарок). После острой фазы инфекции может наступить латентный материала ^ вируса в ДНК период клеток с сохранением ганглия генетического нерва. тройничного Вакцинопрофилактика ИЛТ в птицехозяйствах осуществляется путем применения живых вакцин, что вызывает персистенцию вируса в организме птицы в течение длительного времени и может при определенных

либо синтезировался фрагмент размером 518 п.н., если вирус относился к первой генетической группе, # Следующим этапом нашей работы было изучение биологических свойств вирусов ИЛТ. Исследовали способность к репродукции в КЭ, оценивали характер бляшек, образующихся на ХАО, изучали летальность для эмбрионов (в процентах), определяли инфекционный титр вакцинных штаммов и изолятов вируса ИЛТ титрованием на КЭ, а также оценивали степень нейтрализации гомологичными и гетерологичными сыворотками не

4.9. Идентификация выделенных вирусов средствами электронной микроскопии, в реакциях нейтрализации, РДП и ИФА Электронномикроскопическое исследование полученных нами вируссодержащих препаратов вируса ИЛТ проводили совместно с д.б.н. Пономаревым А.П., ведущим н. сотр. лаборатории болезней крупного рогатого скота. Для обнаружения вируса под электронным микроскопом осветленную фильтрованием вируссодержащую суспензию центрифугировали при 12000 g в течение 30 минут, осадок растворяли в воде в 1/3

Меры по предотвращению болезни сводятся к изолированию территориального очага болезни, дезинфекции помещений птиц, использованию специальной вакцины. Для профилактики инфекционного бронхита применяют живые и инактивированные вакцины. Живые вакцины обеспечивают более напряженный и более длительный иммунитет, чем инактивированные. Так, живая вакцина из голландского штамма Noblis H-52 предохраняет… Читать ещё >

Вирус инфекционного бронхита кур ( реферат , курсовая , диплом , контрольная )

ВИРУС ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР

1. Характеристика возбудителя

1.1. Наименование вируса (ист справка)

Болезнь, вызываемая типичным видом вируса рода Coronavirus, называется инфекционным бронхитом кур. Возбудителем является вирус Avian Infectious Bronchitis Coronavirus, который относится к семейству Коронавирусов (Coronaviridae), роду Коронавирус (Coronavirus) и типу Avian.

Сем. Коронавирусов включает в себя РНК-содержащие вирусы. Коронавирусы относятся к числу малоизученных вирусов. В самостоятельную группу они были выделены только в 1968 г. Типичный представитель этого рода — вирус инфекционного бронхита птиц.

Вирус инфекционного бронхита птиц, как и все коронавирусы, является полиморфным. Средний размер вирионов 65−135 нм. Вирионы круглой или эллиптической формы с булавовидными отростками до 20 нм, напоминающими вид солнечной короны. Нуклеокапсид 7−8 нм в диаметре. РНК вируса представлена двумя неравными фрагментами. Однако имеется мнение, что геном вируса представляет собой однонитевую нефрагментированную высокомолекулярную РНК. Плавучая плотность вириона колеблется от 1,16 до 1,27 г/см 3 . Оболочка вириона содержит липиды. Нейраминидаза не обнаружена.

1.4 . Антигенные свойства

Известно много штаммов вируса инфекционного бронхита кур (более 20 серотипов: Массачусетс, Коннектикут, Айова-97, Грей и др.), поэтому специфические антитела к вирусу образуются медленно.

1 . 5 . Патогенность, место репродукции , восприимчивые животные , лабораторные мо дели

В естественных условиях к инфекционному бронхиту восприимчивы куры всех возрастных групп.

Локализация и развитие вирионов происходит в цитоплазме, созревание и размножение — в цистернах (или везикулах) эндоплазматической сети/

Экспериментально инфекцию можно вызвать при интратрахеальном, интраназальном, подкожном, внутримышечном, интраперитонеальном и клоачном методах заражения. При экспериментальном заражении к вирусу особенно чувствительны цыплята. Кроме цыплят, можно заразить обезьян и пещерных летучих мышей. Индейки невосприимчивы, однако при интравенозном введении им вируса возникаем виремия.

1.6 . У стойчивость

Устойчивость вируса во внешней среде невысокая. Большинство штаммов вируса инактивируются при 56 0 С за 10 мин. Вирус неустойчив к физико-химическим факторам, разрушается после трехминутного воздействия на него обычных дезинфицирующих средств (1-% раствора фенола, 0,5-% раствора формальдегида, раствора перманганата калия 1:10 000, 70-%-ного этилового спирта).

