Сдать анализ скрининг инфекции

ТОРЧ (TORCH) инфекции – это ряд инфекций, которые ВОЗ объединила в комплекс наиболее опасных для развития плода при беременности. Особенность ТОРЧ-инфекций заключается в том, что, будучи относительно безобидными для взрослых, они становятся чрезвычайно опасными для беременных.

В ТОРЧ группу входят вирусные и бактериальные инфекции, многие из которых протекают бессимптомно, но при первичном заражении ими во время беременности могут пагубно воздействовать на все системы и органы плода, главным образом на его нервную систему, повышая риск выкидыша и пороков развития.

Что входит в ТОРЧ-инфекции

В группу TORCH-инфекций включают следующие заболевания:

• Т – токсоплазмоз (toxoplasmosis);
• О – другие инфекции (others): сифилис (бледная трепонема), ВИЧ, ветряную оспу, хламидиоз, гепатит В и С;
• R – краснуху (rubella);
• С – цитомегаловирусную инфекцию или ЦМВ (cytomegalovirus);
• H – герпес (herpes simplex virus).

Анализ на ТОРЧ-инфекции желательно сдать до наступления беременности – на стадии планирования (за 2-3 месяца до планируемого зачатия) или на как можно более ранних сроках беременности. Причем анализы необходимо сдать вне зависимости от самочувствия беременной женщины, так как большинство ТОРЧ-инфекций никак себя не проявляют и протекают бессимптомно, но представляют реальную опасность нормальному внутриутробному развитию ребенка. Именно поэтому анализы на ТОРЧ-инфекций входят в базовый спектр обследования беременных женщин в женских консультациях в рамках оказания медицинской помощи женщинам в период беременности.

Анализ на TORCH-инфекции

Обследование беременных на ТОРЧ-инфекции проводят только один раз – при постановке на учет в женской консультации. Для анализа на TORCH- инфекции используют сыворотку или плазму. Разные иммуноглобулины появляются в крови в разное время. Поэтому для диагностики ТОРЧ-инфекций в крови определяют наличие или отсутствие антител к возбудителю.

После заражения, первыми появляются (в минимальной концентрации) специфические IgM-антитела, которые достигают своего максимума к концу первого – началу третьего месяца заболевания, затем их содержание снижается и через несколько месяцев (от 2 до 6) они перестают определяться. Иммуноглобулины класса G появляются в сыворотке крови на второй-третьей неделе заболевания и достигают пика своей концентрации на месяц позже IgM-антител. В дальнейшем, содержание IgG-антител может снижаться, но они, как правило, продолжают определяться пожизненно.

Расшифровка анализа на ТОРЧ (TORCH) инфекции

Диагностика TORCH-инфекции заключается в определении антител (иммуноглобулинов) к группе инфекций. Антитела – это защитные белки иммунной системы, образующиеся в организме при попадании чужеродных веществ, международное обозначение их – Ig. Для диагностики TORCH-инфекции используются антитела IgG и IgM.

Анализ крови на TORCH-инфекции является комплексным исследованием, в его состав входит 8 тестов - определение антител IgM и IgG:

• к вирусу простого герпеса 1,2 типа;
• к цитомегаловирусу IgM и IgG;
• к вирусу краснухи IgM и IgG;
• к Toxoplasma gondii IgM и IgG;

Антитела IgM – титры говорят об острой фазе заболевания. В некоторых случаях антитела IgМ могут сохраняться в организме после первичного заражения долгое время. Для определения давности заражения беременной используется сопоставление результатов обнаружения IgM с титром и авидностью IgG.

Антитела IgG – повышение говорит о том, что организм уже когда-то встречался с этой инфекцией и выработал иммунитет.

Лаборатории могут определять наличие антител IgG и IgM для каждого показателя ТОРЧ-инфекции как качественно (в результате будет указано, обнаружены/не обнаружены или отрицательно/положительно), так и количественно (результат покажет количество антител - титры).

Возможные результаты анализа на TORCH-инфекции во время беременности

IgG	IgM	Значение
–	–	Нет иммунитета к инфекции (организм с данной инфекцией ранее не встречался). Существует вероятность первичного заражения во время беременности. Необходимы профилактические мероприятия и мониторинг уровня антител во время беременности.
–	+	Начало болезни, заражение было недавно
+	+	Острая стадия заболевания. Существует опасность внутриутробного инфицирования. Рекомендуется проведение дополнительных методов обследования – тест на авидность антител IgG.
+	–	Ваш организм уже встречался с данным возбудителем и выработал иммунитет. Опасности для малыша нет.

Основной задачей проведения скрининга на TORCH-инфекции, является выделение группы риска по первичному инфицированию и диагностика внутриутробных инфекций.

Чем опасны ТОРЧ-инфекции при беременности

Наиболее опасным для плода является первичное инфицирование (заражение) беременной ТОРЧ-инфекциями, особенно на ранних ее сроках, поэтому если при обследовании на ТОРЧ-инфекции до беременности в крови женщины обнаруживаются антитела к ним, то женщина может спокойно планировать беременность – сформировавшийся иммунитет защитит ее и будущего малыша. Если же антител к ТОРЧ-инфекциям не обнаруживается, значит, беременной женщине необходимо будет принимать дополнительные меры для того, чтобы обезопасить от них себя и своего будущего ребенка.

Если заражение ТОРЧ-инфекцией произошло в первые несколько недель после оплодотворения, то повышается риск неразвивающейся беременности и выкидышей, либо, если беременность сохранилась, у малыша могут развиться многочисленные пороки развития органов вследствие поражений на клеточном уровне.

Если первичное заражение ТОРЧ-инфекцией произошло в третьем триместре, у малыша развиваются воспаления различных органов, у таких деток всегда имеются симптомы неврологического поражения центральной нервной системы различной степени выраженности.

Чем опасен токсоплазмоз для беременной? Тяжесть поражения плода токсоплазмозом находится в зависимости от срока инфицирования (стадии внутриутробного развития). Первичное заражение токсоплазмозом в ранние сроки нередко для эмбриона заканчивается его гибелью. При инфицировании на более поздних сроках процент передачи токсоплазмоза плоду очень высок, но риск тяжелых поражений плода снижается. При этом возможно развитие заболевания через несколько лет: заболевания сетчатки глаза, дефекты слуха, эндокринные нарушения и др. Если женщина переболела токсоплазмозом до беременности (не менее чем за полгода до нее), ее будущему ребенку токсоплазмоз не угрожает.

Чем опасна краснуха для беременной? Особенно опасно заболевание в первом триместре беременности. В этом случае больше половины детей рождаются с синдромом врожденной краснухи (СВК) который может включать серьезные врожденные аномалии органов зрения (катаракта, глаукома), пороки сердечно-сосудистной системы, пороки органов слуха, поражения центральной нервной системы, пищеварительной и мочеполовой систем. Задержку роста и сахарный диабет также связывают с поздними осложнениями внутриутробной краснухи. Потенциальная опасность внутриутробного инфицирования плода происходит в 100% случаев в первые 12 недель беременности. Если инфицирование произошло на 13-16 неделе беременности, то у родившегося ребенка может быть выявлена глухота. На более поздних периодах беременности (17-20 недель) инфицирование плода наблюдается редко.

Чем опасна цитомегаловирусная инфекция для беременной? Цитомегаловирусная инфекция занимает одно из первых мест по внутриутробному инфицированию плода. Заражение чаще всего происходит в родах. Опасность цитомегаловирусной инфекции для плода возникает только при первичном заражении женщины во время беременности. ЦМВ может привести к внутриутробной гибели плода или рождению ребенка с врожденной цитомегаловирусной инфекцией (гепатит, желтуха, увеличение печени и селезенки, пневмония, пороки сердца, врожденные уродства). Родившийся ребенок может страдать задержкой психического развития, глухотой, эпилепсией, церебральным параличом, мышечной слабостью.

Чем опасен герпес для беременной? При первичном заражении герпесвирусной инфекцией в первые 20 недель беременности повышается риск спонтанного аборта, а в последние недели – способствует преждевременным родам, либо к врождённому герпесу у ребенка, который характеризуется желтухой, увеличением печени и селезенки, аномалиями развития центральной неровной системы (ЦНС) и т. д. При первичном заражении герпесом во время беременности, особенно на начальной ее стадии, когда закладываются все органы и системы будущего ребенка, герпесная инфекция может быть смертельно опасной для плода.

Стоимость раздельно Стоимость в комплексе
Выбрать Перейти в корзину

TORCH-комплекс – это один из анализов крови, позволяющий выявить сразу четыре инфекционных заболевания, таких как токсоплазмоз, краснуха, герпес и цитомегаловирус. Такой анализ крови является частью комплексной диагностики во время беременности, поскольку все вышеперечисленные заболевания опасны тем, что могут вызывать внутриутробные инфекции у плода.

Анализ крови на наличие TORCH-инфекций необходим для определения наличия у женщины иммунитета к данным заболеваниям. В зависимости от результата врач может назначить вакцинацию, составить рекомендации по планированию беременности либо профилактике данных заболеваний, если речь идет об уже наступившей беременности. Проведение анализа позволяет выявить наличие антител к инфекциям в организме матери.

Основным показанием к исследованию на TORCH-заболевания является беременность или ее планирование. При планировании беременности такой анализ рекомендуется провести за несколько месяцев до зачатия. Если беременность уже наступила, TORCH-комплекс нужно провести на максимально ранних сроках. За время беременности такой анализ проводится только один раз, как правило, при постановке на учет в женскую консультацию. Для исследования берется кровь из вены. Подготовка к анализу достаточно простая – кровь сдается натощак, за сутки до исследования необходимо исключить жирную пищу.

После проведения TORCH-комплекса в крови могут быть обнаружены антитела класса G, свидетельствующие о том, что инфицирование произошло давно, в настоящий момент в организме сформировался иммунитет к болезням, а значит, они не представляют опасности. Также в ходе исследования в крови может не быть обнаружено антител к возбудителям TORCH-заболеваний, что свидетельствует об отсутствии иммунитета к ним.

TORCH-комплекс – это один из видов анализов крови, который позволяет одновременно идентифицировать в образце биоматериала возбудителей герпеса, краснухи, токсоплазмоза и цитомегаловируса. Особо необходимо сдать анализ на TORCH-инфекции при подготовке к беременности и во время нее, так как эти заболевания очень опасны для плода.

Это комплексное исследование позволяет определить у женщины наличие иммунитета к этим заболеваниям. По результатам анализа врач может назначить вакцинацию от этих инфекций, если речь идет о подготовке к беременности. Если беременность же наступила, не лишним будет получить врача список рекомендаций по профилактике заражения этими заболеваниями.

Подготовка к анализу крови на TORCH-инфекции

При планировании беременности это исследование рекомендуется провести за пару месяцев до зачатия. Если беременность у женщины уже наступила, сдать кровь на TORCH-комплекс нужно в первом триместре при постановке на учет в женскую консультацию.

Накануне сдачи крови нужно отказаться от алкоголя и жирной пищи, исключить курение и сильные физические нагрузки. Результаты исследования могут подтвердить наличие в организме антител класса G, что свидетельствует о наличии иммунитета к краснухе, токсоплазмозу, цитомегаловирусу и герпесу. Также в образце крови они могут быть не обнаружены – это показатель отсутствия иммунитета к TORCH-инфекциям.

ОБЩИЕ ПРАВИЛА ПОДГОТОВКИ К АНАЛИЗАМ КРОВИ

Для большинства исследований кровь рекомендуется сдавать утром натощак, это особенно важно, если проводится динамическое наблюдение за определенным показателем. Прием пищи может непосредственно влиять как на концентрацию исследуемых показателей, так и на физические свойства образца (повышенная мутность – липемия – после приема жирной пищи). В случае необходимости можно сдать кровь в течение дня после 2-4-часового голодания. Рекомендуется незадолго до взятия крови выпить 1-2 стакана негазированной воды, это поможет набрать необходимый для исследования объем крови, уменьшит вязкость крови и снизит вероятность образования сгустков в пробирке. Необходимо исключить физическое и эмоциональное перенапряжение, курение за 30 минут до исследования. Кровь для исследования берется из вены.

Цены на ПЦР-диагностика инфекций

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) является одним из методов диагностики, позволяющих добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК/РНК) в биологическом материале (пробе) с использованием фермента ДНК-полимеразы.

Преимущества метода ПЦР:

- высокая чувствительность – выявляет единичные клетки;

- высокая специфичность – определяет уникальный фрагмент ДНК-возбудителя;

- быстрота получения результата и универсальность проведения реакции – ответы выдаются на следующий день после сдачи анализа;

- диагностика любых видов микроорганизмов – культивируемые, некультивируемые, персистирующие формы.

Для исследования используется биологический материал, в котором предполагается обнаружение патогена – соскоб из цервикального канала, уретры, влагалища; сперма, секрет простаты, моча, амниотическая жидкость, биоптат лёгких, печени, бронхоальвеолярный лаваж, кровь, мазок носоглотки, ротоглотки, мокрота, отделяемое конъюнктивы, плевральная жидкость, синовиальная жидкость, слюна, спинномозговая жидкость и др.

Актуальность и обоснованность применения ПЦР-технологии обусловлена тем, что инфекции урогенитального тракта в настоящее время характеризуются отсутствием патогномоничных специфических симптомов, стёртыми клиническими проявлениями, многоочаговостью инфицирования, что представляет значительные трудности для рутинной клинической диагностики и своевременной адекватной терапии.

Наша лаборатория проводит как качественные, так и количественные ПЦР-исследования.

Мы выполняем уникальный анализ ФЕМОФЛОР, который позволяет из одной биопробы выполнить количественную оценку общей бактериальной массы, нормофлоры (лактобациллы, типичные для урогенитального тракта женщин) и комплекса аэробных и анаэробных микроорганизмов, микоплазм, грибов рода Candida, ассоциированных с развитием специфических и неспецифических вульвовагинитов, бактериального вагиноза.

