Техника безопасности при работе с инфицированным материалом микробиология
Работы в диагностических лабораториях сопряжены с неизбежным контактом персонала с различными видами биологических материалов, что приводит к риску заражения возбудителями инфекционных заболеваний, прежде всего вирусами ВИЧ и вирусных гепатитов В и С.
В этой связи во всех клинико-диагностических лабораториях должен выполняться комплекс противоэпидемических мероприятий, регламентируемый Приказами и Положениями Минздрава России.
Вне зависимости от вида лаборатории и ее подчиненности непосредственная ответственность за организацию и соблюдение противоэпидемического режима возлагаются на заведующего лабораторией и главного врача ЛПУ.
Все мероприятия, направленные на предупреждение биологической опасности в условиях лаборатории, можно подразделить на 3 группы:
• организационные меры;
• применение индивидуальных и коллективных защитных средств;
• соблюдение дезинфекционного режима.
В каждой лаборатории выделяется ответственный за технику безопасности, который обязан проводить соответствующий инструктаж среднего и младшего медицинского персонала при приеме на работу, а в последующем — не реже одного раза в квартал. О прохождении инструктажа делается отметка в специальном журнале. Для облегчения обучения младшего персонала в лабораториях с учетом местных условий составляются памятки по мерам безопасности, которые используются при периодическом инструктаже, а также размещаются непосредственно на рабочих местах.
Помещения КДЛ можно использовать только по их прямому назначению, проведение в них каких-либо других работ не разрешается.
Клинико-диагностическая лаборатория должна быть обеспечена водопроводом, горячим водоснабжением, канализацией, центральным отоплением.
Помещения лаборатории должны быть оборудованы приточно-вытяжной вентиляцией с механическим побуждением. Вентиляция во всех помещениях должна включаться до начала работы.
Независимо от наличия приточно-вытяжной вентиляции в лабораториях должны быть легко открывающиеся форточки, кроме специальных боксов бактериологической лаборатории.
В помещениях для проведения исследований мочи и кала, биохимических, серологических и гормональных исследований следует устанавливать вытяжные шкафы.
При размещении оборудования особое внимание уделяют аппаратам — потенциальным источникам биологического аэрозоля. По этой причине рекомендуется размещать центрифуги в отдельных помещениях, в которых не предусматривается постоянное пребывание персонала.
Ядовитые средства должны храниться в отдельной комнате в сейфах под замком. Ключи должны храниться у лица, ответственного за их хранение, — у заведующего КДЛ.
Индивидуальные и коллективные защитные средства
Смена спецодежды в обычных КДЛ осуществляется не реже 2 раз в неделю, а при возникновении аварийных ситуаций — немедленно. В случае попадания на одежду биологического материала, перед тем как снять ее, загрязненное место обрабатывают дезинфицирующим раствором. Стирка одежды на дому категорически запрещена.
Резиновые перчатки обязательны для использования при работе не только с кровью, но и с любым биологическим материалом. Необходимо избегать уколов и порезов. Все повреждения кожи на руках должны быть закрыты лейкопластырем.
В случае загрязнения кожных покровов кровью или другими биологическими жидкостями следует немедленно обработать их в течение 2 минут тампоном, обильно смоченным 70%-ным спиртом, вымыть под проточной водой с мылом и вытереть индивидуальным тампоном.
При загрязнении перчаток кровью их протирают тампоном, смоченным 3%-ным раствором хлорамина, 6%-ным раствором перекиси водорода.
При подозрении на попадание крови на слизистые оболочки их немедленно обрабатывают струей воды, 1%-ным раствором борной кислоты или вводят несколько капель нитрата серебра; нос обрабатывают 1 %-ным раствором протаргола; рот и горло прополаскивают 70%-ным спиртом или 1%-ным раствором перманганата калия.
Запрещается пипетирование крови ртом; следует использовать автоматические пипетки, а при их отсутствии — резиновые груши.
Важный этап в предупреждении внутрилабораторного заражения — грамотная транспортировка биологического материала в лабораторию. Материал должен быть помещен в надежно закрывающуюся посуду, сопроводительная документация должна прикладываться в отдельном целлофановом пакете. Для доставки материала в центральную диагностическую лабораторию из отделений больницы используют специальные металлические или пластмассовые закрывающиеся ящики. После разгрузки они обязательно обрабатываются дезинфицирующими растворами.
Распаковка материала, доставленного в лабораторию, проводится в специально отведенном для этого месте. Персонал работает в перчатках, а емкости с материалом помещают на эмалированные или металлические подносы.
[youtube.player]Учебно – методический комплекс
Раздел 3
Решение проблем пациента посредством сестринского ухода
Разработала преподаватель Дрючина Н.В.
на заседании ЦМК
Оренбург 2013 г.
Лекция.
Студент должен иметь представление:
- о работе клинико -диагностической лаборатории ЛПУ;
- о работе эндоскопического кабинета.
Студент должен знать:
- основные виды лабораторных исследований;
- цели предстоящих лабораторных исследований;
- технику безопасности при работе с биологическим материалом;
- основные виды инструментальных методов исследования;
- цели предстоящих инструментальных исследований;
- подготовку пациента к рентгенологическим и эндоскопическим методам исследования пищеварительной и мочевыделительной системы;
-подготовку пациента к ультразвуковым методам исследования органов брюшной полости и органов малого таза;
- должностные обязанности медицинской сестры эндоскопического кабинета.