2. Характеристика болезни вызываемой вирусом

2.1. Определение (синономы)

Инфекционный бронхит кур (Bronchitis infectiosa avium) — высококонтагиозная, остро протекающая болезнь, главным образом кур, вызываемая вирусом сем. Coronaviridae (Коронавирус) и сопровождающаяся поражением органов дыхания у цыплят и репродуктивных органов со снижением яйценоскости у кур.

2.2. Краткая ист справка

Вирус инфекционного бронхита кур впервые выделили Бич и Шалк в США в 1936 г.

2.3. Эпизоотологические данные

К вирусу восприимчивы куры всех возрастов, но чаще 20−30-дневные цыплята. Источник болезни — больные куры и цыплята, выделяющие вирус с секретом дыхательных органов, пометом. Установлено вирусоносительство кур. В естественных условиях вирус распространяется аэрогенным (воздушным) путем больной и переболевшей птицей [22, "https://referat.bookap.info"].

Распространению способствуют скученность, нарушения температурно-влажностного режима, слабая аэрация помещения для птиц.

2.5 . Течение и симптомы (кратко)

Инкубационный период — 2−6 суток. Болезнь протекает остро и поражает до 100% цыплят.

У заболевших цыплят наблюдаются вялость, угнетение, сонливость, одышка, чихание, конъюнктивит, опухание носовых пазух, истощение. Наблюдается высокая смертность. У молодых (старше 30 суток) и половозрелых птиц болезнь протекает легче, часто бессимптомно. Переболевшие птицы несут деформированные по форме яйца с шероховатой и с перетяжками скорлупой.

Болезнь продолжается 7−18 дней.

2.6. Патологоанатомические изменения (кратко )

При патологоанатомическом исследовании павших птиц наиболее часто изменения обнаруживают в органах дыхания (слизь и гиперемия слизистой оболочки носа, подглазничных синусов, трахеи, серозное или серозно-фибриозное воспаление бронхов и воздухоносных мешков).

В верхних дыхательных путях у цыплят наблюдяется прозрачная жидкость. Слизистая оболочка покрасневшая, отечная. Поражения носовой полости, подглазничных синусов более выражены у цыплят младших возрастов. Легкие наполнены кровью, слизистая оболочка бронхов утолщена, развивается пневмония. В некоторых случая у цыплят поражаются воздухоносные мешки. Стенки их местами утолщается, становится непрозрачной

У кур-несушек изменения обнаруживают только в яйцеводе и яичнике. Яйцевод уменьшается в длине, а яичник — в объеме. Фолликулы яичника плохо развиты. Просвет яйцевода может быть полностью или частично закрыт. В этом случае при нормально развитом яичнике яйца складываются в брюшную полость.

3. Лабораторная диагностика

3.1. Исследуемый материал

Для диагностики инфекционного бронхита из птицехозяйств, где имеется подозрение на заболевание, в лабораторию направляют 5−10 цыплят с признаками поражения респираторных органов. Одновременно посылают 15−25 проб сыворотки крови от кур, подозрительных по заболеванию. В лаборатории от больных цыплят после убоя берут кусочки трахеи, гортани, легких и используют для выделения вируса на эмбрионах кур и для постановки биопробы на здоровых цыплятах.

3.2. Методы лабораторной диагностики

Методы, применяемые в лабораторной диагностике инфекционного бронхита кур:

1. иммуноферментативнный анализ (ИФА) по выделению и идентификации вируса

3. реакция преципитации в агаровом геле (РПГ)

4. реакция нейтрализации (РН) на эмбрионах кур

5. реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)

3.3. Показатели, по которым диагноз считают положительным

Диагноз ставится на анализе эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных и результатов лабораторных исследований.

3.4. Дифференциальная диагностика

При дифференциальной диагностике необходимо исключить ньюкаслскую болезнь, инфекционные ларинготрахеит, бурсит (болезнь Гамборо), оспу, респираторный микоплазмоз, заразный насморк.

3.5. Иммунитет и биопрепараты

У переболевшей птицы образуется иммунитет. Куры передают потомству антитела, предохраняющие цыплят от заражения в первые 2−3 недели жизни.

Читайте также: