Пцр для диагностики грибковых инфекций
Метод ПЦР на грибок ногтей дает максимально точный и быстрый результат определения возбудителя онихомикоза.
Подробно о методе ПЦР
В основе цепной реакции – работа с отдельными участками ДНК, которые многократно увеличиваются. Некоторого количества участков ДНК будет достаточно, чтобы выявить возбудителя. Проводится копия только того праймера ДНК, который обнаружили в исследуемом образце. Праймер ДНК должен соответствовать определенным параметрам. Этот процесс профессионалы называют амплификацией.
ПЦР-методом определяют возбудителя на стадии его развития.
Диагностика полимеразной цепной реакции дает возможность выявлять возбудителей заболевания, когда другие методы показывают отрицательный результат.
Максимальный эффект метода ПЦР достигается при выявлении скрытых форм грибков.
Что происходит в лаборатории
Процесс цепной реакции проходит в амплификаторе. В этом приборе пробирки с отобранным материалом периодически нагреваются и охлаждаются. Чтобы смесь в процессе таких манипуляций не испарялась, в нее добавляют вазелиновое масло. Для улучшения реакции также добавляют специальные ферменты. Каждый цикл проходит через 3 этапа. Количество циклов не ограничивается цифрой 35, их может быть меньше или больше. Все зависит от качества полученных для анализа образцов и ожидаемого результата.
Нагрев до 98°C проводят для того, чтобы две ленты ДНК стали не связанными. Этот процесс называется денатурацией. Происходит разрушение водородных связей. Затем температуру снижают, чтобы отдельные фрагменты могли объединиться с матрицей. Такие действия называют отжигом. И последняя стадия – элонгация. Используя праймер, реплицируется матричная цепь.
Особенности методики ПЦР
- Метод дает возможность выявить возбудителя заболевания по прямому указанию на него.
- При проведении анализа ПЦР работают с любым биологическим материалом.
- Данная методика позволяет выделить фрагмент ДНК конкретного возбудителя.
- При таком методе ответ на анализы получают в кратчайшее время. Результат можно получить через 5 часов.
- Высокая чувствительность метода позволяет выявить не только возбудителя на пике заболевания, но и возбудителей хронических заболеваний. Даже можно выявить единичный экземпляр грибка.
Очень редко, но в отдельных случаях, пользуясь таким методом, можно получить ложноположительный результат, если в отобранном материале на анализ попала мертвая часть ДНК возбудителя. Анализы покажут наличие такого возбудителя. Поэтому важно задолго до начала проведения ПЦР анализов отказаться от применения лекарственных препаратов.
Нужен ли ПЦР тест при грибке ногтей
- Такой анализ со 100% точностью определит вид поселившегося в организме грибка.
- Знание конкретного возбудителя позволит лечащему врачу назначить наиболее эффективный метод лечения.
- Антигрибковый препарат будет назначен под конкретного возбудителя.
- Процесс выздоровления наступит в кратчайшие сроки.
Как подготовиться к ПЦР исследованию
Для проведения ПЦР анализов на наличие грибка можно воспользоваться фрагментом с пораженного участка или сдать кровь на анализ.
Перед отбором биологического материала на анализ ПЦР надо знать, что существуют общие правила подготовки к анализам и узконаправленные.
- До начала сдачи анализов не следует употреблять пищу в течение 12 часов.
- Если нет четких указаний врача, то лекарственные препараты употреблять не следует, лечебные процедуры следует приостановить. Отбор проб на анализы лучше проводить утром, после отбора можно принимать лекарства.
- Не следует принимать алкоголь в течение суток до сдачи анализов.
- Не следует курить в течение 2 часов до отбора материалов.
- Исключите эмоциональные нагрузки и стрессы накануне проведения отбора.
- Приходите на отбор анализов заблаговременно. Желательно за полчаса успокоиться и отдышаться.
Не пользуйтесь в течение двух недель противогрибковыми препаратами и мазями.
- По возможности несколько дней не обрезайте ногти.
