Лабораторная диагностика инфекций вызываемых neisseria gonorrhoeae

Гонорея - инфекционное заболевание, вызванное грамотрицательным диплококком (гонококком - Neisseria gonorrhoeae), является одним из наиболее широко распространенных инфекционных заболеваний. Neisseria gonorrhoeae, относится к роду Neisseria, котрый включает более 20 видов, включая N. canis, N. cinerea, N. denitrificans, N. elongata, N. flavescens, N. lactamica, N. macacae, N. meningitidis, N. mucosa, N. polysaccharea, N. sicca, N. subflava и др.

Факторы вирулентности Neisseria gonorrhoeae

Гонорея относится к классическим заболеваниям, передающимся половым путем (венерическим болезням). При этом заболевании возможно поражение мочеиспускательного канала, прямой кишки, глотки, шейки матки и глаз.
Наиболее часто заражение происходит после вагинального секса, но вероятность заражения при анальном и оральном сексе также существует. При прохождении через родовые пути возможно инфицирование новорожденного с развитием у него гонококкового конъюнктивита.
Бытовое заражение маловероятно. Это обусловлено тем, что гонококк быстро погибает вне организма человека. Кроме того, бытовой способ заражения не может обеспечить попадания нужного количества гонококков на слизистые. Поэтому причиной заражения не могут быть сидения унитазов, плавательные бассейны, бани, общая посуда и полотенца.
Вероятность заражения при незащищенном половом контакте (вагинальном, анальном) с больным гонореей составляет около 50%. При оральном сексе вероятность заражения ниже. Учитывая распространенность бессимптомного гонококкового фарингита среди проституток, незащищенный оральный секс с проституткой нельзя считать безопасным.

Течение заболевания

Инкубационный период при заражении гонореей составляет у мужчин обычно от 2 до 5 суток; у женщин – от 5 до 10 суток. В зависимости от длительности заболевания и выраженности симптомов различают свежую гонорею (если заражение произошло в пределах 2 месяцев) и хроническую гонорею (заражение произошло позднее 2 месяцев).
Симптомами гонореи у мужчин являются желтовато-белые выделения из мочеиспускательного канала и боль при мочеиспускании. У женщин - желтовато-белые выделения из влагалища, боль при мочеиспускании, межменструальные кровотечения, боль внизу живота. Инфицирование мужчин гонореей, как правило, приводит к появлению субъективных симптомов, вынуждающих их обращаться за медицинской помощью. У женщин гонококковая инфекция часто протекает малосимптомно и выявляется при различных профилактических обследованиях, в том числе в качестве половых партнеров, и при развитии осложнений. Данным обстоятельством можно объяснить меньшую обращаемость к врачу женщин, чем мужчин.
У мужчин наиболее частым осложнением является воспаление придатка яичка – эпидидимит.
У женщин наиболее частое осложнение гонореи – воспалительные заболевания матки и придатков, которые являются одной из главных причин женского бесплодия. При этом внутриматочная спираль и менструация увеличивают риск воспалительных заболеваний матки и придатков. При распространении гонококков на другие органы возникает диссеминированная гонококковая инфекция. При этом поражаются суставы, кожа, головной мозг, сердце и печень.
При попадании гонококков в глаза возникает гонококковый конъюнктивит.
Гонококковый фарингит (поражение глотки) часто протекает бессимптомно. Иногда он проявляется болью в горле.
Гонококковый проктит (поражение прямой кишки) обычно протекает бессимптомно. Возможна боль в прямой кишке, зуд и выделения из прямой кишки.

Различают следующие клинические формы гонококковой инфекции:

Инфекции нижних отделов мочеполового тракта:
цервицит;
уретрит (у мужчин и женщин);
абсцессы желез, прилегающих к влагалищу (преддверные и парауретральные железы).

Инфекции верхних отделов мочеполового тракта:

эндометрит;
эпидидимит;
воспалительные заболевания тазовых органов (воспаление фаллопиевых труб, яичника и тканей придатков).

Инфекции прочих органов и тканей:

проктит (ректальная гонорея);
фарингит;
бленнорея;
тазовый перитонит и перигепатит (синдром Фитц-Хью – Куртиса);
фарингеальная гонорея.

Диссеминированная гонококковая инфекция:

синдром дерматита-артрита-тендосиновиита (лихорадка, полиартрит, тендосиновиит и кожные поражения в виде геморрагических папул и пустул, вызванные иммунными комплексами или гонококками);
септический моноартикулярный артрит;
редко развивающиеся поражения (эндокардит с поражением клапанов и менингит).

Качественное определение ДНК возбудителя гонореи методом ПЦР.

Аналитические показатели: для индикации ДНК N. gonorrhoeae в клинических образцах и идентификации в присутствии других непатогенных нейсерий и других микроорганизмов. Определяемый фрагмент - участки последовательности гена крипти-ческой плазмиды N. gonorrhoeae с применением двух пар праймеров. Первая пара праймеров позволяет проводить обнаружение как N. gonorrhoeae, так и некоторых непатогенных нейсерий. Другая пара праймеров также позволяет проводить обнаружение как N. gonorrhoeae так и других непатогенных нейссерий, не выявляемых первой парой праймеров. Таким образом, анализ на обнаружение N.gonorrhoeae считается положительным только в том случае, когда с помощью каждой пары праймеров удаётся получить утвердительный результат. Специфичность обнаружения - 99%. Чувствительность анализа - 100 копий ДНК-матрицы криптической плазмиды N. gonorrhoeae в 5 мкл прошедшей обработку (выделение ДНК) пробы.

Показания к назначению анализа:

Хроническая инфекция.
Стертая клиническая картина.
Контроль эффективности терапии (не ранее чем через месяц после приема антибактериальных препаратов).
Профилактические скрининговые исследования (для исключения вероятности бессимптомного течения инфекции).

[youtube.player]

Выявление возбудителя гонореи (Neisseria gonorrhoeae), в ходе которого определяется генетический материал (ДНК) бактерий в образце.

Гонококк, ДНК возбудителя гонореи.

Neisseria gonorrhoeae, DNA.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Секрет простаты, первую порцию утренней мочи, соскоб из прямой кишки, соскоб урогенитальный, эякулят.

Общая информация об исследовании

Гонококк (Neisseria gonorrhoeae) – это грамотрицательная бактерия, относящаяся к диплококкам и вызывающая одно из самых распространенных венерических заболеваний – гонорею. Гонорея распространяется половым путем. Большинство пациентов (около 80 %), заразившихся гонореей, – сексуально активные люди в возрасте от 16 до 30 лет. Чаще всего это происходит в результате незащищенных сексуальных контактов с инфицированным партнером, однако иногда гонорея передается бытовым путем (через предметы личной гигиены: полотенца, губки и прочее), а также вертикальным путем – во время родов от инфицированной матери ребенку.

Клинические проявления заболевания у мужчин и женщин разнятся. У женщин чаще всего это бессимптомные формы инфекции, и выраженная симптоматика появляется лишь в период развития осложнений. В связи с этим нередко возбудитель у них обнаруживается случайно, например при профилактическом обследовании. Признаками инфекции являются:

У мужчин гонорея обычно проявляется спустя 3-4 дня после заражения выделениями из уретры, резкой болью при мочеиспускании, отечностью и гиперемией в области наружного отверстия уретры. При хронизации инфекции выделения могут быть очень скудными.

При длительном течении инфекции развиваются поражения верхних отделов мочевыделительной системы: мочевого пузыря, почек, а также репродуктивной системы (простаты, яичек – у мужчин и матки, маточных труб, яичников – у женщин). Заболевание также способно поражать суставы (особенно крупные – коленные, тазобедренные), глаза (конъюнктивиты). Хроническая гонорея может являться причиной мужского и женского бесплодия.

Основными факторами риска заражения являются: частая смена половых партнеров, секс с партнером, у которого в прошлом были заболевания, передающиеся половым путем, незащищенный вагинальный, анальный или оральный секс.

Существует несколько подходов к диагностике данного заболевания: микробиологический, серологический и молекулярно-биологический. Наиболее высокой чувствительностью и специфичностью обладает молекулярно-биологический метод (ПЦР-диагностика), основанный на выделении генетического материала возбудителя.

Гонорея в подавляющем большинстве случаев успешно лечится приемом курса антибиотиков.

Для чего используется исследование?

Для диагностики и мониторинга лечения гонококковой инфекции.
Для профилактического обследования определенных контингентов лиц (работников здравоохранения, питания и пр.).

Когда назначается исследование?

При симптомах гонореи. У мужчин это гнойные выделения из уретры, жжение, боль во время мочеиспускания, гиперемия и отечность в области наружного отверстия уретры, воспалительные изменения, жжение, боль в области ануса, у женщин – выделения из влагалища желтовато-белого цвета, жжение во время мочеиспускания, кровотечения в межменструальный период, кровотечения после вагинального полового акта.
В связи с тем что инфекция часто протекает бессимптомно, рекомендуется регулярно проводить обследование даже тем, у кого нет признаков гонореи: молодым сексуально-активным женщинам в возрасте до 25 лет – ежегодно, беременным или планирующим беременность женщинам; сексуально активным мужчинам – не реже одного раза в год.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Возбудителя в исследуемом материале не выявлено.

Если обнаружена инфекция, анализ на Neisseria gonorrhoeae перед назначением лечения необходимо провести еще и половому партнеру – для исключения реинфицирования после проведенной терапии. В случае выявления инфекции у полового партнера курс лечения рекомендуется пройти обоим партнерам.
Инфицирование Neisseria gonorrhoea повышает риск возникновения других ЗППП, включая ВИЧ.
Симптомы гонореи схожи с симптомами хламидиоза, еще одного распространенного ЗППП. Хламидиоз и гонорея требуют различного лечения. Рекомендуется одновременно с тестом на Neisseria gonorrhoeae провести и тест на Chlamydia trachomatis. Возможно также одновременное инфицирование гонококком и хламидией, тогда оба заболевания лечатся одновременно.

Кто назначает исследование?

Врач общей практики, терапевт, дерматовенеролог, гинеколог, инфекционист.

[youtube.player]

Гонококк (neisseria gonorrhoeae) является возбудителем тяжелого венерического заболевания, поражающего органы мочеполовой системы. Гонорея — антропонозная инфекция, вызывающая гнойное воспаление слизистой оболочки урогенитального тракта. В настоящее время гонококковая инфекция считается довольно распространенным и значимым заболеванием, передающимся половым путем.

Гонококковая инфекция широко распространена в Сибири и на Дальнем Востоке. Чаще всего болеют асоциальные лица — проститутки, гомосексуалисты и бисексуалы.

Neisseria gonorrhoeae

Гонококк Нейссера — грамотрицательный диплококк, внешне напоминающий два кофейных зерна, обращенных друг к другу вогнутой стороной. Они окружены микрокапсулой, жгутиков не имеют, спор не образуют. Гонококки были открыты ученым А. Нейссером в конце 19 века и получили одноименное название. Изучением морфологических, тинкториальных, культуральных, антигенных и биохимических свойств гонококков занимается частная микробиология, иммунология и эпидемиология.

Морфология. Neisseria gonorrhoeae является неподвижным аэробом. Его оболочка состоит из белков, которые отличаются по своему функциональному значению. Гонококковая клетка имеет пили — отростки в виде нитей, которыми она прикрепляется к эпителиоцитам мочеполового тракта.
Физиологические свойства. Гонококки очень устойчивы в организме носителя благодаря наличию особой защитной микрокапсулы, оберегающей от воздействия иммуноглобулинов. Бактерии не погибают при фагоцитозе нейтрофилами, сохраняют свою жизнеспособность, вирулентность и активно размножаются. Под воздействием антибактериальных препаратов и сульфаниламидов микробы трансформируются в L-формы. Во внешней среде микроорганизмы мало устойчивы. Они быстро гибнут под воздействием дезинфектантов и высоких температур.
Тинкториальные свойства. Бактерии полиморфны: их клетки могут иметь бобовидную или палочковидную форму. Гонококки в мазке располагаются попарно, тетрадами и скоплениями.
Бактерии прихотливы к питательным средам. Они растут на средах, содержащих человеческие белки — асцит-агаре, сывороточном агаре. Инкубируют посевы в атмосфере с повышенным содержанием углекислого газа и при температуре 37 градусов. Одни колонии гонококков мутные и бесцветные, другие круглые и прозрачные, напоминающие капли росы. На жидких средах отмечается диффузный рост с характерной пленкой на поверхности, постепенно оседающей на дно.
Биохимически гонококки малоактивны. Они расщепляют только глюкозу до кислоты.
Факторы патогенности. Бактерии вырабатывают бета-лактамазу, нейтрализующую действие антибактериальных препаратов. К факторам вирулентности относятся адгезины, ферменты агрессии, эндотоксин. Neisseria gonorrhoeae патогенны только для человека. Они вызывают развитие специфического гнойно-воспалительного заболевания.

Эпидемиология

Гонорея – венерическая болезнь, поражающая преимущественно сексуально активных лиц. В группу риска входят проститутки и их клиенты, бизнесмены, туристы, наркоманы. Основным источником и резервуаром инфекции являются больные мужчины с бессимптомными формами уретрита. Пути передачи инфекции: половой, бытовой, вертикальный. Распространяются гонококки во время вагинального, анального или орального контактов без презерватива; при использовании инфицированных секс-игрушек; внутриутробно или в родах. Наибольшую опасность представляют выделения больного гонореей – сперма, отделяемое влагалища, слизь кишечника и горла.

Входные ворота гонококковой инфекции — эпителиоциты влагалища, уретры, шейки матки, прямой кишки. Гонококки прикрепляются к эпителиальным клеткам с помощью пилей, вызывают их гибель и слущивание. В месте внедрения neisseria gonorrhoeae возникает патологический процесс. Беловато-желтое отделяемое при отсутствии лечения становится густым. Его скопления перекрывают выводные протоки желез, расположенных в паху. Постепенно экссудат замещается фиброзной тканью, что приводит к сужению уретры.

По мере деструкции эпителия гонококки начинают проникать в поверхностные лимфатические и кровеносные сосуды. Этот процесс сопровождается увеличением паховых лимфоузлов. Достигнув соединительной ткани, гонококки вызывают воспаление и развитие патологии — уретрита, цервицита, вульвовагинита. Затем бактерии проникают в кровь, внедряются в лейкоциты и размножаются в них. Возникает транзиторная бактериемия. В дальнейшем микробы диссеминируют с развитием септицемии, формированием абсцессов в подкожно-жировой клетчатке около ануса и простаты.

Симптоматика

Гонококковая инфекция у мужчин может протекать по типу уретрита, эпидидимита, простатита, везикулита.

гонорейные выделения из уретры у мужчин

Гонококковый уретрит начинается остро. Больные жалуются на зуд, жжение, дискомфорт при мочеиспускании. При надавливании на головку полового члена из уретры выделяются капельки гноя. Мочеиспускание становится учащенным и болезненным. В моче появляется кровь. Боль может иррадиировать в промежность, прямую кишку и усиливаться при эрекции, эякуляции, оргазме. Крайняя плоть воспаляется, паховые лимфоузлы увеличиваются. В редких случаях гонококковой уретрит протекает бессимптомно.

Гонококковый эпидидимит является осложнением гонореи у мужчин. Заболевание проявляется болью в мошонке и в паху. Придаток увеличивается в размерах, становится плотным, болезненным при пальпации. У больных появляются признаки интоксикации: лихорадка, озноб, слабость. Из уретры выделяется гной. Боль отдает в нижнюю часть живота и распространяется на область поясницы, крестца.

Гонококковый простатит обычно сочетается с везикулитом. Острое воспаление сопровождается интоксикационным, дизурическим и болевым синдромами.

У женщин гонококковая инфекция также имеет несколько морфологических форм: цирвицит, вульвит, эндометрит, сальпингоофорит, эндомиометрит, сальпингит. У больных мочеиспускание становится учащенным и болезненным, появляются необычные, часто гнойные выделения из влагалища, менструации становятся очень болезненными и обильными, возникают межменструальные кровотечения, боль внизу живота. Симптоматика инфекции у женщин выражена не так ярко, как у мужчин.

Анальные контакты без презерватива с больным мужчиной часто заканчиваются развитием гонококкового проктита. Это заболевание в наибольшей степени свойственно гомосексуалистам. В заднем проходе возникает зуд и жжение, появляются гнойные выделения из прямой кишки, акт дефекации становится болезненным, в кале обнаруживается кровь.

Орогенитальные контакты приводят к развитию гонококкового фарингита. Заболевание обычно протекает бессимптомно и выявляется случайно. В редких случаях у больных першит в горле, возникает сухость и болезненность, осиплость голоса. Зев при осмотре гиперемирован, слизистая глотки отечна.

Диагностика

С диагностической целью у больных берут мазок, проводят исследование и расшифровывают полученные данные. У женщин берут мазок со слизистой влагалища, шейки матки, а у мужчин — из уретры. После нанесения материала на предметное стекло его передают в лабораторию. Перед взятием мазка больным не следует мочиться в течение 2 часов, не принимать антибиотики и местные антисептики в течение месяца.

Бактериоскопическое исследование — приготовление, фиксация и окрашивание мазка метиленовым синим. При микроскопии гонококки имеют синий цвет, а остальные клетки — светло-голубой. В препаратах, окрашенных по Граму, обнаруживаются грамотрицательные диплококки, имеющие бобовидную форму.
Бактериологический анализ на гонококки осуществляется путем посева биоматериала на питательные среды. Посевы помещают в эксикатор на сутки. Для приготовления питательных сред используют питательный агар из мяса кролика или бычьего сердца. В мясо-пептонный или сывороточный агар добавляют “Полимиксин” или “Линкомицин” для подавления роста посторонней микрофлоры. Если рост гонококков отсутствует, чашки переставляют в термостат на срок до 8 суток. Ежедневно просматривают их. Neisseria gonorrhoeae растут в виде круглых, выпуклых колоний с ровными краями, блестящей поверхностью и слизистой консистенцией. Их колонии напоминают капельки росы.После получения чистой культуры исследование продолжают микроскопическим методом. С учетом морфологических, культуральных, ферментативных и прочих свойств выделенные микробы идентифицируют до вида, а затем определяют их чувствительность к антибиотикам.
Серодиагностика – реакция иммунофлюоресценции, латексаглютинации, коаглютинации, непрямой гемагглютинации, связывания комплимента. Иногда применяют иммуноферментный анализ.
ПЦР – диагностика направлена на выявление фрагментов ДНК neisseria gonorrhoeae. Метод является высокочувствительным и специфичным. Это качественный анализ, отражающий все инфекции, передаваемые половым путем, у конкретного обследуемого. В норме ИППП отсутствуют у здоровых лиц.
Аллергические пробы – внутрикожное введение 0,1 мл свежей гонококковой вакцины. Реакция считается положительной, если через 24 ч на коже появляется гиперемия и отек.

Лечение

Лечение гонококковой инфекции проводится в специализированных стационарах. Больным назначают антибиотики, сульфаниламидные препараты, полноценное питание, иммуностимуляторы, местное лечение.

Лечиться необходимо обоим половым партнерам. Во время терапии запрещено посещать бассейн, вести половую жизнь. Специалисты рекомендуют ежедневно мыть гениталии теплой водой с мылом, употреблять много жидкости, исключить из рациона острую пищу и алкоголь. После проведения терапевтических мероприятий следует пройти повторное исследование на гонорею. Контрольный мазок берут у больных спустя десять дней после завершения антибиотикотерапии.

Профилактика

Мероприятия, предупреждающие развитие гонореи:

Моногамные отношения,
Осторожность в выборе полового партнера,
Использование презервативов при полигамии,
Обработка антисептиками наружных половых органов и уретры после случайного полового контакта,
Применение препаратов “Фарматекс”, “Гексикон”,
Регулярное прохождение медицинского обследования у гинеколога или уролога,
Санпросветработа среди населения,
Обследование контактных лиц,
Диспансерный учет и наблюдение больных гонореей.

Гонококки — возбудители одного из самых распространенных венерических заболеваний. Гонорея часто имеет бессимптомное течение. Больные не подозревают о наличии у себя заболевания и продолжают жить половой жизнью, заражая партнеров. При отсутствии своевременного лечения болезнь прогрессирует и может вызвать серьезные нарушения, что приводит к тяжелым осложнениям со стороны репродуктивной сферы организма. Гонорея – бактериальная инфекция, являющаяся одной из наиболее часто встречающихся причин мужского и женского бесплодия.

Видео: врач о гонококковой инфекции

[youtube.player]

Возбудителем гонореи является Neisseria gonorrhoeaе, вызывающая острые и хронические воспалительные поражения мочеполовых органов, слизистой оболочки ротоглотки и конъюнктивы глаза.

Материалом для исследования является гнойное отделяемое мочеполовых органов, прямой кишки или конъюнктивы глаз (при бленорее), суставной и перитонеальный экссудат. Строго регламентированными методами лабораторной диагностики гонореи являются микроскопическое и бактериологическое (культуральное) исследование. Методы микробиологической диагностики гонореи отражены в схеме 18 .

Схема 18. Методы микробиологической диагностики гонореи

Микроскопический метод заключается в исследовании мазков из исследуемого материала, окрашенных по Граму и метиленовым синим. При окрашивании препаратов на гонорею используют модификацию метода Грама (краситель генциан-виолет заменяют кристал-виолетом, а вместо фуксина применяют нейтральный красный; промывку препарата осуществляют после каждого этапа окраски). В мазках при острой гонорее обнаруживают большое количество полиморфноядерных лейкоцитов, внутри и вне которых расположены бобовидные грамотрицательные диплококки; сопутствующая микрофлора либо минимальна, либо отсутствует вовсе (рис. 25). При хронической гонорее в ряде случаев типичный гонококк в мазках не выявляется, либо выглядит нетипично в виде мелких пылевидных или крупных шарообразных образований, нередко 2 клетки гонококка располагаются под углом друг к другу, при этом обнаруживается обильная сопутствующая микрофлора, лейкоциты, эпителиальные и другие клетки. В качестве экспресс-метода диагностики может использоваться ИФМ.

Рис. 25. Возбудитель гонореи(Neisseria gonorrhoeaе) в мазках из уретры больного острой гонореей. Внутри и внеклеточно расположенные грамотрцательные диплококки, обилие лейкоцитов.

Бактериологический метод.Гонококк отличается высокой чувствительностью к различным неблагоприятным факторам, поэтому культуральное исследование необходимо проводить сразу после отбора материала. Посев производят на специальные питательные среды. Основой этих сред является МПА из кроличьего мяса с добавлением дрожжевого аутолизата, гидролизата казеина или гемогидрализата и сыворотки крупного рогатого скота. Асцитическая жидкость и яичный желток в качестве добавок к среде для культивирования гонококка в настоящее время не применяются. Второй тип питательных сред является селективным и включает в свой состав, помимо вышеуказанных компонентов, антибиотики (полимиксин, линкомицин, а для диагностики фарингеальной гонореи – оротовую кислоту). Посевы выращивают при 37 0 С в течение 24-72 часов в атмосфере с повышенным содержанием СО₂. Колонии гонококков круглые, прозрачные, в виде капелек росы. Типичные для гонококков колонии пересевают в пробирки со средой для культивирования гонококка для получения чистых культур, которые идентифицируют по морфологическим и сахаролитическим свойствам на средах "пестрого" ряда (полужидкий агар с сывороткой и углеводом) или с помощью микротест-систем. В мазках из чистых культур гонококки располагаются не попарно, а отдельно. В биохимическом отношении гонококки малоактивны и ферментируют только глюкозу с образованием кислоты, вырабатывают оксидазу. Для выявления оксидазы применяют пробу с 1% водным раствором диметилпарафенилендиамина или диэтилпарафенилендиамина, которые окрашивают колонии гонококка сначала в розовый, затем в красный, а через несколько минут – в черный цвет. Исследуют также чувствительность гонококков к антибиотикам и его бета-лактамазную активность.

Серологический метод (определение антител к гонококку в крови пациентов с помощью РСК и ИФА) не является строго регламентированным, не представляет диагностической ценности, не является методом контроля эффективности проводимого лечения и в реальной практике в настоящее время не используется.

Генодиагностика. Направлена на обнаружение специфических фрагментов ДНК гонококка с помощью ПЦР и может быть использована в качестве дополнительного высокоинформативного метода диагностики гонореи.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

[youtube.player]

Гонококки (Neisseria gonorrhoeae) относятся к грамотрицательным кокам, встречающимся преимущественно парами. Бактерия вызывает триппер (гонорею). Это инфекционный процесс с преимущественным поражением слизистых оболочек мочеполового аппарата.

В редких случаях становится причиной бленнореи – гнойного патологического процесса соединительной оболочки глазного яблока. Диагностика гонококков требуется пациентам после незащищенной сексуальной близости с малознакомым партнером. Либо при подозрениях на инфицирование (иногда патологический возбудитель передается через полотенце или мочалку).

Лабораторная диагностика гонококков состоит из:

микроскопического метода (окраска двух мазков)
бактериологического (посев на питательные среды)
реакции Борде-Жангу (серология)
ПЦР

Свойства гонококка Neisseria gonorrhoeae

Гонококки – разновидность грамотрицательных диплококков, относятся к роду Neisseria. Для гонококков характерна высокая выживаемость в условиях организма. Вне приемлемой среды обитания для жизнедеятельности (во внешней среде) бактерии гибнут.

Также это происходит в результате высыхания субстрата при температуре от 40 градусов. Быстро погибают под воздействием антисептических и антибактериальных растворов, солей серебра и в мыльной воде.

Как выглядят гонококки?

Две половинки парной бактерии схожи на кофейные зерна, соприкасающиеся друг с другом вогнутой стороной. Под угрозой гибели (к примеру, на фоне антибиотикотерапии) трансформируются в L-форму.

Методы лабораторной диагностики

Инкубационный период длится от 3 до 7-ми дней с момента инфицирования. Дальнейшая клиника проявляется острыми симптомами. Это слизистые, с примесями гноя выделения из половых путей, чувство жжения, болезненность в уретре, в особенности при опорожнении мочевого пузыря).

Либо болезнь принимает бессимптомное течение. Анализ на гонококки Нейссера проводится различными способами.

Наиболее информативным считается ПЦР, так как позволяет обнаружить ДНК-возбудителя уже в первые несколько дней после проникновения бактериального агента в организм. У женщин в несколько раз чаще гонококковая инфекция имеет хроническую форму, при которой симптомы отсутствуют.

Возможность выявить гонококки в мазке ПЦР можно через 2-3 дня после сексуального контакта с зараженным партнером. Также применяются другие методы исследования, не менее информативные и позволяющие дополнительно определить чувствительность бактерий к антибиотику.

Микроскопический (бактериоскопический) метод

Анализ на гонококки проводится с использованием микроскопа и методики окраски двух мазков – по Грамму и с применением 1% жидкого раствора метиленового синего и 1% Эозина.

Для исследования наибольшую ценность представляют патологические жидкости. Забор которых производится из мочеиспускательного канала, влагалища, ануса, глотки или крови.

Метод Грамма

Обнаружить гонококки можно с помощью двойной окраски с применением двух красителей.

Первый – основной, второй считается дополнительным. Помимо красителей используется спирт и различные кислоты. Их действие заключается в обесцвечивании бактериального агента. Для выявления возбудителя гонореи применяются анилиновые красители (кристаллвиолет, метиловый фиолетовый) и дополнительные.

После обесцвечивания грамотрицательных диплококков используется фуксин. Он придает гонококкам красный окрас, определяющего идентифицирующего наличие гонококка.

Ход исследования:

Биоматериал наносят на предметное стекло тонким слоем
Следующий этап – сушка
Проводится окраска анилиновыми красителями, промывка водой и использование раствора Люголя
После высыхания материал фиксируется – необходимо для того, чтобы бактериальные клетки остались на поверхности стекла и не смылись. Для фиксации применяют один из двух методов – облучение бактериального агента высокими температурами либо применение специальных препаратов, приводящих к коагуляции цитоплазмы
Далее стекло промывают и дополнительно применяют контрастные краски, после чего бактерии выделяются красным либо розовым цветом, после чего их легко обнаружить

Применение метиленового синего в микроскопическом исследовании

Взятый биоматериал наносится на предметное стекло и фиксируется 96 % этанолом либо над спиртовой горелкой. После полного высыхания мазка выполняется его окрас 1% р-ром метиленовой синьки. Спустя 1 минуту предметное стекло промывают в проточной воде комнатной температуры, подсушивают и помещают под микроскоп для изучения.

Анализ мазка на гонококк позволяет отличить патологическую микрофлору, которая принимает выраженный синий окрас (может иметь различные оттенки). Под микроскопом отличаются бактерии, размещенные парно, их бобовидная форма.

Характерной особенностью остро протекающего инфекционного заболевания является месторасположение возбудителя. То есть внутри гранулоцитарных лейкоцитов, которые выявляются в больших количествах на эпителии и в слизистой.

Для хронического течения характерно отсутствие гонококков при данном исследовании. В единичных случаях бактериальный агент идентифицируется, но в нетипичном для него виде.

Гонококки представлены мелкими или крупными шарообразной формы формированиями. Также выявляется другая патологическая флора, клетки эпителия и белые кровяные клетки (лейкоциты).

Бактериологический способ

Бактериологический или культуральный метод – производится посев биоматериала больного на питательные среды с белками, имеющими нативную пространственную структуру, сыворотку.

Чаще применяются безасцитные питательные среды. Основой которых является мясопентонный агар (производится из мяса кроликов или бычьих сердец). По результатам посевов на гонококки определяется не только возбудитель инфекции, но и его чувствительность к антибиотикам.

Точность и достоверность исследования во многом зависит от правильности сбора биоматериала. Важно использовать стерильные емкости и соблюдать правила подготовки к сбору анализа.

Сдача крови производится медицинским работником в условиях лаборатории.

Мочу пациенты собирают самостоятельно, используя для этого стерильную емкость.

Доставка биоматериала должна быть быстрой.

Мазки из половых путей или уретры выполняются в лаборатории и сразу наносятся на питательные среды. Очень важно провести диагностику до начала приема антибактериальных средств. В противном случае результативность проведенного анализа дает недостоверные результаты.

Если обследование назначается для контроля проведенной терапии, следует выждать не менее 10-ти дней после приема последней дозы антибиотика. При острой необходимости анализ проводится раньше.

Для исследования, отделяемого из половых путей у женщин производится забор материала через две недели после окончания менструации. За несколько часов запрещается опорожнение мочевого пузыря.

Мужчинам перед сдачей выделяемой слизи на анализ следует удержаться от посещения туалета в течение 4-5 часов.

Через сколько времени будет готов результат?

Культуральный метод занимает от 4-х дней. Все зависит от исследуемого материала – исследование каловых масс занимает от 3-4 дней до недели.

Соскоб из уретры будет готов в течение 7-ми дней, кровь – через 10. Несмотря на длительность диагностики, предварительные результаты анализа озвучиваются на 3-ий день.

Что показывает бактериологическая диагностика?

Расшифровка исследования включает информацию о наличии бактериального агента, а также о его концентрации. Определение количества присутствующей патологической микрофлоры имеет большое значение.

Выделяют 4 степени роста гонококков:

1 степень (отсутствует рост бактерий на твердой среде, на жидкой – незначительный рост)
2 степень (рост до 10 колоний)
3-я (рост от 10 до 100 колоний)
4-я (больше 100 колоний)

Первые две степени не являются этиологическими факторами развития болезни.

В данном случае говорят о загрязненности исследуемого биоматериала. Последние две степени (3 и 4) говорят о том, что присутствующие микроорганизмы стали причиной развития инфекционных процессов.

Окончательная расшифровка (подсчет колоний КОЕ/мл) имеет следующий вид:

102 – 103/мл – 1 колония
104/мл – 0т 2 до 5 колоний
105/мл – от 6 до 15 колоний
106/мл и более – от 16 колоний

Диагностика имеет весомое значение для контроля проводимой антибиотикотерапии и позволяет оценить ее эффективность.

Серологический метод

Методика основывается на иммунологической реакции выявления антител (Реакция Борде-Жангу) в плазме крови больного с подозрением на заражение гонококковой инфекцией. Зачастую используется для диагностики бессимптомных форм патологии.

В современной исследовательской практике серологический метод мало информативен. Не применяется для контролирования состояния после медикаментозной терапии.

Диагностика методом ПЦР

Определение гонококков при анализе ПЦР наиболее точный метод. Позволяет уже в впервые дни после заражения идентифицировать бактериального возбудителя.

Для получения максимально верных результатов огромное значение имеет подготовка:

исключить сексуальный контакт за сутки
после приема антибиотиков должно пройти не менее 7-ми дней
перед взятием мазка запрещается посещение туалета за 2-3 часа
не проводится у женщин вовремя месячных

Для диагностики триппера производится забор материала из мочеиспускательного или цервикального канала, можно использовать мочу.

Если в исследуемом биоматериала обнаруживают ДНК гонококков – это говорит о наличии гонореи. Информативность диагностики составляет 98%. Анализ проводится в течение 1-3 дней, что зависит от оснащенности лаборатории и квалификации специалистов.

Основным преимуществом исследования на гонококки является возможность выявления бактериального возбудителя даже при условии его минимальной концентрации в мазке (моче). В лабораторных условиях производится размножение генов возбудителя.

Клонирование ДНК участка, даже если он единичный, позволяет выявить всю имеющуюся патологическую флору в материале. Так, в большинстве случаев исследование на гонококки определяет одновременно диплококков и трихомонад, которые также передаются при половом акте.

Анализ ПЦР высоко информативен на ранних стадиях. Поэтому диагностика рекомендуется пациентам при частой смене половых партнерах или случайной сексуальной связи, в первые дни после интимной связи. Проведенная терапия на начальных стадиях болезни предотвращает развитие неприятных симптомов и возможные осложнения.

Расшифровка анализа ПЦР на гонококки выглядит следующим образом:

высокий уровень лейкоцитов (свыше 10-ти говорит о присутствии воспалительного очага, свыше 20 – острое воспаление)
повышенная концентрация клеток эпителия (более 10 в поле зрения)
наличие грамотрицательных кокков, характерной формы

О чем говорит отсутствие гонококковой инфекции в исследуемом материале?

Если в ходе обследования с применением одного из методов в мазке не были обнаружены гонококки? Это говорит о том, что пациент полностью здоров. Либо о том, что в исследуемом материале, взятом из половых путей или уретры, бактерия отсутствует, но может быть обнаружена в других частях тела.

Для подтверждения диагностики выполняется забор материала из ротовой полости, прямой кишки или конъюнктивы глазного яблока. Если симптоматические проявления локализуются вне половой системы, а присутствие гонококков исключено, выполняются другие методы обследования для идентификации возбудителя патологии.

Диагностика после проведенного лечения

При обнаружении гонококковой инфекции лечащий врач-венеролог назначает комплексное лечение. Его основой является антибиотикотерапия.

Так как бактерии быстро адаптируются к пенициллинам, применяются препараты цефалоспоринового ряда. Чаще назначается Цефтриаксон для инъекций либо перорально Цефиксим.

Длительность лечения составляет 10-14 дней. Спустя 2-3 суток после приема последней дозы исследуют мазок из урогенитального тракта на выявление гонококков. Отрицательные результаты говорят о правильно проведенном лечении.

Диагностика после лечения также проводится второй раз через две недели. Отсутствие бактериального возбудителя означает полное выздоровление, больного снимают с учета у венеролога. Обследованию подлежат все половые партнеры.

Как подготовиться к диагностике гонококков?

Для предотвращения получения в ходе диагностики ложноположительных результатов перед взятием материала пациентам необходимо как следует подготовиться.

Соблюдение подготовительного этапа одинаково требуется представителям женского и мужского пола.

Подготовка

Этап подготовки включает:

Исключение сексуальной близости за трое суток до забора материала
Прекращение медикаментозной терапии, не только антибактериальных средств, но и других лекарственных групп, в частности химический средств контарацепции (спермициды). При невозможности прекращения приема некоторых препаратов пациент заранее сообщает об этом врачу
Исключается использование влагалищных суппозиториев, кремов и спреев
Исключается спринцевание за 3 дня до процедуры
Гигиена половых органов выполняется накануне вечером, в утро забора мазка и взятия крови подмывание запрещается
Опорожнение мочевого пузыря производится за 3 часа до исследования. При наличии незначительного количества бактериальных возбудителей существует вероятность вымывания некоторой части совместно с мочой и получение ложноотрицательных результатов
У женщин манипуляция проводится за 4-5 дней до начала предполагаемых месячных либо спустя несколько дней по завершению. В острых случаях проводится не зависимо от менструального кровотечения

Анализ мазка на выявление гонококка Нейссера выполняется перед началом медикаментозного лечения и несколько раз после окончания.

Методику исследования выбирает лечащий врач, который занимается расшифровкой результатов и разработкой схемы лечения. Самостоятельный прием антибактериальных средств на фоне возникшей клинической картины искажает результаты обследования.

При подозрении на гонорею обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

[youtube.player]

Читайте также: