Продукты из мяса сальмонеллез

Ведущая роль в возникновении пищевых сальмонеллезов принадлежит мясу и мясным продуктам. Статистика свидетельствует, что из мяса различных видов животных наибольший удельный вес в возникновении пищевых сальмонеллезов занимает говядина - 46 %, мясо лошади - 27,8, свинина - 15,7 и телятина - 9,2 %. Необходимо отметить, что вышеуказанные процентные соотношения могут изменяться в зависимости от того, мясо каких животных преимущественно употребляют в пищу в той или иной местности в различные годы.

Степень распространения через мясо сальмонеллезов всецело зависит от четкости проведения ветеринарно-санитарной экспертизы и санитарной оценки мясопродуктов. Обсеменение мяса сальмонеллами может происходить двумя путями: прижизненно и после убоя. Прижизненно сальмонеллы проникают в мышцы у клинически больных животных, а также при переутомлении и длительном голодании животных перед убоем.

Послеубойное обсеменение мяса сальмонеллами происходит при обработке туш больных и здоровых животных одними и теми же непродезинфицированными инструментами, при неправильной разделке туш (отсутствие лигатур при нутровке туш на пищеводе, двенадцатиперстной кишке и др., что приводит к загрязнению мяса кишечника или желчью, в которых могут быть сальмонеллы).

Инфицирование мяса сальмонеллами может произойти при перевозке на одном и том же транспорте туш или внутренних органов больных и здоровых животных. Обсеменить сальмонеллами мясо и мясопродукты может также и человек (больной или бактерионоситель).

Мясо и особенно субпродукты являются хорошей средой для размножения и накопления в нем сальмонелл. Характерно, что при развитии сальмонелл в мясе или других продуктах органолептические показатели его обычно не изменяются.

Большое значение в возникновении сальмонеллезов придается способам кулинарной обработки мяса. Наибольшую опасность представляет измельченное мясо (фарш). Нередко мясо в цельных кусках совершенно безвредно, а приготовленный из него фарш, пролежавший некоторое время при комнатной температуре, вызывает пищевой сальмонеллез. Это обусловливается более быстрым размножением сальмонелл в фарше, чем в кусках мяса. При измельчении мяса в фарш нарушается гистологическая структура мышечной ткани и вытекающий мясной сок благоприятствует развитию сальмонелл. Кроме того, в процессе приготовления фарша мясо интенсивно перемешивается, в результате чего сальмонеллы, находившиеся в одной точке на поверхности мяса, оказываются рассеянными по всей массе фарша. Следует также отметить, что от момента приготовления фарша до его тепловой обработки обычно проходит несколько часов, а за этот срок при комнатной температуре сальмонеллы размножаются в большом количестве. При тепловой же обработке приготовленных из фарша продуктов обычно не достигается полная их стерильность.

Наиболее часто пищевые сальмонеллезы возникают при употреблении в пищу печени и других паренхиматозных органов, в которых чаше всего содержатся сальмонеллы, а также при употреблении ливерной колбасы и паштетов, приготовленных из органов.

Молоко

Обесеменение молока сальмонеллами может происходить в вымени коров, а также из внешней среды - экзогенным путем. На фермах, неблагополучных по паратифам, сальмонеллы нередко выделяются из молока, особенно при заболевании коров маститом сальмонеллезной этиологии. Сальмонеллезные маститы у коров возникают главным образом на тех фермах, на которых больных телят или реконвалесцентов паратифа допускают к сосанию вымени коров. Из пораженных четвертей вымени сальмонеллы выделяются в чистой культуре или чаще в ассоциации с другой микрофлорой, обнаруживаемой при воспалительных процессах вымени. Инфицировать молоко сальмонеллами могут и люди-сальмонеллоносители при доении коров и обработке молока.

Инфицированные сальмонеллами молоко и молочные продукты способны вызывать заболевания не только людей, но и молодняка животных. Сальмонеллы сохраняются в молочных продуктах: в сливочном масле 128 суток, в голландском сыре 7-13 месяцев. В связи со значительными сроками выживания сальмонелл в молочных продуктах и опасностью этих бактерий для здоровья людей необходимо молоко, полученное от коров-сальмонеллоносителей, пастеризовать при температуре 85 С в течении 30 мин и хранить его после пастеризации при температуре, не превышающей 5 С.

Яйца обесеменяются сальмонеллами эндогенными и экзогенными путями. Эндогенное обсеменение яиц сальмонеллами происходит в яичнике и яйцеводе кур-несушек больных или сальмонеллоносителей.

Экзогенное обсеменение яиц возможно на фермах, неблагополучных по сальмонеллезу, пуллорозу, тифу птиц. Экзогенному обсеменению яиц сальмонеллами способствуют следующие факторы: загрязнение скорлупы яиц экскрементами птиц-сальмонеллоносителей; хранение яиц при повышенной температуре и повышенной влажности воздуха; увлажнение яичной скорлупы или конденсация на ней влаги в результате скачкообразных колебаний температуры при хранении яиц; нарушение целостности скорлупы и содержимого яйца.

Скорость проникновения сальмонелл через скорлупу в белок, а затем в желток зависит от температуры окружающего воздуха, от гигиенического состояния гнезд для кладки яиц, тары и яйцескладов, от чистоты рук обслуживающего персонала, а также от типа сальмонелл, обитающих на яичной скорлупе.

Выявление и санитарная оценка

Для выявления сальмонелл проводят бактериологическое исследование мяса и мясных продуктов. С этой целью используют в комплексе методы серологической и биохимической типизации. Такая необходимость обусловлена тем, что при хронических и латентных формах сальмонеллеза, а также при использовании животных перед убоем антибиотиков или нитрофурановых препаратов с профилактической или лечебной целью нередко выделяются сальмонеллы с изменившимися биохимическими и серологическими свойствами.

Санитарная оценка. Если в органах или в туше обнаружены сальмонеллы, органы направляют для технической утилизации, а тушу обезвреживают провариванием. В отдельных случаях при проварке мяса единичные сальмонеллы все же выживают. В условиях комнатной температуры эти бактерии могут быстро размножаться и накапливаться в продукте в больших количествах. Поэтому после проварки обезвреженное мясо направляют для немедленной реализации. Кратковременное хранение его (2-3 суток) допускается лишь при температуре 0-2 С. Мясо, в котором обнаружены сальмонеллы, нельзя направлять в колбасное производство, так как термический режим варки колбас не гарантирует полной гибели в них сальмонелл. Такое мясо может быть использовано в консервном производстве.

При поражении скелетных мышц или паренхиматозных органов и лимфатических узлов тушу независимо от упитанности и внутренние органы подвергают технической утилизации.

Профилактика

Профилактика пищевых сальмонеллезов должна включать комплекс мер, направленных на ликвидацию сальмонеллезных заболеваний животных, предупреждение экзогенного обсеменения пищевых продуктов сальмонеллами, устранение возможности размножения сальмонелл в мясе, молоке, яйцах и других продуктах, уничтожение сальмонелл при тепловой обработке продуктов. Каждое из этих положений направлено на разрыв эпидемиологической цепи. Достаточно разорвать цепь в одном из звеньев - и вспышки пищевого сальмонеллеза не будет. Предупреждение сальмонеллезов людей должно основываться на проведении общих и специальных мероприятий на животноводческих комплексах, убойных пунктах, мясокомбинатах и колхозных рынках.

В связи с опасностью сальмонелл для здоровья людей и животных необходимо осуществлять комплекс следующих мероприятий:

1) не допускать интравитального и постмортального обсеменения мяса сальмонеллами;

2) не допускать к убою утомленных животных, а также животных, подвергшихся перед убоем длительному (свыше 24 ч) голоданию, перегреванию и переохлаждению.

3) животных больных и реконвалесцентов (выздоравливающих) необходимо убивать на санитарной бойне;

4) осуществлять ветеринарно-санитарный контроль при заготовках, убое скота, первичной обработке и хранении мясных туш и субпродуктов, доении коров и первичной обработке молока;

5) не допускать к переработке мяса, мясопродуктов, молока и молочных продуктов лиц-сальмонеллоносителей;

6) оберегать детей от контакта с больными сальмонеллезом животными;

7) исключать доступ в складские помещения, где хранятся мясо, мясопродукты, молоко и молочные продукты, грызунов и мух;

8) хранить мясо, мясопродукты и другие продукты животноводства при низких температурах;

9) обеспечить соблюдение на убойных пунктах и молочных фермах высокого уровня санитарной культуры;

10) тщательно осуществлять лабораторный контроль продукции, подозреваемой в обсеменении сальмонеллами;

11) проводить на должном уровне ветеринарно-санитарную экспертизу продуктов животноводства на колхозных рынках.

Необходимо также соблюдать должный санитарный режим при перевозке и хранении мяса, мясопродуктов, молока и молочных продуктов, не допуская обсеменения их сальмонеллами. Очень важно, чтобы лица, занятые переработкой мяса, молока и других продуктов животноводства, тщательно соблюдали правила личной и производственной гигиены.

Кроме указанных мероприятий, большую роль в предупреждении сальмонеллеза играют правильная обработка, приготовление, хранение и использование пищевых продуктов. Разделка и обработка сырого мяса должны производиться раздельно от мяса вареного.

Учитывая, что сальмонеллез - заболевание общее для человека и животных, ветеринарно-профилактические и оздоровительные мероприятия должны быть разработаны для всех животноводческих ферм хозяйства, неблагополучного по этой инфекции, и проводиться в комплексе. Животных с ферм, неблагополучных по сальмонеллезу, не следует убивать совместно со здоровыми. Продукты убоя таких животных необходимо подвергать тщательной послеубойной ветеринарно-санитарной экспертизе. В неблагополучных по сальмонеллезу хозяйствах обслуживающий персонал должен соблюдать меры личной профилактики. Этих лиц необходимо ежеквартально обследовать на сальмонеллоносительство. Работников неблагополучных по сальмонеллезу ферм не следует допускать к работе в пищеблоках и кормокухнях.

Многие владельцы кошек не решаются перевести любимца на здоровый рацион, потому что обеспокоены здоровьем животных. Можно ли давать кости? Как уберечь питомца от паразитов? Стоит ли беспокоиться по поводу патогенов: например, сальмонеллы? Люди привыкли тщательно готовить мясо. Поэтому перспектива кормить свою кошку сырым мясом кажется пугающей: разве такой рацион не опасен?

Риск переноса патогенов или паразитов сводится к минимуму, если вы внимательно выбираете мясо, правильно храните и готовите его. Приготовление мясного корма для питомцев почти не отличается от приготовления мяса для человека. Не бойтесь давать питомцу кости. Дикие кошки, которые питаются добычей, регулярно грызут сырые кости: они являются важной частью их природного рациона. Кошки хорошо усваивают натуральную пищу и получают из нее все нужные питательные вещества, потому что их пищеварительная система приспособлена для этого.

Сальмонелла и кишечная палочка

Владельцы кошек тревожатся по поводу сальмонеллы и кишечной палочки. Патогены не должны содержаться в мясе, которое предназначено для людей или животных. Поэтому производители обязаны соблюдать правила разведения и забоя скота.

Сальмонеллой заражаются через продукты немясного происхождения. Через продукты, которые прошли термическую обработку, можно заразиться, если приготовленные продукты смешались с зараженными сырыми продуктами. Именно так происходит заражение сухих кормов в магазинах. Вы избежите заражения патогенами, если будете покупать мясо у проверенных поставщиков и соблюдать правила безопасности, когда готовите.

Обычно сальмонеллой заражена только поверхность мясного куска. Когда вы пропускаете мясо через мясорубку, бактерии размножаются по всей массе. Покупать готовый или замороженный фарш, который предназначен для людей, опасно. Вы не можете проверить, как долго мясо лежало после прокрутки перед заморозкой. Производители фарша рассчитывают, что вы его приготовите и тем самым уничтожите все патогены, к размножению которых могли привести условия производства. Фарш, который готовят специально для животных, замораживают сразу после прокручивания, это позволяет предотвратить размножение бактерий.

Пищеварительные системы кошек обладают высокой кислотностью, поэтому их организмы устойчивы к патогенам. Пищеварительный тракт кошки короткий, из-за этого бактерии не успевают размножаться. В среднем пищеварительный цикл занимает около 13 часов, у человека же он в два-три раза дольше. Даже если в организм кошки и попадёт бактерия сальмонеллы, скорее всего на вашем питомце это никак не скажется. В первую очередь это относится к здоровым животным. Больные кошки больше рискуют отравиться.

Поскольку человек довольно легко может заразиться патогенами, прежде всего нужно позаботиться о семье. Меры предосторожности, которые касаются приготовления мяса, нужны для того, чтобы защитить от заразы людей.

Кишечная палочка встречается в пищеварительной системе животных и способна отравить мясо, если не соблюдаются правила забоя. Скот, который питается травой, страдает от кишечной палочки гораздо реже. Эта инфекция достаточно редко встречается в мясных продуктах, но всё равно очень важно покупать мясо только у проверенных поставщиков.

Кости

Вы удивитесь, но кошки легко переваривают сырые кости. В них содержатся кальций, минералы и ферменты, а костный мозг обладает высокой питательной ценностью. Опасными могут быть только термически обработанные кости: они становятся колкими и хрупкими. Приготовленные кости тяжело усваиваются и перевариваются.

Кошки, которые регулярно охотятся, грызут кости своей добычи, это основной источник кальция. Если вы будете давать любимцу небольшие мясные косточки в сыром виде, он будет получать кальций естественным путём. Кости помогают кошке тренировать челюсти и чистить зубы.

Кости не должны быть большими. Можно давать куриные крылышки или косточки кур породы Корниш. Если беспокоитесь, можете перестраховаться и присматривать за кошкой, пока она ест сырые мясные косточки.

Питательные вещества

До одомашнивания кошки питались сырым мясом. Но недавно люди почему-то решили, что им лучше подойдёт еда из магазина, которая прошла глубокую фабричную обработку. Натуральные корма — это попытка воссоздать рацион кошек, которые сами добывают еду на охоте. Пищеварительная система кошки приспособлена именно для сырой пищи, которая богата белком и жидкостью, но почти не содержит углеводов. Кошкам нужно получать питательные вещества из еды, именно так организм усвоит их наиболее эффективно.

Хотите попробовать SUPERPET?

Выберите один из стартовых наборов и убедитесь в том, как положительно корм влияет на здоровье вашего питомца.

ГОСТ Р 50455-92
(ИСО 3565-75)

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МЯСО И МЯСНЫЕ ПРОДУКТЫ

Обнаружение сальмонелл (арбитражный метод)

Meat and meat product. Detection of salmonellae (Reference method)

Дата введения 1994-01-01

1 ПОДГОТОВЛЕН И ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 226 "Мясо и мясная продукция"

2 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 25 декабря 1992 г. N 1567

Настоящий стандарт подготовлен методом прямого применения международного стандарта ИСО 3565-75 Мясо и мясные продукты. Микробиологические исследования на сальмонеллу (арбитражный метод) и полностью ему соответствует

3 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

4 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Январь 2010 г.

1 Назначение

Настоящий стандарт устанавливает метод обнаружения сальмонелл в мясе и мясных продуктах.

2 Область применения

Метод распространяется на все виды мяса и мясные продукты.

3 Ссылка

4 Определения

4.1 Сальмонеллы - микроорганизмы, образующие типичные колонии на плотных селективных питательных средах и имеющие биологические и серологические характеристики, описанные в настоящем стандарте.

4.2 Обнаружение сальмонелл - определение присутствия или отсутствия этих микроорганизмов в определенном продукте по методу, установленному настоящим стандартом.

5 Сущность метода

Обнаружение сальмонелл проходит в четыре стадии (см. пп.5.1-5.4), так как они обычно присутствуют в небольших количествах, иногда в поврежденном состоянии, и часто в сопровождении большого количества других бактерий их группы.

5.1 Предварительное обогащение - выдерживание пробы в термостате в неселективной жидкой среде при температуре 37 °С.

5.2 Обогащение - посев предварительно обогащенной среды в две жидкие селективные среды с последующим выдерживанием в термостате при температуре соответственно 37 или 42-43 °С.

5.3 Посев на чашках - пересев двух обогащенных сред на плотные селективно-диагностические среды, которые, после выдерживания в термостате при температуре 37 °С, исследуют на наличие колоний, по своим характеристикам подозрительных на сальмонеллы.

5.4 Подтверждение - пересев подозрительных на сальмонеллы колоний и определение их биохимических и серологических характеристик.

6 Питательные среды и реактивы

6.1 Основные материалы

Для получения сопоставительных результатов рекомендуется использовать безводные компоненты питательных сред одинакового качества, химические препараты аналитического качества или сухие готовые среды. Используемая вода должна быть дистиллированной или, по крайней мере, эквивалентной чистоты.

Примечание. Требования к бриллиантовому зеленому даны в приложении. Если используются сухие готовые среды, их следует готовить и применять в соответствии с рекомендацией поставщика.

6.2 Питательные среды

6.2.1 Буферная пептонная вода

Состав:

6.2.2 Среда тетратионатная (Мюллера-Кауфмана)

Приготовление: безводные основные компоненты или сухую готовую основу добавляют к воде и кипятят. Устанавливают рН так, чтобы после стерилизации его значение составляло (7,0±0,1) при 20 °С.

Стерилизуют основу в течение 20 мин при температуре (121±1) °С.

6.2.2.2 Раствор тиосульфата натрия

Состав:

вода до общего объема

6.2.2.3 Йодный раствор

Состав:

вода до общего объема

6.2.2.4 Раствор бриллиантового зеленого

Состав:

Приготовление: добавляют бриллиантовый зеленый к воде. Оставляют раствор в темноте не менее чем на сутки, чтобы обеспечить самостерилизацию.

6.2.2.5 Раствор бычьей желчи

Состав:

бычья желчь сухая

Приготовление: сухую бычью желчь растворяют в кипящей воде.

Стерилизуют раствор в течение 20 мин при температуре (121±1) °С.

6.2.2.6 Готовая среда

Состав:

раствор тиосульфата натрия (п.6.2.2.2)

йодный раствор (п.6.2.2.3)

раствор бриллиантового зеленого (п.6.2.2.4)

раствор бычьей желчи (п.6.2.2.5)

6.2.3 Среда селенитовая с бриллиантовым зеленым (Стокса и Осборна)

Приготовление: растворяют первые четыре ингредиента (т.е. безводные основные компоненты или сухую готовую основу) в кипящей воде в течение 5 мин. После охлаждения добавляют гидроселенит натрия, доводят рН до (7,0±0,1) при 20 °С.

Хранят ее при температуре 4 °С в темноте не более недели.

6.2.3.2 Буферный раствор

Состав:

Растворяют дигидроортофосфат калия в воде.

Растворяют гидроортофосфат калия в воде.

Приготовление: смешивают два объема раствора А и три объема раствора Б, получая раствор с рН (7,0±0,1) при 20 °С.

6.2.3.3 Раствор бриллиантового зеленого

Состав и приготовление этого раствора - по п.6.2.2.4.

6.2.3.4 Готовая среда

Состав:

буферный раствор (п.6.2.3.2)

раствор бриллиантового зеленого (п.6.2.3.3)

6.2.4 Агар с бриллиантовым зеленым и феноловым красным (Эделя и Кампельмахера)

6.2.4.2 Сахарный раствор с феноловым красным

Состав:

вода до общего объема

Приготовление: растворяют ингредиенты в воде, нагревают на водяной бане в течение 20 мин при температуре 70 °С, охлаждают до 55 °С и сразу используют.

6.2.4.3 Раствор бриллиантового зеленого

Состав и приготовление раствора - по п.6.2.2.4.

6.2.4.4 Готовая среда

Состав:

сахарный раствор с феноловым красным (п.6.2.4.2)

раствор бриллиантового зеленого (п.6.2.4.3)

Приготовление: в асептических условиях к сахарному раствору с феноловым красным, охлажденному приблизительно до 55 °С, добавляют раствор бриллиантового зеленого. Перемешивают, добавляют к основе при температуре 50-55 °С и снова перемешивают.

6.2.4.5 Приготовление чашек с агаровой средой

В стерильные чашки Петри большого размера разливают примерно по 40 см свежеприготовленной среды (п.6.2.4.4), имеющей температуру приблизительно 45 °С (если в наличии нет больших чашек Петри, то расплавленную среду разливают в стерильные маленькие чашки Петри примерно по 15 см ), дают застыть.

Непосредственно перед использованием чашки осторожно подсушивают в сушильном шкафу или термостате при температуре (50±5) °С в течение 30 мин, сняв крышки и перевернув вверх дном (агаровой поверхностью вниз).

Если чашки приготовили заранее, то их хранят не более 4 ч при комнатной температуре или не более суток в холодильнике (без подсушивания).

6.2.5 Лактозный агар с кристаллическим фиолетовым, нейтральным красным и желчью

Состав:

Приготовление: растворяют безводные компоненты среды или сухую готовую среду в кипящей воде. Устанавливают рН так, чтобы после кипячения его значение составляло (7,4±0,1) при 40 °С. Разливают питательную среду в стерильные пробирки или колбы вместимостью не более 500 см . Стерилизация среды нежелательна.

Если среду приготовили заранее, ее хранят не более одной недели в холодильнике.

Приготовление чашек с агаровой средой.

В стерильные маленькие чашки Петри разливают примерно по 15 см расплавленной среды (п.6.2.5) и далее готовят, как указано в п.6.2.4.5.

6.2.6 Трехсахарный агар с железом (агар ТСЖ)

Состав:

цитрат железа (III)

Приготовление: безводные компоненты среды или сухую готовую среду растворяют в кипящей воде. Устанавливают рН так, чтобы после стерилизации его значение составляло (7,4±0,1) при 40 °С. Разливают среду по 10 см в пробирки диаметром 17-18 мм, стерилизуют в течение 10 мин при температуре (121±1) °С.

Допускается устанавливать пробирки в наклонном положении так, чтобы глубина вертикального столбика агара составляла не менее 2,5 см.

6.2.7 Агар с мочевиной (Кристенсена)

Приготовление: безводные компоненты основы или сухую готовую основу растворяют в кипящей воде. Стерилизуют основу в течение 20 мин при температуре (121±1) °С.

6.2.7.2 Раствор мочевины

Состав:

вода до общего объема

Приготовление: мочевину растворяют в воде, стерилизуют фильтрованием и проверяют стерильность. (Подробности способа стерилизации фильтрованием можно найти в соответствующем руководстве по микробиологии).

6.2.7.3 Готовая среда

Состав:

раствор мочевины (п.6.2.7.2)

6.2.8 Агар питательный полужидкий

Состав:

Приготовление: безводные основные компоненты растворяют в кипящей воде. Устанавливают рН так, чтобы после стерилизации его значение составляло (7,0±0,1) при 40 °С. Среду разливают в колбы вместимостью не более 500 см и стерилизуют в течение 20 мин при температуре (121±1) °С.

Приготовление чашек с агаровой средой

В стерильные маленькие чашки Петри разливают примерно по 15 см свежеприготовленной среды. Чашки с агаровой средой не подсушивают.

6.2.9 Солевой раствор

Состав:

6.2.10 Среда декарбоксилирования лизина

Состав:

6.2.11.1 Буферный раствор

Состав:

вода до общего объема

Приготовление: растворяют дигидроортофосфат натрия приблизительно в 45 см воды. Доводят рН до (7,0±0,1), приливая примерно 3 см раствора гидроксида натрия. Объем доводят водой до 50 см . Хранят в холодильнике.

6.2.11.2 Раствор ОНФГ

Состав:

Приготовление: растворяют ОНФГ в воде при температуре 50 °С, раствор охлаждают.

6.2.11.3 Готовый реактив

Состав:

буферный раствор (п.6.2.11.1)

раствор ОНФГ (п.6.2.11.2)

Приготовление: к раствору ОНФГ добавляют буферный раствор. Хранят готовый реактив при температуре 4 °С не более 1 мес.

6.2.12 Реакция Вогса-Проскаэра (ускоренный метод Барри и Финея)

6.2.12.1 Среда ВП

Состав:

Приготовление: компоненты растворяют в воде, доводят рН до 6,9 и фильтруют. Стерилизуют среду в течение 20 мин при температуре 115 °С.

6.2.12.2 Раствор креатина

Состав:

Приготовление: моногидрат креатина растворяют в воде.

6.2.12.3 Реактив -нафтола (спиртовый раствор -нафтола)

Состав:

Приготовление: -нафтол растворяют в этиловом спирте.

6.2.12.4 Реактив KOH

Состав:

Приготовление: гидроксид калия растворяют в воде.

6.2.13 Индольная реакция

6.2.13.1 Триптон-триптофановая среда (по Лютову)

Состав:

Приготовление: компоненты растворяют в воде при температуре 100 °С и фильтруют. Доводят рН до 7,5.

6.2.13.2 Реактив (Ковакса)

Состав:

Приготовление: смешивают все компоненты.

6.3 Сыворотки

Некоторые антисальмонеллезные сыворотки продаются в готовом виде, а именно: антисыворотки, содержащие одну или несколько " " - групп (так называемые моно- или поливалентные -антисыворотки). -антисыворотки и антисыворотки, содержащие одну или несколько " "-групп (так называемые моно- или поливалентные -антисыворотки). При использовании сывороток следует руководствоваться инструкциями, прилагаемыми к ним изготовителем.

7 Аппаратура и стеклянная посуда

7.1 Аппаратура

Мясорубка механическая лабораторного типа, стерильная, с решеткой, диаметр отверстий которой не более 4 мм.

Смеситель механический, работающий со скоростью от 8000 до 45000 об/мин со стеклянными или металлическими банками для смешивания, с крышками, разной вместимости, устойчивыми к условиям стерилизации.

Аппаратура для стерилизации стеклянной посуды, банок для смешивания, питательных сред и т.д., а также оборудование для стерилизации фильтрованием, например асбестовая прокладка, мембранный фильтр или фильтровальная свеча соответствующей пористости.

Шкаф сушильный или духовой или термостат для подсушивания поверхности агаровой среды в чашках предпочтительно при температуре (50±5) °С.

Термостат для выдерживания жидких сред, чашек и пробирок с посевами при температуре (37±1) °С.

Термостат или водяная баня для выдерживания жидких сред с посевом при температуре 42-43 °С.

Водяные бани для нагревания и охлаждения растворов и питательных сред до разных температур.

Чашка большого размера

Чашка:

Край чашки должен быть ровным, параллельным основанию. Дно чашки должно быть плоским и ровным.

Крышка:

Чашка малого размера

наружная высота, не менее

Край должен быть ровным, параллельным основанию. Дно чашки должно быть плоским и ровным.

Крышка:

наружный диаметр, не более

Вместо стеклянных можно использовать пластмассовые чашки Петри, размеры которых такие же или незначительно отличаются от указанных размеров.

7.3 Стерилизация стеклянной посуды

Стерилизуют стеклянную посуду одним из следующих способов:

влажная стерилизация при температуре не менее 121 °С в течение не менее 20 мин;

сухая стерилизация при температуре не менее 170 °С в течение не менее 1 ч.

8 Отбор проб

Пробу отбирают массой не менее 200 г (см. ГОСТ 9958).

Отобранную пробу можно хранить в лаборатории при температуре 0-5 °С не более 24 ч.

9 Проведение анализа

9.1 Предварительная обработка пробы

Пробу дважды пропускают через мясорубку, перемешивают и сразу приступают к анализу. При необходимости измельченную пробу можно хранить при температуре 0-5 °С не более 1 ч.

9.2 Навеска

Взвешивают 25 г измельченного мяса или мясного продукта (п.9.1) в стерильную банку смесителя.

9.3 Приготовление гомогената

В банку смесителя добавляют 225 см буферной пептонной воды и гомогенизируют. Число оборотов смесителя должно составлять 15000-20000, а время - не более 2,5 мин.

Примечание - При определении присутствия или отсутствия сальмонелл в небольших навесках мяса (например 1,0 или 0,1 г) соответствующую часть гомогената мяса (например 10 или 1 см ) добавляют к 100 см буферной пептонной воды и далее проводят анализ, как указано ниже, учитывая при обработке результатов действительное количество мяса, подвергавшееся анализу.

9.4 Предварительное обогащение

9.4.2 Колбу выдерживают в термостате при температуре (37±1) °С не менее 16 и не более 20 ч.

9.5.1 После инкубационного периода переносят по 10 см содержимого колбы к 100 см тетратионатной среды и к 100 см селенитовой среды.

9.5.2 Посевы выдерживают в термостате в течение 2 сут на тетратионатной среде при температуре 42-43 °С, на селенитовой среде - при температуре (37±1) °С.

9.6 Посев на чашках

9.6.1 После инкубационного периода в течение 18-24 ч из каждой колбы с помощью петли диаметром 2,5-3 мм делают посев штрихами на поверхность агаровой среды с бриллиантовым зеленым и феноловым красным. При необходимости подобным образом делают посев на поверхность одной из следующих плотных сред, приготовленных в лаборатории в качестве селективно-диагностических для выявления сальмонелл, таких как висмут-сульфитный агар, агар S.S., дезоксихолатцитратный агар и др., так, чтобы получить хорошо изолированные колонии (если в наличии нет больших чашек Петри, можно делать посев штрихами на две маленькие чашки, используя одну и ту же петлю).

9.6.2 Чашки с посевами выдерживают в термостате при температуре (37±1) °С, положив их вверх дном.

9.6.3 После инкубационного периода в течение 2 сут делают пересев на чашки двух обогащенных сред и помещают чашки в термостат при температуре (37±1) °С.

9.6.4 После выдерживания в термостате в течение 20-24 ч определяют присутствие сальмонелл на чашках. Типичные колонии сальмонелл на агаре с бриллиантовым зеленым имеют розовую окраску.

9.6.5 Если рост микроорганизмов выражен слабо и не наблюдается типичных колоний сальмонелл, культуру повторно выдерживают в термостате при температуре (37±1) °С в течение 20-24 ч. Затем снова определяют присутствие типичных колоний сальмонелл.

Примечание - Присутствие любых типичных или предполагаемых колоний должно быть подтверждено (см. п.9.7), так как распознавание колоний сальмонелл в значительной степени зависит от опытности лица, проводящего анализ, а внешний вид колоний изменяется не только в зависимости от разновидностей сальмонелл, но и от партий среды. В связи с этим рекомендуется для лучшего распознавания колоний агглютинировать их поливалентной антисывороткой.

9.7 Подтверждение присутствия предполагаемых колоний сальмонелл

9.7.1 Выбор колоний для подтверждения

9.7.1.1 Из каждой чашки с каждой селективной средой выбирают пять типичных или предполагаемых колоний для подтверждения.

9.7.1.2 Если на одной чашке имеется менее пяти типичных или предполагаемых колоний, то для подтверждения берут все имеющиеся колонии.

9.7.1.3 Отобранные колонии высевают штрихами на подсушенную поверхность агаровой среды с кристаллическим фиолетовым, нейтральным красным, желчью и лактозой таким образом, чтобы обеспечить развитие хорошо изолированных колоний.

9.7.1.4 Чашки с посевом выдерживают в термостате при температуре (37±1) °С в течение 20-24 ч.

9.7.1.5 Для биохимического и серологического подтверждения используют чистые бесцветные колонии (лактозо-отрицательные).

9.7.2 Биохимическое подтверждение

9.7.2.1 Посев изолированных лактозоотрицательных колоний и выдерживание в термостате

Посев проводят на следующие среды.

9.7.2.1.1 Трехсахарный агар с железом (агар ТСЖ)

Посевы делают сначала штрихами по поверхности, а затем вглубь столбика агара. Выдерживают в течение 1-2 сут при температуре (37±1) °С.

Интерпретируют изменения среды следующим образом: