Диагностика саркоцистоза у человека

Человек - окончательный хозяин двух видов саркоцист: Sarcocystis hominis и Sarcocystis suihominis (от греч. sark - мясо), которые вызывают саркоцистоз.

Половое размножение саркоцист (их прежнее наименование - саркоспоридии) совершается в ворсинках слизистой оболочки тонкого кишечника человека. При этом образуются и выделяются с испражнениями зрелые одиночные спороцисты, иногда они спаренные в общей сморщенной оболочке ооцисты (ооциста - предшествующая стадия, развивающаяся в эпителии кишечника).

Спороцисты овальные, размером 12-16X9-10 мкм, содержат по 4 зрелых спорозоита. Хорошо сохраняются в окружающей среде.

После заглатывания промежуточными хозяевами (для S. hominis - крупный рогатый скот, для S. suihominis - свиньи) спорозоиты в кишечнике освобождаются из спороцисты и проникают через кровь в поперечнополосатые мышцы. Здесь происходит бесполый цикл размножения, что и приводит к образованию в мышцах саркоцист.

Саркоцисты располагаются продольно в мышечных волокнах. Имеют вид удлиненных, иногда до 5 см, образований, покрыты тонкой оболочкой, от которой отходят внутренние перегородки. Образующиеся благодаря этому камеры заполнены зернистой массой — большим числом трофозоитов. Трофозоиты длиной в несколько микрометров, передний конец их заострен, ядро расположено ближе к заднему концу тела.

По Романовскому цитоплазма окрашивается в бледно-голубой или светло-сиреневый цвета, ядро - в фиолетово-красный.

Человек заражается, употребляя в пищу недостаточно термически обработанную говядину или свинину, содержащие саркоцисты. В некоторых случаях саркоцисты развиваются и в мышцах человека (известны как Sarcocystis Lindemanni, хотя самостоятельность этого вида не доказана), заражение предположительно происходит от мелких грызунов.

Симптомы (клиническая картина) саркоцистоза

При кишечном саркоцистозе наблюдаются следующие симптомы: отсутствие аппетита, тошнота, метеоризм, боли в области живота, понос. При заражении через свинину клинические явления (симптомы) более выражены. Заболевание наступает через 3-8 ч после употребления в пищу инфицированного мяса. Продолжительность болезни от нескольких дней до 3 нед. Возможно бессимптомное течение саркоцистоза.

Мышечный саркоцистоз протекает обычно бессимптомно, в некоторых случаях сопровождается явлениями миозита и миалгии, эозинофилией крови, аллергическими кожными высыпаниями.

Диагностика саркоцистоза

Диагностика кишечного саркоцистоза заключается в следующем. В свежевыделенных испражнениях обнаруживают одиночные или реже спаренные спороцисты, содержащие по 4 зрелых спорозоита. Спороцисты появляются в фекалиях с 9-го дня после заражения, максимальное их число наблюдается на 14-22-й день, и могут обнаруживаться сравнительно недолго и в небольшом количестве. Рекомендуется применять методы обнаружения с обогащением в 33 % растворе сульфата цинка.

Для диагностики мышечного саркоцистоза проводится биопсия и исследуются мазки и гистологические срезы очагов поражения. Применяют также методы переваривания мышц с трипсином или микроскопии мышц в компрессориуме с помощью трихинеллоскопа. Для исследования берут мышцы пищевода, сердца, диафрагмы, где саркоцисты локализуются наиболее часто. Перед микроскопией рекомендуют на мышечные срезы нанести но 2-3 капли смеси из равных частей 0,5 % водного раствора метиленового синего и ледяной уксусной кислоты. После 3-5-минутного окрашивания срезы обесцвечиваются, нанесением на них 2-3-х капель 20-25 % раствора нашатырного спирта. На голубом фоне мышечной ткани саркоцисты имеют темно-синий цвет.

Лечение саркоцистоза

При попадании саркоцист в организм человека без клинических проявлений лечения не требуется. Через короткое время паразит покинет организм самостоятельно и без последствий. При наличии клинических проявлений достаточно пройти лечение саркоцистоза препаратом фуразолидон. Принимать его необходимо по 2 таблетки 3 раза в день в течение 3 дней.

Саркоцистоз человека: симптомы и фото, цикл развития

Саркоцистоз (саркоспоридиоз) — протозойное зоонозное заболевание, которое возникает у разных видов животных и человека. При заболевании заражаются мышцы и некоторые органы организма. Саркоцистоз появляется у организма в случае заражения протистами из рода Sarcocystis (саркоцистами).

Процесс жизни саркоцист идет в две фазы, которые протекают в двух разных организмах, принадлежащим разным видам. Половой процесс жизненного цикла протист происходит в кишечнике первого носителя и по завершению появляются новообразования — ооцисты или спороцисты, которые выделяются с калом такого организма.

Бесполая фаза протекает в теле промежуточного носителя, а именно, когда ооцисты или спороцисты попадают в пищеварительный тракт, начинает происходить освобождение спорозоитов, проникающие через тонкие стены желудка и кишечника в кровь, а затем и в мышцы, где образуются цисты, которые заполнены трофозоитами.

Саркоцистоз у животных видов встречается повсеместно и очень часто. Заражение болезнью саркоцистоз осуществляется алиментарно, то есть при поедании ооцист вместе с употреблением корма или воды. Главными источниками заражения животных выступают собаки, кошки, дикие хищники и человек.

Для избавления от паразитов наши читатели успешно используют Intoxic. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

При попадании в организм животного большого количества спороцист болезнь длится долго и остро. Через 1,5-2 недели значительно поднимается температура тела, наблюдается изменение в поведение зараженного животного.

Если беременные животные заразились саркоцистозом, то это приведет к абортам.

В наибольших случаях саркоцистоз протекает хронически. У животных видны:

• ухудшение состояния,
• заметно увеличивается температура тела,
• исчезает аппетит и близка к нулю продуктивность,
• могут появиться эрозии на языке или внутренней слизистой щек.

Большое количество спороцист в организме, а именно в сердечной мышце может привести к аритмии. Долгое протекание болезней приводит к:

1. онемению конечностей,
2. отеку тканей в области подчелюстного пространства,
3. сильному истощению
4. к гибели.

У специально зараженных телят наблюдали:

• угнетение,
• слабость,
• исхудание,
• лихорадка,
• тахикардия,
• учащенное дыхание,
• одышка ,
• скрежет зубами,
• подергивание мышц .

Если у человека протекает кишечный саркоцистоз, то при этом видны такие симптомы:

При инфицировании через мясо свиньи симптомы заражения более выражены. Первые проявления болезни наступают через 3-8 часов. Тогда больной заболевает на срок от нескольких дней до 3 недель.

Саркоцистоз бывает мышечный, и он протекает часто без видимых симптомов, в редких случаях вызывает явления миозита и миалгии, эозинофилией крови, аллергических кожных высыпаний.

У всего рогатого скота появляются такие изменения:

1. истощение,
2. онемение слизистых оболочек,
3. матовостью волосяного покрова,
4. внутренние кровоизлияния.

При жизни инфицированного животного или человека диагностика болезни саркоцистоз может происходить серологическими микро реакциями с сывороткой крови.

После смерти заболевшего, диагностика происходит через исследование компрессорных методов мышц диафрагмы, языка, межреберных и жевательных.

Диагностирование кишечного саркоцистоза у человека происходит так — в свежих испражнениях заболевшего человека ищут одиночные или реже спаренные спороцисты, которые содержат по 4 зрелых спорозоита.

Спороцисты можно обнаружить в фекалиях с 9-10-го дня после заражения, тогда же максимум можно наблюдать на 14-22-й день. В практике применяются методы проявления саркоцистоза с обогащенным в 33 % растворе сульфата цинка.

Существует, рассмотренный отчасти раннее, гистологический метод. Такая диагностика состоит в основном из пяти этапов:

1. фиксация,
2. консервирование,
3. приготовление гистологических срезов,
4. окрашивание и промывание срезов,
5. микроскопирование.

Срезы тканей разнообразных органов крупнорогатого скота, зараженного саркоцистозой, помещаются:

• в 10% забуференном формалине,
• в жидкости Bouin,
• в фиксаторе Helly.

Некоторою часть получившихся анализов после такой фиксации замачивают парафином, затем делают срезы толщиной не более 5 мкм, оставшуюся часть помещают в раствор метакрилата и изготавливают образцы толщиной 3 мкм.

Диагностирование саркоцистоза мышц у человека происходит за счёт биопсии и исследуются мазки и гистологические ткани очагов поражения.

Для диагностики используют мышцы пищевода, сердца, диафрагмы, где саркоцисты находятся наиболее часто и где их большое количество.

Лечения большинства животных еще не существует, а те которые существуют мало эффективны. К примеру, получены положительные испытания при лечении заболевших телят и овец ампролиумом и химкокцидом.

При скоплении саркоцист в теле человека без симптомов лечение и не требуется. Паразит всегда покидает организм носителя через короткий промежуток времени, и если его обитание было без симптомов, то для человека останется без последствий саркоцистоз.