- За несколько дней до сдачи биоматериала удалите декоративную косметику с ногтевой пластины, и в течение этих дней не используйте в местах заражения другую любую декоративную косметику.
- Не воздействуйте в течение трех дней на пораженные участки агрессивными средами, к которым можно отнести декоративные химические препараты, например: жидкость для снятия лака, лосьоны для ног и другие препараты.
- Откажитесь на несколько дней, во время проведения гигиенических процедур, от применения дезинфицирующих средств и мыла. Обтирайте пораженные участки влажной теплой салфеткой.
- Не проводите паровые бани, пораженных грибком участков.
Не принимайте антибиотики и другие лекарственные средства в течение двух недель.
Правила отбора для ПЦР диагностики грибка
Успех проведения анализов на 70% зависит от этапа пробоподготовки.
При проведении соскоба инструменты и пробирки должны быть стерильными. Врачу необходимо проводить манипуляции в перчатках. Его рот должен быть защищен специальной повязкой.
Для взятия крови лучше использовать вакуумную систему. При таком отборе исключен контакт отобранного образца с персоналом и окружающей средой.
Помещение, в котором проводится отбор, должно быть максимально стерильным.
Вышеперечисленные действия способствуют получению объективных результатов проведенных анализов на выявление грибка. Риск загрязнения отобранных материалов посторонним биоматериалом сводится к нулю.
Куда обратиться для ПЦР-диагностики
Современные методы требуют современного дорогостоящего оборудования и высококлассных специалистов. Высокотехнологичная автоматизированная система под силу крупным современным лабораториям.
Уточняйте наличие системы контроля качества в лаборатории.
Это не прихоть, а важная часть процесса проведения анализов, которая дает возможность исключить человеческий фактор из числа рисков получения ошибок.
Системы контроля должны соответствовать требованиям международных стандартов.
Видео: Подробный обзор ПЦР-анализа
Грибковые заболевания занимают второе место по распространенности среди кожных болезней. Для того чтобы правильно подобрать лечение, нужно вовремя сделать анализ на грибок, определить вид микоза и его чувствительность к лекарственным препаратам. Существует несколько видов анализов на грибковые заболевания кожи, ногтей и внутренних органов. Об этих исследованиях мы подробно расскажем в статье.
Виды грибов и провоцируемые ими заболевания
Грибковые заболевания человека можно разделить на пять основных групп. Это дерматомикозы, кератомикозы, кандидозы, глубокие микозы и псевдомикозы.
К дерматомикозам относят:
- микроспорию (возбудитель — рода Microsporum);
- трихофитию (грибки рода Trichophyton);
- эпидермофитию (Epidermophyton floccosum);
- рубромикоз (Trichophyton rubrum);
- эпидермомикоз (эпидермофитию) стоп (Trichophyton mentagrophytes).
Дерматомикозы вызывают воспалительные процессы в коже, могут поражать ногти и волосы. Источниками инфекции выступают животные (при микроспории) или больные люди.
Ярким признаком дерматомикоза является очаг поражения кожи или ногтей с активно отслаивающимися чешуйками. Последние содержат высокую концентрацию грибков и являются источником инфицирования здоровых людей. Грибок активно размножается во влажной среде, поэтому микозами чаще всего заражаются в сауне, в бассейне или в спортзале.
При кератомикозах происходит повреждение рогового слоя кожи, но при этом нет воспалительной реакции. К кератомикозам относят два заболевания — узловатая трихоспория и отрубевидный лишай, который вызывает грибок Malassezia furfur (он же — Pityrosporum orbiculare). Первое заболевание характерно для жаркой местности, в частности Африки и Южной Америки, поэтому о нем мы говорить не будем.
Возбудитель отрубевидного лишая — дрожжеподобный грибок — питается выделениями сальных желез. Заболевание начинается с появления мелких желтоватых чешуек около волосяных фолликулов. Постепенно очаги заболевания сливаются, образуя покрытые мелкими чешуйками пятна от розоватого до бурого цвета Из-за того, что на коже могут одновременно находиться пятна разного цвета, это заболевание еще называют разноцветным лишаем.
На коже головы Malassezia furfur может спровоцировать себорейный дерматит.
Дрожжеподобные грибки рода Candida в небольших количествах являются частью нормальной микрофлоры. Но при снижении иммунитета Candida может начать усиленно размножаться, вызывая заболевание, известное как кандидоз . В зависимости от места поражения выделяют кандидоз кишечника, кожи, ротовой полости, мочеполовой системы. При размножении этого грибка в крови возникает системный кандидоз.
Глубокие микозы чаще всего поражают органы дыхательной системы. Болезнь развивается в основном у ослабленных людей с хроническими заболеваниями.
К числу глубоких микозов относятся:
- аспергиллез (род Aspergillius);
- мукороз (род Absidia, Mucor, Rhizopus);
- пенициллиоз (род Penicillium);
Мукороз чаще всего поражает полость носа и гортани. Аспергиллез может вызывать заболевания полости носа, гортани, легких. Грибки рода Penicillium могут вызывать отомикоз (заболевания уха), поражение легких, абсцессы.
Выделяют также псевдомикозы . Эти патологии провоцируют особые группы грамположительных бактерий: актиномицеты и нокардии, имеющие много общего в строении вегетативных и репродуктивных форм клеток с грибами.
Зачастую при грибковых поражениях всех типов не развиваются специфические симптомы и установить причину заболевания бывает трудно. Поставить достоверный диагноз можно только на основе совокупности внешних признаков и результатов лабораторных анализов.
При проведении анализа на грибки исследуют кровь, мокроту, соскоб с кожи и слизистых, волосы или ногти. Анализ может проводиться микробиологическим методом (микроскопия, посев), методами ПЦР и ИФА.
Микроскопическое исследование позволяет быстро определить, вызвано ли заболевание грибком. Биологический материал (кусочек ногтя, волосы, соскоб с поверхности кожи или другой материал) обрабатывают специальным образом, при необходимости окрашивают и рассматривают под микроскопом. При микозах в препарате обнаруживают нити мицелия, споры гриба, дрожжевые клетки.
Микроскопическое исследование назначают при подозрении на микоз кожи, волос или ногтей.
Материалом для анализа грибка ногтей является соскоб с помощью стерильного скальпеля с разных участков ногтевой пластинки. При поражении кожи делают соскоб с границы очага — здесь наибольшая концентрация возбудителя. Если поражена волосистая часть головы, то кроме чешуек кожи забирают на исследование и волосы. Их осторожно изымают с помощью пинцета.
Микроскопическое исследование обычно длится около 3–5 дней. В большинстве случаев речь идет о качественном анализе — результат будет содержать лишь информацию о наличии или отсутствии грибов. В редких случаях определяется тип возбудителя (дрожжеподобный или плесневый грибок) и его концентрация (единичные или множественные клетки), а также тип обнаруженных элементов (гифы, споры, конидии).
В норме в исследуемом материале не должно быть грибков. Единичные клетки могут говорить не о заболевании, а о бессимптомном носительстве, поэтому интерпретировать результат должен только врач.
Посев, или культуральный метод , дает более точные данные о возбудителе заболевания, хотя и занимает больше времени. Такой анализ на грибки в зависимости от их вида может занимать от 2–4 дней до 4 недель.
Материал с поверхности кожи или ногтя собирают так же, как и для микроскопии. В лаборатории биоматериал помещают в специальную питательную среду. Если в материале были грибки, то через некоторое время появляются характерные колонии. Грибки из каждой колонии исследуют под микроскопом, определяют род и вид грибка, его концентрацию. В некоторых случаях исследуется чувствительность к определенным лекарственным препаратам.
Иммуноферментный анализ крови на грибок используется для диагностики глубоких микозов, когда получить материал для посева или микроскопии сложно.
ИФА позволяет определить титр антител к конкретному грибку. Чаще всего используется определение IgG к кандидозу и аспергиллезу. Чувствительность и специфичность этих тестов около 80%. Но это исследование может выдать положительный результат и при поверхностных поражениях — ярко выраженных кандидозе влагалища или ротовой полости.
