Для выделения гонококков используют
Гонококк относится к трудно культивируемым бактериям. Для его выращивания требуются питательные основы, богатые аминокислотами и ростовыми факторами, также обязательно добавление крови, нормальной сыворотки или куриного желтка. Культивирование происходит при высокой влажности (что достигается использованием свежеприготовленных сред) и повышенной концентрации CO2 (5-10%) в атмосфере. В качестве питательной основы сред для гонококка рекомендован МПА, приготовленный на мясной воде с использованием мяса кролика или бычьих сердец, pH 7,3±0,1.
Возможно применение сухих коммерческих питательных основ (например, GC-агар, агар Мюллера-Хинтона и др.) с добавлением 20% нормальной сыворотки или 5% свежей крови.
а) Приготовление ватных тампонов для взятия материала на гонококк. Ватные тампоны на деревянных палочках или стержнях из нержавеющей стали (диаметром около 2,0 мм), вмонтированные в ватные пробки, окунают в фосфатный буфер (pH 7,4), кипятят в нем в течение 20 мин, после чего импрегнируют в течение 24 ч 1%-ной водной суспензией тонко измельченного активированного угля. После этого тампоны высушивают, вставляют в бактериологические пробирки диаметром, равным диаметру пробирок с транспортной средой, и стерилизуют в автоклаве при 121°С 20 мин.
б) Среда для хранения и транспортировки гонококка (среда Стюарта). Готовят две смеси.
Смесь №1:
Агар — 3,0 г
Вода дистиллированная — 1000,0 мл
Смесь нагревают до полного растворения агара.
Смесь №2:
Кислота тиогликолевая — 2,0 мл
Натрия гидроксид NaOH 1М раствор — 12,0 мл
Натрия фосфата однозамещенного (NaH2PO4*2H2O)
20%-ный раствор — 100,0 мл
Хлористого кальция (CaCl2) 1%-ный раствор — 20,0 мл
Вода дистиллированная — 900,0 мл
К смеси №1 добавляют смесь №2, доводят pH до 7,3-7,4. Полужидкую агаровую среду разливают в стерильные пробирки по 10,0 мл и стерилизуют текучим паром в течение 60 мин.
Готовую среду сохраняют в холодильнике не более суток. Применяют для транспортировки патологического материала, взятого непосредственно, на ватном тампоне, импрегнированном углем, погруженном в среду. При доставке в лабораторию тампоном производят посев на плотные среды.
в) Среда для транспортировки проб материала, исследуемого на гонококк или менингококковое носительство (среда Эймиса [Amies]). Среда содержит тиогликолят (натриевую соль меркаптоацетиловой кислоты) в качестве редуцирующего агента. При применении среды Эймиса используют обыкновенные ватные или дакроновые тампоны, не импрегнированные углем.
Состав:
Натрия хлорид (NaCl) — 3,0
Калия хлорид (KCl) — 0,2
Фосфат натрия двузамещенный (безводный) (Na2HPO/i) — 1,15 или Na2HPO4*12H2O — 2,9
Фосфат калия однозамещенный (KH2PO4) — 0,2
Натрия тиогликолят — 1,0
Кальция хлорид (CaCl2), 1%-ный раствор — 10,0 мл
Магния хлорид (MgCl2*6H2O), 1% -ный раствор — 10,0 мл
Уголь фармацевтический нейтральный — 10,0
Агар — 4,0
Вода дистиллированная — 1000,0 мл
Вначале растворяют агар в воде при подогревании. Затем в горячий раствор последовательно вносят все перечисленные ингредиенты, кроме угля. После тщательного перемешивания и полного растворения добавляют уголь. Среду быстро разливают по 6,0 мл и автоклавируют при 112°С 20 мин. После автоклавирования, прежде чем дать среде застыть, пробирки несколько раз опрокидывают для равномерного распределения угля, после чего, в случае надобности, заменяют пробки. Среду хранят в холодильнике.
г) Основа питательных сред лабораторного приготовления для выделения и культивирования гонококка (среда ЦКВИ). Питательной основой является мясопептонный агар (МПА), приготовляемый следующим образом. Готовят мясную воду: фарш из мяса кролика или бычьих сердец заливают водой (1 часть фарша и 2 части водопроводной воды) и оставляют на одни сутки при +4°С. Затем смесь кипятят 10 мин, охлаждают и фильтруют через марлю. К фильтрату добавляют 1% сухого коммерческого пептона, 0,5% натрия хлорида (NaCl) и 2% агара. pH смеси 7,4-7,6. Далее среду доводят до кипения (при помешивании), фильтруют через ватно-марлевый фильтр и мерно разливают в стерильные флаконы. Стерилизуют при 112°С 20 мин. Основу хранят в холодильнике.
д) Варианты готовых питательных сред для выделения и культивирования гонококка. Перед использованием, независимо от выбранного варианта, питательную основу расплавляют, остужают до 50-45°С и вносят в нее 20% нормальной сыворотки лошади или крупного рогатого скота, а также следующие биодобавки (на 100,0 мл питательной основы):
Вариант 1. Гидролизат казеина для парентерального белкового питания — 2,0;
Стерильный аутолизат дрожжей (или 1,5%-ный раствор ЭКД) — 2,0 мл
Вариант 2. 5%-ный раствор Гемогидролизата — 2,0 мл
Стерильный аутолизат дрожжей (или 1,5%-ный раствор ЭКД) — 2,0 мл
Вариант 3. Среда 199 для культур тканей (без антибиотиков) — 2,0 мл
Стерильный аутолизат дрожжей (или 1,5%-ный раствор ЭКД) — 2,0 мл
Вариант 4. Желток куриного яйца — 10,0 мл
Основу хорошо перемешивают с биодобавками, разливают в чашки Петри или в пробирки (скашивают!). Хранят в холодильнике не более 4-5 дней.
е) Селективная среда Тейера-Мартина для выделения гонококка из патологического материала, рекомендованная ВОЗ. В качестве основы используют сухую коммерческую среду GC-arap, или агар Мюллера-Хинтона, или питательную основу ЦКВИ, или любую пригодную для гонококка агаровую питательную основу.
К готовой питательной основе, расплавленной и охлажденной до 50-45°С, стерильно добавляют 20% нормальной лошадиной сыворотки или плазмы либо 5% дефибринированной крови. В качестве ингибиторов посторонней флоры в среду вносят растворы антибиотиков — ванкомицина (в конечном содержании 3 мкг/мл), колистина (10,0 мкг/мл) и нистатина (12,5 мкг/мл). Иногда смесь трех антибиотиков выпускается фирмами в виде отдельной добавки VCN (см. ниже).
Среду разливают в чашки Петри для посева нативного материала или смешанной культуры, содержащей гонококк.
ж) Селективная среда для выделения гонококка при экстрагенитальной гонорее. Селективная среда применяется для первичного посева материала с целью выделения чистой культуры гонококка при экстрагенитальной гонорее (миндалин, глотки, прямой кишки). К одному из вариантов МПА, обогащенного для гонококка, добавляют антибиотики (полимиксина М сульфата — 20 ЕД/мл и линкомицина гидрохлорида — 2,0 мкг/мл). Готовую селективную среду разливают в чашки Петри. Среды с антибиотиками используют обязательно одновременно со средой без антибиотиков (одним из обогащенных вариантов МПА).
з) Среда Тейера-Мартина для выращивания N. gonorrhoeae из клинического материала (сухая), HiMedia, Thayer Martin Medium Base. Основу среды Тейера-Мартина с добавками используют для выделения N. gonorrhoeae из клинического материала.
Состав, г/л:
Пептон специальный — 23,0
Крахмал — 1,01
Натрия хлорид — 5,0
Агар — 1,0
pH 7,2±0,2
1. Сухую основную среду в количестве 21,0 г суспензируют в 250,0 мл дистиллированной воды. Среду кипятят до полного растворения.
2. Одновременно с основной средой готовят раствор гемоглобина. Haemoglobin Powder, Soluble (HiMedia, ED 022) представляет собой специально приготовленный порошок гемоглобина, сохраняющего активность после стерилизации. Для этого в 5,0 г порошка гемоглобина при постоянном помешивании медленно вливают 250,0 мл дистиллированной воды для получения однородной массы 2%-ного раствора гемоглобина.
Основу среды и раствор гемоглобина стерилизуют раздельно при 121°С в течение 15 мин. Затем оба компонента охлаждают до 45-50°С и соединяют, соблюдая правила асептики.