В случае необходимости проведения комплексной качественно-количественной оценки состояния урогенитального тракта женщин рекомендовано исследование ФЕМОФЛОР-СКРИН, которое объединяет тестирование на наличие основных патогенов – возбудителей инфекций, передаваемых половым путём (ИППП) и количественное исследование важнейших показателей состояния микробиоценоза.

Принимая во внимание клиническую и социальную значимость заболеваний мочеполовой системы у мужчин, часто стертого или асимптомного течения, а также важность равноценного обследования обоих половых партнёров при нарушениях репродуктивной функции и наличии заболеваний урогенитального тракта мы выполняем анализ АНДРОФЛОР, который позволяет осуществлять диагностику инфекционно-воспалительных заболеваний мочеполовой системы у мужчин.

Проблема диагностики и лечения заболеваний, ассоциированных с вирусом папилломы человека (HPV) является актуальной в связи с ростом заболеваемости (ежегодно диагностируется около 500 тыс. новых случаев рака шейки матки), значительной контагиозностью и высоким онкогенным потенциалом возбудителя. В нашей лаборатории выполняется качественный тест – СКИНИНГ Human papillomavirus (HPV) высокого онкогенного риска, и количественный тест Human papillomavirus (HPV) 21 типа - вирусы высокого и низкого онкогенного риска.

- клинические и/или лабораторные признаки воспалительного процесса урогенитального тракта;

- дисбиотические нарушения на фоне различных воздействий, в том числе:

· лечение антибиотиками, гормонами, цитостатиками;

· использование контрацептивов, в том числе внутриматочной спирали;

· смена полового партнёра;

- предстоящие оперативные манипуляции на органах малого таза с высоким риском инфекционных осложнений;

- беременность (во всех триместрах);

- обследование при планировании беременности.

Не рекомендуется сдавать анализ во время менструации.

Не рекомендуется осуществлять спринцевание влагалища в течение суток до сдачи мазка, использовать вагинальные антибактериальные свечи. Для исключения искажений результатов определения состава микрофлоры из-за присутствия в урогенитальном тракте транзиторной микрофлоры в течение 3 дней перед взятием биоматериала рекомендуется половое воздержание или защищённый половой контакт. Рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 3 часов до сдачи мазка. Если предполагается исследование материала со слизистой оболочки ротовой полости, перед обследованием необходимо воздержаться от принятия пищи и жидкости в течение нескольких часов.

Сбор утренней порции мочи проводится в стерильный контейнер.

Спасибо врачу за проведённую операцию, с легкостью легла к к нему на операционный стол и под его поддержку немножко юморной и я уснула, было не страшно , спасибо огромное за выполненную работу. Подробнее

Выражаю огромную благодарность замечательному доктору Титову Дмитрию Алексеевичу за проведенное лечение, за внимательное отношение и профессионализм! Спасибо за позитивный настрой на протяжении всего лечения. Подробнее

Проходила лечение в Отделении в IX/2019-II/2020, хочу выразить огромную благодарность всему коллективу Отделения противоопухолевой лекарственной терапии под руководством замечательного, чуткого доктора Шикиной Валентины Евгеньевны. Благодаря атмосфере, созданной в Отделении очень нелегкое лечение, перенесла морально легко! Спасибо за профессионализм, внимате. Подробнее

Я искренне благодарю очень хорошего врача Павла Юрьевича Орехова. Так сложилось, что мне по разным диагнозам довелось проходить лечение в отделении сосудистой хирургии, а Павел Юрьевич был моим лечащим врачем. Я уверен, что именно его профессиональные действия, назначения и рекомен. Подробнее

Потрясающий доктор. Спасибо ей огромное за всё, очень компентная, внимательная и что сейчас очень редко в нашей медицине, она нацелена на то, чтоб вылечить пациента и помочь ему, а не просто поговорить. Мы с мужем являемся её пациентами и очень рады, что нас судьба свела с таким чудесным доктором. Спасибо . Подробнее

Хочу выразить огромную благодарность Хлопушину Евгению Юрьевичу за профессионализм и необыкновенно чуткое отношение. Врач очень грамотно и комплексно подошел к моей ситуации: провел полную диагностику, в кратчайшие сроки организовал необходимое предоперационное лечение. Он блестяще провел сложную операцию, после которой уже практически через неделю я смогла . Подробнее

Выражаю огромнейшую благодарность хирургу-онкологу,д.м.н.Ищенко Роману Викторовичу за его добрейшее сердце, высочайший профессионализм и чуткое отношение к пациентам. Благодарю судьбу ,что мы узнали об этом замечательном враче по программе ЗдоровЯ. Роман Викторович помог нам справиться с нашей проблемой. Операция, которую он провел моему мужу на лёгком прошл. Подробнее

Огромная благодарность врачу-колопроктологу зиновскому Михаилу Вячеславовичу. Была у него на приёме 11 марта 2020 года. Острая боль, еле дошли с мужем, хотя всего и через дорогу. Сделал все, как мне кажется, возможное. Дал все необходимые рекомендации, и свой номер телефона. Сказал звонить, если будут какие либо вопросы. Звонила и консультировалась с ним у. Подробнее

В феврале 2020г попала в онкологическое отделение, где меня встретила зав отделением Косый Валентина Васильевна. Огромное ей спасибо за профессионализм и чуткое отношение. Здесь же мне была сделана сложнейшая операция Ищенко Романом Викторовичем и Астаховым Дмитрием Анатольевичем. Это мои три ангела-спасителя.
Сейчас я быстро восстанавливаюс. Подробнее

Выражаю огромную благодарность Артуру Робертовичу за его профессионализм и "золотые" руки. Оперировал маму дважды в июне 2019 и в феврале 2020 года и оба раза успешно. Очень внимательный, чуткий и отзывчивый Врач. Очень аккуратный в своей работе и что порадовало "эстет" по части швов))) Он в буквальном смысле спас жизнь моей м. Подробнее

Подайте заявку на госпитализацию или исследование.
Специалисты регистратуры свяжутся с вами и согласуют
удобное для вас время. Или перейдите к форме записи онлайн.

Комплексное молекулярно-генетическое исследование, которое позволяет выявить генетический материал наиболее вероятных возбудителей острых кишечных инфекций в кале и установить этиологию заболевания.

Синонимы английские

Acute intestinal infection screening; Bacterial and viral diarrhea screening, PCR, fecal samples.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
• Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.) и на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.

Общая информация об исследовании

Острые кишечные инфекции (ОКИ) – группа заболеваний, обусловленных вирусами, бактериями или паразитами, для которых характерен фекально-оральный механизм передачи. Общими для данных инфекций являются факторы передачи: пищевые продукты, вода, инфицированные бытовые предметы и грязные руки. Первые симптомы возникают через несколько часов или дней после инфицирования, начало резкое, с появлением частого жидкого стула, рвоты, боли в животе, признаков интоксикации (лихорадки, озноба, тошноты). Заболевание может носить групповой характер и проявиться у нескольких человек, употреблявших инфицированную пищу или воду.

Согласно официальной статистике, в России до 65-67% заболеваний этой группы составляют ОКИ неуточненной этиологии. Если возбудитель инфекции неизвестен, эффективность противоэпидемических мероприятий ограничивается. Соотношение частоты выявления вирусных и бактериальных патогенов варьируется в разных возрастах: у детей до 3 лет на долю вирусных агентов приходится 80-90% заболеваний, на долю бактериальных – 10-20%; среди взрослых пациентов доля вирусных возбудителей снижается до 30%.

Shigella species и Esherichia coli – грамотрицательные палочковидные микроорганизмы из семейства энтеробактерий. К роду Shigella относятся патогенные бактерии S. dysenteriae, S. flexneri, S. boydii и S. sonnei, которые являются возбудителями шигеллеза (бактериальной дизентерии). Энтероинвазивные E. coli (EIEC) очень близки с шигеллами, синтезируют и выделяют шигеллоподобный токсин, способны проникать в клетки слизистой кишечника и разрушать энтероциты, что приводит к образованию язвенных дефектов в слизистой кишечника. За значительную часть случаев "бактериологически неподтвержденной дизентерии", особенно у детей, ответственен энтероинвазивный эшерихиоз.

Бактерии рода Salmonella относятся к семейству энтеробактерий. S. typhi и S. parathyphi являются возбудителями брюшного тифа и паратифа. Существует множество серовариантов Salmonella species, способных вызвать у человека инфекцию по типу гастроэнтероколита, а также стать причиной внутрибольничных инфекций. Сальмонеллез может протекать в форме острой кишечной инфекции, тяжелой генерализированной инфекции или бессимптомного носительства. Окончательный диагноз ставится только после выделения возбудителя или обнаружения его ДНК.

Кампилобактерии являются одними из наиболее сложных для культивирования (которое требуется в ходе анализа) микроорганизмов. Это объясняется их микроаэрофильностью и возможностью подавления их роста сопутствующей флорой. Род кампилобактерий объединяет как возбудителей ОКИ (термофильные виды), так и сапрофитные и условно-патогенные виды, о чем необходимо помнить при выявлении этих микроорганизмов в клиническом материале. Применение наборов на основе ПЦР для определения термофильной группы кампилобактерий позволяет не только избежать трудоемкой и высокозатратной бактериологической работы, но и четко ограничить детекцию тех видов кампилобактерий, которые имеют этиологическую связь с острой кишечной инфекцией (С. jejuni, C. coli, C. lari, C. upsaliensis).

В соответствии с данными зарубежной литературы, норовирус – наиболее частый возбудитель вспышек ОКИ небактериальной этиологии. Эта особенность связана с низкой инфицирующей дозой и высокой устойчивостью в окружающей среде. ПЦР является "золотым стандартом" в клинической диагностике норовирусных инфекций.

Несмотря на несколько меньшую в сравнении с рота- и норовирусами распространенность, астровирусы составляют значительный пласт кишечных инфекций, у трети пациентов протекающий с явлениями колита. Ротавирусы группы А являются наиболее частой причиной спорадических заболеваний ОКИ у детей, а ДНК-содержащий аденовирус F (серотипы 40 и 41) нередко вызывает вспышки гастроэнтеритов у детей младшего возраста.

Для выявления и дифференциальной диагностики кишечных инфекций используются культуральные и молекулярно-генетические методы исследования генетического материала возбудителя в кале и определение концентрации специфических иммуноглобулинов в крови. ПЦР обладает преимуществом перед культуральными методами благодаря быстрому получению результатов, высокой специфичности и чувствительности исследования. Данный анализ позволяет со 100-процентной точностью определить возбудителя кишечного заболевания, а быстрая диагностика острых кишечных инфекций помогает избежать лишних процедур и оперативных вмешательств, своевременно начать лечение и ограничить очаг распространения инфекции.

Для чего используется исследование?

• Для установления этиологического фактора острой кишечной инфекции;
• для дифференциальной диагностики причин острого гастроэнтероколита (воспаления ЖКТ).

Когда назначается исследование?

• При симптомах острого гастроэнтерита, вероятно, инфекционной этиологии (жидкий частый стул, рвота, лихорадка, боли в животе);
• при одновременном или последовательном развитии ОКИ у нескольких членов семьи, у детей в детском учреждении или пациентов в стационаре;
• при подозрении на развитие внутрибольничной кишечной инфекции (при обострении симптомов энтероколита у пациента, находящегося на лечении по поводу ОКИ).

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

• присутствие ДНК или РНК возбудителя ОКИ; этиология в зависимости от выявленного вида возбудителя (Shigella spp., E. coli (EIEC), Salmonella spp., Campylobacter spp., Adenovirus F, Rotavirus A, Norovirus (2-й генотип), Astrovirus).

Причины отрицательного результата:

• отсутствие инфицирования Shigella spp., E. coli (EIEC), Salmonella spp., Campylobacter spp., Adenovirus F, Rotavirus A, Norovirus (2-й генотип), Astrovirus.



• Рекомендуется проводить исследование в первые 3 суток с начала заболевания, у госпитализированных пациентов – в первый день госпитализации.
• Важно помнить, что острый энтероколит может быть обусловлен и другими инфекциями (например, амебами, лямблиями, иерсиниями, клостридиями, протеями и др.) или неинфекционными причинами (токсинами, ядовитыми веществами, острой непроходимостью кишечника, тромбозом сосудов брыжейки, воспалительными заболеваниями кишечника, острым панкреатитом, аппендицитом, целиакией, острым гепатитом, мальабсорбцией, дивертикулитом).

Кто назначает исследование?

Инфекционист, гастроэнтеролог, терапевт, педиатр.

Литература

• Борисов Л. Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. М.: МИА, 2005. – 736 с.
• Gómez-Duarte O., Bai J., Newel E. Detection of E. coli, Salmonella spp., Shigella spp., Yersinia enterocolitica, Vibrio cholerae, and Campylobacter spp. enteropathogens by Three-reaction Multiplex PCR. Diagn Microbiol Infect Dis. 2009 January; 63(1): 1-9. PMCID: PMC2701628.

За звучной аббревиатурой ПЦР скрывается сложная и не слишком понятная для рядового пациента расшифровка — полимеразная цепная реакция. Что же такое ПЦР-диагностика, на чем она основана и почему в последнее время ее стали считать самой перспективной технологией в постановке диагнозов, касающихся инфекционных и вирусных заболеваний? Мы расскажем о преимуществах ПЦР-метода, его особенностях и этапах проведения.

ПЦР-диагностика: что это такое?

Диагностика методом ПЦР существует чуть более 30 лет. Значительно эволюционировав за это время, она зарекомендовала себя как один из наиболее точных способов выявления инфекций. В основе метода лежит принцип многократного увеличения микроскопических концентраций фрагментов ДНК возбудителя в биологической пробе пациента в искусственных условиях. В результате сложного процесса, называемого амплификацией, под воздействием ферментов и изменения температуры (от 50 до 95°С) из одной молекулы ДНК образуется две. При этом происходит копирование участка ДНК, который присутствует только у того вида патогенного микроорганизма, который интересует врача.

Цикл образования новой молекулы ДНК занимает всего около 3 минут, а тридцати-сорока циклов вполне достаточно, чтобы получить количество молекул, необходимое для достоверного визуального определения методом электрофореза.

Кроме амплификации, то есть простого увеличения числа копий молекулы ДНК, с помощью ПЦР можно производить и другие манипуляции с генетическим материалом, например, сращивать фрагменты ДНК, вводить мутации и т.д. Это позволяет использовать ПЦР не только для диагностики инфекционных и генетических заболеваний, но и для установления отцовства, клонирования и выделения новых генов.

ПЦР-диагностика проводится в специальных лабораториях с помощью амплификационного оборудования. На сегодня существует множество различных модификаций ПЦР, включая технологии с использованием не только ДНК, но и фрагментов рибонуклеиновой кислоты (РНК). В некоторых из них амплификация осуществляется при постоянной температуре, и для их проведения специальное оборудование не требуется.

Еще одна популярная модификация ПЦР — мультиплексная амплификация (МПА), которая позволяет проводить исследование сразу нескольких изучаемых фрагментов в одной пробирке. Это не только ускоряет и удешевляет проведение анализа, но и позволяет рассматривать одни фрагменты, получившиеся в результате реакции, в качестве положительных маркеров для других, что еще больше увеличивает точность исследования методом ПЦР.

В клинической медицине ПЦР-диагностика является одним из наиболее востребованных методов анализа в самых разных сферах:

• Прямое определение возбудителя инфекции. Некоторые традиционные методы, такие как иммуноферментный анализ (ИФА), выделяют только белки-маркеры, которые являются продуктом жизнедеятельности возбудителей инфекции, а потому только косвенно указывают на присутствие микроорганизмов. Наличие специфического участка в ДНК, выявленное с помощью ПЦР, безошибочно или почти безошибочно указывает на присутствие конкретной инфекции.
• Высокая специфичность метода . Она обусловлена тем, что в исследуемом материале выявляется фрагмент ДНК, характерный только для конкретного возбудителя инфекции. Специфичность исключает возможность ложных результатов анализа, тогда как в иммунологических методах исследований ошибки вполне вероятны из-за перекрестной реакции антигенов.
• Высокая чувствительность . При помощи ПЦР-диагностики можно выявить присутствие в организме даже единичных клеток вирусов или бактерий в тех случаях, когда обычными методами сделать это практически невозможно. ПРЦ определяет наличие всего 10–100 клеток в пробе, тогда как иммунологическими и микроскопическими тестами можно определить наличие инфекции при количестве клеток не менее 103–105.
• Универсальность . Сходство состава всех ДНК или РНК дает возможность применять универсальные методы лабораторных исследований, диагностируя сразу несколько возбудителей из одной биологической пробы.
• Скорость получения результатов . Поскольку для проведения ПЦР-диагностики не нужен посев и выделение культуры возбудителя, то и большого количества времени на нее не требуется. Весь цикл — от забора биоматериала до получения результатов — занимает 4–5 часов.
• Диагностика латентных инфекций . ПЦР-методом диагностируются трудно культивируемые и некультивируемые формы микроорганизмов, встречающиеся в тех случаях, когда заболевание протекает в скрытой форме.

Методом ПЦР можно выявлять возбудителей инфекции не только в организме человека, но и в почве, воде, продуктах питания.

Тем не менее не стоит думать, что ПЦР-диагностика не имеет недостатков. У нее есть свои ограничения, но их количество настолько незначительно, что не может отрицательно повлиять на популярность и эффективность метода:

• Вероятность амплификации ДНК не только живого, но и погибшего микроорганизма . При проведении ПЦР-диагностики для контроля эффективности лечения необходимо соблюдать определенные требования. В частности, проводить ПЦР нужно после определенного промежутка времени (1–2 месяца), за который происходит полное исчезновение возбудителя инфекции в организме.
• Возможность возникновения перекрестной реакции . Подбор фрагментов ДНК (праймеров) осуществляется на основе знаний о генетическом строении конкретного микроорганизма. Но теоретически такой же фрагмент может присутствовать и у других микроорганизмов, геном которых на сегодняшний день еще не расшифрован. Их присутствие в пробе может привести к ложноположительному результату анализа.
• Изменчивость микроорганизмов . Эта способность возбудителей к мутации иногда приводит к тому, что некоторые их штаммы становятся неуловимыми в процессе ПЦР-анализа.

Чтобы уменьшить риски, разработаны стандарты объемов испытаний тест-систем ПЦР-диагностики, включающие проверку на перекрестные реакции и тестирование всех известных штаммов конкретного возбудителя.

ПЦР-диагностика проводится в специальной лаборатории в несколько этапов.

1. Забор биоматериала . Процедура, предшествующая непосредственному анализу, которая осуществляется в процедурном кабинете соответствующего профиля. Забор делается с помощью стерильного оборудования только в стерильные пробирки. Материалом для исследования могут быть:
   • Эпителиальные соскобы со слизистых оболочек: из уретры, из цервикального канала, со слизистой дыхательных путей и зева, из конъюнктивы. Забор проводится с помощью специального ершика, при этом недопустимо попадание в материал следов крови.
   • Моча . Собираются первые 50 г утренней мочи в стерильную емкость. Материал используется для диагностики мочеполовых инфекций.
   • Мокрота . Используется для ПЦР-диагностики туберкулеза и респираторных форм микоплазмоза и хламидиоза. Мокроту собирают в стерильный флакон в количестве 15–20 мг.
   • Кровь, сыворотка, плазма . С их помощью диагностируются гепатиты, герпес, ВИЧ-инфекция. Для анализа используется венозная кровь (1–1,5 мл), собранная у пациента натощак в стерильную пробирку. Хранить биоматериал можно не более суток при температуре 4°С. Замораживать кровь категорически запрещается.
   • Биологические жидкости . К ним относятся слюна, сок простаты, околоплодная, плевральная, спинномозговая, суставная жидкости. Собираются при помощи пункции с использованием стерильного инструментария в количестве 0,1–1,5 мл в стерильные пробирки.
   • Биоптаты , т.е. материалы, полученные путем биопсии. Обычно на анализ отправляют биоптаты двенадцатиперстной кишки или желудка, чтобы выявить хеликобактерную инфекцию. Объем материала 2–3 мм 3 .
2. Хранение и транспортировка биоматериала . Хранить образцы можно при комнатной температуре не более 2 часов. Если необходимо длительное хранение, то пробы помещают в холодильник с температурой 2–8°С на срок не более одних суток. Допустимо хранение некоторых биоматериалов в течение двух недель в замороженном виде при температуре -20°С. Оттаивание и повторное замораживание проб запрещено. Транспортировка, если она необходима, должна проводиться в специальных термоконтейнерах или термосах с соблюдением всех правил хранения и перевозки биоматериалов.
3. Выделение ДНК из образца . Способ выделения зависит от вида определяемого микроорганизма и от вида биологического образца. Если, например, анализируется соскоб эпителиальных клеток, используется так называемый метод твердофазной сорбции, заключающийся в добавлении в образец специального вещества, концентрации ДНК на сорбенте и его многократной отмывке буферным раствором.
4. Проведение ПЦР . Некоторое количество образца из биологической пробы переносится в специальную микроцентрифужную пробирку. Туда же добавляется амплификационная смесь, имеющая сложный состав, в объеме 25 мл. Пробирки устанавливают в программируемый термостат, и автоматическом режиме проводится амплификация. Время ее проведения зависит от заданной программы и составляет 2–3 часа. Одновременно с опытными пробами проводятся контрольные — положительные , включающие в себя контрольный препарат ДНК исследуемого возбудителя, и отрицательные , не содержащие исследуемую ДНК. Количество циклов амплификации варьирует от 30 до 40, более 40 циклов проводить не рекомендуется, так как это способствует увеличению количества неспецифических продуктов в пробе.
5. Регистрация результатов . Фрагмент ДНК, характерный для возбудителя инфекции, выделяют методом электрофореза в присутствии специального вещества — бромистого этидия. Его соединение с фрагментами ДНК дает светящиеся полосы при облучении ультрафиолетовым излучением. Образец помещают в камеру для электрофореза и в течение 35–40 минут проводят разделение продуктов амплификации. После этого образец просматривают в ультрафиолетовом свете — наличие оранжевой светящейся полосы свидетельствует о положительном результате.
6. Интерпретация результатов исследования . Результат ПЦР-диагностики может быть либо положительным, либо отрицательным. Положительный результат говорит о том, что в организме человека обнаружены следы инфекции, причем именно в данный момент времени. Количественный результат ПЦР-анализа оценить может только врач, они индивидуальны для разных типов инфекций. На основании количественного результата можно сделать вывод о степени активности заболевания и определить характер лечения.

Цена ПЦР-диагностики зависит от того, на какую конкретно инфекцию пациент планирует проверяться, от вида анализируемого материала, методики тестирования — качественной или количественной. Цена за определение одной инфекции составляет от 200 до 800 рублей в разных клиниках. Кроме того, к стоимости анализа добавится и плата за забор биоматериала — около 400 рублей. Средняя стоимость ПЦР-диагностики разных видов приведена в таблице 1.

Таблица 1 . Примерные цены на анализы ПЦР в Москве

Название анализа	Цена, руб.
Определение ДНК хламидия	750
Определение ДНК микоплазмы хоминис	540
Определение микоплазмы гениталиум	350
Определение ДНК уреаплазмы	350
Гонококк, определение ДНК	350
Определение ДНК герпеса (разные типы)	350–600
Определение ДНК кандиды	570
Вирус краснухи, определение РНК	800
Дифференцированное определение ДНК ВПЧ (разные типы)	350–1900 [1]