Для ИФА забирается кровь из вены. Особой подготовки к исследованию не требуется. Можно забирать кровь натощак или не ранее чем через 4 часа после еды.
Результат готовится от 1–2 до 5 дней. В зависимости от установленного оборудования и проведения подтверждающих проб. Обычно в результатах такого анализа содержится одна из трех формулировок — положительный, отрицательный или сомнительный результат.
ПЦР-исследование позволяет установить наличие грибка определенного вида. Из плюсов этого метода можно выделить его точность, скорость и достоверность (специфичность около 100%). Из минусов — узкую направленность. То есть для проведения ПЦР-анализа на грибок нужно точно знать, что именно искать.
Для исследования делают соскоб с поверхности пораженной кожи или слизистых оболочек. Также на исследование могут забирать кровь, мочу, секрет простаты.
Метод ПЦР может быть как качественным, так и количественным. В первом случае в результате будет указано только наличие или отсутствие ДНК возбудителя. Во втором — количество его клеток в исследуемом материале. Анализ занимает в среднем от 1 до 3 дней.
По результатам одного ПЦР-анализа на грибки нельзя поставить диагноз. Говорить о кандидозе можно только при наличии специфических симптомов.
Стоимость анализов на грибок зависит от типа исследования, от ценовой политики лаборатории, а также от ряда дополнительных факторов. Анализ в клинике обычно стоит дороже, чем непосредственно в лаборатории. Посев — дороже микроскопии. Количественные методы ПЦР будут дороже качественных.
В среднем исследование соскобов с кожи или ногтей под микроскопом будет стоить около 600–800 рублей. Микологический посев для определения грибков рода Candida — 400–500 рублей без определения чувствительности и 600–700 рублей с чувствительностью к противогрибковым препаратам. Анализ на грибок кожи или ногтей стоит дороже — порядка 1500 рублей. Эта стоимость уже включает взятие биоматериала.
ИФА на определение иммуноглобулинов к определенному виду грибка стоит 500–800 рублей за один анализ, плюс около 120–170 рублей за взятие крови. Анализ на грибок методом ПЦР — около 200–300 рублей за качественный анализ и около 700–800 за количественный. Также нужно заложить в бюджет около 200–250 рублей за взятие соскоба.
Не каждая лаборатория проводит микологические исследования. Работа с грибками требует особого разрешения, оборудования и квалификации персонала. Поэтому лучше заранее узнать, какие именно исследования проводятся в конкретных медицинских учреждениях.
При грибковых заболеваниях кожи и ногтей нужно выбрать лабораторию, в которой могут профессионально сделать забор материала, так как от этого во многом зависит результат. Чем меньше времени прошло с момента забора материала до начала исследования, тем лучше.
Для проведения ПЦР- и ИФА-исследований используются микропланшетки на несколько анализов. Лаборант обычно сдает материал на исследования только после того, как заполнится вся планшетка. Это может увеличить срок готовности результатов. Проблема типична для учреждений с небольшим потоком клиентов.
Некоторые клиники заключают договор с лабораториями. В этом случае забор материала осуществляется на базе лечебного учреждения, само же исследование проводится в лаборатории подрядчика. Поэтому стоит уточнить заранее, где именно будет проводиться исследование.
Также стоит обратить внимание на способ получения результатов. В некоторых лабораториях результаты можно получить не только в виде стандартного бумажного бланка, но и через интернет, в личном кабинете или письмом на электронную почту.
Найти надежную лабораторию, где можно сдать все необходимые анализы на грибки, не всегда просто. Однако потраченное на ее поиски время окупится точными результатами, правильным диагнозом и вовремя начатым лечением грибковых заболеваний.
Выявить поражение и определить возбудителя при поражении грибка на первых этапах крайне сложно. Диагностирование осложнено тем, что патология сразу никак не проявляется или имеет разнообразную симптоматику. Для определения возбудителя берут биоматериал с того участка, который поразила патогенная микрофлора: мокроту, часть кожи, зараженный ноготь, кровь, биопсию лимфоузлов или внутренних органов.
Что такое грибковые заболевания
Причиной обращения к дерматологу становятся, как правило, первые патологические проявления болезни. Клинические признаки будут отличаться в зависимости от места заражения, возбудителя грибкового заболевания. Выделяют следующие типы патогенных микроорганизмов:
- грибок Кандида (Candida) – вызывает кандидозные инфекции;
- Трихофитии (Trichophyton) – провоцирует инфекционные патологии ногтей, кожи, слизистых оболочек;
- Криптококкоз – атакует внутренние органы, легкие;
- Аспергиллез – грибковое заболевание, вызванное снижением иммунитета.
При диагностике может быть определена одна из 2 групп инфекции по локализации:
- Поверхностное. Выявляется поражение кожи, слизистых, распространение на внутренние органы не происходит (инфекции, которые вызваны грибками рода трихофитии, кандида).
- Системное. Определяется при поражении внутренних органов, диссеминации паразитов с кровью (аспергиллез, криптококкоз).
Проникает патогенная микрофлора через ранки на поверхности эпидермиса, микротравмы, причиной заболевания может стать любая царапина, которая спровоцирует микоз гладкой кожи. Не справляется организм с атакой возбудителя при снижении защитных функций. При диагностике часто определяют заражение родом трихофитон или Кандида. Последние вызывают такие заболевания:
- молочница;
- кандидоз у мужчин;
- кандидоз ротовой полости.
Существует более нескольких десятков возбудителей, их делят по методу поражения тканей. При диагностике могут выявить следующие виды грибковых микроорганизмов:
- глубокие системные микозы провоцирует Histoplasma capsulatum;
- субкутанные подкожные микозы вызывает Sportrichum schenckii;
- эпидермомикозы развиваются из-за Epidermophyton floccosum;
- отрубевидный лишай, поверхностный микоз - Malassezia furfur;
- оппортунистические грибковые заболевания - Candida albicans.
Классификация микозов
Общее название всех болезней этого типа скрывает под собой разные виды поражения организма человека грибами. При диагностике врачи разделяют заболевания кожи на 4 группы:
- Кератомикозы. Местом локализации становится роговой слой эпидермиса, в других слоях кожи воспалительные явления отсутствуют (пьедра, разноцветный лишай, парша, споротрихоз). Вызывают эту разновидность патологии следующие грибы: Sporotrichium, Trichosporon, Piedraia, Exophiala, Pityrosporum.
- Дерматомикозы. Характеризуются выраженным воспалительным процессом, локализуются на коже, волосистой части головы, на ногтях (фаус, трихофития, эпидермофития, микроспория). Провоцируют патологии следующие штаммы грибов: Epidermophyton, Microsporum, Trichophyton.
- Кандидамикозы. Затрагивает этот вид грибков слизистые оболочки, кожу и ее придатки. Часто объектом атаки грибков рода Кандида становятся внутренние органы.
- Глубокие микозы. Провоцируют тяжелые заражения всех слоев кожи, внутренних органов, слизистых оболочек, костей, мышц (мукороз, пенициллиоз, аспергиллез).
Выделяют отдельно псевдомикозы (актиномикоз, эритразма), которые не являются заболеваниями грибкового типа, но по симптомам схожи с истинными микозами. В этих случаях обязательно нужна дифференциальная диагностика. Диагностика в таких случаях очень важна, потому что помогает определить тип грибкового поражения или исключить его. От этого зависит назначения схемы лечения, ее длительность и эффективность.
Грибки-дерматофиты глубокого проникаются в кожу, провоцируют дерматомикозы, к примеру, следующие известные патологии:
Относят этот вид патологии к разным болезням, которые создают рубцовые изменения, деформацию кистей рук, ногтей стоп, изменение структуры и выпадение волос. Поражают возбудители верхние, глубокие слои кожи, что приводит к появлению фурункулоподобных узлов, пустулезных высыпаний, обширных очагов воспаления. Для развития благоприятным условием становится нарушение гигиены стоп. Сначала грибок растет на коже ног, в межпальцевых промежутках, затем переходит на ногти.
Патогенные микроорганизмы поражают глубокие и поверхностные слои кожи, распространяются на ногти, волосы, внутренние органы. Вызывают болезни грибы рода Кандида, болезни относятся к группе кандидамикозов. Выделяют следующие типы этих недугов:
- генерализованные;
- поверхностные;
- висцеральные.
Относятся грибы Candida к условно-патогенным. Дрожжеподобные возбудители можно обнаружить при диагностике в кишечнике, ротовой полости и у здорового человека. Сдерживает распространение патогенных микроорганизмов сильный иммунитет, а при его ослаблении начинается активное размножение кандид, что приводит к поражению кожного покрова туловища, ступней, головы, кистей. Клинические изменения отмечаются при всех типах кандидамикозов. Лечение зависит от тяжести течения, вида поражения.
Это вид заболеваний, которые затрагивают глубокие слои кожи, внутренние органы. Болезни развиваются при сильном снижении защитных сил организма, изменении гормонального фона, нарушении обмена веществ. Относят следующие патологии к глубоким микозам:
- кокцидиоидоз;
- хромомикоз;
- риноспоридиоз;
- гистоплазмоз;
- споротрихоз;
- бластомикоз;
- мукороз;
- цефалоспориоз;
- мицетома;
- кладоспориоз;
- мадурская стопа;
- аспергиллез.
Это группа патологий, которые локализуются только на кутикулах волос, роговом, поверхностном слое кожи. Характерным признаком кератомикоза становится отсутствие воспалительных явлений. Возбудителями болезни являются плесневелые, дрожжеподобные грибы, дерматофиты (около 70 видов патогенов). Провоцируют они следующие заболевания:
- шимбери;
- белый лишай;
- черный лишай;
- черепицеобразный микоз;
- тропический белый и желтый лишай;
- узловатая трихоспория;
- пьедра;
- разноцветный (отрубевидный) лишай.
Как диагностировать грибок
При подозрении на развитие микоза нужно сразу же обратиться за медицинской помощью. Вам понадобится врач дерматолог или миколог. Диагностика грибка ногтей начинается с опроса пациента, чтобы выявить возможные пути заражения. Специалист спрашивает про контакт больного с птицами, животными, которые могут переносить паразитов. Важно уточнить не был ли человек в неблагоприятных регионах других стран, в каких условиях он живет.
Далее начинается визуальный осмотр, который помогает определить масштабность поражения, какие участки поверглись воздействию грибков. Врач должен обратить внимание на наличие иммунодефицитного состояния пациента. Для определения типа возбудителя необходимо сделать забор материала, который отправляют на лабораторное исследование. Опытный врач может при первичном осмотре поставить диагноз, но для составления схемы терапии нужно все равно провести изучение биоматериала. Для диагностики грибковых заболеваний применяют следующие методы:
- микроскопия – исследование под микроскопом биоматериала, распространенный и простой метод диагностики;
- исследование под лампой Вуда – специальный спектр ультрафиолетового освещения (люминесценция) помогает заметить грибковые поражения;
- бактериологический посев – точный способ диагностики, но проведение его занимает 2-3 недели, пока не вырастет колония на питательной среде;
- ПЦР-диагностика – самый точный способ определения вида патогенной микрофлоры, но для точного диагноза может потребоваться проведение нескольких анализов, что требует траты денег.
Только своевременный точно поставленный диагноз поможет назначить эффективную схему терапии и сократить длительность курса. Лабораторная диагностика грибковых заболеваний является самым эффективным методом для определения типа возбудителя. Для выявления используют такие варианты исследования:
- бактериологический посев;
- гистологический анализ;
- ПЦР-диагностирование;
- иммунологическое исследование;
- микробиологические исследования;
- культкуральное исследование.
Постановку точного диагноза затрудняет то, что при разных видах микоза появляются различные симптомы. В таких случаях используют дифференциальный метод диагностики, сравнивают с другими дерматологическими патологиями микоз. Часто признаки микоза путают с псориазом, но при соскабливании чешуек грибковая патология не будет кровоточить. Схожая симптоматика наблюдается и с парапсориазом.
Врач должен исключить вероятность развития нуммулярной экземы. Это особый вид патологии, который можно выявить только при лабораторной диагностике. Часто признаки грибка принимают за полиморфный фотодерматоз, который может развиваться только у взрослого человека и никогда не встречается у ребенка. Лабораторная и дифференциальная диагностика обязательна для постановки точного диагноза, назначения грамотного лечения.
Микробиологическая диагностика микозов
Это самый простой и распространенный метод выявления микоза на коже и в крови. Для точного диагноза необходимо собрать материал для исследования. При поражении волосистой части головы нужно при помощи пинцета собрать пораженные волосы, а с кожи сделать соскоб поврежденного участка. Лабораторные исследования при грибковых заболеваниях по микробиологическому методу проводятся при помещении биоматериала в раствор гидроксида калия 30%, потом на предметное стекло.
Анализ поможет вывить, где расположен грибок (снаружи или внутри кожи, волоса), его размеры. Если забор материала провести неверно, то анализ может дать ошибочный результат. Используют для диагностики следующие методы микробиологической диагностики:
- микроскопия с нативными и неокрашенными препаратами;
- микроскопия с окрашенными препаратами.
При диагностике специалист должен учитывать структуру мицелия (строение гиф, их септированность, цвет), особенности строения спор, кондиев, учитывается их цвет, форма и размер, строение клеточной стенки и т.д. Для исследования готовят нативные, окрашенные препараты. Последние требуют обработки материала разными способами:
- PAS-окрашивание. Окраска такого типа помогает определить в стенках микроорганизмов нейтральные полисахариды. К ним относится глюкан-маннановый комплекс, который находится в клеточной стенке многих эумицетов. Он и провоцирует процесс окрашивания.
- PAS-реакция. Используется для диагностики грибковой инфекции тканевой формы. В лаборатории применяют для этого исследования разные модификации, к примеру, окраска по Гридли или реакция Бауэра.
- Метод Грама. Окраска этим способом помогает выявить наличие сопутствующих микрорганизмов.
- Окраска по Циль-Нильсону. Помогает определить кислотоустойчивые микроорганизмы. Если биоматериал жидкий, то готовят специальный неокрашенный мазок в просветляющих жидкостях для микроскопии: в равных пропорциях смешивают глицерин и спирт.
Культуральное исследование на грибы
Помещают посев биоматериала на питательную среду (выращивание), чтобы выделить чистую культуру при комнатной температуре. Диморфные грибы в таких условиях образуют мицелий, при росте до 37 градусов начинают формироваться дрожжеподобные клетки. Среда Сабуро применяется для дерматофитов и грибов Candida, для плесневелых (гифальных) необходима среда Чапека. Часто добавляют в состав антибиотик. Глубокие микозы могут определить только в клинико-лабораторных центрах из-за высокой контагиозности.
Люминесцентная диагностика грибковых заболеваний
Для определения пораженных участков кожи патогенной микрофлорой рода Микроспорум используют ультрафиолетовую лампу. Это вариант экспресс-диагностики, которая применяется при необходимости подтвердить наличие кожной инфекции, симптомы лишайных заболеваний. Ультрафиолетовое излучение не является главным способом определения грибка, это вспомогательный метод, поэтому выполнять его не обязательно.
Для осмотра больного используют лампу Вуда, они испускает УФ излучения, под их действием продукты жизнедеятельности грибка светятся ярким светом. Цвет зависит от того, какой вид возбудителя поразил пациента:
- зеленоватый – лишай волосистой части головы;
- голубой – красная волчанка на губах;
- желтоватый – плоские лишайные образования.
Иммунологический ферментный анализ крови на грибок
Для обнаружения микозов, поразивших кожные покровы, внутренние органы (гистоплазмоз, кокцидиоидоз) используют иммунологический ферментный анализ крови на грибковые заболевания. Часто используют эту методику в случае, если взять биопсию тканей для изучения по определенным причинам не получается. Основывается методика на поиск титра антител к конкретному типу грибкового заболевания.
Для этих целей используют определение IgG к аспергиллезу, кандидозу. Точность анализа составляет около 80%, в редких случаях можно получить ложноположительный результат при отсутствии глубоких микозов. Случается это при наличии у больного грибка слизистой оболочки рта или запущенной формы молочницы. Для ИФА требуется забор венозной крови, берут его утром рано или, спустя 4 часа после последнего приема пищи. Другой подготовки для проведения анализа не требуется.
Ответ на анализ будет через несколько суток после забора биоматериала. Редко длительность ожидания превышает 5 дней. Влияет на скорость проведения исследования качество оборудования в лаборатории, если есть причины провести дополнительное изучение образцов крови. Пациенту выдают по завершении процедуры заключение, где будет указано одно из значений:
ПЦР-диагностика грибковых заболеваний
Самым точным и достоверным способом диагностики грибка и других инфекционных заболеваний является полиразмерная цепная реакция. Обладает метод диагностики следующими преимуществами:
- низкая стоимость анализа;
- высокая точность;
- исследование биоматериала проводится быстро;
- для анализа можно собрать любой образец тканей (частичку кожи, слизистой, соскоб с подошвы стоп, пальцев рук, поверхности ногтей, волосы, кровь).
Главный недостаток этого исследования – узкая направленность. Чтобы диагностировать микоз, нужно точно знать, где он поразил организм человека. ПЦР определяет тип возбудителя, концентрацию в организме больного. Результаты будут известны через сутки, в некоторых случаях (при отсутствии неблагоприятных условий), ответы приходят в день сдачи (через 5-6 часов). Скорость выполнения исследования зависит от правильности забора образца, опытности медперсонала, загруженности работой лаборатории.
Как определить грибок в домашних условиях
При умении распознать симптоматику микозных патологий и применении домашних методов диагностирования, можно определить вид патогена. Пациент должен правильно оценить течение болезни, можно на первых этапах грибковое заболевание спутать с псориазом или лишаем. Чтобы этого избежать, нужно знать основные признаки микоза, которые отличают его от других недугов. Симптомы поражения грибком:
- ногти становятся желтого цвета, начинают слоиться;
- изменение формы ногтевой пластины;
- нет периодов ремиссии и обострения, начинается полное отслоение пластины, что не происходит при кожных патологиях и псориазе;
- место поражения имеет неприятный запах, болит при прикосновенно, появляется зуд, шелушение, могут образовываться бляшки на поверхности кожи;
- поражает грибок, как правило, межпальцевые промежутки на одной или обеих ногах, затем недуг распространяется на ноготь и остальную ступню.
Если вы заметили, что ногти на руках, ногах начали видоизменяться, появился неприятный запах, то можно прямо дома проверить наличие или отсутствие инфекции. Вам понадобится для проведения анализа марганец, теплая вода и емкость. Процедура проводится следующим образом:
- Сделайте слабый раствор марганцовки.
- Погрузите руки или ноги (пораженные конечности) на 2-3 минуты в емкость.
- Если ногтевая пластина окрасилась в желтый цвет – вы здоровы. Если же окраска их не изменилась, значит есть инфекция.
Это средство легко найти в аптеке и есть у большинства людей дома. Определить сам грибок йод не поможет, но может помочь определить наличие кожных патологий на начальном этапе развития. К примеру, средство помогает выявить отрубевидный лишай, которые поражает кожу на руках и ногах. Проводится исследование следующим образом:
- при наличии признаков кожного заболевания нанести тонким слоем йод на этот участок;
- подождите 2 минуты;
- если проблема есть, то очаги поражения примут насыщенный окрас;
- здоровые участки кожи выделять не будут.
Сколько стоит диагностика грибковых заболеваний в клиниках Москвы
Микроскопическое исследование проб ногтей
Микроскопия и посев (кожа/ногти)
Посев на дрожжеподобные грибы
Микроскопическое исследование соскоб ногтей
Читайте также: