Иммуноблот на вич у детей

Жизнь человека при ВИЧ напрямую зависит от того когда было диагностировано заболевание. Чтобы выявить патологию, изначально достаточно сдать простой анализ крови. Если у человека присутствует вирус иммунодефицита, то анализ покажет нарушения в функционировании организма.

Общий анализ крови

Общий анализ крови при ВИЧ относится к начальным методам диагностики иммунодефицита. При исследовании крови на ВИЧ стоит цель изучить состояние иммунитета, который значительно ухудшается при наличии патологии.

Анализ имеет целый ряд достоинств:

• Небольшая стоимость исследования;
• Результаты в течение суток;
• Высокая точность.

Показания для сдачи

Сдача анализа на ВИЧ производится в следующих случаях:

• Госпитализация с последующим хирургическим вмешательством. В этом случае кровь сдается для того, чтобы снизить риск заражения медработников. Оперативное вмешательство у ВИЧ-инфицированных проводится с соблюдением особых защитных мер.
• Во время планирования и непосредственно при беременности. Женщины, вынашивающие ребенка, за весь период беременности обязаны трижды сдавать анализ на ВИЧ. Диагностика выполняется для снижения риска заражения малыша внутри утробы, во время родовой деятельности и при лактации.
• Присутствие инфекционных заболеваний, сопутствующих ВИЧ. В их число входит герпес, туберкулез и пневмоцистное воспаление лёгких.
• При незащищённом половом акте с возможно инфицированным партнером. Проводится для профилактики и ранней диагностики инфицирования.

ВИЧ анализы у ребенка проводятся только при наличии ряда симптомов: резкий сброс веса, апатическое состояние, чувство усталости, чрезмерная потливость в ночное время суток, беспричинное увеличение температуры до показателей в 37,5 градусов, диарея.

Расшифровка результатов

Наличие возбудителей вируса нельзя выявить в общем анализе крови, но можно обнаружить факторы, напрямую указывающие на присутствие в организме описываемой патологии.

В норме количество лимфоцитов составляет 1,2–3×109/л. На начальных этапах ВИЧ этот показатель повышается, что напрямую указывает на борьбу организма с возбудителями заболевания.

Когда иммунитет уже ослаблен и не в состоянии противостоять вирусу, происходит снижение количества лимфоцитов до критической отметки.

Во время иммунодефицита наблюдается уменьшение числа Т-лимфоцитов.

Нейтрофилы начинают активное действие непосредственно после проникновения в организм вирусов. Эти элементы способствуют поглощению вирусных клеток.

При ВИЧ наблюдается разрушение и значительное уменьшение общего количества нейтрофилов.

Нормальное количество нейтрофилов в крови составляет 1,8–6,5×109/л. Сниженное число этих элементов характерно не только для ВИЧ, но и для других болезней инфекционно-воспалительного типа.

Мононуклеары являются очередной разновидностью лейкоцитов. Образовываются в крови только после проникновения в организм возбудителей инфекций и вирусов. При нормальном состоянии эти элементы вообще не должны содержаться в крови.

Тромбоциты играют одну из основных ролей во время свёртывания крови.Нормальное количество этих элементов в крови, составляет 150–400×109/л.

В случае развития ВИЧ, количество тромбоцитов снижается.

Клинически это состояние подтверждается наличием целого ряда симптомов:

• Внутренние и наружные кровотечения;
• Формирование мелкоточечной сыпи на кожных покровах;
• Кровоизлияния на слизистых оболочках.

Уровени эритроцитов не считается специфичным для рассматриваемой патологии. При ВИЧ количество этих элементов уменьшается из-за воздействия вируса на костный мозг, где происходит кровообразование. Нормальное количество эритроцитов в крови – 3,7–5,1×1012/л.

Изредка в общем анализе крови можно выявить повышенное содержание этих элементов. Такое наблюдается при легочных болезнях, которые сопутствуют ВИЧ. В число таких патологий входит туберкулез и воспаление легких.

Гемоглобин – белок, содержащий железо, локализуется сверху эритроцитов и принимает непосредственное участие в транспортировке кислорода ко всем клеткам организма. В случае снижения количества гемоглобина клетки начинают страдать дефицитом кислорода.

Признаком ВИЧ считается понижение количества гемоглобина, что признается симптомом железодефицитного малокровия.

Симптомами малокровия признаются следующие:

• Чувство слабости;
• Головокружение;
• Бледность кожных покровов;
• Учащенное биение сердца.

Нормальный уровень гемоглобина – 120–160 г/л.

При диагностике вируса иммунодефицита обнаруживается значительное увеличение скорости оседания эритроцитов. Нормальный показатель составляет от 1 до 15 мм/ч. Ускорение оседания не считается специфическим показателем для ВИЧ. Этот симптом характерен для абсолютно любого инфекционно-воспалительного заболевания.

Скорость оседания эритроцитов может продолжительное время не меняться (до нескольких лет), после чего резко увеличивается.

В результате можно сделать вывод, что ОАК не дает возможности на 100% убедиться в наличии ВИЧ или СПИДа. Однако этот метод исследования очень важен для выявления вируса на начальной стадии.

Иммуноферментный анализ

Если ребенку назначают дополнительно сдать ИФА, то к процедуре нужно подготовиться. Для детей подготовка к анализу заключается в соблюдении диетического рациона накануне. Необходимо исключить из меню блюда соленой, острой и жирной пищи.

Забор крови выполняется в утреннее время на голодный желудок. Биоматериал забирается из вены, в количестве 5 мл.

Если больница платная, получить результаты можно уже на следующий день. В государственных клиниках срок ожидания результатов затягивается на несколько недель. В случае отрицательного результата можно быть уверенным в отсутствии у ребенка вируса иммунодефицита.

Если в ходе исследования в биоматериале обнаружили специфические антитела, то ставиться положительный результат, указывающий на наличие ВИЧ.

Иммуноблот

Если параллельно сдать анализ методом иммуноблота, можно получить однозначно достоверную информацию. Комбинация результатов ИФА и иммуноблота дает результат с достоверностью в 99,9%. Если результаты не совпадают, то это вызвано недостоверностью анализов и их нужно обязательно пересдать.

Диагноз ВИЧ-инфекция исключается или устанавливается у детей с перинатальной трансмиссией с помощью серологических и вирусологических методов. Серологические направлены на обнаружение антител к вирусу в сыворотке крови методом ИФА и иммуноблота. Вирусологические методы (выделение вируса, ПЦР, вирусная нагрузка) позволяют выявить вирус и/или его компоненты — белки и нуклеиновые кислоты, в частности, gp24-aHTHreH, находящийся в составе вирусных частиц в значительном количестве. Быстрая и ранняя серологическая диагностика ВИЧ-инфекции у детей затруднена, так как антитела класса IgG передаются от матери трансплацентарно и присутствуют у детей до 18 месяцев. Различить материнские и собственные антитела к ВИЧ не представляется возможным. У неинфицированных детей материнские антитела обычно исчезают к 9-12 мес., это, при отрицательной ПЦР, позволяет говорить об отсутствии инфицирования ребенка. Результаты серологического обследования новорожденных детей учитываются при окончательной постановке диагноза в любом возрасте. Однако в некоторых случаях антитела могут не определяться и у ВИЧ-позитивных детей. Это связано с врожденной гипогаммаглобулинемией, при которой в период, когда уже исчезают материнские антитела (6-18 мес.), не происходит выработки своих антител к антигенам ВИЧ в титрах, достаточных для выявления в ИФА. Таким образом, отрицательный результат серологического тестирования в раннем возрасте оказывается недостаточным для вывода об отсутствии инфекции.

Для установления или полного отрицания ВИЧ-инфекции у новорожденных и детей первого года жизни рекомендуютсявирусологические тесты.

Максимально достоверными являются методы полимеразной цепной реакции (ПЦР) (ДНК и РНК-тест) и культурально-вирусологический. Их использование позволяет установить диагноз у 30-50% ВИЧ- инфицированных детей сразу после рождения и почти у 100% -в возрасте 3-6 мес.. Метод ПЦР основан на выявлении нуклеиновых кислот вируса — свободной РНК или провирусной ДНК в лимфоцитах крови, наличие которых свидетельствует о размножении ВИЧ в организме ребенка. Для диагностики ВИЧ- инфекции у детей можно применять оба вида тестов: показано, что они не различаются по чувствительности, однако ДНК-тест значительно проще в исполнении и дешевле. Важным условием получения достоверных результатов является использование для анализа только венозной крови ребенка. Метод ПЦР является высокочувствительным: несколько копий ДНК или РНК в образце плазмы может оказаться достаточно, чтобы результат тестирования был положительным. Поэтому пуповинная кровь непригодна для молекулярного тестирования. Это связано с возможностью контаминации крови ребенка материнской кровью во время родов; малейшая примесь вирусных частиц или лимфоцитов ВИЧ- инфицированной матери может привести к получению ложноположительного результата ЛЦР-анализа, что осложнит установление правильного диагноза ребенку.

По мнению экспертов, диагностическое ПЦР-тестирование следует проводить трижды в следующие сроки: — от рождения до 48 ч жизни; в возрасте 1-2 мес; -4-6 мес. Большинство специалистов сходятся во мнении, что при заражении in uteri наблюдается положительный результат вирусологического обследования в первые 48 ч жизни. По мере увеличения возраста ребенка возрастает и выявляемость ДНК ВИЧ при ДНК- тестировании. В случае перинатального заражения в первые 7 дней выявляется лишь 24% инфицированных детей, но уже через неделю их доля составляет 93%. Поэтому большинству инфицированных детей диагноз ВИЧ- инфекции может быть установлен в возрасте 1 мес. при повторном ПЦР- анализе.

Дети, у которых отрицательны результаты вирусологического тестирования при рождении и в возрасте 1 мес., обследуются в возрасте 4-6 месяцев. К возрасту 4-6 мес., практически у всех ВИЧ-инфицированных детей наблюдаются положительные результаты ПЦР-теста.

Другим тестом для оценки вирусологического статуса и мониторинга инфекции является определение вирусной нагрузки — концентрации вируса, выраженной в числе копий РНК ВИЧ (пропорциональном количеству вирусных частиц) на 1 мл плазмы. Для детей характерен высокий уровень вирусной нагрузки, который может сохраняться в организме ребенка в течение длительного времени. Показано, что при внутриутробном заражении в момент рождения концентрация вируса относительно мала (

Таким образом, у детей в возрасте от 6 до 18 мес. лишь сочетание двух методов — серологического и вирусологического — позволяет подтвердить или отвергнуть ВИЧ-инфицирование. Сделать вывод о его отсутствии у детей без клинических признаков ВИЧ- инфекции возможно при двух отрицательных результатах серологического и вирусологического тестов. При сочетании положительных вирусологических и серологических результатов инфицирование подтверждается. После 18 мес. единственным подтверждением ВИЧ-инфекции может быть определение антител к ВИЧ в сыворотке ребенка: после этого срока они могут там обнаруживаться только в том случае, если вырабатываются собственной иммунной системой в ответ на контакт с вирусом.

Приглашаем подписаться на наш канал в Яндекс Дзен

История вообще ужасная.

Вторая беременность, встала на учет в ЖК. Сдала все анализы, пришла на прием. Все хорошо, кроме мазка - молочница. Только анализ мочи еще не успел придти.

Я со спокойной совестью и хорошим анализом мочи иду к своему врачу. Она, как я зашла, закрывает дверь! Открывает мою карту, ищет анализы, спрашивает у медсестры, где тот анализ, по поводу которого звонили? Она в ответ, так анализа нет на руках, только позвонили и все. Она смотрит на меня и говорит: "У вас положительный ВИЧ пришел". Сказать, что я в шоке, значит не сказать ничего. Я в прострации. Как, где. Не может быть. (у меня за все 30 лет всего два партнера было. не наркоманка, не курила даже никогда. ). Она начала перебирать возможные пути: может зубы лечили в частных клиниках. маникюр/педикюр делали в салонах. Зубы лечила сразу после родов и то у мамы в диспансере. маникюр/педикюр делаю сама себе.

Я такого напора не выдерживаю, у меня просто шок, истерика, слезы, сопли. Она на меня смотрит спокойно. ну что вы, мол, плачете? Вы на больную вроде не похожи. "

Я спрашиваю, это может быть ошибкой? Не помню, что она ответила, то ли вообще ничего. В общем говорит, пусть муж пересдаст завтра. А вам позвонят из СПИД-центра, пригласят на беседу. Я вот точно не помню всего этого разговора, но просто у меня (беременной) даже сомнения не возникло. Все было так преподнесено, как будто это уже 100-% факт, что я инфицирована. Мы сами эти анализы не делаем, отправляем в центр СПИДА. Я в голове прокручиваю, ну думаю как такой центр ошибиться-то может.

В общем, выхожу из ЖК, звоню сразу мужу с наездом: "Изменял мне. У меня ВИЧ". Он говорит, что вообще за бред ты несешь, какой ВИЧ. Не изменял, мол, тебе никогда". Давай все в шутку превращать. А я реву.

Вечером пришел домой, ну тоже шутит, успокаивает меня, говорит, что просто ошибка. Только уже ночью что-то тоже поднапрягся. В общем под утро, мы оба ворочались, сон не шел..

На следующий день звонит из ЖК старшая медсестра, дала телефон СПИД-центра, сказала самой им позвонить и записаться.

Следующим утром мы с мужем приезжаем в этот центр. контингент там, конечно, еще тот. У меня в голове одна мысль: "Что я вообще здесь делаю.

Пригласили к врачу, которая беременных ведет. Она мне говорит: "Знаете, у вас перекрестный анализ. ИФА (имунноферментный анализ) положительный, иммуноблот отрицательный". (тест на ИФА делают всем, а иммуноблот это более точный анализ, чем ИФА, и используется для подтверждения результатов. Он считается более чувствительным и специфичным). Я окончательно успокоилась. Врач говорит, сейчас возьмем у вас кровь, и проведем экспресс-тест. Сразу будет известен результат. Я так обрадовалась, что не надо будет переживать еще 10 дней. В общем, экспресс-тест у обоих отрицательный. Я рада! Врач, говорит, значит и расширенный анализ скорее всего будет отрицательным. Спрашиваю, почему так получилось, мне ответ: "Ну знаете, у беременных бывает такое. "

А вот вчера муж поехал за результатами: у него отрицательно, а у меня снова ИФА - положительно, иммуноболт - отрицательно. Сказали снова к ним ехать на пересдачу. Вроде как попробуют по другому взять анализ, с какой-то сывороткой что-то связано.

Была еще вчера в своей ЖК на приеме у терапевта, посмотрела в карточке, уже к ним пришел результат анализа на ВИЧ, в котором так и написано"ИФА - положительно, иммуноболт - отрицательно". Сверху красной пастой - пересдать.

В общем, написала с целью, выяснить, было ли у кого-нибудь такое.

Свое отношение ко всей ситуации описывать не буду. Прошу оценить со стороны действия медперсонала.

Как вы считаете, компетентно ли поступила моя врач и вообще старшая медсестра? Может кто юридически грамотный, имеют ли право говорить анализы голословно, без подтверждения на бумаге.

вот и со мной случилась такая история. Беременность 30 недель. Пошла сдавать все анализы.Пришла к врачу на прием,а она мне у тебя Вич +! я конечно в шоке,откуда с мужем живем давно,я в нем уверена. тем более в мае сдавала все нормально было,а тут на тебе. и до беременности сдавала много раз,т.к. готовилась к лапароскопии.
на анализе написано ИФА положительный,а что то другое отрицательно.и что сыворотку пересдать вот так. вчера звонила акушерка с поликлиники с наездом на меня что меня дома нет,а я то еще работаю,типа говорит ты что скрываешься ты же знаешь какой у тебя анализ. и все в там духе со мной разговаривала.вчера целый день проревела. сегодня сдала повторно в поликлинике анализ.еще хочу платно сдать в независимой.вот такие дела. надеюсь что тоже обойдется. состояние конечно на грани,если честно.

Лично я стала жертвой подобной ошибки в анализе на гепатит С во время своей первой беременности 6 лет назад. При постановке на учёт в ЖК пришёл положительный анализ на гепатит С. Гинеколог отправила к инфекционисту, а та даже не стала предлагать пересдать, сразу назначила лечение, диету и т.д. (а у меня недель 8-9 беременности). Сказать, что я была в шоке-это не сказать ничего. Вот именно мысли и чувства как у Вас
isTORIja. Я всё приняла на веру, раз врач говорит-значит так и есть. И только потом до меня дошло-ПЕРЕСДАТЬ. Пересдали вместе с мужем сначала в ЦНМТ (и я и он на гепатит В и С сразу). Пришло всё отрицательно. Но я понимала, что инфекционистка не удовлетворится этим (а она кстати куда-то там уже позвонила, чтобы меня на учёт поставили). И мы пошли с мужем сдавать ещё в одном месте (если мне не изменяет память на ул.Семьи Шамшиных). Там специализированно делали такой анализ в супер развёрнутом виде (результат практически как книжка-брошурка пришёл в несколько страниц). У меня и мужа всё было отрицательно!

НО мы ждали этих результатов 1,5 месяца. Это был настоящий кошмар.

Когда я показала всё это инфекционистке, то она сказала, что не имела права предлагать мне пересдавать этот анализ платно. Но ведь в поликл. бесплатно она же могла предложить сдать. В общем в лаборатории передо мной извинялись даже (мол простите, ошибка-человеческий фактор), но мне было уже фиолетово. После таких переживаний было только чувство облегчения. Я только потребовала от инфекционистки, чтобы она при мне позвонила в то место, где на учёте больные гепатитом С стоят и всё опровергла. Тем дело и кончилось. Но для меня это был хороший опыт.

Вообщем когда ходила на прием к терапевту, специально просила показать, что там написано, в карточке подклеен результат: ИФА положительный, иммуноблот отрицательный, сверху красной ручкой написано "на пересдачу". В обменке ничего не написано, просто пусто. Пусть только попробуют написать, я им устрою!

Ездила в СПИД-центр в третий раз пересдавать кровь, вообще-то они второй раз должны были уже взять на сыворотку какую-то, но может подумали, что я просто что-то не то съела перед сдачей крови в первый раз и опять взяли как обычно, поэтому тоже самое. В третий раз к ним приехала, взяли крови аж три пробирки: на иммунограму,. вирусы и что-то еще. В общем, после этого анализа уже должны снять меня с учета)))

До гинеколога своего пока не дошла. Хочу к заведующей сходить поговорить, посмотрю на её реакцию, что скажет, может все-таки решу в Минздрав написать.

Потому что меня такое отношение совсем не устраивает, не понимаю как можно сказать беременной, что у неё просто ВИЧ положительный. Если бы мне сразу сказали, что иммуноблот отрицательный, даже без объяснения, что это такое, я бы была спокойна, в интернете прочитала, что если блот отриц-ный, значит 100%, что человек не инфицирован.

Добавлено спустя 3 минуты 6 секунд:

Я тут недавно была на приеме у своего гинеколога. Стала выяснять, почему она мне сказала неполный анализ без документального подтверждения. Ну я вся на эмоциях была, говорю как можно так работать, я считаю, что это просто некомпетентно и некорректно. Вы говорю мне так все преподнесли, что я сама поверила. Речь про пересдачу и недостоверный анализ прозвучала только из моих уст, а не от врача. От вас я услышала только про уголовную ответственность. Она мне: "Ну что вы так расстраиваетесь, теперь же выяснилось, что у вас все нормально". Я вообще в шоке. Говорю, кто мне вернет те два дня нервов, кошмара. Говорю, как так, сказали бы сразу, что имунноблот отрицательный, я бы в интернете сама прочитала, что это уже отменяет ВИЧ, и я уже была бы спокойна. Она сослалась на заведующую, говорит, что у неё такое в первый раз, что работает она 1,5 года и все мне сказала так, как сказала ей заведующая. Почему, говорит, вы к заведующей не сходили с претензиями? Заведующая ей отдала результат на бумажке, где было написано, что ИФА-положительный, а имуноблот в работе. Я считаю, тогда вообще не нужно было мне говорить, либо говорить по существу с разъяснениями, что вот расширенный анализ еще не готов, что у беременных такое бывает из-за гормонального сбоя. Но как выяснилось, наши врачи ничего этого не знают, у них такое в первый раз.

Только вот за анализами мы съездить не успели, потому что уезжали.
В итоге всего во время моего разговора с врачом акушерка пишет в моей обменке в поле: "Диагноз" - "Беременность 18-19 недель (хотя у меня уже 20-я) ВИЧ (ИФА-положительный).

Я в шоке, говорю, что вы мне там пишите такое. Я это подписывать не буду. Я им сидела пол часа объясняла, что отрицательный имуноблот отменяет ВИЧ. им по барабану, она сидит с умным видом и говорит, что не написать не имеет права.

Я звоню врачу-инфекционисту, спрашиваю, что там с моим анализом? Та говорит, все хорошо, ВИЧ-инфекции нет. Рассказываю ей, что в обменной карте написали мне диагноз "ВИЧ", это правильно. Отвечает: "Конечно. нет!"

Написала во вторник, пока молчание.

Пока официальный ответ из Минздрава не пришел.

НО мне на прошлой неделе позвонила главврач КДП № 2 (при которой моя ЖК) и очень извинялась за всю эту ситуацию, сказала в любое удобное время привезти мою обменку, чтобы они её переписали.

Добавлено спустя 4 минуты 34 секунды:

Информацию про ИФА им действительно сказали по телефону из лаборатории, имуноблот был в работе. Потом пришел сам анализ, там написано: ИФА положительный, имуноблот отрицательный.

Заведующая сказала, что они поступили неверно, что отправили меня сразу в СПИД-центр, вроде как повторно я должна была сдать кровь у них снова, а потом в случае такого же результата отправиться на "дообследование" в СПИД-центр.

Добавлено спустя 7 минут 49 секунд:

Еще вопрос, как добиться, чтобы к нам в ЖК специалист из СПИД-центра приехал ? Вы куда-то звонили?

Добавлено спустя 2 минуты 10 секунд:

Самое главное добиться, чтобы заменили обменку. У меня уже 39 неделя скоро пойдет.

Жаропонижающие средства для детей назначаются педиатром. Но бывают ситуации неотложной помощи при лихорадке, когда ребенку нужно дать лекарство немедленно. Тогда родители берут на себя ответственность и применяют жаропонижающие препараты. Что разрешено давать детям грудного возраста? Чем можно сбить температуру у детей постарше? Какие лекарства самые безопасные?

ИММУНОБЛОТ (western blot) - метод лабораторного исследования сыворотки крови на присутствие антител к ВИЧ; это более точный анализ, чем ИФА, и используется для подтверждения результатов ИФА. ИФА - иммуноферментный анализ (ELISA) -лабораторное исследование, позволяющее определить присутствие в крови ВИЧ-антител; тест на ВИЧ-антитела.

По рекомендации ВОЗ иммуноблотинг (вестерн-блот) используется при диагностике ВИЧ-инфекции в качестве дополнительного экспертного метода, который должен подтверждать результаты ИФА . Обычно этим методом перепроверяют положительный результат при ИФА, поскольку он считается более чувствительным и специфичным, хотя более сложным и дорогим.

Иммунный блоттинг сочетает в себе иммуноферментный анализ (ИФА) с предварительным электрофоретическим разделением белков вируса в геле и их переносом на нитроцеллюлозную мембрану. Процедура иммуноблота состоит из нескольких стадий (). Сначала предварительно очищенный и разрушенный до составных компонентов ВИЧ подвергается электрофорезу, при этом все входящие в состав вируса антигены разделяются по молекулярному весу. Затем методом блоттинга антигены переносят из геля на полоску нитроцеллюлозы или нейлонового фильтра, которые отныне содержат невидимый пока глазом спектр белков, характерный для ВИЧ. Далее на стрип наносится исследуемый материал (сыворотка, плазма крови пациента и т.п.), и если в пробе есть специфические антитела, то они связываются со строго соответствующими им полосками белков-антигенов. В результате последующих манипуляций (подобных ИФА) результат этого взаимодействия визуализируется - делается видимым. Наличие полос на определённых участках стрипа подтверждает присутствие в исследованной сыворотке антител к строго определённым антигенам ВИЧ.

Иммунный блоттинг чаще всего используют для подтверждения диагноза ВИЧ-инфекции. ВОЗ считает положительными сыворотки, в которых методом иммунного блотинга обнаруживаются антитела к каким-либо двум белкам оболочки ВИЧ. Согласно этим рекомендациям, при наличии реакции только с одним из белков оболочки (gp160, gp120 , gp41) в сочетании или без реакции с другими белками, результат считается сомнительным и рекомендуется повторное исследование, с использованием набора другой серии или другой фирмы. Если и после этого результат остается сомнительным, исследования продолжаются через каждые 3 месяца.

Для проведения иммуноблотинга на первом этапе белки, содержащиеся в сыворотке крови, разделяют в геле по их молекулярной массе и заряду с помощью электрического поля (методом электрофореза в геле). Затем на гель накладывают нитроцеллюлозную или нейлоновую мембрану и "промокают" (это и есть блоттинг). Это осуществляют в специальной камере, которая позволяет осуществить полный пернос материала из гела на мембрану. В результате та картина расположения белков, которая была на геле, воспроизводится на мембране (блот), с которой можно далее легко манипулировать. Первоначально мембрану обрабатывают антителами к искомому антигену, а после отмывки несвязанного материала, добавляют радиоактивно меченный коньюгат, который специфически связывается с антителами (как в ИФА). Местоположение образующегося комплекса антиген - антитело - меченый коньюгат определяют с помощью авторадиографии с использованием рентгеновской пленки. После ее проявления все становится ясным, есть антигены в крови или их нет.

Что это такое - иммуноблот? Это распространенный метод лабораторной диагностики вирусных инфекций человека. Его считают одним из самых точных и достоверных способов выявить наличие ВИЧ. По своей надежности он превосходит даже иммуноферментный анализ (ИФА). Результаты иммуноблота считаются неопровержимыми и окончательными.

Общая информация

Иммуноблот - что это такое? Для того чтобы распознать у человека ВИЧ-инфекцию, необходимо пройти метод лабораторного исследования сыворотки крови на присутствие антител. Методику иммуноблоттинга еще называют вестерн-блот (western blot). Ее используют для обнаружения вирусных инфекций человека, как дополнительный экспертный способ. Он необходим для подтверждения ИФА - лабораторного исследования, позволяющего определить в крови наличие ВИЧ-антител. Иммуноблоттингом перепроверяют положительный анализ ИФА. Он считается наиболее чувствительным, сложным и дорогим.

Предназначение

Что это такое - иммуноблот? Это методика сыворотки крови на наличие антител к вирусу. Во время проведения исследования специалист предварительно разделяет белки вируса в геле и переносит их на нитроцеллюлозную мембрану. Предназначена процедура иммуноблоттинга для определения ВИЧ на разных стадиях. На первом этапе очищенный вирус от составных частей подвергают электрофорезу, а антигены, входящие в его состав, разделяют по молекулярному весу.

Вирус иммунодефицита человека размножается в живой клетке, встраивая в нее свою генетическую информацию. На этом этапе человек становится носителем вируса ВИЧ, если был заражен. Специфика заболевания в том, что оно долгое время может никак себя не проявлять. Вирус разрушает лимфоциты, поэтому иммунитет человека снижается, и организм становится неспособным противостоять инфекциям. Если ВИЧ грамотно и вовремя лечить, пациент проживет до глубокой старости. Отсутствие терапии неминуемо приводит к летальному исходу. С момента инфицирования, но без лечения, максимальный срок жизни составляет не более десяти лет.

Особенности

Иммуноблот анализ - достоверный метод, который позволяет определить наличие антител к антигенам ВИЧ первого и второго типа. Если человек инфицирован, уже через две недели появляются антитела, которые могут обнаруживаться и намного позднее. Особенность ВИЧ в том, что количество антител быстро увеличивается и сохраняется в крови больного. Даже если они присутствуют, болезнь может не проявлять себя в течение двух и более лет. не всегда точно определяет наличие заболевания, поэтому требуется подтверждение результатов с помощью иммуноблоттинга и ПЦР, если иммуноферментный анализ показал положительный результат.

Показания к назначению

• резкое похудение;
• слабость, потеря работоспособности;
• расстройство кишечника (диарея), которое продолжается в течение трех недель;
• обезвоживание организма;
• лихорадка;
• увеличение лимфатических узлов на теле;
• развитие кандидоза, туберкулеза, пневмонии, токсоплазмоза, обострение герпеса.

Пациенту не нужно подготавливаться перед сдачей венозной крови. За 8-10 часов до исследования нельзя принимать пищу. Не рекомендуется за сутки до сдачи крови употреблять алкогольные и кофейные напитки, заниматься тяжелыми физическими упражнениями, испытывать волнение.

Где сделать анализ?

Где можно сдать анализ на ВИЧ? ИФА, иммуноблот исследования проводят в городских частных клиниках, результаты выдают в течение суток. Возможна и срочная диагностика. В государственных медицинских учреждениях анализы ИФА и иммуноблоттинг проводят бесплатно, согласно законодательству РФ. В обязательном порядке проверку на инфекционные заболевания проходят беременные женщины, а также пациенты, которым предстоит госпитализация или оперативное вмешательство.

Как проводится исследование?

Как проводят анализ ИФА? Иммуноблот положительный/отрицательный подтверждает или опровергает результаты иммуноферментного анализа. Процедура исследования достаточно простая. Специалист проводит забор венозной крови, по времени это занимает не более пяти минут. После взятия проб место укола следует дезинфицировать и заклеить пластырем. Забор проводят натощак, поэтому после процедуры не помешает съесть плитку горького шоколада или выпить сладкий горячий напиток.

Для того чтобы получить направление на бесплатный анализ в государственном медицинском учреждении, необходимо посетить врача-терапевта. В целом, иммуноблот не отличается от других исследований крови по способу забора. Методика исследования простая. Если в крови человека присутствует вирус, организм для его разрушения начинает вырабатывать антитела. Для каждого вируса существует свой набор белков-антигенов. Выявление этих антител и есть основа методики иммуноблоттинга.

Стоимость

Сколько стоит анализ? Иммуноблот на ВИЧ не относится к дешевым исследованиям. В среднем, скрининговое обследование иммуноферментными методами стоит от 500 до 900 рублей. Иммуноблоттинг - это верификационное исследование, стоимость которого составляет от трех до пяти тысяч рублей. Более сложные методы стоят намного дороже. Например, за нужно будет заплатить около 12000 рублей.

Трактовка результата

Самые распространенные методы диагностики инфекции ВИЧ - это иммуноферментный анализ и иммуноблот. Они ипользуются для определения в сыворотки крови антител к вирусу иммунодефицита. Наличие инфекции обычно подтверждают двумя тестами: скрининговым и подтверждающим. Интерпретация результатов исследования должна проводиться врачом, он же ставит диагноз и назначает лечение. Если иммуноблот положительный, это означает, что в организме человека присутствует вирус.

Не допустить заражение вирусом иммунодефицита можно, если соблюдать определенные правила: избегайте случайных половых связей, используйте презерватив во время контактов, не принимайте наркотики. Если болезнь обнаружена у беременной женщины, важно четко соблюдать рекомендации лечащего врача, не забывать проходить обследования на предмет наличия вируса.

Поскольку исследования проводятся поэтапно, то время до получения результата может составить от 1 до 10 дней.

Проходя тестирование в Ханты-Мансийском центре по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями граждане РФ имеют возможность обследоваться на ВИЧ анонимно и бесплатно, получить полное консультирование у инфекционистов и психологов как до, так и после прохождения теста.

Существует методика, позволяющая определять не антитела к вирусу ВИЧ, а сам вирус в организме, это методика ПЦР — полимеразной цепной реакции. Она доказала свою эффективность и используется для:

для определения необходимости назначения лечения и контроля лечения;

для определения ВИЧ-статуса новорожденных, родившихся от ВИЧ-инфицированных матерей.

ПЦР позволяет определить совсем незначительное количество вирусных частиц в зараженном материале. Проведение ПЦР требует сложного лабораторного оборудования и высокой квалификации специалистов. Метод очень дорогостоящий и в массовом тестировании на ВИЧ, которое согласно законодательству проводится для населения бесплатно, не применяется.