План лекции
1.Основные виды и цели предстоящих лабораторных исследований;
2.Техника безопасности при работе с биологическим материалом;
3.Цели предстоящих инструментальных исследований;
4.Основные виды инструментальных методов исследования;
5.Подготовка пациента к рентгенологическим и эндоскопическим методам исследования пищеварительной и мочевыделительной системы;
6.Подготовка пациента к ультразвуковым методам исследования органов брюшной полости и органов малого таза;
7 Должностные обязанности медицинской сестры эндоскопического кабинета.
Лекция.
1)Клинико-диагностическая лаборатория (КДЛ) - обязательное отделение любой поликлиники или больницы, и, чем крупнее лечебное учреждение, тем более многопрофильна его лаборатория. Современный врач, практически любого профиля, не может работать без точных качественных показателей состояния систем и органов, обмена веществ, защитных резервов организма и т.д., так как на их основе устанавливается диагноз, контролируется течение заболевания и эффективность терапии.
Современные методы медицинских исследований могут быть разделены на две основные группы – лабораторные и инструментальные.
Лабораторные методы состоят в исследовании химических и физических свойств биологических жидкостей и тканей, проб окружающей среды (смывы с поверхностей, пробы воды, почвы, воздуха и др.), а также исследование и идентификация микроорганизмов (бактериология и вирусология), с целью выявления патогенных и условно-патогенных для человека и животных микроорганизмов и разработки методов специфической профилактики и лечения инфекционных болезней.
Основные виды и цели предстоящих лабораторных исследований:
- Взятие мазка из зева и носа.
Определение флоры в полости носа и зева с лечебной, диагностической целью и с целью выявления бактерионосительства.
- Общий анализ мокроты
ЦЕЛЬ: Определение степени воспалительного процесса в бронхолёгочной системе.
- Анализ мокроты на бактериологическое исследование.
ЦЕЛЬ: Определение микрофлоры и чувствительности к антибиотикам
- Анализ мокроты на микобактерии туберкулеза
- Общий анализ мочи.
Определение функционального состояния мочевыделительной системы.
- Анализ мочи по Нечипоренко.
Количественное определение содержания форменных элементов в моче (лейкоцитов, эритроцитов, цилиндров).
- Анализ мочи по Амбурже.
Количественное определение содержания форменных элементов в моче (лейкоцитов, эритроцитов, цилиндров).
- Анализ мочи на сахар.
Подтверждение диагноза сахарного диабета.
- Анализ мочи для бактериологического исследования.
Определение характера и интенсивности бактериурии, определение степени микробной обсемененности почек.
- Анализ мочи по Зимницкому.
Определение концентрационной способности почек (плотности мочи).
- Анализ мочи на диастазу.
Определение функционального состояния поджелудочной железы
-Копрологическое исследование кала.
Определение переваривающей способности различных отделов пищеварительного тракта.
- Кал на яйца гельминтов.
Подтверждение глистной инвазии;
- Кал на скрытую кровь.
Выявление скрытого кровотечения из органов желудочно-кишечного тракта.
- Кал на простейших.
Выявление инвазии простейших
- Кал для бактериологического исследования.
Анализ кишечной микрофлоры, выявление больных или бактерионосителей дизентерией, сальмонеллезом, брюшным тифом.
- Взятие крови из вены для биохимического исследования.
ЦЕЛЬ: диагностическая (определение в крови общего белка и белковых фракций, протромбина, фибриногена, билирубина, холестерина, остаточного азота, сулемовую и тимоловую пробы и др) - для подтверждения врачебного диагноза.
-Взятие крови из вены для исследования на ВИЧ
ЦЕЛЬ: определение наличия антител к вирусу иммунодефицита человека.
-Взятие крови из вены для исследования на RW (реакция Вассермана)
- Общий анализ крови
ЦЕЛЬ: изучение количественного и качественного состава форменных элементов крови:
определение количества гемоглобина;
определение числа эритроцитов;
расчет цветового показателя;
определение числа лейкоцитов и соотношение отдельных форм
определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ).
У некоторых больных в зависимости от характера заболевания про-
изводят дополнительные исследования: подсчет ретикулоцитов, тром-
боцитов, определение времени свертывания.
Правила техники безопасности при работе с биологическим материалом.
1. Избегайте непосредственного контакта с биологическими жидкостями. Работайте в резиновых перчатках. Не допускайте боя лабораторной посуды и травм осколками стекла.
2. Обеззараживайте выделения пациентов перед сливом в канализацию.
3. Тщательно дезинфицируйте лабораторную посуду, судно и мочеприемники, петли для забора кала и др.
При попадании выделений пациента на руки следует вымыть руки с мылом, а затем обработать в течение 2-х минут тампоном, смоченным 70% спиртом, и через пять минут ополоснуть проточной водой.
При попадании биологических жидкостей в глаза следует промыть их проточной водой и закапать 1% раствор сульфацила натрия.
ЗАПОМНИТЕ!
В экскрементах, носоглоточных выделениях, мокроте, моче и рвотных массах концентрация ВИЧ крайне низка или ВИЧ не обнаруживается, в связи с этим риск инфицирования при контакте с указанным биологическим материалом возможен лишь при наличии примеси крови.
Однако соблюдать общие меры предосторожности необходимо в любом случае, так как это позволяет предотвратить передачу от пациентов других инфекционных агентов.
Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:
[youtube.player]В-лимфоциты.
Составляют 15-20% от всех лимфоцитов в перефирической крови, Отвечают за развитие гумморального иммунитета. Созревание происходит в костном мозге из полипотентной стволовой клетки. Дальнейшая дифференцировка под влиянием костномозгового гормоноподобного пептида идет образование в К-клетки и НК-клетки (антигено-зависимые и антиген не зависимые) тоансформируется в плазматическую клетку, способную.
Профилактика профессиональных заражений, связанных с работой с инфицированным материалом, является одной из важнейших задач в работе лаборанта. Меры профилактики сводятся к максимальному предотвращению контактов кожи и слизистых оболочек с кровью и другими биологическими жидкостями, для чего необходимо придерживаться следующих правил:
1. Работать в спецодежде: халате, шапочке, сменной обуви, резиновых перчатках. При угрозе разбрызгивания крови работать в очках, маске, клеенчатом фартуке.
2. Повреждения на коже (порезы, царапины) перед работой нужно обязательно заклеить лейкопластырем.
3. Запрещается пипетирование биологического материала ртом. Обязательно использовать автоматические пипетки или резиновые груши.
4. Запрещается есть, пить, курить и пользоваться косметикой на рабочем месте.
5. В случае загрязнения рук кровью их следует немедленно обработать
тампоном, смоченным 1 % раствором хлорамина или 70 % раствором спирта в течение 2 минут, а затем вымыть проточной водой с мылом и протереть индивидуальным полотенцем.
6. При загрязнении кровью перчаток, их протирают тампоном, смоченным в 3 % растворе хлорамина или 6 % перекисью водорода.
7. При загрязнении стола кровью, его немедленно протирают дезраствором дважды с интервалом 15 минут.
8. После работы перчатки дезинфицируют в течении 60 минут в одном из дезинфицирующих растворов.
9. После работы поверхность рабочего стола обязательно продезинфицировать промыть ветошью смоченной в одном из дезрастворов.
10. Лабораторный инструментарий, иглы, капилляры, предметные стекла, кюветы ФЭКа, пипетки, резиновые груши и т.д. после работы должны подвергаться дезинфекции и стерилизации.
11 .Для дезинфекции можно применять следующие растворы:
• Перекись водорода 6 %
• Моющий раствор (0,5 % раствор СМС и 6 % перекись водорода)
• Осветленный раствор хлорной извести 0,6 %
• Дезоксон-1 0,5% и т.д.
• В настоящее время в лаборатории могут применяться другие, более современные дезинфицирующие средства.
В лаборатории нужно соблюдать следующие общие требования:
1. Работать только в спецодежде - халате, колпачке и сменной обуви, при необходимости пользоваться резиновыми перчатками, защитным клеенчатым фартуком, очками или масками.
2. Приступать к работе только после вводного инструктажа и первичного инструктажа на рабочем месте. Повторный инструктаж проводится не реже 1 раза в 6 месяцев.
3. Перед работой внимательно ознакомиться с методикой проведения анализа и в соответствии с этим подготовить свое рабочее место.
4. Перед работой следует убедиться в том, что:
• правильно уяснена методика,
• правильно подготовлены приборы и оборудование,
• взятые вещества соответствуют методике анализа,
• все расставлено так, чтобы было удобно достать, не вставая с места, и самое необходимое находится в пределах оптимальной рабочей зоны, соответствующей размаху согнутой в локтевом суставе руки.
5. Работать только на закрепленном месте.
6. Рабочее место содержать в чистоте, не загромождать его не нужными предметами.
7. Во время работы соблюдать тишину, порядок и чистоту.
8. Не допускать торопливости, невнимательности, беспорядочности и неряшливости.
9. Не покидать рабочее место во время проведения анализа, не оставлять без присмотра включенные приборы.
10. Запрещается выполнять работы не связанные с непосредственной работой
11 .Соблюдать правила ТБ при работе с кислотами, щелочами, летучими и ядовитыми веществами, инфицированным материалом, нагревательными приборами.
12. Соблюдать правила противопожарной безопасности.
13. Не наклоняться близко над склянками реактивами (правильно их нюхайте!).
14.Работать с реактивами только над столом.
15.Пипетировать вещества только пипеткой с грушей или дозатором.
16. Запрещено выливать вещества в канализацию, для этого предусмотрены специальные банки.
17.Не пробовать на вкус в лаборатории любые вещества, даже если они кажется вам знакомыми.
18.В лаборатории запрещается принимать пищу!
19.После работы обязательно вымыть руки с мылом!
20.После работы убрать все приборы и реактивы по местам, выключить все электроприборы, закрыть форточки, краны водоснабжения и протереть рабочий стол.
21. Уметь оказывать первую медицинскую помощь.
| | | следующая лекция ==> | |
| Лимфоциты | | | Управление* - это интегрированный процесс планирования, организации, координации, мотивации и контроля, необходимый для достижения целей организации |
Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет
[youtube.player]Микробиологические лаборатории организуются при больницах и санитарно-эпидемиологических станциях (СЭС). Существуют также специальные лаборатории, в которых работают с возбудителями особо опасных инфекций, вирусологические лаборатории и др. Микробиологические лаборатории занимаются бактериологической диагностикой инфекционных заболеваний, исследуя испражнения, мочу, кровь, мокроту больных с целью обнаружения патогенных микроорганизмов — возбудителей заболевания. Помимо этого, в микробиологических лабораториях проводят санитарно-бактериологические исследования воды, воздуха, смывов с окружающих предметов, рук, пищевых продуктов для обнаружения санитарно-показательных микроорганизмов, указывающих на загрязнение патогенными микробами. При необходимости в объектах внешней среды определяют наличие патогенных микробов.
В связи с тем что в микробиологических лабораториях работают с заразным материалом, помещение их должно быть изолировано от других больничных помещений, пищеблоков, жилых комнат. В состав лаборатории входят:
1) лабораторные комнаты для проведения микробиологических исследований;
3) препараторская для подготовки лабораторной посуды, приготовления питательных сред и других вспомогательных работ;
5) комната, где производят прием материала и выдачу результатов исследования. Лабораторных животных, необходимых для постановки биологических проб, содержат в специальном изолированном помещении — виварии. В лабораториях, где объем работ невелик, можно объединить моечную и препараторскую, исключить комнату для приема анализов и т. д.
Оборудование микробиологической лаборатории
· Термостат. Аппарат, в котором поддерживается постоянная температура.
· Микроанаэростат. Аппарат для выращивания микроорганизмов в анаэробных условиях.
· Холодильник. Используется в микробиологических лабораториях для хранения культур микроорганизмов, питательных сред, крови, вакцин, сывороток и прочих биологически активных препаратов при температуре около 4°С.
· Центрифуги. Применяются для осаждения микроорганизмов, эритроцитов и других клеток, для разделения неоднородных жидкостей (эмульсии, суспензии).
· Сушильно-стерилизационный шкаф (печь Пастера). Предназначена для воздушной стерилизации лабораторной посуды и других материалов.
· Стерилизатор паровой (автоклав). Предназначен для стерилизации паром под давлением.
Правила техники безопасности в лаборатории с бытовым газом, спиртовкой и сухим горючим
· В связи с опасностью взрыва газовоздушной смеси, применение бытового газа для нагрева в лабораториях допускается в крайних случаях, когда отсутствуют электронагревательные приборы.
· Перед зажиганием спиртовки нужно убедиться, что корпус ее исправленный, фитиль выпущен на нужную высоту и развернутый, а горловина и черенок фитиля сухие.
· Зажженную спиртовку не переносить с места на место; нельзя зажигать одну спиртовку от другой.
· Тушить спиртовку нужно накрывая пламя колпачком. Задувать пламя запрещается.
· В спиртовках используется только этиловый спирт; пользоваться бензином или другими горючими жидкостями запрещается.
· Брикеты (таблетки) сухого горючего иногда могут использоваться для нагрева. Зажигать их следует на керамических пластинках, тушить – колпачками для спиртовок или керамическими тиглями. Брикеты, которые не догорели, после тушения надо убрать в вытяжной шкаф.
· Нагревание реакционных смесей в пробирках и других стеклянных сосудах нужно проводить осторожно, предварительно насухо вытереть внешние стенки сосуда и, не допуская разбрызгивания смеси из сосуда. Горловина сосуда должна быть направлена в сторону, как от себя, так и от тех, кто работает рядом. Пробирку следует держать под наклоном. Нельзя наклоняться над жидкостью, которая нагревается, так как иногда ее может выкипать из сосуда. При нагревании пробирки над спиртовкой необходимо использовать специальный держатель для пробирок.
· При возникновении пожара, прежде всего надо выключить все нагревательные приборы, затем тушить пламя. Его нельзя задувать. Если горят органические вещества, не следует заливать пламя водой. Используйте песок, пожарные одеяла, огнетушители (лучше углекислотные).
· При незначительных ожогах (горячими предметами, веществами или паром) место ожога необходимо обработать спиртом или крепким раствором перманганата калия, а при более тяжелых ожогах следует немедленно обратиться к врачу.
Правила техники безопасности в лаборатории при работе с биообъектами
· Необходимо четко выполнять инструкции к лабораторным занятиям.
· В лаборатории запрещается принимать пищу, пить воду.
· Работу с биологическим материалом проводить только инструментами.
· При случайном попадании биологического материала (особенно микроорганизмов) на стол, руки, нужно провести обработку дезинфекционным раствором (например, хлорамином).
· После работы необходимо тщательно вымыть руки с использованием дезинфекционных средств (детергентов).
Папиллярные узоры пальцев рук - маркер спортивных способностей: дерматоглифические признаки формируются на 3-5 месяце беременности, не изменяются в течение жизни.
Организация стока поверхностных вод: Наибольшее количество влаги на земном шаре испаряется с поверхности морей и океанов (88‰).
Поперечные профили набережных и береговой полосы: На городских территориях берегоукрепление проектируют с учетом технических и экономических требований, но особое значение придают эстетическим.
[youtube.player]Цель занятия. Ознакомление с организацией микробиологической лаборатории, правилами и техникой безопасности при работе. Ознакомление с основными и наиболее часто употребляемыми питательными средами и методами их приготовления.
Задание: Ознакомиться с устройством микробиологической лаборатории, проработать положения техники безопасности при работе в ней. Ознакомиться с техникой приготовления основных питательных сред, определить показатель их кислотности рН. Дайте ответы на вопросы к лабораторной работе.
