Определение авидности антител igg к цитомегаловирусу что это такое
В диагностике цитомегаловирусной инфекции (ЦМВИ) важным критерием для определения стадии и формы заболевания и выработки стратегии дальнейших действий является авидность антител IgG к вирусу. Этот показатель используют при многих серологических исследованиях для определения типа и давности цитомегаловирусной инфекции в организме.
Говоря доступным языком, авидность характеризует активность связывания антител с частицами вируса. На объяснении явления такого связывания стоит остановиться подробнее.
Антитела к вирусам: немного теории
Сила иммунного ответа при любой инфекции нарастает постепенно, поэтапно вовлекая каждый из компонентов иммунной системы на определенной стадии заболевания. Выявив активность отдельного звена иммунитета, можно судить о давности инфицирования.
При первичном попадании цитомегаловируса в организм и его размножении в клетках первый этап иммунной защиты осуществляется макрофагами, которые поглощают и переваривают частицы вируса и разрушенные им клетки. При этом специфические вирусные белки, называемые антигенами, появляются на поверхности макрофагов. Т-лимфоциты распознают антиген, так как его структура отличается от нормальных белков организма, и переходят в активированное состояние. Активированные Т-клетки синтезируют вещества, стимулирующие выработку В-лимфоцитами иммуноглобулинов (антител).
Иммуноглобулины являются основными компонентами, сдерживающими размножение вирусов в организме. В диагностике цитомегаловирусной инфекции наиболее важно определение содержания иммуноглобулинов (иначе говоря, антител) IgM и IgG.
Сроки появления в крови антител к вирусу могут сильно отличаться у разных людей, в зависимости от состояния иммунной системы, наличия сопутствующих инфекций и эндокринных заболеваний.
При проникновении вируса в организм первыми вырабатываются иммуноглобулины класса М. Они могут определяться в крови через 5-7 дней после инфицирования у лиц с нормальным иммунитетом либо через 14-50 дней при сниженном иммунном статусе. IgM циркулируют в организме от 2 до 5 месяцев, поэтому их высокое содержание в сыворотке крови считают показателем недавнего первичного инфицирования.
Иногда иммуноглобулины М сохраняются в крови до двух лет, что может приводить к постановке ложноположительного диагноза. При иммунодефицитах антитела этого класса могут не вырабатываться вообще. В этом случае возможен ложноотрицательный результат.
Дополнительным критерием для установления факта инфицирования и его сроков служит определение содержания в сыворотке крови антител IgG и их авидности.
Авидность антител IgG к тому или иному вирусу обеспечивается структурой их молекулы и зависит от количества антигенсвязывающих участков. В IgG таких участков два, а в IgM – десять. В начале иммунного ответа всегда вырабатываются низкоавидные антитела, затем авидность постепенно нарастает. Иммуноглобулины класса М обладают в пять раз большей авидностью, чем IgG, но период их циркуляции в крови слишком короткий и не позволяет использовать критерий авидности для диагностики.
Кстати, полезно также почитать:
Иммуноглобулины класса G появляются в крови через 3-4 недели после заражения вирусом. В течение месяца после начала выработки их количество быстро растет, затем постепенно снижается и сохраняется на относительно постоянном уровне в течение всей жизни. Низкоавидные антитела сохраняются в крови 3-5 месяцев после инфицирования. При реактивации давней хронической инфекции выявляются высокоавидные иммуноглобулины G в высоких концентрациях. В связи с этим наличие в сыворотке крови IgG с низкой авидностью служит доказательством недавнего первичного заражения.
Как определяется авидность антител IgG
Для определения авидности сыворотку пациента разводят и вносят в лунки пластикового планшета, с поверхностью которых связан белок цитомегаловируса – антиген. Если в сыворотке есть иммуноглобулины G к вирусу, они образуют прочный комплекс с белком.
Затем в лунки добавляют мочевину, которая способна ослаблять связь между антителами и антигеном. В случае низкой авидности большая часть комплексов разрушается. Лунки промывают и выливают промывочный раствор. При этом разрушенные комплексы удаляются. На следующем этапе вносят меченые антитела к иммуноглобулинам, которые садятся на оставшиеся IgG.
В качестве метки для антител используют фермент, разрушающий какой-нибудь простой субстрат с образованием химически активных продуктов. Чаще всего меткой служит пероксидаза, а субстратом – перекись водорода. В результате их взаимодействия образуется кислород, который окисляет бесцветный компонент реакции – хромоген, что приводит к окрашиванию жидкости.
Чем выше авидность антител, тем больше иммуноглобулинов IgG остается в лунке и, соответственно, сильнее окрашивание. Степень окрашивания определяют на спектрофотометре и сравнивают с заведомо положительным и отрицательным образцами.
Параллельно ставят ту же реакцию, но без обработки мочевиной. Результат выражают в виде индекса авидности: титр IgG после обработки мочевиной делят на титр необработанных IgG и умножают на 100%.
Расшифровка результатов анализа
Интерпретация результатов определения авидности может несколько варьировать в зависимости от тест-системы, используемой в конкретной лаборатории.
Усредненные значения авидности и их расшифровка:
Исследование, направленное на определение авидности антител класса IgG к цитомегаловирусу для определения срока первичного инфицирования и длительности цитомегаловирусной инфекции.
Антитела класса IgG к цитомегаловирусу; антитела класса IgG к ЦМВ; иммуноглобулины класса G к ЦМВ; авидность антител.
Cytomegalovirus Antibodies, IgG; CMVAntibodies, IgG;Anti-Cytomegalovirus-IgG; Anti- CMV-IgG; avidity.
Электрохемилюминесцентный иммуноанализ (ECLIA).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Цитомегаловирус (Cytomegalovirus) относится к семейству герпес-вирусов человека, рода Cytomegalovirus, и является возбудителем цитомегаловирусной инфекции. Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) – это широко распространенная инфекция человека, характеризующаяся легким, бессимптомным течением у людей в обычных условиях, с нормально функционирующей иммунной системой. Особое клиническое значение она приобретает у лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями и у беременных женщин из-за риска внутриутробного инфицирования плода.
Носительство цитомегаловируса определяется у 60-90 % взрослого населения. ЦМВИ входит в группу TORCH-инфекций (перевод первых букв латинских токсоплазмы - Toxoplasma, краснухи - Rubella, цитомегаловируса - Cytomegalovirus, герпеса - Herpes), являющихся потенциально опасными для развития плода и вызывающие тяжелые поражения органов у новорождённых детей. Цитомегаловирус может обнаруживаться у 0,2-2,2 % новорождённых и является ведущей причиной врождённых инфекций во всем мире. Примерно у 10 % таких детей развиваются клинические признаки заболевания с рождения, у части – в течение первых десяти лет жизни.
Цитомегаловирус относится к ДНК-содержащим вирусам. Он обладает способностью к медленному распространению в культуре инфицированных клеток, изменяя и увеличивая размеры клеток (явление цитомегалии). Источником инфекции является человек, выделяющий вирус через различные биологические жидкости. К ним относятся кровь, слюна, моча, грудное молоко, цервикальный и вагинальный секрет, семенная жидкость, ликвор, содержимое желудочно-кишечного тракта и прочие секреты. Инфекция передается воздушно-капельным, контактным, половым путем, в результате переливания крови от инфицированного донора. Возможно также заражение при трансплантации органов и вертикальный путь передачи, от инфицированной женщины к ребенку во время беременности или родов. Длительность инкубационного периода заболевания часто установить невозможно, так как большинство клинических случаев не распознается и протекает в латентной, бессимптомной, форме. Следует отметить, что для ЦМВИ характерна длительная персистенция возбудителя в организме человека. Это приводит к тому, что множество людей является носителями этого вида инфекции на протяжении долгих лет и, возможно, всей жизни. При ослаблении иммунной системы может отмечаться тяжелое течение заболевания.
Различают приобретенную и врождённую формы ЦМВИ. Приобретенная форма инфекции протекает в виде острого локализованного процесса, схожего по клинической симптоматике с острой респираторной вирусной инфекцией или инфекционным мононуклеозом. Отмечается повышение температуры тела, слабость, общее недомогание, боль в горле, миалгии, увеличение шейных лимфатических узлов. В редких случаях отмечаются осложнения в виде артралгий, артритов, пневмонии, цитомегаловирусного гепатита.
Диагностика ЦМВИ является комплексной и основана на сочетании анамнестических, клинических данных и результатах лабораторных исследований. В связи с тем что клиническая диагностика ЦМВИ в большинстве случаев затруднена, методы лабораторной диагностики имеют большое значение.
Серологическая диагностика основана на выявлении антител к антигенам возбудителя ЦМВИ. В первые дни от начала инфекции начинается выработка антител класса IgM, затем их количество нарастает в течение первых двух недель, впоследствии постепенно снижаясь спустя несколько месяцев. Присутствие данных антител свидетельствует о свежем инфицировании или реактивации латентной и персистентной форм инфекции. Антитела класса IgG к цитомегаловирусу появляются через 2-4 недели после инфицирования, их уровень в крови сохраняется до нескольких лет и может служить признаком перенесенного заболевания. Данный класс антител может выявляться при первичном инфицировании, обострении хронической формы инфекции, при персистентной и латентной формах ЦМВИ.
Важным значением в диагностике ЦМВИ является определение авидности антител класса IgG к антигенам цитомегаловируса. Авидность антител характеризует прочность связывания специфических антител с антигенами возбудителя. Определение авидности антител класса IgG необходимо для получения данных о давности инфицирования, возможном определении длительности течения ЦМВИ и срока первичного инфицирования. Это связано с тем, что в первые три-четыре месяца после инфицирования синтезируются антитела с низкой авидностью, то есть имеющие слабую прочность связывания антигенов. Затем начинается выработка антител с пограничной (средней) авидностью и высокоавидных антител. Низкоавидные антитела свидетельствуют о первичном инфицировании и инфекции в течение последних трех-четырех месяцев. Выявление антител со средней авидностью свидетельствует о присутствии антител как с низкой, так и с высокой авидностью. Определение антител с высокой авидностью свидетельствует о давности перенесенной инфекции не менее трех-четырех месяцев назад до момента исследования. Антитела с высокой авидностью также определяются в случае активной формы ЦМВИ в период реактивации (обострения) персистентной инфекции.
Важно, что у новорождённых детей в первые шесть месяцев жизни возможно обнаружение в крови материнских антител класса IgG, что делает затруднительным и в ряде случаев нецелесообразным проведение данного исследование на авидность. У лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией результат исследования может быть недостоверным вследствие низкого уровня антител класса IgG. В данном случае рекомендуется проведение дополнительных тестов по выявлению ЦМВИ.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики ЦМВИ;
- для определения срока первичного инфицирования цитомегаловирусом;
- для получения данных о давности инфицирования цитомегаловирусом;
- для дифференциальной диагностики первичного инфицирования от хронической формы и активной формы ЦМВИ в период реактивации (обострения) персистентной инфекции;
- для подтверждения или исключения недавнего инфицирования цитомегаловирусом беременных женщин или женщин, планирующих беременность, в комплексной лабораторной диагностике ЦМВИ.
Когда назначается исследование?
- При подозрении на ЦМВИ и при её клинических проявлениях;
- при необходимости оценки длительности ЦМВИ и давности инфицирования цитомегаловирусом;
- при определении срока первичного инфицирования и получении данных о давности инфицирования цитомегаловирусом;
- при подозрении на ЦМВИ у беременных женщин;
- при планировании беременности в целях профилактики заражения плода;
- при обследовании детей, родившихся от матерей с ЦМВИ (рекомендуется проведение исследования у детей старше шестимесячного возраста);
- при положительных результатах определения антител к цитомегаловирусу классов IgM и IgG.
Что означают результаты?
1. Cytomegalovirus, IgG, авидность
Выдается результат с интерпетацией: высоко/низкоавидные антитела.
2. Cytomegalovirus, IgG (количественно)
Концентрация: 0 - 0,50 Ед/мл.
- выявление антител класса IgG с низкой авидностью - свидетельствует об инфицировании цитомегаловирусом менее трех-четырех месяцев назад до момента исследования, возможно наличие первичного инфицирования;
- выявление антител класса IgG с высокой авидностью - свидетельствует об инфицировании цитомегаловирусом три-четыре и более месяцев назад до момента исследования, отсутствие первичного инфицирования;
- обнаружение материнских антител класса IgG - цитомегаловирус у новорождённых в первые шесть месяцев жизни.
- отсутствие инфицирования цитомегаловирусом;
- отсутствие или снижение иммунного ответа у лиц с иммунодефицитными состояниями, пациентов после трансплантации органов, ВИЧ-инфекцией;
- ори отрицательном результате исследования, но при сохраняющемся подозрении на ЦМВИ рекомендуется проведение повторного теста через две недели.
Что может влиять на результат?
- Возраст обследуемых лиц, у новорождённых детей в первые шесть месяцев жизни возможно обнаружение в крови материнских антител класса IgG к цитомегаловирусу;
- длительность заболевания от момента первичного инфицирования возбудителем;
- нарушения со стороны иммунной системы, аутоиммунные заболевания, иммунодефицитные состояния, ВИЧ-инфекция.
- Диагностика ЦМВИ основана на сочетании анамнестических, клинических данных, результатах лабораторного обследования;
- определение авидности антител необходимо производить при положительных результатах на определение антител классов IgM и/или IgG к антигенам цитомегаловируса;
- при обнаружении антител с пограничной (средней) авидностью необходимо повторить исследование через две-четыре недели;
- у новорождённых детей в первые шесть месяцев жизни возможно обнаружение в крови материнских антител класса IgG к возбудителю, что делает затруднительным и в ряде случаев нецелесообразным проведения исследования на авидность; у лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией результат исследования может быть недостоверным вследствие низкого уровня антител класса IgG. В данном случае рекомендуется проведение дополнительных тестов по выявлению ЦМВИ.
8 Cytomegalovirus предранний белок IEA, IgM, IgG
15 Cytomegalovirus, IgG
14 Cytomegalovirus, IgM
9 Cytomegalovirus, ДНК [реал-тайм ПЦР]
42 Cytomegalovirus, ДНК, количественно
117 Антитела к Cytomegalovirus (IgG) с определением авидности
Кто назначает исследование?
Терапевт, врач общей практики, инфекционист, акушер-гинеколог, неонатолог, педиатр, уролог, хирург.
Литература
- Seo S, Cho Y, Park J. Serologic screening of pregnant Korean women for primary human cytomegalovirus infection using IgG avidity test / Korean J Lab Med. 2009 Dec;29(6):557-62.
- Gaytant M A, Steegers E A P, Semmekrot B A, Merkus H M M W, Galama J M D. Congenital cytomegalovirus infection: Review of the epidemiology and outcome. Obstet Gynecol Surv 2002; 57: 245-256.
Для того чтобы определить стадию цитомегаловирусной инфекции нам необходимо разобрать такое понятие, как авидность антител IgG к цитомегаловирусу и что это такое, а затем приступить к расшифровке анализа. Авидность показывает насколько прочная связь присутствует у антител с вирусом. Поэтому чтобы подробнее изучить авидность к цитомегаловирусу сначала придётся поговорить о видах антител и понять, что это такое.
Антитела к цитомегаловирусу
Антитела — это иммуноглобулины, которые кратко записываются в виде Ig. Существует 5 разных классов иммуноглобулинов, где к записи Ig подписывается ещё одна заглавная латинская буква, которая является классом иммуноглобулина: G, A, M, D, E. Различаются они по функциям и аминокислотному составу. При цитомегаловирусной инфекции важно во время диагностики определить содержание G и M иммуноглобулинов, а именно — IgG и IgM. Поскольку именно эти антитела сдерживают размножение ЦМВ в организме.
Так как иммунная система может быть сильной или слабой у человека, а также человек может быть подвержен различным инфекционным заболеваниям, и болезням связанными с эндокринной системой, сроки выработки антител к ЦМВ могут сильно отличаться.
Антитела IgM появляются первыми, после того как человек инфицировался ЦМВ. При стабильной работе иммунной системы определить их в крови можно уже в течение недели после инфицирования организма, примерно через пять дней иммунная система начнёт выработку иммуноглобулинов класса M к вирусу. А при низком иммунитете выработка IgM начнётся только в промежутке от двух недель до полутора месяцев.
При диагностике цитомегаловируса иммуноглобулины класса M могут давать неочевидные результаты. Во-первых, IgM могут держаться в крови носителя до двух лет, в этом случае есть высокая вероятность того что диагноз будет положительный, но ложный. Во-вторых, если организм испытывает иммунодефицит, то IgM и вовсе может отсутствовать в крови носителя, при этом диагноз будет отрицательный, и тоже ложный.
Поэтому для точного диагноза необходимо проверить кровь на наличие иммуноглобулинов класса G (IgG) и их авидность к ЦМВ. Это даст не только показатель того что человек инфицирован цитомегаловирусом, но и возможность установить сроки.
Выше мы уже кратко описали понятие авидности антител IgG к цитомегаловирусу и что это такое. Теперь давайте более подробно разберём этот вопрос.
В иммуноглобулине G есть два антигенсвязывающих участка. Авидность антител IgG к ЦМВ как раз и зависит от количества этих участков. Чем больше участков, тем выше авидность. Авидность растёт по мере продолжительности иммунного ответа. То есть в самом начале появляются низкоавидные антитела, а затем высокоавидные. Несмотря на то что у антител IgM в пять раз больше антигенсвязывающих участков чем у антител IgG, то есть их десять, а соответственно их авидность в пять раз больше чем у иммуноглобулинов класса G, для диагностики авидность антител IgM не используется. Всё из-за того, что их наличие в крови обуславливается коротким периодом и не позволяет опираться на необъективные показатели.
Именно поэтому для более объективной диагностики необходимо проверить кровь на авидность антител IgG к ЦМВ. Примерно через месяц после первичного инфицирования происходит выработка антител IgG. После того как началась выработка IgG, примерно в течение четырёх недель наблюдается их активный рост. Затем количество иммуноглобулинов класса G постепенно падает и сохраняется в среднем диапазоне на протяжении всей жизни. Антитела IgG с низкой авидностью сохраняются до полугода после первичного заражения, таким образом, IgG авидность может указать на первичное инфицирование при диагностике. А при рецидиве ЦМВИ с хронической формы обнаруживается большая концентрация антител IgG в крови с высокой авидностью. Что при диагностике может выявить активацию давней цитомегаловирусной инфекции в организме.
Анализы и расшифровка
Для диагностики цитомегаловируса в организме используется несколько видов анализов, а именно:
- Серологические анализы, в них входит ИФА, для которых берут кровь.
- Цитологический, для которого необходимы биоматериалы в виде слюны, а также мочи.
- ПЦР, для которого делается соскоб поражённых инфекцией органов, в случае при ЦМВ, берут мочу и слюну.
Для определения авидности IgG необходим анализ ИФА (иммуноферментный анализ). После того как вы получите анализы, как правило, у вас должен быть бланк с показателями и средними значениями. В этом случае если вы видите, что показатель ниже уровня средних значений, значит анализ отрицательный, если выше — значит положительный.
В различных лабораториях анализы могут немного отличаться, давайте рассмотрим средние значения и произведём их расшифровку.
- Если индекс авидности антител IgG не более 40 процентов, это означает что в крови были замечены низкоавидные иммуноглобулины класса G, что говорит нам о первичном заражении, то есть инфицирование произошло недавно.
- Если индекс авидности антител IgG более 60 процентов, это означает что в крови были обнаружены высокоавидные иммуноглобулины класса G, что говорит нам о наличии хронической инфекции ЦМВ.
- Если же индекс авидности антител IgG находятся в диапазоне от 40 до 60 процентов, то необходимо сделать повторный анализ примерно через две недели, поскольку подобные показатели дают неопределённые результаты.
Анализы при беременности
При беременности очень важно проводить анализ на ЦМВ, поскольку наличие иммуноглобулинов обоих классов, а именно G и M, могут быть опасны для развития плода. К тому же, необходимо помнить о возможном ложном анализе, поэтому стоит делать перепроверку.
Для того чтобы лучше понимать и проще читать анализы, необходимо знать, что такое титр антител. Поскольку для обозначения иммуноглобулина класса G используют титр. Титр — это максимальное разведение пробы крови, для того чтобы обнаружить активность антител.
Давайте рассмотрим интерпретацию анализа на цитомегаловирусную инфекцию для беременных.
| Анализ на IgM | Анализ на IgG | Авидность IgG |
|---|---|---|
| Первый вариант анализа | ||
| + | — | — |
| Второй вариант анализа | ||
| + | + | Низкая |
| Третий вариант анализа | ||
| + | + | Высокая |
| Четвёртый вариант анализа | ||
| — | + (в случае когда при двукратном обследовании присутствовало нарастание титра) | Высокая |
| Пятый вариант анализа | ||
| — | + (в случае когда при двукратном обследовании отсутствовало нарастание титра) | Высокая |
| Шестой вариант анализа | ||
| — | — | — |