Состав, мг:
1. Состав FD 025 на флакон (на 500,0 мл среды)
Витамин В12 — 0,1
L-глутамин — 100,0
Аденин SO4 — 10,0
Гуанин HCl — 0,3
Р-аминобензойная кислота — 0,13
L-цистин — 11,0
НАД (кофермент) — 2,5
Кокарбоксилаза — 1,0
Железа нитрат — 0,2
Тиамин HCl — 0,03
Цистеин HCl — 259,0
Декстроза — 1,0
2. Жидкость для регидратации (на 500,0 мл среды):
Декстроза — 1,0
Вода дистиллированная — 10,0
Растворяют содержимое части 1 в 10,0 мл жидкости для регидратации, стерилизуют при 121°С в течение 15 мин. После стерилизации раствор остужают до 50°С и добавляют к среде Тейера- Мартина.
Для выделения N. gonorrhoeae из урогенитального тракта, где, кроме него, присутствует обычно множество других бактерий и грибов, в среду для придания ей селективности вносят добавку VCN, состоящую из комплекса антибиотиков "VCN Supplement" (HiMedia).
Состав добавки VCN (на 500,0 мл среды):
Ванкомицин — 1,5 мг
Колистин метан сульфонат — 3,75 мг
Нистатин — 6250 ЕД
Комплекс перечисленных антибиотиков регидрируют в 10,0 мл дистиллированной воды и вливают в растопленную и охлажденную до 45-50°С среду при тщательном перемешивании, чтобы внесенные в нее антибиотики распределились равномерно. Дальнейшее повышение селективности среды может быть достигнуто внесением в нее триметоприма в дозе 2,5 мг на 500,0 мл среды.
и) Среды с углеводами для дифференциации гонококка и других нейссерий. Используется желточный МПА (вариант 4, но без сыворотки), содержащий 1% одного из углеводов (глюкоза, мальтоза, сахароза, фруктоза, лактоза) и индикатор феноловый красный, в чашках Петри. Разложение углевода до кислот сопровождается пожелтением среды вокруг роста культуры.
Приготовление среды. К 100,0 мл расплавленного питательного агара для гонококка, охлажденного до 45-50°С, добавляют смесь, состоящую из 15,0 мл желтка, раствора 1,5 г одного из углеводов в 2,0 мл дистиллированной воды (этот раствор простерилизован в кипящей водяной бане 15 мин) и 6,0 мл 0,2%-ного водного раствора водорастворимого фенолового красного.
Приготовление раствора индикатора. 2,0 г водорастворимого фенолового красного разводят в 1000,0 мл дистиллированной воды, доводят pH до 7,8 (при помощи 20%-ного раствора гидроксида натрия — NaOH). Раствор стерилизуют в автоклаве при 121 °С в течение 20 мин.
После перемешивания среды разливают в 5 чашек Петри (по числу углеводов). Засеянные испытуемыми культурами среды инкубируют при 37°С в эксикаторе с влажной ватой, но без свечи, в течение 1-2 сут.
При небольшом количестве испытуемых культур используют тот же желточный агар без сыворотки в одной чашке Петри. Чашку делят на 5 секторов (по числу углеводов). На каждый сектор пипеткой наносят по 1 капле стерильного 80%-ного раствора одного из углеводов в 0,2% растворе фенолового красного. Смесь углевода и индикатора предварительно стерилизуют в кипящей водяной бане 15 мин. После диффузии растворов углеводов в агар сектора засевают штрихами испытуемой культуры.
Посевы на средах с углеводами инкубируют без CO2!
к) Среда для определения чувствительности гонококка к антибиотикам. К расплавленному и охлажденному до 50°С питательному агару для гонококка (GC-агар) добавляют 1% (по объему) комплексной питательной добавки (взамен нестандартных биодобавок).
Состав комплексной питательной биодобавки (КПД):
Глюкоза — 100,0 г
L-цистеин-гидрохлорид* — 25,0 г
L-глютамин — 10,0 г
L-цистин — 1,1 г
Никотинамид-адениндинуклеотид (НАД) — 0,25 г
Витамин В12 — 0,1 г
Тиамина пирофосфат — 0,1 г
Гуанина гидрохлорид — 0,03 г
Железа нитрат [Fe(NO3)3*6H2O] — 0,02 г
Парааминобензойная кислота — 0,013 г
Тиамина гидрохлорид — 3,0 г
Дистиллированная вода — 1000,0 мл
* При определении чувствительности к карбапенемам и клавулоновой кислоте цистеин-гидрохлорид не применять!
Готовую питательную среду после добавления 1% раствора КПД, как и самое КПД, нельзя автоклавировать.
При разливе в чашки Петри, после застывания агара, чашки оставляют при комнатной температуре на 10-12 ч. Чашки с готовой средой можно хранить в герметичных пластиковых пакетах при +4°С не более 2 нед.
Некоторые штаммы гонококка плохо растут на среде без гемоглобина. В таких случаях их необходимо 2-3 раза пассировать на данной среде перед определением чувствительности.
Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 27.2.2020
Гонококки – это грамотрицательные, неподвижные, не имеющий капсулы, неспорообразующие диплококки. В мазках кокки прилегают плоскими поверхностями друг к другу и по очертанию похожи на кофейные зерна. Он имеет характерную для грамотрицательный микроорганизмов клеточную структуру, и может размножаться вне, и внутри клеток хозяина. Не имеет внутривидовых вариантов.
Род Neisseriae включен в семейство Neisseriaceae, объединяющее грамотрицательные коккобактерии. Человек является единственным естественным хозяином двух патогенных гноеродных нейссерий – Neisseriae gonorrhoeae и Neisseriae meningitidis. Это факультативные анаэробы, паразитирующие на слизистых человека, продуцирующие оксидазу и каталазу.
Neisseriae gonorrhoeae (гонококк) является возбудителем гонореи – широко распространенной заразной инфекции, передающейся половым путем. Болезнь была известна еще древним китайцам, египтянам, иудеям. Название свое получила от двух греческих слов gone – семя и rhein – истечение, то есть болезнь, передающаяся с семенной жидкостью. Так назвал ее Гален в начале новой эры. Гонококки также называют диплококками – это название дано ему немецким врачом Альбертом Нейссером, который в 1879 году обнаружил его в гнойном отделяемом уретры, шейки матки и конъюнктивы глаз. Возбудитель был назван в честь Нейссера – Neisseriae gonorrhoeae.
Гонококки. Общая характеристика
Гонорея – это болезнь, сопровождающаяся выделениями из урогенитального тракта, вначале жидкими, водянистыми, а затем гнойными. Инкубационный период короткий – 3-5 дней. В первые дни болезни гонококки обнаруживаются свободно лежащими в серозном экссудате или прикрепившимися к эпителиальным клеткам. Когда отделяемое становится гнойным, кокки фагоцитируются и их можно увидеть в цитоплазме клеток гноя (долиморфонуклеарные нейтрофильные лейкоциты). В одной клетке могут быть от 20 до 100 гонококков, которые будучи поглощенными, не погибают и остаются вирулентными. В поздней стадии болезни они могут быть обнаружены вне клеток, в стадии формирования хронического процесса чаще вообще не обнаруживаются.
Гонококки – весьма прихотливые микробы, не растут на обычных питательных средах, его с трудом удается культивировать на специально приготовленных для них обогащенных средах. Лучше растут при слегка пониженной (до 35,5°С) температуре в присутствии кислорода и 10% СО2.
Описано 4 типа колоний:
– гонококки 1 и 2 типа образуются вирулентными гонококками;
– гонококки 3 и 4 типа – невирулентными.
Кокки, образующие колоши 1 и 2 типов имеют пили – фактор адгезии. Именно пилями бактерия прикрепляется к клеткам цилиндрического эпителия уретры, лейки матки, прямой кишки и не фагоцитируется, а заселяет клетки этих отделов (колонизация). Прикрепление – необходимое условие инфекции, только бактерии, имеющие пили, считаются патогенными.
Гонококки продуцируют фермент индофенол оксидазу, катализирующую восстановление молекулярного кислорода независимо от перекиси водорода. Проба на оксидазу используется для идентификации колоний в лабораторных культурах. Гонококки, относящиеся ко всей типам, продуцируют фермент, расщепляющий секреторный IgA, находящийся в секретах слизистой.
Несмотря на то, что гонококки в организме больного разрушаются с трудом, они крайне нестойки во внешней среде. Они погибают весьма быстро на солнечном свету и при высушивании. В гное или на белье, находящемся в темном влажном месте, могут сохраняться от 18 до 24 часов. Очень чувствительны к дезинфицирующим средствам, особенно солям серебра. Температура +60°С убивает их через 10минут.
Гонококки. Патогенность
Гонококки являются специфическими паразитами человека. Экспериментальный гонококковый уретрит удается вызвать только у шимпанзе.В типичных случаях гонореи местами первичной инфицированности у женщин является уретра и шейка матки; у мужчин, соответственно, уретра.
Гонококки повреждают цилиндрический эпителий, выстилающий шейку матки и прямую кишку, а также промежуточный (урогенитальный) эпителий, выстилающий мочевой тракт. Вагинальная инфекция не обнаруживается, поскольку эпителий, выстилающий влагалище взрослой женщины – это ороговевающий многослойный плоский эпителий, устойчивый к гонококкам. До наступления половой зрелости вагина выстлана более мягким, особенно восприимчивым эпителием. Гонорейный вульвовагинит у препубертатных девушек может быть эпидемическим и трудно вылечиваемым. Изменение эпителия с окончанием пубертатного периода полностью исключает эту форму гонореи.
В настоящее время важным первичным местом инфицирования является конъюнктива глаза, и этот процесс (гонорейный конъюнктивит и кератит) активно повреждает глаза. Ophthalmia neonatorum – гонорейный конъюнктивит новорожденных, возникает при инфицировании глаз плода во время прохождения через родовые пути. Обильные гнойные выделения из глаза новорожденного могут создать значительное давление под веками. Если веки насильно разомкнуть, гной может брызнуть наружу. Врачи и медицинский персонал, лечащие таких детей, должны тщательно оберегать свои глаза. У детей или взрослых такая инфекция легко приводит к слепоте или серьезному ухудшению зрения вследствие воспалительных изменений структур глаза.
Гонококковая инфекция из мужской уретры может непосредственно проникать в другие части мужской репродуктивной системы. У женщин она также может проникать в другие части тракта, особенно в Бартолиниевы железы и фаллопиевы трубы.
Слизистая матки устойчива к воздействию гонококков, но применение контрацептивов может облегчить внедрение гонококков в эндометрий, увеличивая риск осложнений в фаллопиевых трубах. Инфицирование фаллопиевых труб обычно происходит в первый или второй менструальный цикл после заражения, но в некоторых случаях оно происходит позже.
Вовлечение в воспалительный процесс фаллопиевых труб (сальпингит) приводит к значительному их перекручиванию и рубцеванию в случае, когда заболевание принимает хроническую форму.
Рубцевание уретры у мужчин может привести к стриктуре или облитерации мочеиспускательного канала в одной или нескольких фокальных точках.
Иногда гонококки мигрируют из мочеполового тракта в лимфатическую систему или кровоток, образуя дистантные фокусы инфицирования (например, эндокардит, перигепатит и менингит).
Гонококцемия связана с различными кожными повреждениями, из которых могут быть выделены микроорганизмы. Существенным проявлением экстрагенитальной гонококковой инфекции является гнойный деструктивный артрит, особенно часто встречающийся у лиц в возрасте от 15 до 35 лет. С увеличением числа случаев заболевания гонореей, экстрагенитальные повреждения становятся более заметными.
Гонококки. Источники и пути заражения инфекцией
Гонококки никогда не обнаруживаются вне человеческого организма, если только они не находятся на объектах, совсем недавно загрязненных гонорейными выделениями. Поэтому гонорейные инфекции практически всегда распространяются путем прямых контактов, в основном при половом акте. Крайне редко гонорея предается непрямым путем через загрязненные объекты,
Гонорейная офтальмия у взрослых обычно случайна. Инфекция из урогенитального тракта неумышленно заносится в глаза руками самого больного или: другого лица.
Вульвовагинит среди детей распространяется путем использования общего постельного белья, ванны, туалетных принадлежностей и т.д. Он обычно возникает там, где дети живут в перенаселенных квартирах.
Нелеченные гонорейные инфекции имеют тенденцию переходить в хроническое состояние. При отсутствии лечения или неправильном лечении женщины становятся бактерионосителями в течение многих лет после исчезновения признаков заболевания. У 60-80% инфицированных женщин болезнь протекает бессимптомно. Примерно у 40% мужчин болезнь также протекает бессимптомно.
Гонококки. Лабораторный диагноз инфекции
Для установления диагноза гонореи используется несколько микробиологических методов. Мазки, культуры и оксидазная реакция являются предварительными тестами. Для установления точного диагноза гонореи и подтверждения результатов предварительных тестов используется метод флуоресцирующих антител и реакция ферментации карбогидрата.
Бактериоскопическая диагностика. Прямые мазки генитальных выделений могут быть окрашены по Граму. Обнаружение грамотрицательных диплококков в гнойных клетках генитального экссудата является сильным доводом в пользу того, что это гонококки. Это особенно верно, если отделяемое взято из мужской уретры, где, в случае типичного острого гнойного уретрита, окрашенный по Граму мазок, содержащий ясно видимые внутриклеточные диплококки предполагает однозначный диагноз.
У женщин типичные диплококки могут обнаруживаться в мазках материала, взятого из бартолиниевых желез и желез Скена на ранней стадии заболевания. Но на основании только этого нельзя поставить даже рабочий диагноз.
Причин насколько:
1. грамотрицательные диплококки (но не гонококки) встречаются вне клеток;
2. гонококки в одиночку или парами встречаются вне клеток;
3. в клетках встречаются грамположительные микроорганизмы с морфологией гонококков.
Все, что можно сказать о грамотрицательных диплококках, обнаруживаемых вне клеток, – так это то, что они могут быть гонококками. Весьма редко внутри гнойных клеток генитального экссудата находят грамотрицательные диплококки, не являющиеся гонококками.
Мазок, приготовленный из гонорейного экссудата, должен быть очень тонким. Гонококки реагируют на окраску по Граму таким образом, что в случае толстого и неравномерного по толщине мазка может быть получен ошибочный результат. В случае хронической гонореи микробы обычно не обнаруживаются в экссудате.
Разработаны специальные транспортные среды, которые позволяют отсылать подозреваемые культуры для дальнейшей идентификации. При этом используют пробирки с завинчивающимися пробками, содержащие среду и смесь воздуха с СО2. После инокуляции материала рост гонококков поддерживается в течение 48-96 часов.
Согласно современным рекомендациям, материал, подозрительный на выделение культуры гонококка, должен быть получен не только из урогенитального тракта (эндоцервикального канала, передней уретры), но и из аноректальной области и глотки. Ректальную гонорею можно легко просмотреть. Тщательная работа с использованием тампонов необходима при обследовании мужчин-гомосексуалистов. У женщин необходимо орать цервикальные и ректальные мазки, поскольку у 50% инфицированных женщин гонококки оседают в ректальной области. Инфекция может оставаться там и после того, как она исчезнет из шейки матки.
Стерильные ватные тампоны часто содержат жирные кислоты и другие вещества, которые подавляют рост гонококков. Поэтому для взятия образцов рекомендуется использовать нейтральные в этом отношении тампоны, например из альгината кальция.
Гонококки могут быть получены из мочи мужчин, если первые 10 мл выделяемой мочи центрифугировать и выделить культуру из осадка. При более простом методе скрининга первые несколько капель мочи, попавшие на сухой тампон, немедленно переносятся на среду. Культуры мочи при скрининговых программах помогают установить источник инфекции, среди мужчин с бессимптомным течением заболевания.
Следующей ступенью в бактериологическом изучении гонококков является качественный анализ биохимических реакций и идентификация микроорганизмов с помощью антисывороток. Наличие у гонококков специфического К-антигена дает возможность использовать метод флуоресцирующих антител, при обнаружении гонококков в прямых мазках или экссудате, либо в мазках, приготовленных на культур.
Гонококки. Социальное значение гонореи
Гонорея имеет далеко идущие медицинские, социальные, психологические и даже судебно-медицинские последствия. Болезнь приобрела характер близкий к пандемии – по наиболее вероятным оценкам ежегодно в мире регистрируется от 2,5 до 3 миллионов новых случаев в год, примерно 1 случай каждые 15 секунд. Более половины случаев составляют подростки и молодые люди до 25 лет. Гонорея регистрируется не только среди подростков, но и среди детей, не достигших половой зрелости. Подозрительными должны быть любые выделения из влагалища или уретры у детей.
Отмечено, что гонорея является самой распространенной причиной бесплодия у обоих полов. У женщин стерильность обусловлена облитерацией фаллопиевых труб рубцовой тканью, образовавшейся при разрешении гонорейного сальпингита. У мужчин стерильность обусловлена облитерацией семенных протоков, вызванной аналогичным процессом гонорейного заражения и разрешением воспалительного процесса с последующим рубцеванием.
Гонококки. Иммунитет
Заболевание гонореей почти или вообще не создает иммунитета к последующим случаям заражения. Реакция антител слабо выражена. Очевидный дефицит иммунитета может быть главной причиной, почему болезнь остается эндемичной в человеческой популяции. Существует выраженная чувствительность к повторному инфицированию. Относительный типоспецифический иммунитет к гонорее обусловлен опсонинами.
Гонококки. Профилактика
Вульвовагинит у детей может быть предотвращен путем надлежащей обработки постельного белья, ночной одежды, воды для мытья и ванны. Все дети должны быть обследованы на гонорею прежде чем получат разрешение на контакт с другими детьми в детских учреждениях или больницах. Врачи и медперсонал, использующие резиновые или пластиковые перчатки для пальпации и обследования шейки матки и влагалища должны эти перчатки заменить перед пальцевым исследованием прямой кишки.
В связи с тем, что половым путем передается не только гонорея, каждый гонорейный больной должен пройти серологическое тестирование на сифилис и ВИЧ-инфекцию.
Гонококковая вакцина была получена путем выделения и очистки белка пилей. Ее действие заключается в том, что антитела, продуцируемые реципиентом, обволакивают ворсинки любого проникшего в организм человека гонококка, что препятствует фиксации бактерий на клетках хозяина и, тем самым, препятствует развитию заболеванию.
Существует гонококковая вакцина (гоновакцина), представляющая собой взвесь инактивированной культуры гонококков в 0,9% растворе хлорида натрия. Используется при диагностике (установлении излечения гонореи), и как вспомогательный метод лечения при вяло протекающих рецидивах, при свежих торпидных и хронических формах заболевания. Назначается мужчинам с осложненной и женщинам с восходящей гонореей (после стихания острых воспалительных явлений).
Заключение
1. Нейссерии – это грамотрицательные, аэробные или факультативно- анаэробные микроорганизмы, паразитирующие на слизистой человека.
2. Гонококки (возбудители гонореи) – это диплококки, которые могут быть расположены внутри- и внеклеточно.
3. Нейссерии растут только в атмосфере, содержащей 10% СО2, и лишь на специально обогащенных средах.
4. Пили гонококка являются структурой, обеспечивающей прикрепление микроба к цилиндрическому эпителию слизистой оболочки.
5. Гонококки из первичного очага инфекции (эпителий уретры, шейки матки, прямой кишки) распространяются в другие отделы организма, в том числе в репродуктивные органы. При повторяющихся заражениях происходит деформация фаллопиевых труб, вызванная формированием рубцов. Возможна полная непроходимость. У мужчин образование рубцов приводит к сужению (структуре) уретры.
6. Одной из форм проявления гонококковой инфекции взрослых и, особенно, новорожденных детей, является специфическое гнойное воспаление конъюнктивы. В процесс иногда вовлекаются ткани глаза, что может привести к серьезному нарушению зрения.
7. Ophthalmia neonatorum – гонококковая инфекция, возникающая при прохождении плода через зараженный родовой канал. С целью профилактики всем новорожденным в конъюнктивальный мешок обоих глаз вводят нитрат серебра (метод Креде).
Гонококки
Гонококки (Neisseria gonorrhoeae) относятся к специфическим паразитам, поражающим организм человека. Они открыты в1879 году немецким учёным Альбертом Нейссером. Это неподвижные бобовидные, не образующие спор гноеродные бактерии, относящиеся к роду Neisseria, вызывающие воспалительные процесс на слизистых оболочках мочеполовых путей и конъюнктивы глаз у новорожденных. Также в некоторых случаях они могут поражать эндокард, железы и суставы.
Биологические свойства и морфология гонококков
Гонококки по своей форме напоминают бобы или кофейные зёрна, расположенные попарно, вогнутыми сторонами внутрь. Размеры возбудителя колеблются в среднем от 0,7 до 1,3 мкм. В гнойном отделяемом человека эти микроорганизмы локализуются в цитоплазме лейкоцитов, где долго сохраняют свою жизнеспособность (незавершённый фагоцитоз). На культуральных средах гонококки располагаются беспорядочно, имеют разные размеры и круглую или бобовидную форму.
Гонококки относятся к грамотрицательным бактериям и поддаются окрашиванию всеми анилиновыми красителями. При бактериоскопическом исследовании выделяется характерная триада свойств, отличающая гонококки от других диплококков: грамотрицательная окраска (окрашивание в красный цвет по методу Грамма), бобовидная форма и внутриклеточное расположение.
Необходимо отметить, что под воздействием лекарственных препаратов, а также при хронической форме заболевания, микроорганизмы могут видоизменяться. В этом случае в мазках наряду с грамотрицательными возбудителями встречаются грамположительные бактерии разной величины и формы (шаровидные L-формы гонококка).
Гонококки – это ээробные микроорганизмы, образующие в патологическом отделяемом слизистое капсулоподобное вещество. Чаще всего они расположены скоплениями, напоминающими пчелиный рой.
Возбудители требовательны к питательным средам. Они хорошо растут при достаточной влажности на средах, содержащих в своём составе нативный белок.
При разрушении клетки гонококки выделяют эндотоксин, экзотоксина не образуют.
Устойчивость возбудителя
Гонококки быстро погибают во внешней среде. Они не переносят охлаждения, а при повышении температуры до 40 градусов гибнут за 3 – 6 часов. При 56 градусах Цельсия возбудитель погибает через 5 минут. Микроорганизм не переносит соли серебра, высокочувствителен к антибиотикам пенициллинового и стрептомицинового ряда, однако в процессе лечения способен приобретать к ним устойчивость.
В гнойном отделяемом человека бактерия сохраняется в течение суток.
Гонококки. Клиника и патогенез.
Гонококки являются возбудителями гнойно-воспалительных заболеваний мочеполовых путей (гонорея) и глаз (бленнорея). Этим инфекциям подвержен только человек. Урогенитальное заражение, как правило, происходит при незащищённых сексуальных контактах. Поражение глаз происходит через предметы обихода (полотенце, губка и пр.). Чаще всего бленнореей страдают маленькие дети.
Инкубационный период заболевания 3 – 7 дней (иногда 10 – 15). В этот период, попадая на слизистые оболочки мочеполовых органов, возбудитель начинает там размножаться, после чего он мигрирует в подслизистую соединительную ткань. Чаще всего происходит поражение уретры и слизистой оболочки матки. Далее, при отсутствии лечения, процесс может распространяться по восходящему пути через лимфатическую систему.
Клиническими симптомами гонореи являются рези и боли при мочеиспускании, чувство тяжести внизу живота, а также возникновение гнойных выделений из наружных половых органов.
В том случае, когда гонококк по кровотоку проникает в другие органы, он может оседать на суставах или сердечных клапанах, провоцируя гонококковый артрит или гонорейный эндокардит. Также существует угроза заражения крови (сепсис). У новорожденных гонококковая инфекция вызывает гнойное воспаление слизистой оболочки глаз.
Иммунитет к возбудителю.
К сожалению, у человека не вырабатывается иммунитет после перенесенного заболевания, в связи с чем, существует вероятность повторного заражения. Также не бывает и врождённого иммунитета к гонококковой инфекции. Из-за синдрома незавершённого фагоцитоза, возбудители не только сохраняются в лейкоцитах, но и прекрасно там размножаются, а также способны переноситься с током крови в различные органы.
Диагностика возбудителя.
Идентификация гонококка, как правило, из-за крупных размеров и характерной морфологии возбудителя, не представляет сложностей. Наиболее распространённый метод лабораторной диагностики - это бактериоскопическое исследование мазка отделяемого, окрашенного по Грамму.
В том случае, когда при микроскопии возникают какие-либо сомнения, назначается культуральная диагностика (бактериологическая методика на питательных средах).
Также в некоторых случаях применяются иммуноферментный, серологический и иммунофлюоресцентный методы выявления гонококковой инфекции.
Новейшими перспективными методами диагностики гонореи считаются молекулярно-биологические методики, такие, как ПЦР и ЛЦР.
Читайте также: