Монорецепторные сальмонеллезные сыворотки получение

Диагностические сыворотки используются в бактериологическом методе на этапе идентификации для определения антигенной структуры возбудителя и микроскопическом методе в РИФ и РЗЦПД. Получают путём иммунизации животных вакцинами и анатоксинами.

Монорецепторные сыворотки получают путём истощения по Кастелани (пример: берут мышь и заражают антигенами А, В, С, D, Е, К, затем берут сыворотку мыши и добавляют антитела А, В, С, Е, К, и получают моноклональную сыворотку D.

Моноклональные антитела – принцип тот-же (путём слияния активного В-лимфоцита с миеломной клеткой, получается гибридом (активная онкоклетка продуцирующая антитела к одному антигену.

Монорецепторные моноклональные сыворотки применяют для специфической диагностики.

30. Понятие о клинической иммунологии. Методы оценки иммунного статуса организма. Врождённые и приобретённые иммунодефицитные состояния. Аутоиммунные заболевания. Трансплантационные реакции. Иммуномодуляторы.

Клиническая иммунология изучает изменения иммунной системы при патологических состояниях, выявляет иммунодефициты и изучает их.

Методы оценки иммунного статуса.

1. Количественное – определение числа Т- и В-лимфоцитов, иммуноглобулинов различных классов, факторов естественной резистентности. Активность фагоцитоза.

2. Качественное изучение функционально-активных иммунокомпетентных клеток и антител в реакциях розеткообразования.

Иммунодефициты: врождённые (первичные), результат генетических нарушений. Проявляется в виде гипо- или агаммаглобулинемий, дефицита иммунных клеток или нарушения эритропоэза. Приобретённые (вторичные) в результате действия неблагоприятных факторов: радиации, авитаминоза, инфекционных болезней, экофакторов.

Аутоиммунные заболевания – реакция иммунной системы на аутоантигены, при нарушении гистиобарьеров, травмах и воспалительных процессах или на собственные ткани организма.

Трансплантационные реакции бывают двух типов: отторжение (хозяин против трансплантанта), и аутоиммунные процессы (трансплантант против хозяина). При трансплантации учитывают принцип иммунной толерантности и предпочтительной является пересадка органов близких родственников.

Иммуномодуляторы – препараты изменяющие состояние иммунной системы. Выделяют две группы: иммуномодуляторы применяют при хронических инфекционных заболеваниях, иммуносупрессоры при трансплантации и аутоиммунных процессах.

Раздел №3 Частная медицинская микробиология.

Стафилококки. Виды стафилококков, дифференцирующие признаки. Эпидемиология. Патогенез гнойно-воспалительйых заболеваний, вызванных стафилококками. Ферменты патогенности. Лабораторная диагностика, специфическая профилактика и терапия. Проблема госпитальной стафилококковой инфекции. Выявление и санация бактерионосителей.

Стафилококки - возбудители заболевании у человека 1-St. aureus. 2-St. epidermidis. 3-St. saprofiticus. 1-патогенный вид, 2 и 3 - условно-патогенные микробы (УПМ). Все стафилококки Гр+ кокки. При микроскопии выявляется расположение в виде грозди (staphila - виноград). Дифференцируются при идентификации по видовым признакам: биохимическая активность, факторы патогенности. Все стафилококки по наличию фермента плазмокоагулазы делятся на коагулаза+ КГ+ и КГ-, (КГ+ St. aureus. КГ- УПМ).

Стафилококки обладают широким спектром ферментов агрессии и защиты: плазмокоагулаза (ПКГ) (сворачивает белки плазмы вокруг стафилококка), фибринолизин, гиалуронидаза, лецитовителлаза (расщепляет лецитин и мембрану), коллагеназа и др.

Культивируют на специальных средах - желточносолевой агар (ЖСА), молочносолевой агар (МСА), но может расти и на мясопептонном агаре (МПА). Если стафилококк обладает лецитовителлазой, то при росте на ЖСА образует колонии с венчиком. Устойчивость во внешней среде высокая.

Эпидемиология – источником инфекции являются больные люди, бактерионосители и животные. Пути передачи: контактно-бытовой, алиментарный. Восприимчивость организма высокая, особенно у ослабленных (дети, старики и т.д.).

Патогенез. Входными воротами являются чаще кожа и слизистые, где возникают очаговые воспаления (фурункул, карбункул), из которых возбудитель может попасть в кровь и лимфу и распространиться по этим системам – это генерализация процесса, сепсис, который может привести к септикопиемии. Другими входными воротами являются дыхательные пути, инфицирование которых приводит к бронхиту и пневмонии (чаще детей). Если входными воротами станет ЖКТ, то разовьется заболевание по типу токсикоинфекции, т.к. токсины стафилококка накапливаются в пищевых продуктах (чаще в молочных, кондитерских).

Лабораторная диагностика. Используются методы I принципа: микроскопический, бактериологический и биопроба. Биопроба используется для определения факторов патогенности - некротоксина, летального токсина и т.д. Бактериологический метод позволяет идентифицировать возбудителя и изучить факторы патогенности: плазмокоагулазу, лецитиназу, АЛА, антибиотикорезистентность. II принцип не используется, т.к. применение серологического метода нецелесообразно вследствии определенных особенностей микроба: антигенная мимикрия, острое течение заболеания, нормальная микрофлора которая содержит эти УПМ, поэтому в крови есть определенный титр антител к этим микробам.

Специфическая терапия: При генерализованных формах используется стафилококковая плазма, при хронических - стафилококковый гамма-глобулин, при стафилодизбаюпериозе - стафилобактериофаг. Профилактика: по показаниям - стафилококковый анатоксин.

Госпитальные стафилококковые инфекции возникают в хирургических, акушерскогинекологических и неонатологических отделениях. Источники - медперсонал и больные. Пути передачи - контактно-бытовой и артифициальный.

Особенности возбудителя: устойчивость к антибиотикам, к хлору, УФЛ, к бактериофагам и т.д.

Основным источником инфекции являются бактерионосители среди медперсонала, поэтому идет строгий контроль за их выявлением и санацией. Диагностика бактерионосительства проводится среди работников медицинских учреждений, дошкольных учреждений, пищеблоков, фармацевтов, связанных с производством лекарств.

1. Цитоскопический – обнаружение в мазках со слизистой носа эпителиацитов с микроколониями стафилококка. Для диагноза таких клеток должно быть не менее 20%. Исследуемый материал (мазок) подвергается окраске и микроскопии.

2. Бактериологический метод: исследуемый материал (мазок слизистой носа) сеется на ЖСА. Производится оценка колоний по лицитиназе (ЛВ) и подсчитывавпся показатель микробной обсемененности (ПМО). ЛВ+ отсеиваются для получения чистой культуры, идентифицируются: определяются ПКГ и биохимических свойств, определение АЛА и т.д.

1. Выделение St. Aureus при ПМО>10 3

2. Выделение St. Epidermidis при ПМО>10 3 +ЛВ+АЛА

Санация: Используются бактерицидные препараты – антисептики и вещества поглащающие АЛА (например витамин А). В случае длительного и упорного носительства используются антибиотики.

Стрептококки. Свойства, классификация. Виды патогенных стрептококков. Гемолитические стрептококки группы А, стрептококки пневмонии и их роль в патологии человека. Факторы патогенности. Лабораторная диагностика. Лечение.

Стрептококки – возбудители крупозной пневмонии. (Str. pneumonia), ревматизма (Str. hemolyticus), пиодермии, скарлатины, ангины, b-гемолитический стрептококк группы А)

Морфологически - это Гр+ кокки. Факультативные анаэробы. Культивируются на кровяном агаре. Высокоустойчивы во внешней среде. Факторы патогенности: токсины, ферменты, защиты и агрессии.

Классификация стрептококков: группа А- патогенные виды, b- непатогенные. Группа А включает a- и b-гемолитические стрептококки - b-гемолитический - возбудитель ангины, может вызвать ревматизм, так как при хронизации процесса реализуется антигенная мимикрия (под соединительную ткань, к которой развивается аутоиммунный ответ.

Лабораторная диагностика. Включает выявление носительства и определение этиологии ангины. Исследуемый материал - мазок зева. Применяются: 1-микроскопический метод. 2-метод бактериологический: посев на кровяной агар, отбор колоний с зоной гемолиза и их идентификация. Лечение: только антибиотиками.

Str. pneumonia – возбудитель крупозной пневмонии. Морфологически - это дипплококк. Фактор патогенности - капсула. Культивируется в специальной среде, т.к. плохо растет на обычных.

Патогенез. Входные ворота - эпителий дыхательных путей, поражение легких (воспалительное) влечет крупозную пневмонию (характерные признаки крупозной пневмонии: долевое поражение из-за этого тяжелая интоксикация, выключение из вентиляции доли легкого (печеночный звук при перкуссии).

Лабораторная диагностика: Включает: 1-Микроскопию. 2-Бактериологический метод. З-Биологический метод. 2+3 - диагноз ставится на основании фактора патогенности - капсулы. Исследуемый материал вводится в животное, после его гибели: 1-Мазок и отпечаток органов. 2-Посев из органов.

Лечение: антибиотиками. Специфической терапии нет.

Менингококки. Серологические группы. Свойства. Эпидемиология, патогенез заболеваний. Лабораторная диагностика различных клинических форм менингококковой инфекции, бактерионосительства. Выделение внутриклеточно-паразитирующего возбудителя.

Менингококки (Neisseria meningitidis) - это Гр- кокки, расположенные попарно в виде бобов. Факультативные анаэробы. Факторы патогенности – эндотоксин и АЛА. Склонны к внутриклеточному паразитированию. Устойчивость во внешней среде низкая. Культивируются в специальных средах на основе кровяного агара с добавлением антибиотиков и лизоцима

Эпидемиология. Заболевание антропонозное. Источниками инфекции являются больные, бактерионосители. Путь передачи - воздушно-капельный. Восприимчивость организмов низкая (болеют 2-3% людей), но актуальность заболевания определяется тяжестью и последствиями. Формы инфекции: 1) назофарингит. 2) менингит 3) менингококцемия (сепсис). 4) носительство.

Патогенез: Входные ворота – слизистая носоглотки. Далее возбудитель лимфогенно и гематогенно проникает в головной мозг и вызывает менингит. На фазе гематогенного распространения может возникнуть генерализация - менингококцемия.

Клинические особенности: Продуктивное воспаление приводит к увеличению объема спинномозговой жидкости и повышению внутричерепного давления, из-за этого возникает головная боль, повышение температуры тела, рвота, менингеалъные знаки: ригидностъ затылочных мышц (симптомы Кернига) или боль.

Лабораторная диагностика: назофарингит и носительство - микроскопический, бактериологический (основной), менингит -микроскопический (основной) и бактериологический; менингококцемия - бактериологичекий.

Выделение внутриклеточных паразитов: исследуемый материал (клетки эпителия) помещаются в среду 199 с лизацимом, где инкубируются 3-6 часов, при температуре 37°С центрифугируются и высеиваются на питательные среды.

Специфическая профилактика - гамма-глобулин контактным: Вакцина в стадии разработки.

Диагностические сыворотки- содержат АТ против одного (моновалентные, моноспецифические) или нескольких (поливалентные, полиспецифические) АГ. Получают путем иммунизации животных (кроликов ) известными полноценными АГ. Диагностические иммунные сыворотки широко применяются для определения вида или типа микроба, выделенного от больного или носителя и для определения природы неизвестного белка при условии, если его можно получить в коллоидном состоянии. Специфические свойства иммунных сывороток могут быть обнаружены путем изучения действия их на соответствующие антигены. В зависимости от условий опыта у таких сывороток можно наблюдать агглютинирующее (склеивающее), преципитирующее (осаждающее) и литическое (растворяющее) действие. Применительно к наблюдаемым феноменам принято говорить о соответствующих иммунных телах, содержащихся в сыворотках: агглютининах, преципитинах, лизинах.

2.32 Вакцины. Определение. Современная классификация вакцин. Требования, предъявляемые к современным вакцинным препаратам.

Вакцина— медицинский препарат, предназначенный для создания иммунитета к инфекционным болезням.

1.Живые вакцины - препараты, действующим началом в которых являются ослабленные тем или иным способом, потерявшие свою вирулентность, но сохранившие специфическую антигенность штаммы патогенных бактерий. Примером таких вакцин являются БЦЖ и вакцина против натуральной оспы человека, в качестве которой используется непатогенный для человека вирус оспы коров.

2.Инактивированные (убитые) вакцины – препараты, в качестве действующего начала включающие убитые химическим или физическим способом культуры патогенных вирусов или бактерий, (клеточные, вирионные) или же извлечённые из патогенных микробов комплексы антигенов, содержащие в своём составе проективные антигены (субклеточные, субвирионные вакцины). В препараты иногда добавляют консерванты и адьюванты.

Молекулярные вакцины– в них антиген находится в молекулярной форме или даже в виде фрагментов его молекул, определяющих специфичность т. е. в виде эпитопов, детерминант.

Корпускулярные вакцины– содержащие в своем составе протективный антиген

3.Анатоксиныотносятся к числу наиболее эффективных препаратов. Принцип получения – токсин соответствующей бактерии в молекулярном виде превращают в нетоксичную, но сохранившую свою антигенную специфичность форму путем воздействия 0.4% формальдегида при 37t в течение 3-4 недель, далее анатоксин концентрируют, очищают, добавляют адьюванты.

4.Синтетические вакцины.Молекулы эпитопов сами по себе не обладают высокой иммуногенностью для повышения их антигенных свойств эти молекулы сшиваются с полимерным крупномолекулярным безвредным веществом, иногда добавляют адьюванты.

5.Ассоциированные вакцины– препараты, включающие несколько разнородных антигенов.

Требования, предъявляемые к современным вакцинам:

Низкая реактогенность (аллергенность);

Не должны обладать тератогенностью, онкогенностью;

Штаммы, из которых приготовлена вакцина, должны быть генетически стабильны;

Длительный срок хранения;

Простота и доступность в применении.

2.33 Живые вакцины. получение, применение. Достоинства и недостатки.

Живые вакцины - препараты, действующим началом в которых являются ослабленные тем или иным способом, потерявшие свою вирулентность, но сохранившие специфическую антигенность штаммы патогенных бактерий.

Аттенуация (ослабление) возможна путём воздействия на штамм химических (мутагены) и физических (температура) факторов или посредством длительных пассажей через невосприимчивый организм. Так же в качестве живых вакцин используются дивергентные штаммы (непатогенные для человека), имеющие общие протективные антигены с патогенными для человека микробами. Примером такой вакцины является БЦЖ и вакцина против натуральной оспы.

Возможно получение живых вакцин генно-инженерным способом. Принцип получения таких вакцин сводится к созданию непатогенных для человека рекмбинантных штаммов, несущих протективные антигены патогенных микробов и способных при введении в орг. человека размножаться и создавать иммунитет. Такие вакцины называют векторными.

Вне зависимости от того, какие штаммы включены в вакцины, бактерии получают путём выращивания на искусственных питательных средах, культурах клеток или куриных эмбрионах. В живую вакцину, как правило, добавляют стабилизатор, после чего подвергают лиофильному высушиванию.

В связи с тем, что живые вакцины способны вызывать вакцинную инфекцию (живые аттенуированные микробы размножаются в организме, вызывая воспалительный процесс проходящий без клинических проявлений), они всегда вызывают перестройку иммунобиологического статуса организма и образование специфических антител. Это так же может являться недостатком, т. к. живые вакцины чаще вызывают аллергические реакции.

Вакцины данного типа, как правило, вводятся однократно.

Примеры: сибиреязвенная вакцина, чумная вакцина, бруцеллёзная вакцина, БЦЖ вакцина, оспенная дермальная вакцина.

2.34 Инактивированные (корпускулярные) вакцины. Применение. Недостатки.

Инактивированные (убитые, корпускулярные или молекулярные) вакцины – препараты, в качестве действующего начала включающие убитые химическим или физическим способом культуры патогенных вирусов или бактерий, (клеточные, вирионные) или же извлечённые из патогенных микробов комплексы антигенов, содержащие в своём составе проективные антигены (субклеточные, субвирионные вакцины).

Для выделения из бактерий и вирусов антигенных комплексов (гликопротеинов, ЛПС, белков) применяют трихлоруксусную кислоту, фенол, ферменты, изоэлектрическое осаждение.

Их получают путем выращивания патогенных бактерий и вирусов на искусственных питательных средах, инактивируют, выделяют антигенные комплексы, очищают, конструируют в виде жидкого или лиофильного препарата.

Преимуществом данного типа вакцин является относительная простота получения (не требуется длительного изучения и выделения штаммов). К недостаткам же относятся низкая иммуногенность, потребность в трехкратном применении и высокая реактогенность формализированных вакцин. Так же, по сравнению с живыми вакцинами, иммунитет, вызываемый ими, непродолжителен.

В настоящее время применяются следующие убитые вакцины: брюшнотифозная, обогащенная Vi антигеном; холерная вакцина, коклюшная вакцина

2.35 Субклеточные и субъединичные вакцины. Получение. Преимущество. Применение. Роль адъювантов.

Действующим началом этого типа препаратов являются протективные антигены бактерий, полученные путем воздействия ультразвука на бактериальные клетки.

Главным преимуществом данного типа вакцин является их низкая реактогеннность.

2.36 Молекулярные вакцины. Анатоксины. Получение, очистка, титрование. Применение.

Молекулярные вакцины– в них антиген находится в молекулярной форме или даже в виде фрагментов его молекул, определяющих специфичность т. е. в виде эпитопов, детерминант.

В процессе культивирования природных патогенных микробов можно получить протективный антиген, синтезируемый этими бактериями токсин затем превращается в анатоксин, сохраняющий специфическую антигенность и иммуногенность. Анатоксины являются одним из видов молекулярных вакцин. Анатоксины – препараты, полученные из бактериальных экзотоксинов, полностью лишенные своих токсических свойств, но сохранившие антигенные и иммуногенные свойства. Получение: токсигенные бактерии выращивают на жидких средах, фильтруют с помощью бактериальных фильтров для удаления микробных тел, к фильтрату добавляют 0,4% формалина и выдерживают в термостате при 30-40t на 4 недели до полного исчезновения токсических свойств, проверяют на стерильность, токсигенность и иммуногенность. Эти препараты называются нативными анатоксинам, в настоящее время почти не используются, т. к. содержат большое количество балластных веществ, неблагоприятно влияющих на организм. Анатоксины подвергаю физической и химической очистке, адсорбируют на адъювантах. Такие препараты называются адсорбированными высокоочищенными концентрированными анатоксинами.

Титрование анатоксинов в реакции фолликуляции производят по стандартной фолликулирующей атитоксической сыворотке, в которой известно количество антитоксических единиц. 1 антигенная единица анатоксина обозначается Lf, это то количество анатоксина, которое вступает в реакцию фолликуляции с 1 единицей дифтерийного анатоксина.

Анатоксины применяются для профилактики и реже, для лечения токсинемических инфекций дифтерия, газовая гангрена, ботулизм, столбняк). Так же анатоксины применяются для получения антитоксических сывороток путем гипериммунизации животных.

Примеры препаратов: АКДС, АДС, адсорбированный стафилококковый анатоксин, ботулинистический анатоксин, анатоксины из экзотоксинов возбудителей газовых инфекций.

2.37 Ассоциированные и комбинированные вакцинные препараты. Достоинства. Вакцинотерапия.

Ассоциированные вакцины – препараты, включающие несколько разнородных антигенов и позволяющие проводить иммунизацию против нескольких инфекций одновременно. Если в препарат входят однородные антигены, то такую ассоциированную вакцину называют поливакциной. Если же ассоциированный препарат состоит из разнородных антигенов, то его целесообразно называть комбинированной вакциной.

Возможна так же комбинированная иммунизация, когда одновременно вводят несколько вакцин в различные участки тела, например, против оспы(накожно) и чумы(подкожно)

Примером поливакцины можно считать живую полиомиелитную поливакцину, содержащую аттенуированные штаммы вируса полиомиелита I, II, III типов. Примером комбинированной вакцины является АКДС, куда входят инактивированная корпускулярная коклюшная вакцина, дифтерийный и столбнячный анатоксин.

Комбинированные вакцины применяются в сложной противоэпидемической обстановке. В основе их действия лежит способность иммунной системы отвечать на несколько антигенов одновременно

2.38 Генно-инженерные вакцины. Принципы получения, применение.

Генно-инженерные вакцины – это препараты, полученные с помощью биотехнологии, которая по сути сводиться к генетической рекомбинации .

Для начала получают ген, который должен быть встроен в геном реципиента. Небольшие гены могут быть получены методом химического синтеза. Для этого расшифровывается число и последовательность аминокислот в белковой молекуле вещества, затем по этим данным узнают очерёдность нуклеотидов в гене, далее следует синтез гена химическим путем.

Крупные структуры, которые довольно сложно синтезировать получаются путем выделения(клонирования), прицельного выщепления этих генетических образований с помощью рестриктаз.

Полученный одним из способов целевой ген с помощью ферментов сшивается с другим геном, который используется в качестве вектора для встраивания гибридного гена в клетку. Вектором могут служить плазмиды, бактериофаги, вирусы человека и животных. Экспрессируемый ген встраивается в бактериальную или животную клетку, которая начинает синтезировать несвойственное ей ранее вещество, кодируемое эксперссируемым геном.

В качестве реципиентов экспрессируемого гена чаще всего используется E. coli, B. subtilis, псевдомонады, дрожжи, вирусы. некоторые штаммы способны переключаться на синтез чужеродного вещества до 50% своих синтетических возможностей – эти штамм называются суперпродуцентами.

Иногда к генно-инженерным вакцинам добавляется адъювант.

Примерами таких вакцин служат вакцина против гепатита В (энджерикс), сифилиса, холеры, бруцеллёза, гриппа, бешенства.

Есть определённые сложности в разработке и применении:

- длительное время к генно-инженерным препаратам относились настороженно.

- на разработку технологии для получения вакцины затрачиваются значительные средства

- при получении препаратов данным способом возникает вопрос об идентичности полученного материала природному веществу.

2.39 Иммунные сыворотки. Классификация. Получение, очистка. Применение.

Иммунные сыворотки: иммунологические препараты на основе антител.

1.Антитоксические - сыворотки против дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой гангрены, т.е. сыво­ротки, содержащие в качестве антител антитоксины, которые нейтрализуют специфические токсины.

2.Антибактериальные - сыворотки, содержащие агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие антитела к воз­будителям брюшного тифа, дизентерии, чумы, коклюша.

3.Противовирусныесыворотки (коревая, гриппоз­ная, антирабическая) содержат вируснейтрализующие, комплементсвязывающие противовирусные антитела.

Иммунные сыворотки получают путем гипе­риммунизации животных (ло­шади) специфическим антигеном (анатоксином, бактериальными или вирусными культурами и их антигенами) с пос­ледующим, в период максимального антителообразования, выделением из крови иммунной сыворотки. Иммунные сы­воротки, полученные от животных, называют гетерогенными, так как они содержат чужерод­ные для человека сывороточные белки.

Для получения гомологичных нечужеродных иммунных сывороток используют сы­воротки переболевших людей (коревая, оспенная сыворотки) или специ­ально иммунизированных людей-доноров (противостолбнячная, противоботулиническая), содержащие антитела к ряду возбудителей инфекционных болезней вследствие вакци­нации или перенесенного заболевания.

Нативные иммунные сыворотки содержат ненужные белки (альбумин), из этих сывороток выделяют и подвергают очистке специфические белки- иммуноглобулины. Методы очистки: осаждение спиртом, ацетоном на холоде, обработка ферментами.

Иммунные сыворотки создают пассивный специфический иммунитет сразу после введения. Применяют с лечебной и профилактической целью. Для лечения токсинемических инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия, газовая гангрена), а также для ле­чения бактериальных и вирусных инфекций (корь, краснуха, чума, сибирская язва). С лечебной целью сывороточные препараты в/м. Профилактически: в/м лицам, имевшим контакт с больным, для создания пассивного иммунитета.

2.40 Антитоксические сыворотки. Получение, очистка, титро­вание. Применение. Осложнения при использовании и их преду­преждение.

Антитоксические гетерогенные сыворотки получаются путем гипериммунизации различных животных. Они называются гетерогенными т.к. содержат чужеродные для человека сывороточные белки. Более предпочтительным является применение гомологичных антитоксических сывороток, для получения которых используется сыворотка переболевших людей (коревая, паротидная), или специально иммунизированных доноров(противостолбнячная, противоботулинистическая), сыворотка из плацентарной а так же абортивной крови, содержащие антитела к ряду возбудителей инфекционных болезней вследствие вакцинации или перенесенного заболевания.

Для очистки и концентрирования антитоксических сывороток используют методы: осаждение спиртом или ацетоном на холоде, обработка ферментами, аффинная хроматография, ультрафильтрация.

Активность иммунных антитоксических сывороток выражают в антитоксических единицах, т.е. тем наименьшим кол-вом антител, которое вызывает видимую или регистрируемую соответствующим способом реакцию с определённым кол-вом специфического антигена. активность антитоксической противостолбнячной сыворотки и соответствующего Ig выражается в антитоксических единицах.

Антитоксические сыворотки применяются для лечения токсинемических инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия, газовая гангрена).

После введения антитоксических сывороток возможны осложнения в виде анафилактического шока и сывороточной болезни, поэтому пред введением препаратов ставят аллергическую пробу на чувствительность к ним пациента, а вводят их дробно, по Безредке.

2.41 Препараты иммуноглобулинов. Получение, очистка, по­казания к применению.

Нативные иммунные сыворотки содержат ненужные белки (альбумин), из этих сывороток выделяют и подвергают очистке специфические белки- иммуноглобулины.

Иммуноглобулины, иммунные сыворотки подразделяют на:

1.Антитоксические - сыворотки против дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой гангрены, т.е. сыво­ротки, содержащие в качестве антител антитоксины, которые нейтрализуют специфические токсины.

2.Антибактериальные - сыворотки, содержащие агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие антитела к воз­будителям брюшного тифа, дизентерии, чумы, коклюша.

3.Противовирусныесыворотки (коревая, гриппоз­ная, антирабическая) содержат вируснейтрализующие, комплементсвязывающие противовирусные антитела.

Методы очистки: осаждение спиртом, ацетоном на холоде, обработка ферментами, аффинная хроматография, ультрафильтрация.

Активность иммуноглобулинов выражают в антитоксических единицах, в титрах вируснейтрализующей, гемагглютинирующей, агглютинирующей активности, т.е. тем наименьшим количеством антител, которое вызывает видимую реакцию с определенным количеством специфического антигена.

Иммуноглобулины создают пассивный специфический иммунитет сразу после введения. Применяют с лечебной и профилактической целью. Для лечения токсинемических инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия, газовая гангрена), а также для ле­чения бактериальных и вирусных инфекций (корь, краснуха, чума, сибирская язва). С лечебной целью сывороточные препараты в/м. Профилактически: в/м лицам, имевшим контакт с больным, для создания пассивного иммунитета.

При необходимости экстренного создания иммунитета, для лечения развивающейся инфекции применяют иммуноглобулины, содержащие готовые антитела.

2.42 Иммунотерапия и иммунопрофилактика инфекционных болезней.

Иммунопрофилактика и иммунотерапия являются разделами иммунологии, которые изучают и разрабатывают способы и методы специфической профилактики, лечения и диа­гностики инфекционных и неинфекционных болезней с помощью иммунобиологических препаратов, оказывающих влияние на функ­цию иммунной системы, или действие которых основано на иммунологических принципах.

Иммунопрофилактика направлена на со­здание активного или пассивного иммуни­тета к возбудителю инфекционной болезни, его антигену с целью предупреждения возможного заболевания путем формирования невосприимчивости к ним организма.

Иммунотерапия направлена на лечение уже развившейся болезни, в ос­нове которой лежит нарушение функции им­мунной системы.

Иммунопрофилактика и иммунотерапия применяются, когда необходимо:

а)сформировать, создать специфический иммунитет, активизировать деятельность иммунной системы;

б) подавить активность звеньев иммунной системы;

в)нормализовать работу иммунной систе­мы.

Иммунопрофилактика и иммунотерапия применяются в про­филактике и лечении инфекционных болез­ней, аллергий, иммунопатологических состо­яний, в онкологии, трансплантологии, при первичных и вторичных иммунодефицитах.

В лечении токсинемических инфек­ций (ботулизм, столбняк) значение имеет серотерапия, т.е. применение антитокси­ческих сывороток, и иммуноглобулин.

В терапии онкологических болезней применяются иммуноцитокины.

Для всего этого – иммунобиологические препараты.

Монорецепторная сыворотка агглютинирующая сальмонеллезная (О)

Пренадлежность к группе диагност. Ат, кот. получают в 3 этапа: на 1-ом выбираем сальмонелу (например S.typhimurium c Аг структурой О-1,4,5,12; Mi 1,2) нагревают на водяной бане для разрушения жгутиков Н-Аг,ост. Только О-Аг 1,4,5,12. На втором этапе проводят гипериммунизацию кроликов оставшимся О-Аг сальмонелл, у кролика образуются О-1,4,5,12 Ат . Это поливалентная сыворотка. На 3-ем этапе проводим истощение сыворотки по Кастеллани. Для этого и получают сыворотку добавляют предварительно нагретых на вод. Бане из той же сер.группы например S.hudelberg o-45,12 Аг, произойдет связь Аг и оставшегося О-1 Ат. Полученная сыворотка используется для сероидентификации сальмонел в РА на 3 этапе бакт. анализа.

Монорецепторная сыворотка агглютинирующая сальмонеллезная (Н)

Определение серовара Диагн. Ат получают в 2 этапа. На 1-м этапе берут S.paratyphi (чистую культуру микроба) . А О-1,2,12 на обработку формалином. Происходит разрушение О-Аг , второй этап гипериммунизация кролика оставшимся Аг и вырабатывается Ат. . Полученная сыворотка используется для сероидентификации сальмонел в РА на 3 этапе бакт. анализа.

Сухая агглютинирующая адсорбированная поливалентная сыворотка к шигеллам.

Ат содержащий препарат инактивир.Шигеллы нескольких видов. Диагн. Ат, полученное путем гипериммунизацией кролика убитыми шигеллами с опред. антигенной структурой. Используется для сероидентификации шигелл в РА на стекле.

Сибиреязвенная сыворотка лошадиная, меченная ФИТЦ

АТ,диагностический;Получают гипериммунизацией лошадей возбудителем сибирской язвы, применяют в РИФ (прямой метод)

Кроличий античеловеческий глобулин, меченный ФИТЦ

АТ,диагностический. Получают гипериммунизацией кролика гамма-глобулинами человека, применяют в РИФ (непрямой метод)

Гриппозная диагностическая сыворотка

Диагн. Ат,которая используется в РТГА или РСК для идентификации вируса гриппа опр.серотипа, при вирусологическом методе диагностики. При образовании пуговки серотип сыворотки соответствует серотипу вируса гриппа. При образовании зонтика НЕ соответствует.

Туляремийный диагностикум

АГ содержащий препарат из туляримийных бактерий Fransicella tularensis,получается путем инактивирования бактерий. Используется для – экспресс-диагностики туляримии в кровяно-капельной РА на стекле. На стекло: 1 капля крови, 1 капля дист.воды, 1 капля диагностикума. Если реация мгновенна, то титр 1:200, если через 30 минут 1:100.

Бруцеллезный диагностикум

АГ-содержащий препарат, содержит убитые нагреванием бруцеллы нескольких видов: abortus, melitensis, suis, ovis, canis.

Препарат подкрашен синькой или негциан-виолетом. Используется для РА на стекле в реакции Хаддилсона для серодиагностики бруцеллеза. Ели аглютинация происходит мгновенно, то человек болен бруцеллезом (титр АТ 1:200). Если раекция произошла через 30 сек. И позже,то надо повторить,титр 1:100, если агл-и нет, то человек здоров!

Парагриппозный диагностикум

Аг-содержащий препарат, содержит варианты 1,2,3 серотипов,обрабатываются эфиром. Использ. в РТГА и РСК для серодиагностики парагриппа.

Эритроцитарный туберкулезный диагностикум для РНГА.

Аг-содержащий препарат, в котором туберкулезные палочки Mycobacterium tuberculosis адсорбированы на поверхности эритроцитов барана, взятых из яремной вены, ляфильно высушен. Препарат стабилизируют формалином. Используется для серодиагностики в РНГА с парными сыворотками. Р-я положительная-при наличии зонтика, при пуговице р-я отрицательная.

Гонококковый антиген

Представляет собой диагностический препарат полученный из гонококков Neisseria gonorrhaea, путем инактивирования нагревание. Используется для серодиагностики гонореи в РСК.

Кардиолипиновый антиген

Ультраозвученный трепонемный антиген

Кардиолипиновый антиген для реакции микропреципитации (микрореакции)

Холерный монофаг Эль-Тор

Тулярин

Бруцеллин

Препараты содержащие фракции микробов, вызывают аллергичесике реакции в организме. Аллергены извлеченные из бактериальной клетки вводят внутрикожно в ладонную поверхность предплечья.

Туберкулин очищенный (PPD)

АГ,диагностическийю Получают: выращивают микобактерии, выделяют белки, применяют для внутрикожной аллергической пробы Манту; учитывают через 48-72 часа, измеряют диаметр папулы в мм (допустимые 5-22 мм), больше реакция положительная!

B. Профилактические и лечебные иммунобиологические препараты

Стафилококковый анатоксин

Дифтерийный анатоксин

Лечебно-профилактический препарат, полученный из экзотоксинов дифтерии по правилу Рамона. Используют для лечения легких форм дифтерии и для профилактики лиц, находящихся в контакте с больными дифтерией.

Входит в состав вакцин АКДС, АДС. Приобретённый, активный, искусственный, антитоксический, напряженный иммунитет.

Столбнячный анатоксин

Профилактический препарат, получаемый из экзотоксина столбняка по правилу Рамона. Используется в составе АКДС, АДС, а также для профилактики столбняка людям с порезами (ножевой) гвоздевой, при ожогах, обморожении, а так же роженицам и их детям,в случае родов не в стационаре. Приобретённый, активный, искусственный, антитоксический, ненапряженный иммунитет.

Брюшнотифозная вакцина (Vi-анвак)

Представляет собой профилактическую вакцину против брюшного тифа, содержит Salmonellae typhi , штамм Ту-2, из которой химическим путем выделили Аг-Vi и инактивировали, т.о. вакцина содержит 2 поверхностных исходных Аг. Применяется по эпид. показаниям. С 2-х летнего возраста: Приобретённый, активный, искусственный, антимикробный, напряженный иммунитет. RV каждые 5 лет.

?: ?? ? . E? ?? ?т микобактерии, выделяют белки, применяют для внутрикожной аллергической пробы Манту; учитывают через 48-72 часа, измеряют диаметр папулы в мм (допустимые 5-22 мм), больше реакция положительная!

Холероген-анатоксин

Комбинированная вакцина, содержит извлеченный химическим путем О1-АГ возбудитель холеры и инактивируется температурой, а так же холероген-анатоксин получают по принципу Рамона, из холерного экзотоксина. Применяется по эпид. Показаниям у взрослух и детей после 7 лет. Иммунитет приобретенный, искуственный,активный.

tyle='fM? sz?E? ?? font-family:"Times New Roman","serif"'> , штамм Ту-2, из которой химическим путем выделили Аг-Vi и инактивировали, т.о. вакцина содержит 2 поверхностных исходных Аг. Применяется по эпид. показаниям. С 2-х летнего возраста: Приобретённый, активный, искусственный, антимикробный, напряженный иммунитет. RV каждые 5 лет.

Сибиреязвенная вакцина

Вакцина БЦЖ.

В 1921 году Аг. Представляет собой профилактический препарат, содерж. Живые ослабленные туберкулезные палочки бычьего типа (Mycobacterium bocsis). Ослабление путем культивирования в течении 13 лет, 230 пассажей на картофельно-глицериновую среду солей жирных кислот.

При получении вакцины легли 2 принципа: 1) Дженер использовал возбудителя родственного патогенному, но не опасного для человека. 2) Пастер (аттенуация) –снижение вирулентности. Вакцина является обязательной, вводится всем детям в род.доме на 4-6 день жизни, внутрикожно в область плеча! RV через 7 лет, или в 14, при отрицательной пробе Манту. Приобретённый, активный, искусственный, антимикробный, напряженный иммунитет.

Коколюшная моновакцина

Коревая вакцина

Гриппозные вакцины

Инфлювак-субъединичная вакцина, Аг, профилактический препарат. Получен путем выращивания вируса гриппа и выделение отдельных компанентов из бактерии. Применяется для профилактики гриппа по эпид.показаниям! Приобретённый, активный, искусственный, антивирусный, напряженный иммунитет.

Чумная вакцина

Профил.вакцина, содержит живые авирулентные штаммы чумной бактерии, выделяют из трупа погибшего человека (мужчины). Исп.по эпид.показаниям в очагах чумы, лицам выезжающим в эпид.территории, мед.персоналу работающем в очагах. Вводят подкожно в область плеча, RV ежегодно. Приобретённый, активный, искусственный, антимикробный, ненапряженный иммунитет.

Антирабическая вакцина

культурально-клеточная. Лечебно-профилактическая вакцина содержит вирус бешенства, выращенная в культуре диплоидных клеток, кл.легких человека или фибробластах новорожденных хомечков и инактивируют формалином. Вводят по 2-м схемам: 1) Люди в группе риска 1V из 7 дней и из 28 дней. 2) экстренная профилактика по эпид.показаниям (после укуса животного)

Бруцеллезная вакцина

Вакцина против гепатита В (Engerix-B)

Аг, профилактическая, ген, который осущ.синтез оболочки вируса, присоединяется к геному дрожжевой клетки. Применяется детям в первые 12 часов жизни. Сроки вакцинации: 0-1-6 мес, сроки риска: 0-1-2-12 мес.

Энжерикс В-генно-инженерная вакцина. Иммунитет: Приобретённый, активный, искусственный, антивирусный, напряженный.

Гонококковая вакцина

Дизентериная вакцина

Бруцеллезная вакцина

Стафилококковая вакцина

Лечебно-профилактические сыворотки, пробиотики, бактериофаги

Интерферон лейкоцитарный

Интерфероны- низкомолекулярные белки глобулиновой природы, синтезируется клетками и ответ на проникновение вируса, оказывают противовирусное, антипролиферативное, иммуномодулирующее действие. Лечебно-профилактический. Получают из лейкоцитов, для лечения и профилактики вирусных инфекций.

Бифидумбактерин

Лактобактерин

Колибактерин

Бификол

В живом состоянии! Для лечения и профилактики дизбиоза. Пробиотики- бактерии из нормальной кишечной флоры.

Монокомпонентные: бифидумбактерин, лактобактерин

Поликомпонентные: бификол- АГ, выращивают в одном реакторе бифибобактерии, в другом колибактерии; смешивают, затем замораживают, высушивают.

Препараты содержат лиофильно высушенную взвесь живых бифидобактерий вида Bifidobacterium bifidum с добавление бифигенного фактора-лактозы.

Дизентирийный бактериофаг

Брюшнотифозный бактериофаг

Брюшнотифозный (Эль-тор) Получают из фильтрата фаголизата холерных вибрионов. Могут быть как в житком виде, так и в таблетках для лечения.

Монорецепторная сыворотка агглютинирующая сальмонеллезная (О)

Пренадлежность к группе диагност. Ат, кот. получают в 3 этапа: на 1-ом выбираем сальмонелу (например S.typhimurium c Аг структурой О-1,4,5,12; Mi 1,2) нагревают на водяной бане для разрушения жгутиков Н-Аг,ост. Только О-Аг 1,4,5,12. На втором этапе проводят гипериммунизацию кроликов оставшимся О-Аг сальмонелл, у кролика образуются О-1,4,5,12 Ат . Это поливалентная сыворотка. На 3-ем этапе проводим истощение сыворотки по Кастеллани. Для этого и получают сыворотку добавляют предварительно нагретых на вод. Бане из той же сер.группы например S.hudelberg o-45,12 Аг, произойдет связь Аг и оставшегося О-1 Ат. Полученная сыворотка используется для сероидентификации сальмонел в РА на 3 этапе бакт. анализа.

Последнее изменение этой страницы: 2016-08-01; Нарушение авторского права страницы