При наличии ярко выраженных симптомов заражения необходимо пройти лечение от саркоцистоза препаратом фуразолидон или похожими. Принимать нужно по 2 капсулы 3 раза в день в течение 3-4 дней.

Лучше не держать плотоядных животных вблизи ферм, детских лагерей и в местах, где хранятся корма и злаковые. Зараженное саркоцистами мясо или корма нельзя давать употреблять в пищу собакам, кошкам или другим плотоядным в необработанном виде.

Охраняющих территорию собак нужно хотя бы раз в квартал обследовать на кишечный саркоцистоз , и зараженных животных усыплять. В фермерских комплексах должны быть построены качественные санузлы. Нельзя, что бы бездомные животные бродили по населенным пунктам.

Качество мяса в главной мере зависит от степени заражения хроническим саркоцистозом у животного. Говядина от зараженных животных содержит саркоцисты,из-за этого в нем меньше доброкачественных мышц. Присутствие в теле животного больших саркоцист не дает роста соединительным тканям и снижает упитанность животных.

Таким образом, тщательный осмотр и микро исследования пораженной саркоцистами свинины и говядины заключают, прежде всего, структурные отличия мышечной ткани здоровых животных и заболевших саркоцистозом, такие как:

• лейкоцитарные,
• гистиоцитарные,
• эозинофильные крупно-очаговые инфильтраты,
• ухудшающие качество мяса.

Видео в этой статье покажет, как проводится проверка мяса на паразитов.

• 
  Ришта: цикл развития червя, лечение, фото
• 
  Жизненный цикл развития острицы
• 
  Жизненный цикл развития печеночного сосальщика

Саркоцистоз: причины возникновения, симптомы и лечение

Инвазионное заболевание, вызванное простейшими паразитами саркоцистами, носит название саркоцистоз. Эти микроорганизмы из семейства Sarcocystidae класса споровиков при благоприятных условиях могут образовывать твердые оболочки – цисты.

Через воду и корм они попадают в желудок домашнего скота. Человек, который поедает необработанное или плохо прожаренное мясо зараженного животного, может заразиться цистами.

Саркоцисты проходят две фазы развития: бесполую и половую.

Промежуточными хозяевами цист являются рогатый скот, свиньи и птицы. Одноклеточные паразиты попадают в пищевод животного с кормом и сырой водой. Спорозоиты через желудочно-кишечный тракт проникают в кровь и в клетки внутренних органов животного. В его организме протекает бесполое размножение спорозоитов — мерогония.

На следующем этапе происходит образование саркоцист, они состоят из множества метрозоитов. Наибольшее их скопление наблюдают в печени, почках, языке, сердце, легких и селезенке. Иногда мышечные цисты достигают 30-50 мм в диаметре. Вместе с испражнениями животных цисты попадают в почву и воду.

Фаза 2 (половая)

Поедая сырое мясо или выпив грязную воду, заразиться спороцистами могут домашние питомцы — собаки и кошки. Именно они и человек являются окончательными хозяевами цист. В кишечном тракте происходит созревание взрослого паразита. Одноклеточные микроорганизмы, попадая в организм, паразитируют в кишечнике или мышечной ткани человека. Внедряясь в эпителии тонкого кишечника, мерозоиты паразитируют в клетках, освобождаются от своих оболочек, растут и развиваются. После их оплодотворения образуется зигота, а затем она перерастает в ооцисту (размер 9-20 на 12-15 мкм), в которой развивается 2 спороциста (12-17 мкм в диаметре). Каждый из них содержит 4 спорозоита.

Оболочка у ооцисты очень нежная, поэтому некоторые из них погибают ещё в кишечнике. Со временем ооциста лопается, выделяя спороцистов, которые выходят из кишечного тракта вместе с калом. У них более плотная оболочка и они могут долго сохраняться в окружающей среде в ожидании нового хозяина.

Для избавления от паразитов наши читатели успешно используют Intoxic. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Через 3-5 часов после заражения, человек уже может почувствовать первые симптомы заражения, но бывает, что заболевание протекает бессимптомно.

Симптомы болезни

Первые признаки кишечного заболевания при саркоспоридиозе:

• Тошнота, слабость.
• Понос.
• Рвота.
• Тупая боль и рези в кишечнике.
• Снижение аппетита.
• Возможные высыпания на кожных покровах, аллергия на вещества жизнедеятельности паразитов.
• Не большое повышение температуры тела.
• Иногда происходит увеличение лимфоузлов.

При мышечном заражении только через 2 месяца начинают появляться боли в теле, болезненные ощущения при движении, происходит отёк межчелюстной зоны, идёт истощение всего организма.

Симптоматика зависит от следующих критериев:

1. Условие жизни человека и его питание.
2. Состояние иммунитета.
3. Зависит от типа возбудителя: живой паразит или циста.
4. От количества возбудителей в кишечнике.

При хроническом течении заболевания:

• Происходит падение работоспособности.
• Может развиться малокровие.
• Истощение организма.
• Температура тела поднимается до 38-40 градусов.

Если симптомы указывают на присутствие у человека цист, нужно найти причину, по которой это произошло, выявив её, можно будет избежать повторного заражения.

Основные причины заражения человека цистами:

• Употребление мяса зараженного животного, которое прошло не достаточную термическую обработку.
• Немытые руки.
• Несоблюдение правил гигиены.
• Контакт с инфицированным человеком.
• Передача инфекции через домашних животных.

Во время правильной термической обработки (свыше 60 градусов) мяса паразиты погибают. Для того чтобы понять какой вид паразитов поселился в организме человека, нужно провести своевременную диагностику.

Для выявления кишечного саркоцистоза берут анализ кала больного для обнаружения одиночных или спаренных спороцист. Обычно их выявляют только на 10 день после заражения, максимум спороцист находится в фекалиях на 15-20 день после инфицирования. Так же берут анализ крови и проводят серологические микрореакции с сывороткой крови.

Гистологический метод выявления саркоцистов заключается в следующем:

• Фиксация ткани.
• Консервирование.
• Гистологические срезы.
• Промывание и окрашивание срезов.
• Микроскопирование.

Для обнаружения саркоцистов используют мышцы сердца, пищевода, диафрагмы животного или человека. Правильный диагноз поможет установить стадию заражения и назначить своевременное лечение.

Во время обострения болезни, нужно пить много жидкости (до 2 литров в сутки), и принимать солевые растворы. Острый период длится около двух недель. При расстройстве кишечного тракта лучше отказаться на время от приёма пищи. Далее нужна строгая щадящая диета. В рацион питания должны входить продукты растительного происхождения, богатые на клетчатку, которые не вызывают запоры, метеоризм и гниение. Необходимо на время лечения исключить сахар, соль, кофе, конфеты, дрожжи, спиртные напитки, маринады. Ограничить употребление: картофеля, мяса, яиц, молока, белого хлеба, свежей рыбы.

При обнаружении спороцистов, пациенту назначают Фуразолидон (Фурадонин, Фурагин), который принимают по 2 таблетки каждые 8 часов в течение 3 дней.

Выделения в процессе жизнедеятельности спороцистов могут вызвать аллергию, в этом случае врач назначает антигистаминные препараты (Тавегил, Супрастин, Диазолин, Димедрол).

Во время принятия ванны можно добавить в тёплую воду несколько капель аниса. Вещества эфирного масла проникают через поры кожного покрова и изгоняют паразитов.

Бывает, что болезнь у человека протекает не заметно, лечение в этом случае не проводят. После трёх недель паразиты выводятся из организма самостоятельно с каловыми массами.

Чтобы избежать заражения саркоцистами, нужно следовать определённым рекомендациям:

1. Не употреблять в пищу плохо прожаренное или не достаточно обработанное мясо и сало.
2. Стараться не есть сырые овощи прямо с грядки, особенно если огород был удобрен коровьим навозом.
3. Соблюдать правила гигиены.
4. Не пить сырую воду, особенно из колодцев и открытых водоёмов.
5. Стараться обдавать кипятком сырую зелень.
6. Находясь за границей, не купаться в неизвестных водоёмах.
7. Проводить дегельминтизацию домашних животных, так же в профилактических целях её проводят всем членам семьи.

Заразиться можно везде и всюду. Не нужно паниковать и бояться. Выполняя не сложные рекомендации и соблюдая правила гигиены, можно оставаться спокойным за своё здоровье и здоровье своей семьи.

Саркоцистоз (саркоспоридиоз) — протозойное зоонозное заболевание, которое возникает у разных видов животных и человека. При заболевании заражаются мышцы и некоторые органы организма. Саркоцистоз появляется у организма в случае заражения протистами из рода Sarcocystis (саркоцистами).

Процесс жизни саркоцист идет в две фазы, которые протекают в двух разных организмах, принадлежащим разным видам. Половой процесс жизненного цикла протист происходит в кишечнике первого носителя и по завершению появляются новообразования — ооцисты или спороцисты, которые выделяются с калом такого организма.

Бесполая фаза протекает в теле промежуточного носителя, а именно, когда ооцисты или спороцисты попадают в пищеварительный тракт, начинает происходить освобождение спорозоитов, проникающие через тонкие стены желудка и кишечника в кровь, а затем и в мышцы, где образуются цисты, которые заполнены трофозоитами.

Саркоцистоз у животных видов встречается повсеместно и очень часто. Заражение болезнью саркоцистоз осуществляется алиментарно, то есть при поедании ооцист вместе с употреблением корма или воды. Главными источниками заражения животных выступают собаки, кошки, дикие хищники и человек.

Симптомы и течение

При попадании в организм животного большого количества спороцист болезнь длится долго и остро. Через 1,5-2 недели значительно поднимается температура тела, наблюдается изменение в поведение зараженного животного.

Если беременные животные заразились саркоцистозом, то это приведет к абортам.

В наибольших случаях саркоцистоз протекает хронически. У животных видны:

• ухудшение состояния,
• заметно увеличивается температура тела,
• исчезает аппетит и близка к нулю продуктивность,
• могут появиться эрозии на языке или внутренней слизистой щек.

Большое количество спороцист в организме, а именно в сердечной мышце может привести к аритмии. Долгое протекание болезней приводит к:

1. онемению конечностей,
2. отеку тканей в области подчелюстного пространства,
3. сильному истощению
4. к гибели.

У специально зараженных телят наблюдали:

• угнетение,
• слабость,
• исхудание,
• лихорадка,
• тахикардия,
• учащенное дыхание,
• одышка ,
• скрежет зубами,
• подергивание мышц .

Если у человека протекает кишечный саркоцистоз, то при этом видны такие симптомы:

При инфицировании через мясо свиньи симптомы заражения более выражены. Первые проявления болезни наступают через 3-8 часов. Тогда больной заболевает на срок от нескольких дней до 3 недель.

Саркоцистоз бывает мышечный, и он протекает часто без видимых симптомов, в редких случаях вызывает явления миозита и миалгии, эозинофилией крови, аллергических кожных высыпаний.

Патологоанатомические изменения

У всего рогатого скота появляются такие изменения:

1. истощение,
2. онемение слизистых оболочек,
3. матовостью волосяного покрова,
4. внутренние кровоизлияния.

Диагностика

При жизни инфицированного животного или человека диагностика болезни саркоцистоз может происходить серологическими микро реакциями с сывороткой крови.

После смерти заболевшего, диагностика происходит через исследование компрессорных методов мышц диафрагмы, языка, межреберных и жевательных.

Диагностирование кишечного саркоцистоза у человека происходит так — в свежих испражнениях заболевшего человека ищут одиночные или реже спаренные спороцисты, которые содержат по 4 зрелых спорозоита.

Спороцисты можно обнаружить в фекалиях с 9-10-го дня после заражения, тогда же максимум можно наблюдать на 14-22-й день. В практике применяются методы проявления саркоцистоза с обогащенным в 33 % растворе сульфата цинка.

Существует, рассмотренный отчасти раннее, гистологический метод. Такая диагностика состоит в основном из пяти этапов:

1. фиксация,
2. консервирование,
3. приготовление гистологических срезов,
4. окрашивание и промывание срезов,
5. микроскопирование.

Срезы тканей разнообразных органов крупнорогатого скота, зараженного саркоцистозой, помещаются:

• в 10% забуференном формалине,
• в жидкости Bouin,
• в фиксаторе Helly.

Некоторою часть получившихся анализов после такой фиксации замачивают парафином, затем делают срезы толщиной не более 5 мкм, оставшуюся часть помещают в раствор метакрилата и изготавливают образцы толщиной 3 мкм.

Диагностирование саркоцистоза мышц у человека происходит за счёт биопсии и исследуются мазки и гистологические ткани очагов поражения.

Для диагностики используют мышцы пищевода, сердца, диафрагмы, где саркоцисты находятся наиболее часто и где их большое количество.

Лечение

Лечения большинства животных еще не существует, а те которые существуют мало эффективны. К примеру, получены положительные испытания при лечении заболевших телят и овец ампролиумом и химкокцидом.

При скоплении саркоцист в теле человека без симптомов лечение и не требуется. Паразит всегда покидает организм носителя через короткий промежуток времени, и если его обитание было без симптомов, то для человека останется без последствий саркоцистоз.

При наличии ярко выраженных симптомов заражения необходимо пройти лечение от саркоцистоза препаратом фуразолидон или похожими. Принимать нужно по 2 капсулы 3 раза в день в течение 3-4 дней.

Профилактика и меры борьбы

Лучше не держать плотоядных животных вблизи ферм, детских лагерей и в местах, где хранятся корма и злаковые. Зараженное саркоцистами мясо или корма нельзя давать употреблять в пищу собакам, кошкам или другим плотоядным в необработанном виде.

Охраняющих территорию собак нужно хотя бы раз в квартал обследовать на кишечный саркоцистоз , и зараженных животных усыплять. В фермерских комплексах должны быть построены качественные санузлы. Нельзя, что бы бездомные животные бродили по населенным пунктам.

Качество мяса в главной мере зависит от степени заражения хроническим саркоцистозом у животного. Говядина от зараженных животных содержит саркоцисты,из-за этого в нем меньше доброкачественных мышц. Присутствие в теле животного больших саркоцист не дает роста соединительным тканям и снижает упитанность животных.

Таким образом, тщательный осмотр и микро исследования пораженной саркоцистами свинины и говядины заключают, прежде всего, структурные отличия мышечной ткани здоровых животных и заболевших саркоцистозом, такие как:

• лейкоцитарные,
• гистиоцитарные,
• эозинофильные крупно-очаговые инфильтраты,
• ухудшающие качество мяса.

Видео в этой статье покажет, как проводится проверка мяса на паразитов.

Цели занятия:

1. Сформировать представление о строении токсоплазм, понятие о различных методах диагностики токсоплазмоза.

2. Сформировать понятие о чередовании полового и бесполого (шизогония) размножения у споровиков, путях заражения, месте локализации, клинике заболеваний. Научить готовить мазки из разных материалов исследования, методике окраски мазков.

Исходный уровень знаний и навыков.

Учащийся должен знать:

1. Признаки строения токсоплазмы, цикл развития и пути заражения, бессимптомное и симптомное течение болезни.

2. Какой материал необходимо исследовать, проводение внутрикожной пробы, поставка биопробы на животных.

3. Клинику саркоцистоза, пневмоцистоза, пути заражения,

Учащийся должен уметь:

1. Работать с микроскопом с иммерсией готовых препаратов на выявление токсоплазм.

2. Различает саркоцист, пневмоцист, готовит мазки для исследования, красит мазки, работает с таблицами, оформляет работу.

Структура занятия:

Теоретическая часть:

Практическая часть:

Ø Изучение различных методов диагностики токсоплазмоза, саркоцистоза, пневмоцистоза.

Микролекция.

Диагностика токсоплазмоза.

Диагноз токсоплазмоза устанавливают на основании комплекса показателей, которые включают клинические данные и результаты лабораторного подтверждения. Относительное значение имеют эпидемиологические предпосылки, такие как контакт с кошками, условия общения с ними, особенности пищевых привычек (употребление сырого, полусырого мяса, проба сырого фарша, немытых овощей, фруктов), соблюдение личных гигиенических навыков, профессия и др.

Методы лабораторной диагностики токсоплазмоза делят на две группы: паразитологические и иммунологические.

Паразитологические методы диагностики токсоплазмоза основаны на возможности обнаружения возбудителя или выделении его при заражении восприимчивых животных - биопроба.

К ним относится прямая микроскопия мазков – приготовленных из тканей пораженных органов (миндалины, биоптат лимфоузлов, головного мозга, внутренние органы погибших эмбрионов или плодов) или мазков из осадка спинномозговой жидкости, крови, окрашенных по Романовскому - Гимзе. Можно исследовать гистологические препараты этих органов.

К сожалению, технические сложности обнаружения, а также редкие случаи обнаружения токсоплазм в крови, спинномозговой жидкости затрудняют использование этих методов.

Биологическая проба на белых мышах основан на внутрибрюшинном введении инвазионного материала белым мышам. Материал получают путем центрифугирования, при 2000-3000 об/мин в течение 10-15 мин, спинномозговой жидкости, крови, пунктата лимфатических узлов, околоплодной жидкости или взвеси трупного материала в 0,9 %-ном растворе NaCl. Полученный после центрифугирования осадок вводят внутрибрюшинно в объеме до 1 мл. За подопытными животными наблюдают 10-12 дней. В положительных случаях у мышей развивается острая форма токсоплазмоза. Паразиты выявляются вперитониальном экссудате мышей, в меньшей степени - в печени, селезенке, легких.

Но заключение, что в данном препарате обнаружены токсоплазмы, не несёт никакой положительной информации, за исключением той, что данный пациент был ими инфицирован. Также и отсутствие в препарате возбудителя не может служить основанием для исключения токсоплазмоза, поскольку в исследуемый материал он мог просто не попасть.

В широкой практике используют преимущественно иммунологические методы диагностики токсоплазмоза, которые включают серологические реакции и внутрикожную пробу. Эти методы, достаточно специфичные и чувствительные.

Из методов серологической диагностики токсоплазмоза используют реакцию связывания комплемента (РСК), реакцию непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ) и иммуноферментный анализ (ИФА). Диагноз подтверждается достоверным нарастанием титра антител - динамикой титров в парных сыворотках, взятых с интервалом 2-4 недели.

РСК становится положительной со 2-й недели после заражения и наибольших титров - 1:16 - 1:320 достигает через 2-4 месяца. Через 1-3 года может стать отрицательной или сохраниться в низких титрах (1:5, 1:10), которые не имеют самостоятельного значения.

Реакция связывания комплемента (РСК) заключается в том, что при соответствии друг другу антигенов и антител они образуют иммунный комплекс, к которому через Fc-фрагмент антител присоединяется комплемент (С), те происходит связывание комплемента комплексом антиген - антитело. Если же комплекс антиген - антитело не образуется, то комплемент остается свободным. PCK проводят в две фазы 1-я фаза - инкубация смеси, содержащей антиген + антитело + комплемент, 2-я фаза (индикаторная) - выявление в смеси свободного комплемента путем добавления к ней гемолитической системы, состоящей из эритроцитов барана, и гемолитической сыворотки, содержащей антитела к ним. В 1-й фазе реакции при образовании комплекса антиген - антитело происходит связывание им комплемента, и тогда во 2-й фазе гемолиз сенсибилизированных антителами эритроцитов не произойдет (реакция положительная). Если антиген и антитело не соответствуют друг другу (в исследуемом образце нет антигена или антитела), комплемент остается свободным и во 2-й фазе присоединится к комплексу эритроцит - антиэритроцитарное антитело, вызывая гемолиз (реакция отрицательная).

РНИФ становится положительной с 1-й недели инфекции и максимальных показателей (1:1280 - 1:5000) достигает на 2- 4 месяце. В низких титрах 1:10 - 1: 40 может сохраняться 15-20 лет.

Прямой метод РИФ основан на том, что антигены, обработанные иммунными сыворотками с антителами, меченными флюорохромами, способны светиться в УФ-лучах люминесцентного микроскопа.

Непрямой метод РИФ заключается в выявлении комплекса антиген - антитело с помощью антиглобулиновой (против антитела) сыворотки, меченной флюорохромом. Для этого мазки обрабатывают антителами антимикробной кроличьей диагностической сыворотки. Затем антитела, не связавшиеся антигенами микробов, отмывают, а оставшиеся антитела выявляют, обрабатывая мазок антиглобулиновой (антикроличьей) сывороткой, меченной флюорохромами. В результате образуется комплекс микроб + антимикробные кроличьи антитела + антикроличьи антитела, меченные флюорохромом. Этот комплекс наблюдают в люминесцентном микроскопе, как и при прямом методе.

ИФА в соответствии с ориентацией на международный стандарт ВОЗ является наиболее объективным методом. О положительной реакции свидетельствуют оптические показатели более 1,5, в иммуноферметных единицах - больше 60, в международных - больше 125, в титрах антител - 1:1600 и больше.

Иммуноферментный анализ или метод – выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой. После соединения антигена с меченной ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат-хромоген. Субстрат расщепляется ферментом и изменяется цвет продукта реакции – интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител.

В крови выявляются определенные типы антител: IgM и IgG. IgM появляются в организме примерно через 2 недели после заражения токсоплазмой, их количество постепенно достигает пика, а затем снижается до нуля примерно к 8-10 неделе после заражения. Наличие в крови IgM указывает на то, что это острая инфекция, то есть в настоящее время человек болен токсоплазмозом.

Обнаружение в крови IgG наоборот, говорит о том, что организм встречался с инфекцией раньше, но уже победил ее. Если в крови были обнаружены и IgM и IgG, это означает, что заражение произошло в течение последних 12 месяцев.

Аллергологический метод – основан на введение внутрикожно антигенного комплекса, полученного из перитонеального экссудата белых мышей, зараженных Toxoplasma gondii. Специфическая безвредность препарата определяется отсутствием в нем жизнеспособных форм паразита.

Внутрикожная проба проводится путем введения в кожу ладонной поверхности предплечья или наружной поверхности плеча аллергена токсоплазмина. Аллерген в количестве 0,1 мл инсулиновым шприцом вводят внутрикожно, а на расстоянии 5-7 см от места введения ал­лергена в качестве контроля вводят 0,1 мл 0,9 %-ного NaCl. Учет реакции производится через 24-48 ч. Различа­ют резкоположительную реакцию (++++) при диаметре инфильтрата более 20 мм, положительную (+++) - при инфильтрате 15-20 мм в диаметре, слабоположительную (++) - при инфильтрате 10-15мм и отрицательную (+) -' при инфильтрате менее 10 мм или его отсутствии. Быстро возникающие реакции и исчезающие спустя 40-48ч счи­таются неспецифическими. Внутрикожная проба специ­фична, но по ней нельзя судить об активности процесса вследствие ее длительного сохранения.

Диагностика саркоцистоза.

Диагностика кишечного саркоцистоза: в свежевыделенных испражнениях обнаруживают одиночные или реже спаренные спороцисты, содержащие по 4 зрелых спорозоита. Спороцисты появляются в фекалиях с 9-го дня после заражения, максимальное их число наблюдается на 14—22-й день, и могут обнаруживаться сравнительно недолго и в небольшом количестве. Рекомендуется применять методы обогащением – флотация в 33 % растворе сульфата цинка (см. практич. работу №3).

Для диагностики мышечного саркоцистоза проводится биопсия и исследуются мазки и гистологические срезы очагов поражения. Применяют также методы переваривания мышц с трипсином или микроскопии мышц в компрессориуме с помощью трихинеллоскопа. Для исследования берут мышцы пищевода, сердца, диафрагмы, где саркоцисты локализуются наиболее часто. Перед микроскопией рекомендуют на мышечные срезы нанести но 2—3 капли смеси из равных частей 0,5 % водного раствора метиленового синего и ледяной уксусной кислоты. После 3—5-минутного окрашивания срезы обесцвечиваются, нанося на них 2—3 капли 20—25 % раствора нашатырного спирта. На голубом фоне мышечной ткани саркоцисты имеют темно-синий цвет.

Переваривание мышц с трипсином Фрагмент мышцы измельчают, переносят в коническую колбу соответствующей вместимости и заливают ИЖС в соотношении 1:15. Колбу помещают в термостат при температуре 41 - 42 °С и выдерживают 5 - 7 ч, периодически перемешивая. За 10 мин. до окончания переваривания перемешивание прекращают. После окончания переваривания в осадке остаются хлопья коричневого или темно-коричневого цвета.

Из колбы сливают (осторожно) 2/3 надосадочной жидкости, осадок выливают на сито, установленное в стеклянной воронке, соединенной резиновой трубкой с пробиркой вместимостью 5,0 мл.

Залитый осадок отстаивают 15 - 20 мин., затем резиновую трубку перекрывают зажимом и пробирку отсоединяют. Содержимое пробирки (осадок) переносят по частям на предметное стекло и исследуют под малым (8x10) увеличением микроскопа или трихинеллоскопа на наличие саркоцист.

Микроскопия мышц в компрессориуме: из кусочков мышц изогнутыми ножницами по ходу мышечных волокон делают 24 среза величиной с овсяное зерно, которые помещают в середину клеточки компрессориума, накрывают вторым стеклом и завинчивают винты, раздавливая срезы так, чтобы они стали прозрачными и удобными для их качественного просмотра.

Срезы исследуют под малым увеличением (8x10).

При просмотре срезов обнаруживают саркоцисты, которые имеют собственную оболочку цилиндрической или неправильной формы; циста состоит из камер, внутри которых находятся мерозоиты.

Диагностика пневмоцистоза.

Для обнаружения пневмоцист микроскопируют окрашенные по Романовскому мазки слизи, полученной у детей методом прямой ларингоскопии, катетером — из трахеи или верхних дыхательных путей. Исследуют также окрашенные мазки мокроты или слизи из нижних отделов дыхательных путей, полученных при глубоком откашливании, лучше после предварительной ингаляции водяного пара.

Пневмоцисты могут быть обнаружены не ранее 2-й недели болезни. Прямое микроскопирование мазков не всегда дает положительный результат, так как типичные восьмиядерные цисты обнаруживаются сравнительно редко, а отдельные вегетативные особи не всегда могут быть различимы в препарате, где обычно наблюдается обилие различных клеток и их остатков.

При летальном исходе изучают гистологические срезы и мазки - отпечатки легких. Разработаны серологические методы диагностики пневмоцистоза.

Практическая часть

Дифференциальные признаки, особенности жизненного цикла и лабораторная диагностика токсоплазмоза, саркоцистоза, пневмоцистоза.