Столы для работы располагаются у окон так, чтобы было максимум света и удобств. Вдоль стола, посередине, ставят штативы для пробирок, флаконы или капельницы с красителями в штативах-колодках, спиртовки или газовые горелки. По этому же ряду монтируют освещение, которое должно приближаться к естественному или быть матовым. Для занятий по проведению биологических исследований, вскрытию трупов мелких животных или органов желательно иметь дополнительно небольшой стол.
Микробиологическая лаборатория оборудована аппаратурой и включает следующие помещения: моечную, стерилизационную, средоварочную, бокс, препараторскую, термостатную, комнату для оборудования, виварий для содержания подопытных животных и др. В микробиологической лаборатории хранятся культуры микроорганизмов,
Моечная должна иметь столы, раковины, электрические или газовые плиты, сушильный, вытяжной и другие шкафы. Вытяжной шкаф необходим для удаления паров воды и некоторых реактивов, используемых при мойке стекол и посуды. Пол и стены должны быть облицованы плиткой,
Стерилизационная комната. В ней может быть один или два паровых стерилизатора и стол. При наличии двух паровых стерилизаторов занятия в нескольких подгруппах можно проводить без длительного перерыва, а во время повреждения одного из них — пользоваться исправным.
В стерилизационной комнате должна быть хорошая вентиляция для удаления остатка пара, выходящего после открывания стерилизатора. Пар из стерилизатора, до подъема давления, выводят через резиновую трубку во внешнюю среду или направляют в ведро с водой. Дверь (неостекленная) и окна должны открываться наружу.
Средоварочная — комната для приготовления питательных сред. Стены такой комнаты должны быть облицованы плиткой или покрашены масляной краской. Пол выстлан плиткой или покрыт линолеумом.
В средоварочном помещении необходимы: газовая или электрическая плита, электроплитки, ящики с отсеками для сред в пробирках, столы, шкафы для хранения компонентов сред, мясной воды и некоторых сред в колбах, холодильник.
Термостатная. В ней могут быть термостаты разных форм и размеров. Для выращивания плесневых грибов температура в термостате должна быть 20—25 °С, для большинства сапрофитов — 25—30 °С, для возбудителей инфекционных болезней — 35—37 °С, для термофилов — 40—45 °С и т. д.
Препараторская — это место для подготовки оснащения к лабораторно-практическим занятиям. Здесь обычно располагается холодильник, дистиллятор, весы разные, центрифуга и другое.
Моют бокс влажным способом с применением дезинфицирующих средств: 2—3 %-м раствором натрия гидрокарбоната (соды питьевой), 3—5%-м раствором фенола и др. Воздух стерилизуют бактерицидными лампами (БУВ-15, БУВ-30 и др.), которые излучают ультрафиолетовые лучи длиной 254 им.
В зависимости от степени загрязненности воздуха, стерилизация таким способом проводится от 30 мин до нескольких часов. Нахождение в комнате с включенной бактерицидной лампой нежелательно, так как ультрафиолетовые лучи вызывают острое воспаление роговицы глаз. Для предупреждения ожога роговицы глаз необходимо пользоваться защитными очками.
Виварий — помещение, где содержат белых мышей, белых крыс, морских свинок, кроликов и других лабораторных животных. Таких животных чаще используют в научно-исследовательской работе, реже на занятиях, поэтому там, где нет условий, виварий обычно отсутствует.
Реактивы и некоторые биологические препараты хранят в подвальном помещении или в темном стенном шкафу, где сухо, невысокая температура и нет резких ее колебаний в течение года.
Правила и техника безопасности при работе в микробиологической лаборатории
Заходить в микробиологическую лабораторию и работать там только в халате. Не вносить в лабораторию посторонних вещей.
Работать на одном и том же месте и пользоваться закрепленным оборудованием. Соблюдать чистоту и опрятность при работе.
Во избежание заражения во время перерывов не курить и не принимать пищу. На столе должно быть только необходимое для выполнения задания.
По окончании занятий рабочее место и оборудование приводить в порядок. Для предотвращения взрыва не зажигать одну спиртовку от другой, использовать для этой цели спички, зажигалку. Не соприкасаться металлическими и другими предметами проводами и контактными частями электросети.
Без ведома преподавателя или обслуживающего персонала не включать электроприборы и аппаратуру.
Соблюдать правила обращения с химическими и другими реактивами. Уходя из лаборатории, вымыть руки.
[youtube.player]Лабораторная работа № 1
Структура и материально-техническое обеспечение лаборатории микробиологии. Лабораторное оборудование, применяемое в микробиологических исследованиях
Цель работы. Ознакомление с основными подразделениями и размещением лаборатории микробиологии.
Материалы и оборудование: пробирки бактериологические, шпатели Дригальского, пастеровские пипетки, ватно-марлевые пробки, штативы для пробирок, чашки Петри, колбы на 500 и 1000 мл, мерные цилиндры на 100 мл, пипетки градуированные на 1 и 10 мл, ручные дозаторы, воронки, фильтровальная бумага, вата, марлевые салфетки, индикаторная бумага для определения pH, дистиллированная вода, сухие готовые питательные среды, химические реактивы, красители, горелки газовые или электроплитки, водяные бани, весы электронные, термостат, автоклав, центрифуга, pH-метр, дистиллятор, настольная лупа.
Задание:
1. Ознакомиться с основными подразделениями и размещением лаборатории микробиологии.
2. Изучить лабораторное оборудование, основные принципы работы приборов.
Теоретическая часть
Различают микробиологические лаборатории нескольких типов: учебные, производственные и научно-исследовательские. Организация работы в лабораториях разных типов определяется стоящими перед ними задачами. Учебные лаборатории призваны знакомить будущих специалистов – микробиологов с основными методами диагностики, профилактики и терапии инфекционных болезней рыб.
Лаборатория микробиологии включает группы, занимающиеся изучением инфекционных болезней рыб. При проведении исследований большое значение имеет материально-техническое оснащение лаборатории. Кроме того, серьезные требования предъявляются к ее размещению.
Лаборатория микробиологии состоит из нескольких помещений, различающихся по целевому назначению, оборудованию и режиму работы. При этом особое значение имеет устройство подразделения лаборатории, в котором осуществляются бактериологические и микологические исследования. В составе лаборатории микробиологии выделяют следующие помещения.
1. Комната кабинетного типа, где проводят анализ данных эпизоотологического исследования, обработку результатов лабораторных работ и при необходимости – некоторые лабораторные исследования, например, микроскопию фиксированных препаратов.
2. Комната для лабораторных работ. Здесь исследуют рыбу (осмотр, вскрытие, взятие патологического материала), изучают патологический материал и выделенных возбудителей.
3. Препараторская. В этой комнате размещают основное оборудование лаборатории. Здесь же находятся реактивы, необходимые в работе лаборатории.
4. Аквариальная служит для проведения исследований, связанных с выяснением патогенной значимости выделенных возбудителей (постановка биологической пробы) и подбором эффективных профилактических и лечебных средств.
Микробиологический отдел лаборатории включает ряд помещений, где проводят работу с микроорганизмами. Кроме основного рабочего помещения лаборатория имеет стерилизационную, где размещены автоклавы и сушильные шкафы,бокс, моечную, комнату для приготовления питательных сред и реактивов.
Для проведения стерильных работ при изучении возбудителей инфекционных болезней рыб бокс может быть оборудован в комнате для лабораторных работ. Воздух и поверхность предметов в боксе должны быть стерильны. С этой целью помещение бокса герметизируют, а бокс оборудуют бактерицидными лампами. Бокс служит для работы с культурами микроорганизмов и представляет собой небольшую изолированную комнату, разделенную перегородкой на две части (собственно бокс и предбоксник). Оборудование бокса состоит из стола, стула, газовой горелки (или спиртовки) и бактерицидной лампы настенного или настольного типа. Удобно иметь в боксе приставной столик, на котором размещают необходимые во время работы предметы.
Рабочее место, где непосредственно проводится работа с культурами микроорганизмов, требует особенно тщательной обработки. Рабочий стол до и после окончания работы дезинфицируют 70 %-ным раствором этилового спирта или растворами хлорсодержащих препаратов (хлорамина Б и других).
Воздух в лаборатории наиболее просто дезинфицировать проветриванием. Продолжительная вентиляция помещения (в течение 30-60 мин) приводит к резкому снижению количества микроорганизмов в воздухе, особенно при значительной разнице в температуре между наружным воздухом и воздухом помещения. Более эффективный и надежный способ дезинфекции воздуха – облучение ультрафиолетовыми лучами с длиной волны от 200 до 400 нм. Эти лучи обладают высокой антимикробной активностью и могут вызвать гибель не только вегетативных форм микроорганизмов, но и спор.
В бокс входят через предбоксник, где надевают чистый халат. Там же размещают шкаф для хранения стерильной посуды.
При отсутствии отдельного помещения для бокса используют ламинарные шкафы или боксы настольные (рисунок 1).
Рисунок 1 – Оборудование для проведения стерильных работ в лаборатории
(а – ламинарный шкаф, б – настольный бокс)
Бокс может быть изолированным от общего помещения (рисунок 2)
Рисунок 2 – Изолированный бокс
Правила работы и техника безопасности в микробиологической лаборатории
Каждый сотрудник лаборатории должен иметь закрепленное за ним рабочее место. Каждое рабочее место имеет обязательный комплект оборудования: спиртовую или газовую горелку; закрывающиеся контейнеры с дезинфицирующим раствором; банку с дезинфицирующим раствором для использованных предметных и покровных стекол; плотно закрывающуюся банку для хранения чистых, обезжиренных стекол в смеси Никифорова; набор бактериологических петель разного диаметра; лупу 5-кратного увеличения; бинокуляр и микроскоп.
В ящиках стола находится дневной запас стерильных пастеровских и градуированных пипеток разного объема, резиновая груша или пипеточные дозаторы.
Перед началом работы следует надеть халат, который хранится отдельно от верхней одежды.
При работе со спиртовкой необходимо иметь под рукой одеяло или плотную ткань для быстрого тушения огня в случае аварии.
Насасывание в пипетки растворов химических реактивов и жидкостей, содержащих возбудителей инфекционных заболеваний рыбы, производят с помощью резиновой груши или автоматических дозаторов. Насасывание ртом не допускается.
Материал для исследования доставляют в лабораторию в контейнерах, биксах или сумках-холодильниках. Ёмкости с жидкими материалами закрывают пробками, исключающими выливание содержимого во время транспортирования. Дно контейнеров, содержащих емкости с патологическим материалом, покрывают адсорбирующим материалом (марлевая салфетка, ткань и др.). Не допускается доставка материала в хозяйственных сумках, чемоданах и других предметах личного пользования. Сопроводительную документацию к направляемому материалу прилагают отдельно, в полиэтиленовом пакете.
Для посевов используют бактериологическую петлю, замкнутую в непрерывное кольцо, с плечом не более 6 см. Допускается применение одноразовых промышленно изготовленных петель с большей длиной плеча.
| ЗАПРЕЩАЕТСЯ прикасаться руками к исследуемому материалу и культурам микробов. Все необходимые операции с названными объектами проводятся только с использованием специальных инструментов. Запрещается переливать жидкости, содержащие живые клетки микроорганизмов, из одного сосуда в другой; оставлять на столах нефиксированные мазки, открытую посуду с посевами. |
По окончании работы все посевы убирают в термостаты и обязательно проводят дезинфекцию рабочих поверхностей столов.
Использованные в работе с инфицированным материалом стеклянные шпатели, пастеровские и градуированные пипетки погружают в емкость с дезинфицирующим раствором. Отработанный заразный материал помещают в специальные закрывающиеся контейнеры и сдают для дальнейшего обеззараживания в автоклавах.
Каждый сотрудник лаборатории должен быть обеспечен индивидуальной рабочей одеждой: медицинскими халатами, сменной обувью, одноразовыми перчатками в соответствии с действующими правилами. До проведения исследований в предбокснике рабочий халат снимают и для работы в боксе надевают новый халат.
Смена рабочей одежды проводится по мере загрязнения, но не реже одного раза в неделю. Перед сдачей в стирку защитную одежду обеззараживают.
В лаборатории необходимо хранить как минимум недельный запас дезинфицирующих средств. Вновь поступающие на склад серии дезинфицирующих средств, следует контролировать на содержание действующего вещества. На емкости с дезинфицирующим раствором должны быть указаны его название, концентрация и дата приготовления.
Автоклавирование проводится персоналом, имеющим свидетельство об окончании специальных курсов.
При возникновении аварийных ситуаций, таких как розлив инфицированного материала, в случае разбивания пробирок и чашек Петри с посевами, а также стеклотары в связи с перепадом температур при работе на автоклаве немедленно прекращают работу с культурами микроорганизмов и ставят в известность руководителя лаборатории. Все открытые части тела обрабатывают дезинфицирующим раствором или 70 % раствором этанола. При попадании инфицированного материала на слизистые оболочки их немедленно обрабатывают: глаза – 1 % раствором борной кислоты, несколькими каплями 1 % раствора азотнокислого серебра или струей воды; в нос закапывают, а рот и горло прополаскивают 0,05 % раствором перманганата калия или 1 % раствором борной кислоты. При аварии, приведшей к повреждениям кожных покровов, перчатки (если работа проводилась в них) обрабатывают дезинфицирующим раствором, снимают их, из ранки выдавливают кровь, руки обрабатывают 70 % раствором этанола, протирают их тампоном не менее 2 мин, затем моют водой с мылом, ранку смазывают раствором йода.
После обеззараживания места аварии защитную одежду замачивают в дезинфицирующем растворе.
Для ликвидации последствий аварии, а также профилактики возможного поражения сотрудников в лаборатории необходимо иметь аптечку для оказания экстренной медицинской помощи, запас дезинфицирующих средств, средства индивидуальной защиты (СИЗ), емкости для замачивания СИЗ, которые хранят в специально отведенном месте.
Аптечка экстренной помощи должна включать 70 % этиловый спирт, раствор йода, сухие навески перманганата калия, нитрата серебра и борной кислоты, которые в случае аварии растворяют в мерном объеме дистиллированной воды для получения требуемых концентраций дезинфицирующих средств, стерильную дистиллированную воду, глазные пипетки, ножницы, перевязочные средства, бактерицидный пластырь.
Лабораторное оборудование
Оборудование, применяемые в лаборатории микробиологии, делят на группы общего и специального назначения. Специальное оборудование применяют при определённых методах исследования: бактериологических, вирусологических, микологических, токсикологических. Оборудование общего назначения используют при разных методах исследования; оно включает микроскопическую технику, устройства для поддержания температуры, аппаратуру для очистки воды, стерилизаторы, центрифуги, pH-метры, приборы для взвешивания.
Термостат
Для выращивания бактерий и грибов, культивирования вирусов, изучения иммунитета и гистологических исследований необходимо выдерживать материал при постоянной температуре. Приборы, которые автоматически поддерживают определенную температуру воздушной или водной среды в рабочей камере, называют термостатами (рисунок 3).
Рисунок 3 – Лабораторный суховоздушный термостат
Стенки прибора для улучшения теплоизолирующих свойств делают двухслойными. Между стенками находятся воздух или вода.
Для сушки и стерилизации лабораторной посуды применяют сушильные шкафы. Сушильный шкаф принципиально устроен так же, как термостаты на 25-60 °С, но приспособлен для создания более высоких температур (200 °С).
Водяные бани и термостаты служат для поддержания определенной температуры водной среды. Во внутренней камере этих приборов находится жидкость, в которую помещают штатив с пробами. Регулировка температуры воды от 30 до 100 °С осуществляется автоматически с помощью контактного термометра, соединенного с электронагревателями. На верхней крышке погружного термостата смонтирован двигатель, приводящий в движение мешалку и насос для перекачки подогретой воды в другие емкости. Поддержание стабильной температуры в открытых емкостях от 25 до 85 °С может быть осуществлено также с помощью погружного термостатирующего устройства УТП-1. Устройство состоит из двух разобщенных блоков: блока нагрева и перемешивания и блока управления.
При отсутствии автоматических нагревающих приборов используют электроплитку, на которую устанавливают металлическую емкость с водой. Пробирки с пробами и пробирку с термометром помещают в металлическую сетку или штатив и погружают в воду. Затем температуру в бане доводят до необходимой величины, следя за показаниями термометра. Температуру поддерживают на определенном уровне, включая или отключая плитку.
Для создания температуры 4-6 °С используют бытовые холодильники. Длительное замораживание материала осуществляют в морозильных камерах бытовых холодильников или в специальных морозильниках, обеспечивающих температуру до -25 °С.
Дистиллятор
Для приготовления питательных сред и растворов реактивов необходимо пользоваться очищенной водой. Одним из распространенных методов очистки, воды является перегонка (дистилляция), которая осуществляется с помощью дистилляторов (рисунок 4).
Рисунок 4 – Дистиллятор лабораторный ДЛ-25
В камере испарения воду нагревают до кипения. Образовавшийся пар поступает в конденсатор, который охлаждается водопроводной водой, непрерывно протекающей между стенкой конденсатора и наружным стальным кожухом прибора. Сконденсированный пар в виде дистиллята вытекает через ниппель. В верхней части испарительной камеры находятся отражательные, экраны, сепарирующие пар и обеспечивающие чистоту дистиллята. По мере выкипания воды в камере через вентиль поступают новые порции водопроводной воды, уровень которой поддерживается уравнителем.
При вирусологических и других исследованиях требуется вода с определенными физико-химическими свойствами. В таких случаях применяют повторную дистилляцию или пропускают воду через ионообменники. Для двукратной перегонки воды используют бидистилляторы БД-2 и БД-4.
Автоклав
При проведении микробиологических исследований необходимо приготовить стерильные питательные среды, растворы реактивов, посуду и т.д. Широко распространенным методом стерилизации является автоклавирование. Стерилизация в автоклаве осуществляется с помощью нагретого пара под давлением (рисунок 5).
Рисунок 5 – Стерилизатор паровой (автоклав) ГК-100-3
Стерилизатор может быть настольный (рисунок 6).
Рисунок 6 – Настольный стерилизатор (автоклав) TNP-88 М
Материал в металлических биксах или сетках загружают в стерилизационную камеру, которая сообщается с водопаровой камерой. Обе камеры герметически изолированы от атмосферного воздуха при помощи крышки. В водопаровую камеру заливают дистиллированную воду и после герметизации автоклава нагревают ее с помощью электронагревательных элементов. По достижении необходимого давления пара им заполняют стерилизационную камеру, вытесняя из нее воздух. По окончании продувки вентиль закрывают, и давление повышают до требуемой величины, определяемой по манометру. По окончании стерилизации перекрывают сообщение междуводопаровой и стерилизационными камерами, выпускают пар и конденсат и специальным приемом подсушивают материал под вакуумом. Затем давление в камере уравнивают с атмосферным и автоклав разгружают.
Шприцы и инструменты стерилизуют кипячением в электрических стерилизаторах, которые представляют собой оборудованные электрическим подогревом металлические ванны с крышкой.
Бактерицидный облучатель.
Для стерилизации воздуха и поверхности предметов в помещениях лаборатории применяют стационарные и переносные облучатели (рисунок 7).
Рисунок 7 – Бактерицидные облучатели (а – стационарный, б – переносной)
Стерилизацию (необратимые изменения микробных клеток, а затем их гибель) осуществляют с помощью ультрафиолетовых лучей (УФЛ), излучаемых бактерицидной лампой, укрепленной в штативе и соединенной с электропитающим устройством. Стационарный бактерицидный облучатель устанавливается на потолке или стене. Передвижной облучатель позволяет устанавливать необходимое расстояние от лампы до объекта, так как лампа с рефлектором подвижно закреплена на вертикальной стойке.
Центрифуга
Для разделения частиц и отделения их от растворителя при обработке патологического материала и культур возбудителей применяют центрифугирование (рисунок 8).
Рисунок 8 – Центрифуга лабораторная настольная ЦЛМН-Р 10-01
Принцип работы центрифуги заключается в том, что при вращении пробирок с материалом возникает центробежная сила, отбрасывающая частицы с большей плотностью, чем жидкость, на дно пробирки. Существует большое количество типов и моделей центрифуг. В микробиологии используют центрифуги с нерегулируемым температурным режимом, рефрижераторные центрифуги и ультрацентрифуги.
Все приборы имеют ряд общих элементов: вращающееся приспособление с гнездами для проб (ротор), электродвигатель, регулятор скорости вращения ротора и кожух с крышкой.
Кроме всего прочего в микробиологической лаборатории используют торсионные весы для взвешивания сухих сред и химических веществ, используемых для исследования, а также используют магнитные мешалки для приготовления растворов и рН-метр для определения активной реакции среды получаемых растворов (рисунок 9).
Рисунок 9 – Торсионные весы (слева); магнитная мешалка (справа): рН-метр (на переднем плане)
Для просмотра колоний бактерий, выросших на питательной среде в чашках Петри, используют специальную настольную лупу с подсветкой (рисунок 10).
[youtube.player]Читайте также: