Диаскинтест на туберкулез в инвитро
Если у человека появляются симптомы такого опасного и трудноизлечимого заболевания, как туберкулез, необходимо срочно обратиться в диспансер для проведения диагностических исследований организма. Не менее важно регулярно обследоваться в тубдиспансере тем людям, которые контактировали или постоянно ухаживают за больным с открытой формой туберкулеза. Кроме того, после посещения страны, где уровень заболеваемости и заражением микобактериями очень высок, следует сразу же сдать соответствующие анализы на выявление возбудителя в организме.
В настоящее время диагностировать туберкулез легких или других органов можно различными способами. Но самый первый тест – это туберкулиновая проба Манту, которая за пару дней позволяет определить, инфицирован ли человек микобактериями или нет. Также с недавних пор начали использовать другие виды тестирования: Диаскинтест и Квантифероновое исследование в Инвитро. Рассмотрим, как они проводятся и в чем их преимущества перед пробой Манту.
Диаскинтест на туберкулез
В отличие от туберкулиновой пробы, которая реагирует на прививку БЦЖ и живую инфекцию микобактерий, вещество Диаскин показывает исключительное заражение, а не аллергическую реакцию на проведенную вакцинацию. Поэтому Диаскинтест необходимо проводить в тех случаях, когда после Манту нужно отделить поствакцинальную аллергию от наличия истинного возбудителя туберкулеза.
Диаскин является новым аллергендиагностическим препаратом, который улучшает качество исследования организма туберкулезной инфекции. В средстве содержатся антитела, которые присутствуют в болезнетворных штаммах микобактерий, но отсутствуют в вакцине БЦЖ. Благодаря этому аллергическая реакция Диаскинтеста возникает только при наличии истинной инфекции. Но в препарате не содержится возбудителей туберкулеза, поэтому заразится заболеванием после аллергопробы невозможно.
Если сравнивать пробу Манту и Диаскинтест, то в первом случае выявить микобактерии получается лишь в 50-70% случаев. А вторая аллергопроба более точная, так как находит возбудителя туберкулеза в 90%. Нельзя сказать, что препарат Диаскин заменит туберкулиновую пробу, поскольку с его помощью невозможно определить, необходима ли пациенту ревакцинация БЦЖ или нет.
Диаскинтест назначают в следующих ситуациях:
- Когда нужно диагностировать туберкулез и выявить уровень активности воспалительного процесса;
- Отличить заражение микобактериями от симптомов других заболеваний, с похожими проявлениями;
- Дифференцировать аллергическую реакцию на БЦЖ от воспаления на истинного возбудителя;
- Наблюдать за процессом лечения и его эффективностью.
Диаскинтест на туберкулез обязательно проводится в тех случаях, когда у детей или взрослых пациентов присутствует вираж пробы Манту. Но он противопоказан пациентам с такими заболеваниями:
- Острые воспаления или обострения хронических болезней (исключением являются симптомы, которые похожи на развитие туберкулеза);
- Соматические расстройства;
- Кожные заболевания;
- Аллергия;
- Эпилептические припадки.
После того как острые воспалительные процессы проходят, тогда Диаскинтест проводить не противопоказано.
Вводят Диаскин таким же образом, как и пробу Манту. Но оба теста не совмещают в один период. То есть, если туберкулиновую реакцию проводят по календарю, то Диаскинтест переносят на следующий месяц после прививки. Когда Манту вводят в одно предплечье, для инъекции Диаскина обязательно используют другое.
Результат Диаскинтеста оценивают через три сутки. Если на месте введения препарата отсутствует покраснение и инфильтрат, то тест отрицательный. Как только на коже образуется папула любого размера и присутствует гиперемия, проба положительная. Реакция на Диаскинтест будет отсутствовать у здоровых пациентов, вылечившихся от туберкулеза и инфицированных неактивной микобактерией.
Заменяет ли Диаскин пробу Манту?
Диаскинтест является хорошей туберкулезной пробой, но один он не может быть полностью информативным. С его помощью удается выделить большую часть больных с легочной формой заболевания человечьей палочкой Коха. Но при других видах микобактерий проба не сможет выявить возбудителя туберкулеза.
Важно отметить, что сила реакции организма на Диаскин не может говорить о выраженности или уровне активности палочки, поскольку кожная аллергия больше отмечает ответ иммунной системы на введенные антитела.
Кроме того, Диаскинтест обычно не диагностирует вторичное инфицирование туберкулеза, которое, как правило, вызвано бычьим штаммом микобактерий. Поэтому даже при резкой реакции пробы Манту ребенка или взрослого человека уже направляют на лечение от туберкулеза, даже если у него отсутствует кашель. Хоть в этом случае Диаскинтест может быть отрицательным, первая туберкулиновая реакция требует особого внимания.
В настоящее время выделяют три клинических формы туберкулеза:
В зависимости от вида поражения каждый тест будет реагировать по-своему.
При введении инъекции Манту все три формы туберкулеза вызовут положительную реакцию организма пациента. Если проводить Диаскинтест, то при легочном заболевании он обычно положительный, а при двух других формах – отрицателен. Из этого можно сделать вывод, что Манту укажет на микобактерии, поражающие любые органы человека, даже если они находятся в неактивном состоянии. А Диаскин выявит истинную человеческую палочку туберкулеза среди больных легочными формами. Диаскинтест не заменяет пробу Манту, он может стать лишь ее дополнением.
Квантифероновый тест на туберкулез
За последние годы очень часто вместе с пробой Манту рекомендовано использовать тест для выявления больных, зараженных туберкулезной инфекцией разных видов. Квантифероновый тест проводится вне организма, поэтому является полностью безопасным для людей с ослабленным иммунитетом.
Анализ крови определяет наличие гамма-интерферона, который продуцируется только у заболевших туберкулезом. Чтобы провести исследование, у пациента берут венозную кровь. Перед сдачей анализов человек не должен принимать пищу в течение восьми часов. Забранный образец помещают в три пробирки, чтобы исключить ложные результаты исследования.
Если сравнивать Квантифероновый тест с Манту или Диаскинтестом, то он более чувствителен и помогает точно выявить наличие туберкулезной инфекции. Но при этом, он также не реагирует на вакцину БЦЖ и дает отрицательный результат.
К преимуществам определения гамма-интерферонов относят:
- Высокую чувствительность теста;
- Безопасность, отсутствие побочных действий;
- Не реагирование на БЦЖ;
- Нет противопоказаний;
- Объективность оценки результатов теста.
К недостаткам Квантиферонового исследования можно отнести то, что оно не позволяет определить, есть ли в организме человека латентная форма туберкулеза или активное воспаление.
Важно отметить, что тест в Инвитро дает возможность заменить туберкулинодиагностику. Но в настоящее время точность Квантиферонового результата доказана лишь в лабораторных исследованиях, но не проверена на практике.
Инвитро определяются гамма-интерфероны, которые вырабатываются в организме Т-лимфоцитами лишь после встречи с туберкулезным возбудителем. Специфические белки выделяются при контакте, как с человеческим видом микобактерий, так и с бычьим. После того как иммунные клетки распознают туберкулезную палочку, они вырабатывают антитела, определяющиеся при исследовании венозной крови. Таким образом, Квантифероновый тест выявляет даже микобактериозы. Поэтому при положительном результате диагностики следует отличить наличие возбудителя туберкулеза от микобактериозов.
Проведенные обследования разных пациентов дали понять, что третья часть всего населения инфицирована микобактериями. Но только у 6% людей может развиться туберкулез. Чаще всего его провоцируют внешние неблагоприятные факторы или ослабленный иммунитет.
В группу риска входят люди:
- Контактирующие с пациентами с открытой формой туберкулеза (родственники, медработники);
- ВИЧ-инфицированные;
- Болеющие диабетом;
- Освобожденные из исправительных колоний.
Квантифероновый тест в Инвитро рекомендован тем лицам, которым противопоказано делать Манту или Диаскинтест. Например, если у человека отмечаются острые или рецидивирующие заболевания, то вводить туберкулиновое вещество категорически запрещено. Также в период карантина детям не делают кожные пробы. У некоторых людей есть аллергия на туберкулин, поэтому им не подходит данный вид исследования на инфицирование туберкулезом.
Чтобы сравнить преимущества Квантиферонового теста с пробой Манту или Диаскинтестом, необходимо ознакомиться с некоторыми особенностями диагностики.
| Квантифероновый тест | Манту, Диаскинтест |
| Для исследования не нужно вводить инъекцию под кожу, потому что используется венозная кровь пациента. | Проба требует подкожной инъекции, поэтому не разрешена при ослабленном иммунитете человека. |
| Не отмечается побочных реакций, так как нет контакта с организмом. | Бывают негативные воздействия, особенно, если у больного наблюдается непереносимость введенного вещества. |
| Не бывает противопоказаний, поскольку тест проводится в Инвитро. | При обострениях заболеваний или тяжелых хронических патологиях производить исследования туберкулиновой пробой запрещено. |
| Нет реакции на вакцинацию БЦЖ. | У Манту аллергическая реакция возникает не только на инфекцию, но и на антитела после прививок БЦЖ. У Диаскинтеста ложноположительных ответов на поствакцинацию не бывает. |
Квантифероновый тест, это такая процедура, которая дает возможность с высокой степенью точности обнаружить туберкулез даже на первоначальной стадии. Способ внедрен не так давно, в связи с чем его испытание в клинических условиях продолжается.
По мнению врачей фтизиатров, формальный отказ от туберкулинодиагностики и применение названного выше метода диагностики было плохим решением. Так как эффективная экономия от внедрения этой процедуры стала важнее качества диагностики и здоровья пациента.
Несмотря на новую технологию, нельзя забывать про традиционные способы диагностики, дающие существенный эффект последнюю половину века. При их содействии получилось снизить смертность и процент заболеваемости.
Квантифероновый тест на туберкулез в Инвитро был создан как альтернатива для туберкулинодиагностики. Однако не опробован в клинических условиях. Только по результатам обследований можно признать высокую точность диагностики процедуры.
Основа квантиферонового теста состоит в установлении гамма-интерферона, высвобождаемого Т-лимфоцитами во время встречи с микобактерией туберкулеза. Инвитро устанавливают специфичные белки, имеющиеся в составе микобактерии человеческого туберкулеза и бычьего. С их поддержкой создаются специальные антитела. Обнаружение протеинов при содействии квантиферонового теста считается качественным показателем присутствия палочки Коха в теле человека.
При проведении процедуры также возможно обнаружение микобактериоза. Если результат диагностики положительный, то следует выполнить дифференцированное диагностирование между микобактериозом и возбудителем туберкулеза.
Как проводится
Тестирование обнаруживает наличие гамма-интерферона к протеинам. Итоговый результат устанавливается впоследствии оценки проверок с двух пробирок.
При практическом использовании квантиферонового тестирования медиками было установлено, что треть от всего народонаселения заражена микобактериями. Но лишь у 10% болезнь начинает развиваться. Неблагоприятные условия для жизни активизируют инфекцию при условии наличия слабой иммунной защитой.
В категорию высокого риска к положительному квантифероновому тесту относят:
- работа в противотуберкулезном учреждении;
- выходцы исправительных учреждений;
- носители ВИЧ-инфекции;
- граждан с сахарным диабетом;
- проживание с больными.
Квантифероновое обследование проводится при отсутствии возможности выполнить Диаскинтест и пробы Манту, в ситуациях:
- при острых и соматических расстройствах, при обострении хронических заболеваний
- при непереносимости туберкулина
- при аллергических, дерматологических заболеваниях в период обострения
- во время карантина в организациях, которые посещает ребенок.
Ложный положительный результат пробы Манту может встречаться у человека, имеющего индивидуальную непереносимость туберкулина. Подобная характерная черта туберкулинового теста стала главной причиной отказаться от пробы.
Сходные и отличительные черты тестов на туберкулез: Манту, квантифероновый тест, диаскинтест
- тестирование Манту и Диаскинтест являются дерматологическими пробами, а квантифероновое обследование выполняется при заборе крови.
- выполнение квантиферонового теста не имеет побочных эффектов
- к туберкулинодиагностике и диаскинтесту имеются противопоказания
- квантифероновый и диаскинтест имеют большую специфику
- при проведении пробы Манту может встречаться ложный результат
Зависимость от времени выполнения профилактической прививки у квантиферонового тестирования отсутствует, прочие процедуры выполняются спустя месяц после БЦЖ. Беспристрастное интерпретирование результатов возможно лишь при квантифероновом тесте.
Из этого следует ряд плюсов квантиферонового теста:
- отсутствие ложных положительных результатов
- нет ограничений и противопоказаний
- отсутствие побочных реакций
- безвредность
- большая чувствительность и специфика.
Показания для выполнения квантиферонового теста:
- контактирование с больным туберкулезом
- высокая опасность контакта с возбудителем
- положительный результат пробы Манту
- противопоказания к проведению диаскинтеста и туберкулинодиагностики
- обследование мигрантов.
Значение результатов теста
При квантифероновом тестировании не проводится разделения между активным и скрытым туберкулезом. При положительном результате необходим прием у фтизиатра, который установит последующий план лечения больного. Если установленный уровень гамма интерферона не говорит о наличии инфицирования, возможен риск скрытой фазы болезни, в этом случае необходимо вести динамическое наблюдение за пациентом.
Отрицательный результат сообщает об отсутствии инфекции в теле. Если результат положительный, то возможность присутствия болезни имеется. Если результат сомнительный. то можно предполагать чувствительность к ТВ-антигену.
Что означает положительное значение квантиферонового теста:
- Инфицирование нетуберкулезными бактериями
- Присутствие микобактерий туберкулеза в теле
- Оценка при спорном значении теста
- Плохая преаналитическая подготовленность
- Персональная особенность иммунитета.
Если получены вышеназванные результаты, выполняется новый забор крови.
Что означает отрицательный показатель теста:
- иммунодефицит
- ранняя стадия заражения
- невыполнение правил преаналитики
- возраст до 5 лет
Отрицательный результат не гарантирует полное исключение заражения туберкулезом.
Оценивание итогов теста выполняется учитывая клинико-эпидемиологическую картину и прочие анамнестические свойства лица.
Новый тест на туберкулез, названный диаскинтестом пришел на смену стандартной туберкулинодиагностике. Основой методики стало подкожное введение определенного количества белка, являющегося специфичным для туберкулезных микобактерий. Положительные значения говорят о том, что пациент имеет инфекцию в активной или скрытой стадии. Отрицательный показатель не гарантирует отсутствие инфекции. При выраженном иммунитете против туберкулезной микобактерии характерна негативная проба.
Однако медицинские результаты диаскинтеста считаются более точными и универсальными по сравнению с пробой Манту.
Новая методика диагностирования устанавливает тубинфицированность и основана на раскрытии ответа индивидуума на присутствие микобактерии. Исследование разработано в России и демонстрирует высокую точность.
- В растворе содержатся видоспецифичные белки.
- Высокая чувствительность.
- Результаты более точные
- Применяется при динамическом наблюдении за ходом лечения
Различие в составе препаратов теста Манту и диаскинтеста предполагает разные клинические показатели обоих тестов. Во время введения туберкулина возникают ложноположительные реакции, вызванные введением немалого числа чужеродного антигена. Диаскинтест дает положительный результат, если тело человека ранее имело дело с туберкулезными антигенами. Если проба Манту дала положительный эффект, то требуется профилактическая терапия, а это не всегда является разумным решением.
КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ (QuantiFERON®-ТВ Gold) – современный лабораторный тест для выявления туберкулезной инфекции, альтернатива классическому кожному тесту с туберкулином. В настоящий момент в различных странах разработано и выпущено большое число национальных рекомендаций по применению данного теста.
Квантифероновый тест основан на определении INF-γ (гамма-интерферона), высвобождаемого сенсибилизированными Т-клетками, стимулированными in vitro специфическими протеинами (ESAT-6, CFP-10, TB7.7 (p4)) микобактерий туберкулеза, входящих в комплекс Mycobacterium tuberculosis complex (M. tuberculosis, M. bovis, M. canettii, M. caprae, M. pinnipedii, M. mungi, M. microti, M. africanum и др.). Эти протеины отсутствуют в вакцинных штаммах M. bovis BCG и в большинстве нетуберкулезных микобактерий, за исключением M. kansasii, M. szulagai, M. marinum.
В исследуемой крови пациента (из пробирки с ТВ-антигеном) определяется содержание INFγ, результат анализируется в совокупности с данными, полученными из 2-х других пробирок (выполняющих роль контрольных).
Примерно 1/3 часть населения мира инфицирована МБТ, и только у 5-10% инфицированных лиц развивается заболевание. При наличии неблагоприятных факторов латентная туберкулезаня инфекция (ЛТИ – состояние, когда микобактерии туберкулеза (МБТ) присутствуют в организме человека, но при этом отсутствуют клинические и рентгенологические признаки туберкулеза) может перейти в активную форму с развитием внелегочного туберкулеза (например, туберкулез почек).
К группе высокого риска инфицирования МБТ относятся лица, имевшие контакт с больным туберкулезом, или имеющие высокую вероятность контакта (работники противотуберкулезных диспансеров, приютов, исправительных учреждений и др.), а также лица с сопутствующими заболеваниями (ВИЧ-инфекцией, сахарным диабетом и др.).
Используемые для диагностики ЛТИ кожные тесты – проба Манту и Диаскинтест®, имеют ряд противопоказаний и ограничений к применению.
Противопоказания к проведению пробы Манту и Диаскинтеста:
- Индивидуальная непереносимость туберкулина;
- Острые и хронические инфекционные заболевания и соматические заболевания в период обострения;
- Кожные заболевания и аллергические состояния в период обострения;
- Период карантина в детских коллективах.
У пациентов с индивидуальной гиперчувствительностью к туберкулину может наблюдаться ложноположительная реакция.
Сравнение тестов для диагностики туберкулезной инфекции
| Параметр | Проба Манту | Диаскинтест® | Квантифероновый тест |
|---|---|---|---|
| Метод исследования | Кожный тест | Кожный тест | Исследование крови |
| Побочные реакции | Возможны | Возможны | Нет |
| Противопоказания | Есть | Есть | Нет |
| Специфичность | Низкая | Высокая | Высокая |
| Ложноположительные результаты после вакцинации БЦЖ | Да | Нет | Нет |
| Зависимость от сроков проведения профилактических прививок | Да (не ранее чем через месяц) | Да (не ранее чем через месяц) | Нет |
| Интерпретация результатов | Субъективна | Субъективна | Объективна |
Преимущества КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА:
- отсутствие противопоказаний и ограничений по времени проведения;
- отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
- безопасность процедуры и отсутствие побочных реакций;
- интерпретация результатов этого теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожных туберкулиновых тестов;
- высокая специфичность (99,1%) и высокая чувствительность (89,0%).
Показания к назначению КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА:
- Выявление ЛТИ в группах высокого риска: работники специализированных противотуберкулезных и других учреждений, где есть высокий риск контакта с возбудителем или больным туберкулезом, пациенты с сопутствующими заболеваниями и др.;
- Наличие известных контактов с больным туберкулезом (бактериовыделителем);
- Наличие положительной реакции пробы Манту для исключения поствакцинальной реакции;
- Наличие противопоказаний к проведению кожных туберкулиновых проб (пробы Манту и Диаскинтеста®);
- Дифференциальная диагностика инфекций, вызванных МБТ;
- Обследование иммигрантов.
Пример результата исследования и интерпретация:
| Параметр | Результат | Критерии оценки результатов |
|---|---|---|
| Содержание гамма-интерферона в контрольной пробирке (NIL) | 0,05 | До 8,00 |
| Содержание гамма-интерферона в пробирке с ТВ-антигеном (ТВ Ag) | 0,09 | Менее 0,35 (или свыше 0,35, но до 25% контрольного значения NIL) |
| Содержание гамма-интерферона в пробирке с митогеном (Mitogen) | 9,56 | От 0,50 |
| Квантифероновый тест (диагностика туберкулеза) | Отрицательный | Отрицательный |
Интерпретация результата исследования
| Положительный результат | Сомнительный результат | Отрицательный результат | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
|
Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт. Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 - 2020
! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.
Комментарии
Перечисленные Вами методы анализа не информативны для тех целей, из-за которых проводится туберкулинодиагностика. Альтернативой Манту и Диаскинтесту могут служить только Квантифероновый тест или T.SPOT-TB.
То, что Вы перечислили, это методы ПЦР и ИФА. Метод ПЦР используется для диагностики заболевания туберкулёзом и абсолютно не подходит для выявления инфицирования. С помощью ПЦР ищут ДНК туб. палочек в биологическом материале: мокроте, промывных водах бронхов или желудка, моче, операционном материале, отделяемом свищей и пр. ПЦР крови во фтизиатрии не применяется, т. к. туб. палочка в кровеносном русле может находится очень кратковременно при генерализации процесса. Поэтому берегите свои деньги и никогда не ведитесь на анализ "ПЦР крови на туберкулез". ИФА метод предполагает определение антител к туб. палочке. Даже при активной форме туберкулеза чувствительность этого метода не более 75%. Часто пациенты с активной формой туберкулёза, подтвержденной другими методами обследования, приносят отрицательный результат анализа, сделанный методом ИФА. Поэтому методы ПЦР и ИФА являются лишь дополнительными методами диагностики туберкулеза. Но в любом случае нужно помнить, что проба Манту, Диаскинтест, Квантифероновый тест, T-SPOT.TB являются лишь скрининговыми методами диагностики у детей. Их цель - выявить тех лиц, которых необходимо дообследовать дальше на туберкулез, а при отсутствии заболевания решить вопрос с профилактикой его возникновения в будущем.
То, что Вы перечислили, это методы ПЦР и ИФА. Метод ПЦР используется для диагностики заболевания туберкулёзом и абсолютно не подходит для выявления инфицирования. С помощью ПЦР ищут ДНК туб. палочек в биологическом материале: мокроте, промывных водах бронхов или желудка, моче, операционном материале, отделяемом свищей и пр. ПЦР крови во фтизиатрии не применяется, т. к. туб. палочка в кровеносном русле может находится очень кратковременно при генерализации процесса. Поэтому берегите свои деньги и никогда не ведитесь на анализ "ПЦР крови на туберкулез". ИФА метод предполагает определение антител к туб. палочке. Даже при активной форме туберкулеза чувствительность этого метода не более 75%. Часто пациенты с активной формой туберкулёза, подтвержденной другими методами обследования, приносят отрицательный результат анализа, сделанный методом ИФА. Поэтому методы ПЦР и ИФА являются лишь дополнительными методами диагностики туберкулеза. Читайте также:
|
