Методы лабораторной диагностики риккетсиозов

ВОЗБУДИТЕЛЬ И ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА РИККЕТСИОЗОВ СОБАК

Риккетсиоз собак является зооантропонозным заболеванием, что обуславливает актуальность выбранной мной темы. Клещевой риккетсиоз описан в Восточной Сибири и на Дальнем Востоке (Приморский, Хабаровский, Красноярский края, Читинская и Иркутская области, Бурятия и Тува), в Западной Сибири (Кемеровская, Томская, Новосибирская, Омская, Тюменская, Курганская области, Алтайский край), Азербайджане, Казахстане, Туркмении, Таджикистане, Кыргызстане и Армении, в Монгольской Народной Республике и Пакистане. В Европейской части России (Тульская и Харьковская области, Башкирия) установлена циркуляция возбудителя в антропургических очагах, заболевания людей не описаны.

Цель исследования: изучить возбудителя и лабораторную диагностику риккетсиоза собак.

Характеристика заболевания. Риккетсиоз собак – острое лихорадочное заболевание собак и других видов животных семейства Canidae с генерализованным поражением лимфоидной системы, сопровождающаяся резким обезвоживанием, рвотой, депрессией, полным отсутствием аппетита, иногда сыпью в области живота, абортами. Летальность достигает 90%.

Клинические признаки: острый энтерит, диарея, рвота, отсутствие аппетита, увеличение лимфатических узлов, высока температура тела, иногда ринит, аборты, бесплодие, пневмония, сыпь на животе (рисунок 1) /1, 8/.

Рисунок 1 Сыпь на животе собак

Характеристика возбудителя.

Исследования этой группы микроорганизмов были начаты в 1906 Х. Риккетсом (рисунок 2) в Чикагском университете.

Морфология возбудителя.

Вид Neorickettsia helminthoeca

Строение риккетсий аналогично строению прочих бактерий. Риккетсии полиморфны. Все многообразие их форм может быть сведено к четырем основным морфологическим типам:

Тип а. Кокковидные риккетсии, это наиболее патогенный тип.

Тип в. Палочковидные, биполярные.

Тип с. Бациллярные, удлиненные, обычно изогнутой формы, выделяются в начальном периоде болезни.

Тип d. Нитевидные, полизернистые риккетсии имеют вид длинных причудливо прогнутых нитей.

Рисунок 2 Риккетс Ховард Тейлор

Риккетсии окрашиваются грамотрицательно (рисунок 3).

Рисунок 3 Окраска риккетсий по Граму

Лабораторная диагностика заболевания. Особенности взятия и пересылки материала. При риккетсиозах у животного берту 5 мл венозной крови и дефибринируют, также берут мочу, мокроту, смывы с объектов внешней среды. Собирают вшей и отправляют их в лабораторию в закрытой пробирке, заклеенной лейкопластырем /2/. Бактериологическая диагностика. Большое значение для морфологического их изучения имеют специальные методы окраски риккетсии, среди которых отличается своей информативностью метод Д.Л. Романовского с использованием красящего раствора Гимзы. Этот метод позволяет обнаружить все виды и формы вне- и внутриклеточных риккетсии, а также выявить их микроструктуру. Кроме метода Романовского, используют методы импрегнации серебром по М.А. Морозову, окраску по Маккиавелло в модификации П.Ф. Здродовского и др.

Результат окраски по Романовскому-Гимзе: бактерии окрашиваются в фиолетово-красный цвет, цитоплазма клеток — в голубой, ядра — в красный (рисунок 4).

Рисунок 4 Микроскопическая картина риккетсий, окрашенных по Романовскому-Гимзе

По Здродовскому риккетсии окрашиваются в рубиново-красный цвет, клеточные элементы – в голубой (протоплазмы) или синий (ядро) цвет. По Макиавелло риккетсии окрашиваются в красный цвет на синем фоне /4/.

Культуральные свойства. Патогенным риккетсиям свойственен внутриклеточный паразитизм. Риккетсии не культивируются на обычных питательных средах. Их репродуцируют на развивающихся куриных эмбрионах (рисунок 5), в культуре клеток или в организме лабораторных животных /3,6,7/.

Рисунок 5 Электронная фотография риккетсий, выращенных в желточном мешке куриного эмбриона

В настоящее время для накопления риккетсии широко используется метод культуры тканей. Оптимальная реакция среды рН 7,4-7,8. Обильное размножение риккетсии происходит в аэробных условиях при 35-37 °С /10/.

Биохимические и токсигенные свойства возбудителя. Риккетсии - аэробы, поглощают О² и выделяют СО², образуют гемолизины, активно окисляют глутаминовую кислоту, выделяя углекислый газ, но индифферентны к глюкозе, образуют эндотоксины /8,9/. Антигенное строение возбудителя. Бактерии имеют группоспецифический К-антиген, видоспецифический корпускулярный О-антиген /8/. Серологическая диагностика. В клинической практике применяют реакцию агглютинации, реакцию связывания комплемента, реакцию гемагглютинации. В лабораторной диагностике риккетсиозов важное место занимают люминесцентная микроскопия и люминисцентно-серологичский метод, а также электронная микроскопия /2,3/. Биопроба. Внутрибрюшинное или интратестикулярное (в толщу яичек) заражение исследуемым материалом морских свинок самцов, куриных эмбрионов в желточный мешок. Обнаружение риккетсий осуществляется в мазках-отпечатках внутренних органов, окрашенных по Романовскому-Гимзе или Здродовскому /1/.

Устойчивость возбудителя.Риккетсии являются малоустойчивыми к разным условиям окружающей среды: при нагревании до 50°С они погибают уже спустя 10 минут, а до 80°С — спустя 1 минуту.

При воздействии на риккетсий различных дезинфицирующих средств в обычных концентрациях их гибель наступает через 5 мин.

Риккетсии чувствительны к тетрациклину, дибиомицину, синтомицину, левомицетину и сульфаниламидам /3,6/.

Особенности специфической профилактики и иммунитет. Лечение антибиотиками тетрациклинового ряда.

Профилактика сводится к истреблению переносчиков инфекции - насекомых и грызунов, специфическая профилактика разработана только для нескольких видов риккетсий - живая сыпнотифозная вакцина.

У переболевших риккетсиозами животных развивается стойкий антитоксический, антибактериальный и перекрестный иммунитет к другим возбудителям риккетсиозов /5/.

Заключение

Риккетсиоз собак относится к природно-очаговым зоонозам. Основной источник инфекции – грызуны, собаки и другие животные, а переносчиками являются кровососущие членистоногие. Риккетсиозы – широко распространенные заболевания, регистрируемые на всех континентах. В развивающихся странах они составляют 15-25% всех лихорадочных заболеваний неясной этиологии. У собак при злокачественном течении риккетсиоза при отсутствии полноценно лечения летальность может достигать 90%. Для людей настоящее время риккетсиозы не представляют большой опасности, так как при своевременном лечении в подавляющем большинстве случаев наступает полное выздоровление.

Библиографический список

Аркадьева-Берлин, Н. Г. Лечение собак : справочник / Н. Г. Аркадьева-Берлин. – М.: Агропромиздат, 2005, 188 с.

Бессарабов, Б. Ф. Инфекционные болезни животных : учебник / Б. Ф. Бессарабов, Е. С. Воронин. – М.: КолосС, 2007. – 671 с.

Воробьев, А. А. Медицинская и санитарная микробиология : учеб. пособие / А. А. Воробьев, Ю. С. Кривошеин, В. П. Широкобоков. – М.: Медицина, 2003. – 487 с.

Данилов, А. Д. Болезни собак : справочник / А. Д. Данилов. – М.: Агропроимздат, 2000. – 368 с.

Еремеева, М. Е. Современные подходы к лабораторной диагностике риккетсиозов [Текст] / М. Е. Еремеева, С. Н. Шпынов, Н. К. Токаревич // Инфекция и иммунитет. – 2014. - №2. – С. 17.

Красинкова, Л. В. Микробиология : учеб. пособие / Л. В. Красинкова. – 3-е изд. – М.: Медицина, 2012. – 262 с.

Масимов, Н. А. Инфекционные болезни собак и кошек : учебник / Н. А. Масимов, С. С. Лебедько. – М.: Лань, 2009. – 128 с.

Рэмси, Я. К. Инфекционные болезни собак: практ. Руководство / Я. К. Рэмси, Д. Эдди, Б. Теннат. – М.: Аквариум-Принт, 2015. – 304 с.

Сутер, П. Болезни собак : учебник / П. Сутер, Б. Кон. – М.: Аквариум-Принт, 2008. – 816 с.

Шуляк, Б. Ф Руководство по бактериальным инфекциям собак. Грамотрицательные бактерии : учеб. пособие / Б. Ф. Шуляк. - 2-й том. – М.: ОЛИТА, 2003. – 608 с.

Цель занятия: изучение биологических свойств основных возбудителей риккетсиозов, методов их лабораторной диагностики, профилактики и лечения.

Перечень конкретных учебно-целевых вопросов

Риккетсии, эрлихии, коксиеллы, их таксономическое положение.

2.Бартонеллы.Таксономия. Биологические свойства. Роль в патологии человека. Микробиологическая диагностика. Этиотропная терапия.

3. Классификация риккетсий и риккетсиозов.

4. Морфология, биологические свойства и методы культивиро­вания риккетсий.

5. Возбудители эпидемического сыпного тифа и болезни Брилля–Цинс­сера, эндемического сыпного тифа, клещевого сыпного тифа (северо-азиатского риккетсиоза), лихорадки цуцугамуши. Возбудитель Ку-лихо­радки. Возбудители эрлихиозов. Биологические свойства. Экология. Хозяева и переносчики. Резистентность. Культивирование. Внутриклеточный паразитизм. Антигенная структура. Факторы патогенности. Патогенность для человека и животных. Иммунитет. Лабораторная диагностика. Этиотропная терапия. Специфическая профилактика.

Микробиологическая диагностика риккетсиозов

Риккетсиозы у человека и животных (12 нозологических форм) вызываются риккетсиями, подразделяющимися на 5 групп в зависи­мости от особенностей возбудителей и переносчиков:

I - группа сыпного тифа;

II - группа клещевых риккетсиозов;

III - группа лихорадки цуцугамуши;

IV - эрлихиозы человека и животных;

V - группа лихорадки Ку.

Риккетсии относятся к прокариотам, представляя собой мелкие полиморфные, грамотрицательные палочки, коккобактерии или нитевидные формы. Риккетсии являются облигатными паразитами, на искусственных питательных средах не растут и размножаются только в живой клетке. Риккетсии удается выделить путем заражения кровью больных риккетсиозами культур ткани (Vero, HeLa и др.), куриных эмбрионов, насекомых-переносчиков или экспериментальных животных. Наиболее часто в настоящее время используется метод культивирования риккетсий на культуре ткани. Выделение риккетсий проводится обычно с научными целями в специализированных лабораториях.

Культуральный метод. Исследуемый материал вносят в лунки пластиковых планшетов или пробирок с культурой ткани, инкубируют 48-72 часа при 34 0 С в атмосфере 5 % СО_2, после чего клетки промывают, фиксируют и окра­шивают люминесцирующими сыворотками (прямая РИФ) против риккетсий для обнаружения возбудителя в клетках. Идентификацию выделенных риккетсий проводят также методом ПЦР.

Серологический метод является основным методом при лабораторной диагностике риккетсиозов. Его применяют с целью обнаружения антител к риккетсиям в крови больных с подозрением на риккетсиоз, используя РСК, РИФ, РА, ИФА, иммуноблотинг и другие иммунологические реакции.

Генодиагностика. В последнее время для диагностики риккетсиозов при­меняют метод ПЦР для детекции специфических фрагментов ДНК непосредственно в клиническом материале (кожные биоптаты, лимфоциты перифе­рической крови, ликвор, клетки эндотелия и др.).

Микробиологическая диагностика эпидемического сыпного тифа.

Возбудителем эпидемического сып­ного тифа и болезни Брилля-Цинссера (рецидивного сыпного тифа) является риккетсия Провачека (Rickettsia prowazekii), вызывающая у человека острое заболевание с внезапным началом, тифозным статусом (высокая температура тела, бред) и характерной сосудистой розеолезно-петехиальной сыпью в результате развития васкулита.

Культуральный метод - выделение риккетсий Провачека из крови больных или от насекомых-переносчиков - вшей путем заражения куриного эмбриона в желточный мешок, вшей или культур клеток связан с высоким риском лабораторного заражения и проводится в редких случаях в специальных лабораториях. Риккетсии можно обнаружить в ядре или цитоплазме инфицированных клеток микроскопическим методом при окраске по методу Романовского—Гимзе в виде полиморфных мелких микроорганизмов, окрашенных в пурпурно-фиолетовый цвет, а при окраске по Здродовскому — в ярко-красный. Обнаружить риккетсий в материале можно также с помощью РИФ (прямой вариант) и ПЦР.

Серологический метод диагностики с целью определения уровня сыпнотифозных антител и динамики их нарастания в сыворотке крови больных с подозрением на сыпной тиф является ведущим в лабораторной диагностике этой инфекции. Применяется РСК (диагностический титр 1:20), РА с диагностикумами из риккетсий Провачека (диагностический титр 1:160) , РНГА, непрямая РИФ. Диагностическое значение имеет 4-крат­ное нарастание титра антител в парных сыворотках. РСК позволяет диагностировать как активную форму болезни, так и перенесенную в прошлом (рет­роспективный диагноз), диффе­ренцировать эпидемический и эндемический (кры­синый) сыпной тиф, а также первичный сыпной тиф от бо­лезни Брилля - Цинссера (рецидива).

План

1. Общая характеристика методы культивированиия риккетсий.

2. Классификация риккетсиозов.

3. Эпидемический и эндемический сыпной тиф.

4. Особенности возбудителей, механизм заражения.

РИККЕТСИИ

Общая характеристика и классификация.

Риккетсии (Rickettsia) включены в порядок Rikettsiales,семейство Rickettsiaceae, род Rickettsia.

Общая характеристика.

Все риккетсии являются облигатными внутриклеточными паразитами, т.е. живут и размножаются (как и вирусы), только в клетках (цитоплазме и ядре) тканей животных, человека и переносчиков. И не растут на искусственных питательных средах.

Это полиморфные микроорганизмы, имеющие следующие формы:

1. кокковидные – мелкие овоидные, d = 0,5 мкм, часто в виде диплококков;

2. палочковидные – изогнутые короткие, тонкие палочки 1-1,5 мкм с зернами на концах, или длинные 3-4 мкм;

3. нитевидные (мицелярные) – 10-40 мкм, изогнутые, иногда многозернистые нити.

Не образуют спор, капсул, неподвижны!

Хорошо окрашиваются по Романовскому-Гимзе, Цилю-Нильсену, грамотрицательны (грам -).

Электронной микроскопией и цитохимическими исследованиями у риккетсий установлено наличие внутренней и наружной оболочки, выполняющей функции стенки состоящей из 3-ех слоев. В цитоплазме риккетсий обнаружены, гранулы типа рибосом (20-70) и вакуолеобразные структуры (6-8 нм в диаметре).

Риккетсии размножаются путем деления кокковидных и палочковидных форм с образованием гомогенных популяций соответствующего типа, а также в результате дробления нитевидных форм с последующим развитием кокковидных и палочковидных образований.

Большая часть риккетсий относится к безвредным микроорганизмам. Около 50 различных видов риккетсий найдено в кишечнике и слюнных железах тлей, клопов, клещей.

Патогенные риккетсии поражают различные виды животных и человека; заболевания, вызываемые риккетсиями, носят название риккетсиозов.

Классификация риккетсий и риккетсиозов:

Группа	Возбудители	Особенности паразитирования	Переносчики возбудителей	Источник инфекции	Наименование заболевания
Сыпные тифы	R.prowazekii R.typhi	Размножаются в цитоплазме и эн-дотелии сосудов Там же	Платяная и головная вши Крысиные блохи и вши	Больной человек Крысы, мыши	Эпидемический сыпной тиф Эндемический сыпной тиф
Клещевые пятнистые лихорадки	R.conorii R.sibirica R.akari	Размножаются в цитоплазме и ядре Там же Там же	Собачий клещ Иксодовые клещи Гамазовые клещи	Южный собачий клещ Грызуны (мыши, суслики) Домовая мышь, черная и серая крысы	Марсельская лихорадка Североазиатский (сибирский) риккетсиоз Везикулезный (осповидный) риккетсиоз
Риккетсиозы цуцуга-муши	R.tsutsuga-mushi	Размножаются в цитоплазме	Краснотел-ковые клещи	Грызуны, сум-чатые, насекомые	Лихорадка цуцу-гамуши
Пароксизма-мальный риккетсиоз	Rochalimae quintana	Внеклеточный паразитизм	Платяная вошь	Больной человек и носитель	Волынская (пяти-дневная) лихорад-ка
Ку-риккет-сиоз	Coxiella burnetii	Размножаются в вакуолях и цито-плазме макрофагов	Иксодовые и гамазовые клещи	Многие виды диких и домаш-них животных	Ку-лихорадка (пневмориккет-сиоз)

Возбудитель сыпного тифа

В 1909-1910 гг. Г. Риккетс и Р. Уайллер нашли в крови больных мексиканским сыпным тифом и в зараженных вшах неподвижные мелкие биполярные микроорганизмы. В 1913 г. Чешский ученый С. Провачек обнаружил в плазме и лейкоцитах людей, больных сыпным тифом, овальные и продолговатые тельца, окрашенные по Романовскому-Гимзе. В 1916 г. Г. Х. Роша-Лима на основании своих многолетних исследований пришел к выводу, что сыпной тиф вызывают мелкие полиморфные микроорганизмы, обнаруживающиеся в крови больных и в кишечнике зараженных вшей. В честь первооткрывателей он их назвал риккетсиями Провачека.

Риккетсии Провачека – гантелевидные микроорганизмы, описание - смотри общую характеристику. Средние размеры их 0,3-0,6 мкм. Они хорошо окрашиваются феноловым фуксином в красный цвет. В электронном микроскопе у них выявлена микрокапсула (толщиной 10-12нм).

Хорошо размножаются при t 25°С в желточном мешке куриного эмбриона.

Используют и другие методы:

1. В куриных эмбрионах по Коксу: материал содержащий риккетсии, вводят в полость желточного мешка → яйца в термостат при 36-37°С на 6-7 дней;

2. Интраназально заражают белых мышей, в легких которых накапливаются риккетсии;

3. По методу Вейгля и Мосинга – платяных вшей заражают взвесью риккетсий путем введения в кишку через анальное отверстие с помощью специальных капилляров.

4. А. В. Пшеничков и Б. И. Райхер – метод культивирования риккетсий на личинках вшей, которых кормят через мембрану кожи трупа дефибринированной кровью.

5. И можно, как вирусы, путем заражения тканевых культур (об этом методе более подробно мы поговорим на следующей лекции).

Методы культивирования риккетсий используют при изготовлении сыпнотифозной вакцины и для получения антигенов для серодиагностики риккетсиозов.

Токсинообразование:термолабильный токсин (эндотоксин), который разрушается при 66°С.

I Аг:термолабильный, спефический для риккетсий Провачека, корпускулярный, поверхностный растворимый, не обладает видовой специфичностью.

II Аг:термостабильный, общий для риккетсий Провачека и крысиного сыпного тифа. Общий с риккетсиями полисахаридный гаптен имеет протей – ( Proteus OXI9, OX2, OXK, OXL). Этот Аг липидополисахаридопротеиновый комплекс.

В высушенных и неповрежденных вшах риккетсии сохраняются до 30 суток, в сухих фекалиях вшей – до 6 суток. От t 50°C гибнут через 15' и при 100°C – через ½ минуты. Губительное действие на них оказывают все применяемые дезинфицирующие средства.

Патогенность для животных:

Восприимчивы обезьяны, морские свинки, белые мыши.

Сыпной тиф – антропонозное заболевание, источником его всегда является больной человек. Носительства нет. Восприимчивость к заболеванию всеобщая. Дети младшего возраста переносят тиф легче, чем пожилые люди. Характерна сезонность заболевания: февраль-май. Развитию болезни способствуют скученность, антисанитарные условия.

В 1876 г. О. О. Мочутковский опытами на себе впервые доказал заразность крови людей, больных сыпным тифом. Он высказал предположение, что сыпной тиф передают кровососущие насекомые. В 1909 г. Ш. Николь и соавторами подтвердили это положение на обезьянах и установили передачу сыпного тифа через платяную вошь(Pediculus humanus).

Источник болезни – больной человек, переносчик – платяная вошь. Насосавшись крови сыпнотифозного больного, платяная вошь на 3-10е, чаще 4-5е сутки становится заразной. Риккетсии развиваются при 30°C в кишечнике вшей (в клетках эпителия слизистой оболочки кишечника). В результате накопления риккетсий клетки разрушаются, и возбудители вместе с испражнениями попадают на кожу, платье и т.д. Заражение сыпным тифом происходит не через укус вшей, а при втирании риккетсий, которые выделяются при дефекации на кожу и слизистые оболочки.

Риккетсии Провачека вызывают у людей сыпной тиф, который протекает в виде лихорадочного состояния с розеолезно-петехиальной сыпью. Сыпной тиф относится к кровяным инфекциям. Возбудитель в период лихорадки находится в лейкоцитах, эндотелии сосудов кожи, мозга и других органов. Множественный тромбоз артериальной системы приводит к нарушению питания ткани, гибели клеток, особенно ЦНС. На 1 см 2 поверхности мозга насчитывается несколько тысяч гранулем.

Патологический процесс обусловлен паразитированием риккетсий Провачека в эндотелии мелких кровеносных сосудов и образованием в них специфических гранулем.

Инкубационный период 12-14 дней, с колебаниями от 1 до 3 недель.

Осложнения при сыпном тифе встречаются редко. Иногда возможны гипостатическая пневмония, пролежни, отиты.

Иммунитет: постинфекционный – прочный!

В последние годы количество повторных случаев возросло. Повторные случаи сыпного тифа представляют собой эндогенные рецидивы первичного заболевания. Повторные случаи сыпного тифа называют болезнью Брилля-Цинссера. Рецидивы наступают после различных неблагоприятных воздействий (заболевания, хирургическое вмешательство, переохлаждение, психические и физические травмы, переутомление, голод), на организм, который в течение длительного времени являлся носителем риккетсий в покоящихся формах в состоянии персистирования.

Болезнь Брилля-Цинссера характеризуется более легким клиническим течением с сохранением наиболее типичных признаков сыпного тифа при отсутствии вшивости.

Материалом для выделения возбудителя при всех видах риккетсиозов служит кровь, взятая у больного из вены в возможно раннем периоде лихорадки.

Обычно используют цитратную кровь или взвесь из растертого сгустка свернувшейся крови. Кроме того, материалом могут служить переносчики, органы зараженных животных.

1. Серологический – основной метод;

Алгоритм

микробиологического исследования при риккетсиозных инфекциях

§ Реакция агглютинации риккетсий (РАР);

§ РН риккетсий сывороткой больного с последующей биопробой.

Биопроба: заражение самцов морских свинок в/брюшинно или интрацеребрально.

а) Введение материала в желточный мешок куриного эмбриона;

б) Заражение тканевых культур.

1. Вскрытие животных → препараты из органов, окраска по Здрадовскому, ответ.

2. Препараты из зараженных эмбрионов и тканевых культур, окраска по Здрадовскому и иммунофлюоресцентный метод → ответ.

РАР– в пробирках по 0,5 мл объем: 0,25 мл разведения сыворотки + 0,25 мл соответствующих антигенов, → +37°C 18 часов → учет результата, не встряхивая пробирки. Положительной считается реакция не менее, чем на ++ (незначительное просветление, зернистый осадок) в разведениях 1:40 – 1:80.

РСК– по общепринятой методике; реакция считается положительной при задержке гемолиза не менее чем ++. Условно-диагностический титр 1:160 и выше.

РПГА– с разведениями сывороток от 1:250 до 1:64000 по обычной схеме. Условно-диагностический титр 1:250.

Серологическое дифференцирование первичного (эпидемического) и повторного сыпного тифа (болезнь Брилля):

При 1-ом и повторном сыпном тифе формируются качественно различные иммуноглобулины (Ig): при первичном – Ig М (19 S), при повторном – Ig G (7 S). Дифференцирование Ig М и Ig G антител основано на их различной чувствительности к действию редуцирующих веществ, содержащих свободные сульфгидридные группы (2-меркаптоэтанол, цистеин и др.) Эти вещества вызывают разрыв дисульфидных связей в молекулах

Ig М и их распад на субъединицы, лишенные активности антител. Ig G при этом не изменяются. Параллельно ставят РСК с испытуемой исходной сывороткой и обработанной 2-меркаптоэтанолом или цистеином (см. табл. № 95). В случае первичного сыпного тифа наблюдается снижение титра антител в обработанной сыворотке не менее, чем в 4 раза по сравнению с необработанной исходной сывороткой. При повторном сыпном тифе титр антител в обеих сыворотках должен быть одинаковым (допускается снижение титра не более чем в 2 раза).

Антибиотики. Чаще тетрациклины, левомицетин, рифампицин.

В последние годы летальность совсем не регистрировалась.

· Ранняя диагностика, изоляция и госпитализация больных.

· Санитарная обработка в очаге (дезинсекция).

· Учет и наблюдение за контактировавшими с больными.

· Осмотры на педикулез, санпросвет работа среди населения.

· Вакцинация сухой живой сыпнотифозной вакциной, изготовленной из авирулентного штамма Е. В связи со значительным улучшением санитарного состояния населения иммунизации подлежат только отдельные контингенты.

Благодаря значительному улучшению условий жизни людей и проведению профилактических мероприятий эпидемический сыпной тиф на большей части территории Беларуси ликвидирован. Сухая живая комбинированная сыпнотифозная вакцина Е(ЖКСВ – Е) – смесь живой яичной культуры риккетсий Провачека вакцинного штамм Е, выращенной в курином эмбрионе, с растворимым антигеном вирулентного штамма риккетсий Провачека. Применяется для активной иммунизации против сыпного тифа. Есть химическая сыпнотифозная вакцина.

Риккетсии Музера.

Возбудитель открыт в 1928 г. Х. Музером. По своим биологическим свойствам во многом сходен с риккетсиями Провачека.

Морфология.

Менее полиморфны, чем R.prowazekii. Это - мелкие палочки и кокковидные клетки длиной 0,7-1,3 мкм и шириной 0,35-0,6 мкм, редко образуют нитевидные клетки. Грам -, по Здрадовскому окрашиваются в красный цвет.

Культуральные свойства.

Хорошо размножаются в курином эмбрионе и некоторых культурах клеток, образуя, как и риккетсии Провачека бляшки, t° _optim 35°C.

1) Термостабильный Аг, общий с риккетсиями Провачека;

2) Термолабильный Аг, видоспецифический, он позволяет дифференцировать от других видов риккетсий.

Этиопатогенез.

Эндемический, или крысиный, сыпной тиф – остролихорадочная зоонозная инфекция, встречающаяся среди крыс, серых и черных мышей, которые и являются источником инфекции. Передается их паразитами: крысиными блохами, способными нападать на человека, крысиными вшами, не нападающими на людей, и гамазовыми клещами. Эктопаразиты заражаются при кровососании, риккетсии размножаются у них в кишечнике и выделяются с фекалиями. Циркуляция риккетсий происходит по цепи крыса или мышь → крысиная блоха или вошь → крыса или мышь.

Ø путем втирания в кожу при расчесах фекалий блох;

Ø аэрогенно при попадании фекалий на слизистые оболочки верхних

Ø алиментарным путем при загрязнении пищевых продуктов мочой грызунов.

Эндемический сыпной тиф распространяется повсеместно, особенно в зонах большого количества крыс (морские порты), а так же в тех местах, где имеются случаи эпидемического сыпного тифа. Патогенез сходен с эпидемическим сыпным тифом.

Постинфекционный иммунитет стойкий и продолжительный (пожизненный), при этом создается невосприимчивость и к эпидемическому сыпному тифу.

1) Серодиагностика – РАР и РСК со специфическими антигенами, позволяет ставить диагноз крысиного сыпного тифа и дифференцировать его от эпидемического сыпного тифа;

2) Биопроба – заражение самцов морских свинок (у них развивается лихорадка и периорхит при эндемическом, и только лихорадка при эпидемическом сыпном тифе).

Специфическая терапия – антибиотики тетрациклинового ряда, средств специфической профилактики нет.

Коксиеллы Бернета.

Coxiella burnetii – относится к роду Coxiella, семейству Rickettsiaceae. Являются возбудителем Ку-лихорадки (от англ. query – неясный, неопределенный). Болезнь впервые была описана в 19 веке в Австралии, а затем в других странах. Возбудителя впервые идентифицировали как риккетсии Ф. Бернет и М. Фриман.

Грам - , неподвижные, мелкие кокковидные или палочковидные образования размером 0,25 х 1,5 мкм. По Романовскому-Гимзе → в иссиня-пурпурный цвет, по Здрадовскому → в красный.

Облигатные внутриклеточные паразиты с автономным, в отличие от вирусов обменом веществ. Культивируются в желточных мешках куриного эмбриона или в культуре клеток (куриных и мышиных фибробластов), размножаясь почти исключительно в вакуолях.

Довольно устойчивы к воздействию физических и химических факторов. До 90°C выдерживают больше часа. Длительно сохраняются в окружающей среде.

Два Аг – Ι фазы и ΙΙ фазы. Аг Ι фазы является поверхностным полисахаридным, Аг ΙΙ фазы глубоко в клетке, его химическая природа неизвестна. Способность к образованию токсина у риккетсий Бернета пока не доказана.

Ку-лихорадка встречается повсеместно, не зарегистрирована только в Финляндии, Швеции, Норвегии, Дании, некоторых странах Западной Африки и Южной Америки). Ку-лихорадка – зоонозная инфекционная болезнь, характеризующаяся полиморфной клинической картиной с преимущественным поражением легких. Паразитирование C. burnetii выявлено у многих видов млекопитающих, птиц, членистоногих. Установлено носительство их у 92 видов диких млекопитающих, 72 видов птиц, 73 видов клещей. Особенно опасны домашние животные (лошади, рогатый скот, собаки) и грызуны. В природных очагах передача возбудителя происходит трансмиссивным путем (клещи).В сельскохозяйственных очагах источником возбудителя является крупный и мелкий рогатый скот, лошади и верблюды. Передача возбудителей происходит воздушно-пылевым (при обработке шерсти, кожи зараженных животных) и пищевым(при употреблении молока и молочных продуктов), контактным и трансмиссивным путями.

Заражение здорового человека от больного не наблюдается.! Возбудитель → в кровь (виремия) → поражает многие органы и ткани, чаще легкие. Протекает как лихорадочное заболевание, с развитием аллергии.

Постинфекционный иммунитет – прочный и длительный, повторно редко.

Материал:кровь, мокрота, моча.

Морских свинок заражают материалом от больного → из селезенки морских свинок возбудителей выделяют путем культивирования на курином эмбрионе. Для серодиагностики применяют РАР, РСК, разработан ИФА.

Для диагноза может быть использована кожно-аллергическая проба с Аг.

Специфическая терапия: антибиотики тетрациклинового ряда и левомицетин.

Специфическая профилактика: П. Ф. Здродовский и В. А. Гениг разработали эффективную живую вакцину из штамма М-44 для профилактики Ку-лихорадки.