Иммунологический тест на туберкулез 5

Туберкулёз в России распространён настолько, что к сорока годам 70-90% жителей нашей страны инфицированы им. Это не значит, что они больны: после инфицирования иммунитет большинства людей справляется с бактерией. Вероятность заболеть составляет в среднем 8% в первые два года после инфицирования, затем постепенно снижается, и формируется приобретенный клеточный иммунитет. Среди взрослых чаще болеют люди ослабленные, живущие в плохих условиях, при недостатке света и свежего воздуха. Тем не менее, заразиться может абсолютно каждый из нас. Поэтому так важно проходить регулярные проверки на туберкулёз и проверять своих детей.

Зачем нужна прививка БЦЖ?

ВОЗ рекомендует массовую вакцинацию новорожденных против туберкулёза во всех странах, где эта болезнь распространена. Поэтому на 3-5 день после рождения, еще в роддоме, всем новорожденным бесплатно делают прививку БЦЖ. Но эта вакцина не защищает от инфицирования туберкулёзом. Её задача несколько иная. Если не привитый ребенок младше 2 лет будет инфицирован туберкулёзом, у него крайне высока вероятность развития туберкулезного менингита и генерализованных форм туберкулеза, которые очень быстро приводят к смерти. БЦЖ достаточно надёжно защищает ребенка именно от этих форм. Она также защищает детей от легочной формы туберкулеза, но уже менее эффективно.

Проба Манту

Проба Манту ежегодно проводится всем детям до 7 лет. Это не прививка (!), а иммунологический тест, показывающий, есть ли в организме возбудитель туберкулеза. При этом внутрикожно вводится туберкулин — специфический белок, содержащий антигены человеческого и бычьего туберкулеза. Через 72 часа измеряется размер папулы. На результат реакции Манту может повлиять посещение сауны, долгое принятие ванны, бассейн и расчёсывание места введения пробы. Временный контакт с водой никак не влияет на результаты пробы Манту, поэтому мнение о том, что Манту нельзя мочить — миф.

Диаскинтест тест

Он проводится детям с 8 лет. Также является кожной пробой. Но если в Манту используются антигены как человеческого, так и бычьего туберкулеза, то в диаскинтесте — только антигены туберкулеза человека. Диаскинтест гораздо более специфичен: реакция на него возникает, только если в организме есть активные бактерии туберкулеза. Проще говоря — если проба Манту положительная, это ещё ничего не значит: эта проба часто дает и ложноположительные реакции. А вот после диаскинтеста появилась реакция — это более серьёзный показатель.

Точность Манту составляет 50-70%, диаскинтеста — 90%.

Квантифероновый тест

Квантифероновый тест — один из новых методов диагностики туберкулёза по анализу крови. Он основан на определении в крови гамма-интерферона, который вырабатывают клетки в ответ на внедрение туберкулезной палочки. В отличие от Манту и диаскинтеста, квантифероновый тест не требует введения в организм никаких антигенов и бактерий. Кровь для исследования берут из вены. Результат готов через несколько дней, и его точность намного выше, чем у кожных проб. Тест будет положительным, только если человек действительно болен.

Сравнительная характеристика четырех тестов на туберкулёз

Манту	Диаскинтест	Квантифероновый тест	T.SPOT.TB
Точность	50,00%	90,00%	97,00%	97,00%
Оценка данных	Субъективная	Субъективная	Объективная	Объективная
Ложноположительные результаты	Часто	Редко	Крайне редко	Нет
При скрытой форме туберкулеза	Не достоверен	Не достоверен	Достоверен	Достоверен
Противопоказания	Много	Есть	Нет	Нет
Побочные реакции	Есть	Редко	Нет	Нет
При ВИЧ и других иммунодефицитах	Не информативен	Не информативен	Информативен	Информативен
Способ исследования	Кожный тест	Кожный тест	Анализ крови	Анализ крови

Чтобы отличить активную форму туберкулеза от латентной, используется специфический тест — ПЦР (исследования мокроты на ДНК). Таким образом, диаскинтест, ти-спот и другие тесты позволяют определить, болен ли человек туберкулезом вообще (легочным или внелегочным), а ПЦР — болен ли он им в активной форме.

Флюорография

Если у вас остались вопросы по методам диагностики туберкулеза — позвоните нам: +7 812 331 00 00, мы ответим на них!

Универсальный альтернативный вариант иммунологического исследования in vitro диагностики туберкулезного процесса путем количественного определения мононуклеарных клеток периферической крови, продуцирующих ИФН-γ в ответ на присутствие белков CFP-10 и ESAT-6 M. tuberculosis.

Иммунологический тест на туберкулез

Синонимы английские

Testing for tuberculosis infection

Прямая оценка функции T-клеток энзим-связывающий иммуноспотингом (ELISPOT).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.

Общая информация об исследовании

Возбудителем туберкулёза является микобактерия туберкулеза (МБТ, палочка Коха, Mycobacterium tuberculosis) – высокоустойчивый микроорганизм. В настоящее время описано около 150 видов микобактерий, но клинически значимыми признаны М. tuberculosis (более 90 % всех случаев туберкулезной инфекции), М. bovis (5 %) и М. africanum (около 3 % – главным образом среди населения стран тропической Африки).

Источником инфекции являются больные люди и животные. Наиболее распространен воздушно-капельный путь заражения, при котором возбудитель проникает в организм через верхние дыхательные пути, иногда через слизистые оболочки пищеварительного тракта или через поврежденную кожу.

Попадая в окружающую среду, возбудитель способен длительно сохраняться: в высохшей мокроте он выживают до 10 месяцев, на предметах, окружающих больного (белье, книги), – более 3 месяцев, в воде – более года, в почве – до 6 месяцев.

В настоящее время описаны следующие варианты развития ситуации после проникновения МБТ в организм человека: [1]

полная элиминация (удаление) возбудителя из организма;
развитие первичного туберкулеза (при быстром росте и размножении МБТ);
инфицирование, или "латентная туберкулезная инфекция" (ЛТИ), [2] – состояние стойкого иммунного ответа на антигены МБТ при отсутствии клинических проявлений активной формы туберкулеза.

Присутствующий в организме возбудитель способен не только длительно бессимптомно персистировать в организме, но при определенных обстоятельствах (интенсивное размножение МБТ на фоне малоэффективного иммунитета и т.д.) реактивироваться и вызвать развитие заболевания. В настоящее время установлено, что с момента инфицирования МБТ в течение первого года заболевание развивается у 5 % инфицированных людей, в течение всей оставшейся жизни туберкулез развивается еще у 5 %, то есть пожизненный риск заболевания туберкулезом среди инфицированных составляет 10 %.

Вместе с тем наличие различных факторов может способствовать повышению риска развития локального туберкулеза: так, при ВИЧ-инфицировании ежегодный риск заболевания туберкулезом на фоне ЛТИ составляет 10 %, а пожизненный риск – 50 %.

Диагностика туберкулеза является комплексной и включает, согласно регламентирующим документам, [3] аллергические внутрикожные пробы (реакция Манту и "Диаскинтест"), инструментальное обследование (ФЛГ, рентген) и лабораторные – направленные как на выявление и идентификацию возбудителя с определением спектра его чувствительности к препаратам этиотропной терапии, так и на изучение выраженности иммунологической реакции на патоген.

Одним из современных и высокоинформативных методов определения специфической иммунной реакции на МБТ, особенно при отсутствии или минимальных клинико-инструментальных признаках инфекции и сомнительных результатах общепринятых методов лабораторной диагностики туберкулеза, является тест T-SPOT.

Исследование иммунного Т-клеточно-опосредованного ответа: количественное определение в крови эффекторных Т-клеток (CD4 и CD8), вырабатывающих ИФН-ɣ (гамма-интерферон), который продуцируется в ответ на стимуляцию специально подобранными антигенами ESAT-6 и CFP10. Эти белки входят в состав клинически значимых МБТ (М. tuberculosis, М. bovis, М. africanum) и отсутствуют у бактерий, используемых при производстве вакцины БЦЖ и у непатогенных для человека микобактерий.

Преимущества теста Т- SPOT:

высокая специфичность и чувствительность метода (87-97 %);
безопасность, отсутствие побочных реакций;
отсутствие ложноположительных результатов;
результат исследования не зависит от наличия вакцинации БЦЖ;
не имеет противопоказаний и ограничений по времени проведения;
позволяет диагностировать внелегочные формы туберкулеза;
позволяет диагностировать инфекцию у пациентов с ВИЧ и низкими показателями уровня CD4. [4]

Для чего используется исследование?

Диагностика туберкулезной инфекции.

Когда назначается исследование?

Пациентам, у которых в связи с основным заболеванием (эпилепсия, хронические заболевания в стадии обострения и др.) затруднено проведение внутрикожных тестов.
При наличии в анамнезе пациента токсико-аллергических реакций на туберкулин.
Детям, привитым БЦЖ, у которых выявлена ложноположительная реакция Манту, – до проведения инструментального обследования легких. [5]
По эпидемиологическим показаниям – пациентам, прибывшим из стран с высоким уровнем заболеваемости туберкулезом (Африка, Азия) и/или находившимся в контакте с лицами с диагностированным заболеванием.
Пациентам с аутоиммунными и др. заболеваниями (силикоз), ведущими к снижению системного иммунитета.
Пациентам, получающим системное лечение глюкокортикоидами или иммуносупрессивную терапию.
Онкологическим пациентам, получающим лучевую и химиотерапию.
Пациентам на диализе или готовящимся к трансплантации органов или переливанию крови.
ВИЧ-инфицированным, особенно со снижением количества СD4-клеток.
При подозрении на внелегочные формы туберкулеза.

Туберкулез – опасное инфекционное заболевание, способное длительно протекать бессимптомно. Для выявления инфицирования туберкулезными микобактериями проводят тест на туберкулез.

Туберкулиновые пробы

Заражение выявляют с помощью введения под кожу препарата с названием Туберкулин, который впервые был получен в 1890 г. Робертом Кохом из культуры возбудителей туберкулеза.

В состав Туберкулина входят низкомолекулярные белки, нуклеиновые кислоты, липиды, полисахариды, получившиеся при разрушении микобактерий.

Препарат не содержит живых бактерий и не может вызвать заражения.

Диагностические туберкулиновые пробы проводят всем, кроме новорожденных, перед введением вакцины БЦЖ. При положительном результате прививку БЦЖ не делают из-за риска осложнений.

Первоначально Туберкулин вводили подкожно под лопатку. Для получения результата должно было пройти 48-72 часа. В месте укола за это время появлялась папула, а у пациента повышалась температура, ухудшалось самочувствие.

Если организм бурно реагировал на подкожную пробу, то предполагалось, что человек заражен палочкой Коха (микобактериями). При отсутствии реакции человек считался здоровым.

В 1907 г. врачом К. Пирке был предложен скарификационный метод. Для его проведения использовалась вытяжка из сухого очищенного туберкулина.

При проведении исследования:

кожу предплечья обрабатывают карболовой кислотой;
наносят царапину глубиной 5 мм;
капают раствор туберкулина.

Оценка теста проводится через 2-3 суток. Положительный результат пробы у детей до 3 лет означает активную стадию болезни. После 3 лет положительная накожная проба указывает на первичное заражение микобактерией.

Усовершенствовал пробу Пирке в 1908 г. доктор Ш. Манту. Пробу Манту ставят на предплечье, Туберкулин вводят внутрь кожи, что позволило исключить возможность воспаления накожной царапины.

В месте введения развивается воспаление, появляется покраснение участка кожи.

По величине папулы делают вывод о состоянии противотуберкулезного иммунитета.

Для детей, которые проходили вакцинацию БЦЖ меньше года назад, нормальным считается положительный результат пробы Манту.

Тесты на основе белков туберкулезных бактерий

Стратегия ВОЗ по туберкулезу направлена на снижение смертности от него к 2035 г. на 95%. Условием снижения смертности является ранняя диагностика инфицирования. С этой целью созданы новые точные методы определения присутствия туберкулезных микобактерий в организме человека.

Созданы способы выявления инфекции с помощью Диаскинтеста, Квантиферона, Тубинферона.

Эти методы позволяют выявить белки CFP-10, ESAT-6, которые синтезируются только опасными для человека M. Tuberculosis.

Диаскинтест и Тубинферон вводятся внутрь кожи. Для проведения квантиферонового теста берут кровь пациента и проводят исследование в пробирке.

Квантифероновый метод и Диаскинтест отличаются более высокой чувствительностью к микобактериям, чем туберкулиновые пробы при тестировании детей и взрослых, вакцинированных БЦЖ.

При отсутствии вакцинации БЦЖ более точным оказывается туберкулиновая проба Манту.

Прогноз болезни улучшается при диагностике на стадии ранних симптомов болезни с помощью экспресс-тестов на туберкулез. В аптеке можно приобрести ИммуноХром-анти-МТ-Экспресс и, следуя инструкции, выполнить его в домашних условиях самостоятельно.

При сомнительной реакции пройдите его повторно, а если получен положительный результат, нужно пройти обследование в противотуберкулезном диспансере.

Точным способом выявления туберкулеза является Диаскинтест. При проведении пробы вместо туберкулина внутрикожно вводят смесь из белков CFP-10, ESAT-6.

Исследование назначают для уточнения результатов пробы Манту. Результаты проверяют через 3 суток.

Положительный результат указывает на стадию первых признаков заражения или активной фазы болезни. Диаскинтест редко дает ошибочные результаты, так как отличается высокой специфичностью к M. tuberculosis.

Тубинфероновый метод разработан в России. Под кожу вводится смесь очищенного туберкулина и белков CFP-10, ESAT-6. С помощью тубинферонового теста можно выявить заражение туберкулезом.

Тубинферон чувствительнее, чем другие методы при выявлении скрытой туберкулезной инфекции, что важно для улучшения прогноза заболевания.

Чем раньше будет начато лечение такими сильными антибиотиками, как Рифампицин, Диоксидин, Изониазид, тем выше вероятность полного выздоровления.

Проводится квантифероновый тест на туберкулез вне организма и позволяет обнаружить заболевание, протекающее в скрытой и активной форме. Главное его преимущество – незначительный риск ложноположительных результатов и отсутствие их у людей, вакцинированных БЦЖ.

Для исследования необходима цельная кровь, в которой есть T-лимфоциты. Если пациент был инфицирован туберкулезом, то T-лимфоциты при встрече с белками микобактерии начинают активно выделять гамма-интерферон. По количеству выделенного гамма-интерферона определяют тяжесть инфекции.

Чтобы провести гамма-интерфероновый тест на туберкулез:

берут кровь из вены;
добавляют образцы в 3 пробирки с белками CFP-10, ESAT-6;
ожидают реакцию T-лимфоцитов;
определяют количество синтезированного гамма-интерферона в пробирке.

С использованием квантиферонового теста диагностика туберкулеза достигает точности 99,1%. А проведение исследования вне организма исключает риск побочных эффектов и аллергической реакции.

Выбирая, какой способ диагностики надежнее, нельзя забывать о доступности метода по цене:

Пробу Манту можно сделать за 400-700 руб.
Цена Квантиферона составляет 1900-3500 руб.
Экспресс-тест на туберкулез ИммуноХром-анти-МТ-Экспресс стоит 400 руб.

К положительным сторонам Квантиферона относится отсутствие противопоказаний, высокая специфичность и отсутствие зависимости от календаря детских прививок.

Метод можно использовать для проверки на туберкулез у детей, которым противопоказано проведение туберкулиновой пробы.

Вне организма можно проводить диагностику туберкулезного инфицирования Хайн-тестом. Этот метод выявляет ДНК микобактерии в мокроте. Недостаток исследования в отсутствии различий между живыми и погибшими палочками Коха, что не позволяет использовать Хайн-тест для контроля лечения.

Для определения активной формы заболевания используются иммунохроматографический экспресс-тест SD BIOLINE для выявления белка MPT64, который вырабатывается микобактериями. Иммунологический способ диагностики позволяет идентифицировать микобактерии туберкулеза с точностью 98,5-100%.

Несмотря на высокую специфичность тестов, основанных на выявлении белков микобактерий, окончательный диагноз ставит фтизиатр, основываясь на результатах нескольких видов лабораторных исследований крови, мочи и мокроты.

Манту - на выбор. Знаменитый иммунный тест на выявление заражения туберкулезом, по мнению детского омбудсмена Анны Кузнецовой, не должен быть обязательным при приеме малышей в детские сады и школы. Она не призывает совсем отказываться от обследования, но тестирование может быть иным - без укола. Хотя за него придется немало заплатить. Мнения профильных врачей о ранней диагностике опасного заболевания выяснял корреспондент "Вестей ФМ" Сергей Артемов .

Споры о реакции Манту - нужна она детям или нет - идут с 2013 года, когда вышли санитарные правила. Они обязали всех детей проходить тестирование на туберкулез перед поступлением в ясли и школы. И хотя копья вокруг пуговок на предплечье ломали не сами дети, но их родители - врачи поступали, и будут поступать по своим инструкциям, говорит главный фтизиопедиатр Минздрава России, доктор медицинских наук Валентина Аксенова .

"Ситуация такая в настоящее время: все дети в возрасте до 7 лет проходят ежегодное обследование пробы Манту. После 7 лет у них более информативная проба - диаскинтест. Если родители отказываются проводить либо ту, либо другую пробу - то давайте берите кровь и используйте другие методы. Не далее, как 24 марта были утверждены на профильной комиссии Российского общества фтизиатров другие тесты - альтернативные, которые можно делать, забрав кровь у ребенка".

И тест Манту, и Диаскинтест проводятся уколом в руку. Лучше всего, если оба варианта будут работать в паре, полагает ведущий научный сотрудник Центрального НИИ туберкулеза доктор медицинских наук Марина Губкина .

"Все тесты любят сравнивать с позиции чувствительности и специфичности. Проба Манту - более чувствительная… Диаскинтест - более специфичный. Просто, традиционно в России, до появления Диаскинтеста, сложилась определенная тактика обследования детей на туберкулезную инфекцию - проведение пробы Манту ежегодно. Вот этой папулы, или пуговкой ее называют. Если она стала больше, или была отрицательная, а стала положительная, то отбирают в группу риска для дообследования с использованием рентгенологического метода".

Марина Губкина ссылается и на приказ Минздрава, который рекомендует как раз оба вида проверки.

"У нас уже есть новый нормативный документ, приказ №951, который определяет использование Диаскинтеста с 8 лет ежегодно, а пробы Манту с 12 месяцев до 7 лет включительно".

Возраст диагностических инъекций, как видно отличается. И зависит он от точности показаний, пояснила Валентина Аксенова .

"Диаскинтест имеет очень высокую специфичность. Если он положительный - на 100% надо идти к врачу. Значит в организме развивается уже вирулентная микобактерия. Это очень опасный вариант. Он требует обследования на туберкулез. Таких детей в школу допускать нельзя. Проба Манту малоспецифичная. У нее специфичность - около 40%. Она может давать ложноположительные результаты на аллергию, глистную инвазию, и много таких моментов. Особенно, если ребенок аллергик".

То есть, на практике распухшая пуговка Манту может показать и наличие туберкулезной инфекции, и очень мощный иммунитет ребенка, который тут же активно подавляет даже ослабленные микобактерии, и то, что у ребенка могут быть глисты или аллергия. А поскольку Диаскинтест выявляет только туберкулез, то маленьким детям, после прививок - его проводить бессмысленно, реакция покажет, что ребенок - якобы болен именно туберкулезом. Многие родители настроены против уколов их чадам. Они по-разному аргументируют свою позицию, говорит Валентина Аксенова .

"Они думают, что можно заразить. Раньше, когда были шприцы многоразовые - они боялись ВИЧ-инфекции, но сейчас это в прошлом. Шприцы теперь одноразовые. Плюс - они боятся, что у ребенка на введенное вещество будет аллергия. Мы таких детей знаем - у кого бывают аллергические реакции. Прежде, чем он сделает реакцию Манту - у него давным-давно будет написано в медицинской книжке, что ему противопоказана проба Манту".

В последние годы во многих странах мира распространяется другой принцип диагностики - без уколов, но с анализом крови, рассказывает Марина Губкина .

"Есть квантифероновый тест. Ребенку не вводят препараты, а забирают кровь и потом в лаборатории проводят исследования".

Квантифероновый тест использовался и в России - но лицензия на препарат истекла и теперь единственной альтернативой инъекционным тестам осталась так называемая Ти-спот-диагностика. Родители могут настаивать на ней - если они категорически против Манту. Врачи обязаны пойти им навстречу. Уже изданы клинические рекомендации такого тестирования. Одна проблема, замечает Валентина Аксенова - делается этот тест за собственные деньги и далеко не в каждом населенном пункте:

"Такой тест делается в крупных центрах. Там, где есть иммунологические лаборатории. Намного проще сделать Диаскинтест. Те же, кто против прививок и манипуляций с ребенком, пусть едут в областной центр и делают альтернативный метод".

Тесты на туберкулез через анализ крови уже стали самыми популярными в США. А вот в Германии, например, детей при поступлении в школу вообще не проверяют на эту болезнь. В России от диагностики Минздрав отказываться не намерен. Но будут внесены поправки в вакцинацию БЦЖ - первая прививка младенцам сохранится, а вот вторую в 7-летнем возрасте, скорее всего, отменят. Тогда самый точный диаскинтест можно будет использовать уже в 5 лет.

Медики подчеркивают - они не отнимают у родителей право беспокоиться за своего ребенка, ставить ему прививки, делать диагностику - или нет. Но до тех пор, пока на врачах лежит государственная ответственность за профилактику туберкулеза - в коллективы, будь то в детские сады, или в школы - потенциальных носителей инфекции они, как и прежде, не допустят.