Лабораторная диагностика инфекции helicobacter pylori

Проблемы с желудком доставляют огромный дискомфорт и подчас мешают вести привычный образ жизни. Боли в области живота, тошнота, отрыжка, тяжесть в желудке способны разрушить любые планы и надолго выбить из колеи. Ситуация серьезно осложняется, если такие явления обретают хронический характер. В чем может крыться причина желудочных расстройств и как ее устранить? Давайте в этом разберемся.

Что такое хеликобактер пилори и зачем нужен анализ

Очень часто проблемы с желудком вызывает коварная бактерия — хеликобактер пилори ( Helicobacter pylori ). Она имеет спиралевидную форму, является патогенной бактерией-паразитом, производит множество токсинов, поражающих слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки — именно в этих органах она обитает. Хеликобактер пилори приводит к воспалительным процессам, таким как гастрит, язва и ряду других, появление которых еще не так давно объясняли генетической предрасположенностью и нарушением здорового питания. Доказано, что в ряде случаев гастрит и язва вызваны именно инфицированием этой бактерией. То есть этими заболеваниями, оказывается, можно так же легко заразиться, как и гриппом.

Причем если большинство бактерий гибнет в кислой желудочной среде, то хеликобактер пилори в ней очень даже жизнеспособна. Она легко приспосабливается к агрессивной среде и без особого труда передвигается по стенкам внутренних органов благодаря специальным жгутикам на ее поверхности.

В России распространенность бактерии очень велика — в разных регионах инфицировано от 70 до 90% населения, что значительно выше показателей Европы и США. Это объясняется сравнительно низким уровнем жизни большинства россиян, как следствие — пренебрежение правилами гигиены, проживание в антисанитарных условиях. В Москве, как наиболее развитом городе России, количество инфицированных не превышает 60% (речь идет о зарегистрированных гражданах).

Как правило, поводом для назначения анализа на хеликобактер пилори становятся следующие симптомы:

• Боли в желудке после приема пищи.
• Частая отрыжка.
• Повторяющаяся изжога.
• Затруднение во время глотания пищи.
• Метеоризм и урчание в животе.
• Тошнота и рвота.
• Частая диарея и запоры, длящиеся более двух суток.
• Нарушение аппетита и потеря веса без видимой причины.
• Появление крови во время рвоты и дефекации.

Разумеется, перечисленные симптомы вовсе не указывают на инфекцию. Подтвердить или опровергнуть ее присутствие может только лабораторный анализ.

Выявить присутствие коварной бактерии в организме можно разными способами.

Этот анализ является качественным, то есть отвечает на вопрос, есть ли хеликобактер пилори в организме или нет. Исследование проводится в лаборатории методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Анализ отличается высокой точностью — до 95%. Данный анализ является самым простым видом диагностики. Его рекомендуют детям, пожилым людям и тяжелобольным пациентам.

Точность результатов исследования зависит не только от лаборатории, но и от соблюдения ряда простых правил подготовки к анализу.

Кал собирают в специальный контейнер, купленный в аптеке. Если контейнер будет заполнен на 1/3, этого будет достаточно для анализа. Ни в коем случае нельзя брать кал из унитаза — в биоматериал могут попасть дезинфицирующие средства. Доставить материал в лабораторию для анализа нужно как можно быстрее. Максимальное время его хранения — 10–12 часов при температуре +2…-8 градусов Цельсия.

Накануне анализа следует избегать физических и эмоциональных нагрузок, отказаться от алкоголя и жирной пищи. Кровь берут из вены натощак в утренние часы. Сама по себе процедура достаточно безболезненна и длится всего несколько минут. Однако пациенты по-разному ее переносят. Поэтому если организм ослаблен, то сразу после забора крови рекомендуется выпить сладкий чай или съесть кусочек черного шоколада — это поможет избежать головокружения. Чтобы не образовалась гематома на месте ввода иглы, после процедуры руку нужно несколько минут подержать согнутой в локте.

Результаты анализов на хеликобактер пилори может интерпретировать только врач, он же ставит окончательный диагноз и назначает подходящую терапию. Однако некоторые выводы можно сделать и самостоятельно изучив бланк с результатами.

• Иммуноферментный анализ. Результаты анализа на антитела готовятся в течение одного дня, не считая дня сдачи анализа. При необходимости возможна срочная подготовка результатов, она займет всего 2–3 часа. В разных лабораториях могут использоваться разные единицы измерения. Одна из наиболее распространенных — Ед/мл.

Результаты трактуются следующим образом:

>1,1 Ед/мл
Высокий риск развития язвенной болезни или язвенная болезнь; высокий риск развития рака желудка.

0,9–1,1 Ед/мл
Рекомендуется повторный анализ через две недели.

Бак­те­рия хе­ли­ко­бак­тер пи­ло­ри — свое­об­раз­ная тем­ная ло­шад­ка, на се­год­няш­ний день ма­ло изу­чен­ная и тем — бо­лее опас­ная. До сих пор оста­ет­ся мно­жест­во от­кры­тых во­про­сов: по­че­му не­ко­то­рые ин­фи­ци­ро­ван­ные лю­ди за­бо­ле­ва­ют яз­вой или гаст­ри­том, а дру­гие — нет; на­сколь­ко при­сут­ст­вие этой бак­те­рии в ор­га­низ­ме уве­ли­чи­ва­ет риск раз­ви­тия ра­ка же­луд­ка? Оче­вид­на не­об­хо­ди­мость раз­ра­бот­ки вак­ци­ны для про­фи­лак­ти­ки ин­фек­ции, по­иск ан­ти­био­ти­ков на­прав­лен­но­го дейст­вия, уби­ва­ю­щих бак­те­рию, — ведь у не­ко­то­рых лю­дей раз­ви­ва­ет­ся ре­зис­тент­ность к су­щест­ву­ю­щим ви­дам те­ра­пии. Единст­вен­ное, что мы мо­жем на­вер­ня­ка сде­лать во бла­го сво­е­му здо­ровью, — сдать про­фи­лак­ти­чес­кий ана­лиз.

[youtube.player]

Бактерии Helicobacter pylori повреждают поверхностный эпителий желудка и вызывают воспаление. Чаще всего обнаруживаются у пациентов с язвенной болезнью желудка (в 60-80 % случаев) и двенадцатиперстной кишки (90-100 % случаев).В настоящее время диагностика хеликобактериоза не представляет трудностей.

Чтобы выявить инфицирование бактериями, нужно сдать анализ крови из вены или пробы выдыхаемого воздуха (аэротест). В период обострения заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки назначается гастроскопия (ФГДС), при проведении которой врач-эндоскопист может взять участок слизистой (биоптат) для экспресс-теста или морфологического исследования на наличие Helicobacter pylori.

Методы диагностики

• доступен всем пациентам;
• не сопровождается выраженным дискомфортом и стрессом при проведении процедуры (инъекционный метод забора крови);
• прием лекарственных препаратов, применяемых для лечения заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки, не оказывает влияние на результат исследования.

Процедура забора крови проводится утром натощак.

• За сутки до исследования из рациона исключается жирная пища.
• Курение прекращают за 8 часов до анализа.

Забор крови производится путем венепункции. Материал отбирают в стерильную вакуумную пробирку с активатором свертывания для быстрого отделения сыворотки. Кровь доставляется в лабораторию в течение 2 часов. Микропробирки с сывороткой разрешается хранить в холодильнике при температуре 2-8 °С или в морозильной камере при -20 °С до 10 суток.

Для выявления бактерий применяется иммуноферментный анализ – ИФА. Это лабораторный метод предполагает исследование сыворотки крови. Путем химических реакций врачи определяют наличие в ней антител – специфических белков иммунологической природы, выделяющихся при воздействии на организм человека различных антигенов, не знакомых ему (чужеродных бактерий, вирусов, грибов, токсинов, аллергенов и т. д.). Helicobacter pylori является инфекционным возбудителем гастропатологии. При попадании в желудочно-кишечный тракт он активирует систему иммунитета и вызывает выработку антител – иммуноглобулинов (Ig). ИФА помогает диагностировать наличие или отсутствие данной инфекции.

Бывают ситуации, когда обнаруженные антитела в сыворотке крови является ложноположительным результатом. Это может быть связано с длительным циркулированием в плазме иммуноглобулинов после уничтожения бактерий вследствие эрадикационной терапии. Антитела присутствуют в крови в течение месяца после лечения, а у некоторых остаются пожизненно. В другом случае все наоборот. Инфицирование есть, а антитела в сыворотке крови не определяются (ложноотрицательный результат). Это может быть связано с ранним периодом после заражения. Антитела не успевают выработаться из-за слабого иммунного ответа. Чтобы избежать неточностей в результатах, необходимо дополнительно исследовать фракции иммуноглобулинов 3 видов: M, G, A.

Характеристики специфических белков крови:

Существует качественное и количественное определение антител к Helicobacter pylori. В первом случае диагностируют наличие специфических иммуноглобулинов, а во втором их концентрацию. При качественном анализе определяются суммарные антитела (IgM, IgG, IgA). При количественном исследовании используют нормы содержания специфических белков в крови.

У каждой лаборатории свои референсные значения, применяемые для определенного вида реактивов.

Вид исследования	Норма	Патология
Качественный анализ на антитела к Helicobacter pylori	Отрицательный (отсутствие антител)	Положительный (наличие антител)
Количественный анализ на антитела к Helicobacter pylori:	Нормальные референсные значения	Превышение показателей
IgM	Отрицательный (значения IgM в пределах нормы)

При нормальных показателях IgG и IgA инфицирования нет Положительный (референсные значения превышают норму)

Определяется сразу после заражения хеликобактериозом (выявляется в течение 3-4 недель от контакта с возбудителем)

• IgG

Отрицательный

IgG может быть ложноотрицательным в течение 3-4 недель после заражения (IgM положительный) Положительный

Инфицирование Helicobacter pylori

Может превышать норму в течение месяца после эрадикационной терапии

• IgA

Отрицательный

Может быть ложноотрицательным в ранний период после контакта с возбудителем (в течение 2-3 недель от момента заражения) Положительный

Чем выше концентрация IgA в сыворотке крови, тем активнее протекает воспалительный процесс

Возможны сомнительные результаты исследования. В таких случаях анализ на антитела к Helicobacter pylori повторяют через 2-3 недели.

• помогает выявить даже низкие концентрации возбудителя;
• безопасный метод, не сопровождается радиоактивной нагрузкой на пациента (при использовании тестовых растворов мочевины, меченой нерадиоактивными изотопами);
• оценивается процент бактерий на всей поверхности слизистой желудка;
• удобен для пациентов (неинвазивный метод);
• дыхательный уреазный тест с раствором карбамида разрешен беременным и младенцам;
• является точным диагностическим исследованием.

1. Дыхательный уреазный тест проводится натощак. Перед исследованием с утра можно почистить зубы без применения ополаскивателей и освежителей для полости рта. Не рекомендуется использовать жевательные резинки.
2. Накануне забора проб разрешен легкий ужин. С 22 часов вечера и до начала процедуры есть нельзя, питье отменяют за час до исследования.
   
3. За 2-3 дня до аэротеста запрещен прием алкоголя (пары алкоголя искажают результаты проб). Также на этот период исключаются продукты, вызывающие метеоризм (капуста, бобовые, чеснок, яблоки, грибы, черный хлеб и другие).
4. Курение прекращают за 8 часов до начала процедуры.
5. За 2 недели до исследования отменяют препараты висмута (“Де-нол”, “Викалин”, “Викаир”), ингибиторы протонной помпы (“Омез”, “Нольпаза”, “Нексиум” и другие). Данные средства угнетают активность уреазы.
6. За неделю до проведения теста прекращают прием нестероидных противовоспалительных и антибактериальных препаратов.
7. За 2 дня до процедуры исключаются лекарственные средства из группы блокаторов Н₂ – гистаминовых рецепторов (“Гистодил”, “Примамет”, “Ранитидин”, “Фамотидин” и другие).
8. Разрешены препараты, снижающие избыточную продукцию соляной кислоты желудком (антациды – “Алмагель”, “Фосфалюгель”, “Маалокс”, “Гевискон” и т. д.).

Специфичность метода

Дыхательный уреазный тест на Helicobacter pylori связан с особенностями жизнедеятельности бактерии. Возбудитель в процессе своего существования выделяет защитный фермент – уреазу. Это биологически активное соединение помогает микроорганизму справляться с агрессивным воздействием соляной кислоты, выделяемой в составе желудочного сока. В процессе пищеварения уреаза расщепляет продукт метаболизма белков – мочевину. В результате образуется аммиак и углекислота. Эта химическая реакция стала основой для аэротеста. При дыхании пациента можно измерить концентрацию углекислого газа в выдыхаемом воздухе.

• Аэротест с применением тестового раствора или драже мочевины, меченой радиоактивным углеродом ( 14 С). Данный метод применяется редко из-за лучевой нагрузки на организм человека.

Пациент дышит через специальную трубку, находящуюся глубоко в ротовой полости. Дыхание должно быть ровным и спокойным. Трубка подсоединяется к специальному газовому спектрометру, замеряющему процент меченого углекислого газа в выдыхаемом воздухе. В начале процедуры берут 2 фоновые пробы аэротеста. Затем пациенту дают выпить тестовый раствор или проглотить специальное драже с мочевиной, меченой радиоактивным изотопом. Через каждые 15 минут (в течение часа) осуществляют забор дополнительных 4 проб выдыхаемого воздуха. Не допустимо попадание слюны в трубку, результат исследования может стать недостоверным. В этом случае пробу придется повторить через 40-60 минут после предыдущей. Чтобы избежать неприятной ситуации, трубку во время процедуры необходимо периодически вынимать, а слюну сглатывать.

• Дыхательный уреазный тест с применением стабильного раствора мочевины, меченой нерадиоактивным углеродом ( 13 С). Данный метод является “золотым стандартом” в диагностике хеликобактериоза (подробнее о методе см. здесь).

Во время исследования осуществляют забор 2 проб выдыхаемого воздуха. Процедура проводится на голодный желудок, в положении сидя. Пациент делает глубокий вдох и на несколько секунд задерживает дыхание. Затем выдыхает в герметичный одноразовый пакет, который сразу же плотно закрывают. Пациенту дают выпить тестовый раствор мочевины, меченой нерадиоактивным изотопом. Через полчаса осуществляют повторный забор выдыхаемого воздуха. С помощью масс-спектрометра измеряют концентрацию углекислоты в выдыхаемом воздухе. Полученные результаты сравнивают и делают выводы о наличии инфицирования.

• Аэротест с применением раствора мочевины (карбамида). Данная методика не является максимально точной. Рекомендуется для диагностики хеликобактериоза у беременных женщин и маленьких детей.

Методика схожа с предыдущим тестом. У пациента делают забор 2 проб выдыхаемого воздуха. Измеряют концентрацию углекислого газа до и после применения тестового раствора карбамида.

Вид исследования	Норма	Патология
Качественное определение уреазной активности Helicobacter pylori	Отрицательный аэротест

Инфицирования нет или полное излечение после эрадикационной терапии Положительный аэротест

Инфицирование Helicobacter pylori Количественное определение уреазной активности Helicobacter pylori (по процентному содержанию изотопа в выдыхаемом воздухе) Менее 1%

Хеликобактериоза нет

• 1-3,4% – легкое инфицирование Helicobacter pylori
• 3,5-6,4% – среднетяжелый воспалительный процесс
• 6,5-9,4% – тяжелое инфицирование
• Более 9,5% – крайне тяжелая степень хеликобактериоза

Во время проведения гастроскопии (ФГДС) врач-эндоскопист берет кусочек слизистой из любого отдела желудка. Биоптат помещают на реагентную тест-полоску, обработанную раствором мочевины. Под действием фермента уреазы, выделяемой бактериями Helicobacter pylori, происходит ощелачивание среды. Мочевина расщепляется. Вследствие этого индикаторная полоска меняет свою окраску – с желтой на малиновую. Тест считается положительным. От скорости изменения цвета реагента зависит выраженность воспалительного процесса и концентрация возбудителя в биоптате.

Оценка полученного результата:

• Helicobacter pylori (+) – слабое инфицирование (реагентная тест-полоска изменила свой цвет в течение суток).
• Helicobacter pylori (++) – умеренный инфекционный процесс (реагентная тест-полоска изменила свой цвет в течение 2-3 часов).
• Helicobacter pylori (+++) – тяжелое инфицирование (реагентная тест-полоска изменила свой цвет в течение одного часа).

• наиболее точный метод диагностики Helicobacter pylori (специфичность до 100%);
• исключает возможность ложноположительных результатов, подтверждает наличие инфекции.

1. 
   Процедура ФГДС предусматривает 3-х дневную диету с исключением продуктов, раздражающих пищеварительный тракт (нельзя жареные, копченые, соленые, жирные и острые блюда).
2. Запрещаются газированные напитки, кофе, алкоголь.
3. Диета бесшлаковая на основе легкоусвояемого меню (каши на воде, отварное мясо, йогурты, овощные салаты и т. д.). Последний прием пищи за 12 часов до проведения ФГДС.
4. За 3 часа до начала исследования необходимо отказаться от сигарет.
5. Нельзя принимать лекарства перед эндоскопической процедурой.
6. Прием жидкости прекращают за 1-2 часа до начала исследования.
7. Не разрешается перед процедурой чистить зубы, применять ополаскиватели или освежители для полости рта, а также жевательные резинки.
8. Гастроскопия проводится на голодный желудок.

ФГДС сопровождается введением специального зонда в желудок. Процедура неприятна из-за диспепсических проявлений. Во время проглатывания зонда происходит раздражение рецепторов ротоглотки, и пациент испытывает чувство тошноты и рвотные позывы. Длительность процедуры обычно не превышает 10-15 минут. За это время специалист осматривает слизистую желудка и двенадцатиперстной кишки, выявляет очаги воспаления (эрозии, язвы, дефекты и т. д.) и проводит забор материала для последующего морфологического исследования.

Для бактериологического посева биоптата на питательную среду потребуется не менее 5 образцов тканей. Их помещают в стерильные пробирки с транспортным раствором. Затем доставляют в бактериологическую лабораторию. Helicobacter pylori выращивают на питательных средах в течение 3-6 дней, иногда дольше (до 12 суток).

Гистологическое исследование мазков-отпечатков, полученных из биоптатов слизистой желудка, является “золотым стандартом” среди инвазивных методов диагностики хеликобактериоза. Участки тканей при ФГДС берут с неповрежденного эпителия (исключают эрозивно-язвенные дефекты). Helicobacter pylori живет на здоровой слизистой желудка и двенадцатиперстной кишки. Затем полученные мазки-отпечатки окрашивают (по Романовскому-Гимзе, по Граму или другими красителями). Производят микроскопию. Бактерии обнаруживаются в желудочной слизи, располагаются свободно. Helicobacter pylori имеет характерные для него изогнутые формы: спиралевидную, в виде буквы “S” или распахнутых крыльев птицы.

Вид исследования	Норма	Патология
Бактериологический посев биоптата на Helicobacter pylori	Отрицательный

(рост бактерий не обнаружен) Положительный

(на питательной среде выросли культуры Helicobacter pylori) Гистологическое исследование биоптата на Helicobacter pylori (качественный анализ) Отрицательный

(бактерии в мазке отсутствуют) Положительный (обнаружена одна или большее количество бактерий при микроскопии) Гистологическое исследование биоптата на Helicobacter pylori (количественный анализ) Отрицательный (0 бактерий в мазке, инфицирования нет) 3 степени распространения возбудителя (микроскопия на увеличении в 360 раз):

• Слабая обсемененность Helicobacter pylori (+) – в поле зрения не более 20 бактерий
• Умеренная обсемененность Helicobacter pylori (++) – в поле зрения от 20 до 50 микроорганизмов
• Высокая обсемененность Helicobacter pylori (+++) – в поле зрения более 50 микробных тел

Резюме

Таким образом, существует 2 точных диагностических метода выявления хеликобактериоза. Они являются “золотым стандартом” в современной гастроэнтерологии. Первый метод – неинвазивный: дыхательный уреазный тест с раствором мочевины, меченой нерадиоактивным углеродом; второй – инвазивный: ФГДС с биопсией и последующим гистологическим изучением образцов тканей.

Для подтверждения инфицирования Helicobacter pylori требуется не менее 2 различных исследований. Диагноз ставят на основании клинической симптоматики и результатов, полученных в процессе лабораторных и эндоскопических мероприятий.

[youtube.player]

Комплексный анализ, предназначенный для выявления H . pylori у пациентов с подозрением на гастрит, язву желудка или двенадцатиперстной кишки, включающий основные серологические тесты и метод РТ-ПЦР.

Комплексная диагностика геликобактериоза.

H. pylori diagnostic panel, H. pylori Abs, IgA, IgG, H. pylori, PCR.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь, кал.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
• Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

H. pylori – это грамотрицательный, факультативно-анаэробный микроорганизм, способный инфицировать слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки. В большинстве случаев инфицирование H. pylori (геликобактериоз, или хеликобактериоз) носит постоянный, хронический характер. Геликобактериоз очень распространен: бактерия H. pylori может быть выявлена у 50 % людей земного шара. При этом H. pylori-ассоциированные заболевания (гастрит, язва желудка или двенадцатиперстной кишки, аденокарцинома желудка, MALT-лимфома) возникают только у 15-20 % инфицированных пациентов. Особенностью этих заболеваний является их благоприятный прогноз при условии их ранней диагностики и полной эрадикации H. pylori. Ведущее значение в диагностике геликобактериоза принадлежит лабораторным методам исследования.

Существует несколько методов выявления H. pylori. Прямые методы позволяют непосредственно выявить сам микроорганизм. Для большинства прямых методов необходим образец ткани слизистой оболочки (биоптат) и/или содержимое желудка и двенадцатиперстной кишки (аспират), которые обычно получают во время эндоскопического исследования. Таким образом, прямые методы исследования, как правило, являются инвазивными. В отличие от этого, непрямые методы выявляют не сам микроорганизм, а косвенные признаки инфекции, например специфические антитела в сыворотке крови (серологические тесты) или содержание меченого атома углерода в выдыхаемом воздухе (дыхательный уреазный тест). Так как для проведения непрямых тестов не требуется эндоскопического исследования, они называются неинвазивными. Как прямые, так и непрямые тесты на H. pylori, имеют свои преимущества и недостатки. Для точной диагностики геликобактериоза требуется сразу несколько тестов. В связи с этим особенно удобным для врача и пациента является комплексный анализ, включающий все необходимые тесты на H. pylori.

Одним из самых чувствительных методов выявления H. pylori является полимеразная цепная реакция в режиме реального времени (РТ-ПЦР). РТ-ПЦР – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в образце ткани) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. Так как анализ основан на выявлении генетического материала, РТ-ПЦР позволяет выявлять присутствие любых форм H. pylori (не только активных спиралевидных, но и неактивных кокковых, некультивируемых), в результате чего исследование характеризуется очень высокой чувствительностью, превосходящей чувствительность метода бактериологического посева. Теоретически для осуществления РТ-ПЦР достаточно присутствие 1 молекулы ДНК. На практике концентрация возбудителя в образце должна составлять около 10-100 КОЕ/мл. Такая высокая чувствительность теста означает, что получение отрицательного результата исследования позволяет исключить H. pylori как причину заболевания. Это имеет принципиальное значение при дифференциальной диагностике НПВС-ассоциированных, стрессовых и ишемических гастритов и язв.

Следует отметить, что, несмотря на очень высокую чувствительность теста (85-98 %), ложноотрицательные результаты все же возможны. Так, например, ложноотрицательный результат может быть получен, если бактериальная нагрузка очень низкая (например, на фоне приема некоторых антибиотиков). Ошибок диагностики можно избежать при комбинации этого прямого теста с серологическими исследованиями.

Инфицирование H. pylori сопровождается значительным нарастанием иммуноглобулинов класса IgG и IgA в сыворотке крови. Эти иммуноглобулины (антитела) определяются в крови с помощью непрямых тестов. IgG обнаруживаются в 95-100 % случаев геликобактериоза, а IgA – в 68-80 %. Исследование позволяет определить титр антител, то есть является количественным. Как правило, высокие титры антител более характерны для активной, текущей инфекции. Следует отметить, однако, что четкой корреляции между титром антител и степенью тяжести инфекции нет.

Серологические тесты, как и метод РТ-ПЦР, имеют некоторые ограничения. Так, результат анализа зависит от особенностей иммунного ответа пациента. Иммунный ответ пациентов, принимающих цитостатические препараты, и пожилых людей характеризуется пониженной выработкой специфических антител (любых, в том числе к H. pylori). По этой причине во избежание диагностических ошибок серологические тесты целесообразно дополнять прямыми тестами. Эта особенность была учтена при составлении комплексного анализа на H. pylori.

Таким образом, комплексный анализ на H. pylori – это комбинация необходимых и достаточных тестов для выявления этого микроорганизма. Комплексный анализ не предназначен для контроля лечения. Результат как РТ-ПЦР, так и исследования иммуноглобулинов IgG и IgA будет оставаться положительными даже в случае полной эрадикации H. pylori. Ложноположительный результат РТ-ПЦР в этом случае обусловлен способностью этого метода выявлять ДНК любых, даже разрушенных микроорганизмов, ложноположительный результат серологических тестов − особенностями динамики иммунного ответа.

Для чего используется исследование?

• Для выявления H. pylori у пациентов с подозрением на гастрит, язву желудка или двенадцатиперстной кишки.

Когда назначается исследование?

• При обследовании пациента с признаками диспепсии: дискомфорт или боли в эпигастральной области, тошнота, рвота, нарушение аппетита.

Что означают результаты?

Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:

[youtube.player]

Почти четыре десятилетия прошло с того момента, как австралийские врачи Р. Уоррен и Б. Маршалл выделили из биоптатов слизистой оболочки желудка пациента с гастритом изогнутые микроорганизмы. Изначально их отнесли к грамотрицательным бактериям рода Campylobacter и назвали Campylobacter pylori.

Но дальнейшие исследования продемонстрировали его отличия в последовательности аминокислот, структуре белков наружной мембраны, чувствительности к антибиотикам. В результате микроорганизм отнесли к новому роду Helicobacter (helix — спираль, bacter — палочка), а изучаемая бактерия получила наименование Хеликобактер Пилори (Helicobacter pylori).

Это мелкие грамотрицательные неспорообразующие микробы, которые имеют спиралевидную форму или изгибаются наподобие латинской буквы S. Ближе к концу жизненного цикла Хеликобактер трансформируются в кокки первого типа. Такой же процесс происходит и при неблагоприятных условиях окружающей среды (колебания температуры или уровня кислотности). В результате образуются кокки второго типа.

Они представляют собой своего рода замершую форму Хеликобактер.

У них приостанавливается обмен веществ, пропадает репродуктивная и ферментативная способность. Однако такие кокки могут попасть в окружающую среду, а оттуда — в организм другого человека. Кроме того, кокки второго типа вновь приобретают патологическую активность (превращаются в спираль и заселяют слизистую) при благоприятных условиях для развития в кишечнике.

Трансформация Helicobacter в кокки второго типа может быть последствием неправильного применения антибиотиков.

Бактерии Helicobacter обладают наибольшим сродством к клеткам эпителия пилорического и антрального отдела желудка (от средней до нижней части органа).

В конце годов была образована Европейская группа по изучению инфекции, вызванной Хеликобактер Пилори. У ученых особое беспокойство вызывает возможная связь этой бактерии с раком желудка. С тех пор постоянно проводятся конференции, работают согласительные группы для выработки единой тактики лечения болезни. Это существенно снижает риск формирования резистентности микроорганизма.

Инфекцию Helicobacter считают одной из самых распространенных в мире. По данным статистики, в развивающихся странах Азии и Африки заражено до 90% населения, до 70% — в Восточной Европе и Южной Америке и до 40% — на Европейском континенте и в странах Северной Америки.

Развивается инфекция очень медленно, возбудитель может оставаться в слизистой оболочке пищеварительного тракта на протяжении всей жизни человека. Как правило, Хеликобактер полностью приспосабливается к иммунной системе, но в некоторых случаях возможно выделение разнообразных цитотоксинов, провоцирующих нарушение функционирование клеток и воспалительный процесс.

Заражение Helicobacter возможно несколькими путями. Для последующего развития необходимо, чтобы бактерия попала не в кровь, а на поверхность слизистой оболочки пищеварительного тракта. Инфицирование вероятно при:

• проведении лечебных или диагностических манипуляций недостаточно простерилизованными инструментами;
• потреблении в пищу продуктов или воды, содержащих кокки Хеликобактер второго типа;
• использовании общих зубных щеток, зубной нити, зубочисток, посуды, так как по мнению специалистов, Helicobacter присутствует и на слизистой ротовой полости.

Симптоматика инфекции Хеликобактер зависит от множества факторов. Это особенности работы иммунной системы человека, принципы диеты, наследственная предрасположенность. В некоторых случаях болезнь не сопровождается клиническими проявлениями, но колонизация слизистой желудка вызывает образование комплексов антиген — антитело, что может привести к развитию серьезных и опасных осложнений.

Но у большинства пациентов Helicobacter протекает с определенными симптомами. Это:

• тошнота;
• рвота;
• изжога;
• боли в эпигастральной области;
• метеоризм;
• изжога;
• вздутие живота;
• отрыжка;
• неприятный привкус и запах изо рта;
• потеря аппетита;
• расстройства стула;
• нарушение сна.

В некоторых случаях клиническая картина инфекции Хеликобактер не ограничивается симптомами со стороны пищеварительного тракта. Отмечают дерматозы различной локализации, иногда возникает аллергическая или гнойничковая сыпь. С Helicobacter также связывают появление очагов экземы и псориаза. Нередко ослабляется иммунная защита в отношении разнообразных вирусов, грибков и других бактерий.

Helicobacter pylori: методы диагностики, осложнения после инфицирования

С момента открытия бактерии, появляются все новые методы диагностики, но ни один из них нельзя считать универсальным. Возможности способов исследования ограничиваются возрастом пациента, стадиями инфекции, приемом определенных лекарственных препаратов.

Все методы диагностики делят на прямые и непрямые. К первой группе относят:

• бактериологический;
• гистологический;
• молекулярно-биологический (ПЦР — исследование кала и крови);
• контрастная микроскопия;
• иммуногистохимический.

Непрямыми методами являются:

• уреазный тест;
• серологическая диагностика.

Также обследования, применяемые для постановки диагноза, бывают инвазивными и неинвазивными. Первые требуют забора биопсийного материала при фаброгастродуоденоскопии (ФГДС), крови. Это:

• бактериологический и морфологический (гистологический или цитологический) методы;
• уреазный тест;
• ПЦР биоптатов;
• ИФА;
• микроскопия.

Неинвазивные техники выявления Хеликобактер приобретают все большую популярность, особенно при профилактических обследованиях и диагностики в раннем возрасте. К их числу относят:

• определение антител к Helicobacter в кале, слюне и моче;
• исследование методом полимеразной цепной реакции кала, слюны, зубного налета.

Одним из наиболее информативных является бактериологическое (культуральное) исследование. Его специфичность достигает 100%. Преимуществом подобной методики служит возможность определения и антибиотикорезистентности Хеликобактер. Однако такой способ имеет и ряд недостатков. Результаты получают только спустя 7 — 10 суток, также существуют определенные сложности с транспортировкой исследуемого биологического материала. Кроме того, бактериологическая диагностика не выделяет кокковых форм. Однако многие врачи считают такой тест необходимым перед началом лечения в связи с растущей резистентностью бактерий к антибиотикам.

Специфичность гистологической методики составляет до 97%. Биопсию берут со слизистой оболочки желудка с максимально выраженной гиперемией и воспалительным отеком. Этот способ позволяет определить обсемененность слизистой и признаки изменения ее структуры.

Цитологическое обследование проводят при изучении отпечатков биоптатов, полученных в результате эндоскопического осмотра желудка и двенадцатиперстной кишки. Чувствительность подобной методики невелика (около 20%), однако она позволяет выявить первые признаки изменения структуры клеток (метаплазии, неоплазии и т.д.).

Быстрый уреазный тест считают стандартом для диагностики инфицирования Хеликобактер. В его основе лежат особенности жизнедеятельности бактерии. Helicobacter при помощи уреазы расщепляет мочевину, содержащуюся в желудке, с выделением аммиака и углекислого газа, в результате рН становится щелочной, что фиксируют при помощи специального индикатора. Скорость изменения оттенка свидетельствует о степени инфицированности. Чувствительность уреазного теста составляет до 98 — 99%, часто его используют для первичной диагностики Helicobacter.

Фазово-контрастная микроскопия удобна высокой скоростью проведения, но информативна лишь при большом количестве патогенных микроорганизмов. Иммуногистохимический анализ предусматривает обработку биопсийного материала антителами, которые избирательно окрашивают Хеликобактер. Методика полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяет определить Helicobacter не только в мазке или биоптате, но и при неинвазивных исследованиях. Кроме того, подобный анализ позволяет точно выявить штамм бактерии.

Уреазный дыхательный тест проводится с использованием меченной мочевины 13С. Ее предлагают пациенту во время завтрака. Хеликобактер разлагает мочевину, однако в выделяемом углекислом газе сохраняются маркеры углерода 13С. Больной выдыхает в специальную пробирку, и ее содержимое подвергается дальнейшему исследованию с применением спектрометров, инфракрасных или лазерных приборов.

Однако подобная методика не проводится пациентам с язвенными кровотечениями, атрофическим гастритом, раком желудка. Широкой распространенности такого способа диагностики препятствует его высокая стоимость.

В Санкт-Петербурге разработан аппарат для выполнения аммиачного дыхательного теста, по проведению он аналогичен уреазному.

Специфичность определения Helicobacter pylori в кале методом ПЦР достигает 100%. Однако результаты такого анализа искажаются на фоне проводимой терапии, кроме того, возможны ложноотрицательные данные у больных пожилого возраста.

Наиболее подходящим для диагностики Helicobacter считают ИФА — метод. Через несколько недель после инфицирования в организме пациента вырабатываются специфические антитела к Хеликобактер, которые и определяют при проведении иммуноферментного анализа. Выявление иммуноглобулинов возможно в слюне или желудочном соке. Но они сохраняются на протяжении долгих лет, поэтому подобная методика не подходит для оценки эффективности терапии.

Особое внимание уделяют раннему выявлению пациентов с повышенным риском развития рака желудка. Для этого проводят скрининг на определение специфических маркеров aтрофии (пепсиноген первого и второго типа, гастрин — 17). Однако эффективная терапия, направленная на эрадикацию бактерии существенно снижает вероятность злокачественного перерождения клеток.

В настоящее время доктора уверены, что инфицирование Helicobacter pylori является определяющим фактором для развития:

• хронического гастрита типа В;
• гастродуоденита;
• язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки;
• рака желудка;
• гастроэзофагиальной рефлюксной болезни.

В начале годов, Хеликобактер отнесли к факторам первой группы риска развития злокачественных поражений пищеварительного тракта.

Кроме того, специалисты связывают инфицирование Helicobacter с:

• железодефицитной анемией (встречается у 40% пациентов);
• тромбоцитарной пурпурой (у половины больных);
• недостатком цианокобаламина;
• атопическим дерматитом.

В последние годы появились данные о связи Helicobacter pylori с инсультом, болезнью Паркинсона, болезнью Альцгеймера, ишемической болезнью сердца. Однако клинически эта информация была не подтверждена. Кроме того, бактерия влияет на биодоступность ряда лекарственных препаратов, что требует коррекции их дозировки.

Бактерия Хеликобактер Пилори в желудке: особенности терапии и применяемые лекарственные средства

Клинические исследования продемонстрировали устойчивость бактерии к:

• Ванкомицину и другим гликопептидас;
• сульфаниламидам;
• полимиксинам.

Врачи связывают развитие резистентности Хеликобактер с достаточно коротким временем нахождения антибиотика в желудке. Его недостаточно для полной эрадикации бактерии, но повышает риск появления устойчивости к традиционной терапии. Поэтому для устранения Helicobacter показано комбинированное лечение.

Низкую эффективность антибиотиков связывают с низким значением рН желудка и недостаточной степенью проникновения действующих веществ медикамента в слизистую. Однако вторичная резистентность микроорганизма — результат неадекватной терапии или несоблюдения рекомендаций врача, когда обнаружена бактерия Хеликобактер Пилори в желудке.

В настоящее время имеются данные о высокой резистентности Helicobacter к:

• нитроимидазолам;
• макролидам;
• фторхиннолонам;
• рифампицину и его производным;
• β-лактамным антибиотикам;
• тетрациклинам;
• нитрофуранам.

У докторов вызывает беспокойство постоянно прогрессирующая резистентность Helicobacter к Метронидазолу и макролидам, который широко применяют для терапии вызванных бактерией заболеваний. Однако механизм подобной устойчивости до конца не выяснен, хотя его связывают с мутацией генов. Считают, что это обусловлено широким применением данных препаратов в гинекологии, хирургии и терапии патологий бронхо-легочной системы.

Доктора дополнительно применяют соли висмута и блокаторы протонной помпы. Использование препаратов подобной группы повышает эффективность антибактериальной терапии до 100%.

Выбор тактики лечения инфекции Хеликобактер зависит от результатов бактериологического исследования.

• ингибиторы протонной помпы;
• Кларитромицин;
• Амоксициллин или Метронидазол.

Иногда в схему лечения вводят пребиотики для снижения нежелательных последствий от приема антибиотиков.

При резистентности к макролидам рекомендуют квадротерапию с применением:

• ингибиторов протонной помпы;
• Метронидазола;
• Тетрациклина;
• препаратов висмута.

В некоторых европейских странах хороший результат демонстрирует поэтапная терапия, которая включает назначение ингибиторов протонной помпы (ИПП) и Амоксициллина на протяжении 5 — 7 дней, и применение ИПП, Кларитромицина и Тинидазола (можно заменить Метронидазолом) на такой же срок. В некоторых случаях назначают сочетание ИПП, Кларитромицина, Амоксициллина и Метронидазола одновременно.

Применение подобных схем обеспечивают эрадикацию у 91 — 95% пациентов. При отсутствии эффекта от применения средств первой линии рекомендуют сочетание ингибиторов протонной помпы, Амоксициллина и Левофлоксацина.

Антибактериальные препараты вызывают необратимую гибель Хеликобактер. Комбинация нескольких лекарственных средств снижает риск развития резистентности и сокращает продолжительность терапии. Назначают:

• Амоксициллин (Оспамокс, Флемоксин, Хинкоцил);
• Кларитромицин (Бакттикап, Кларбакт, Клацид, Фромилид).

Гораздо реже в терапии инфекции назначают Тетрациклин. При аллергии на антибиотики пенициллинового ряда показан Ломефлоксацин (Лофокс, Ксенаквин). Неотъемлемым компонентом терапии остаются препараты из группы нитроимидазолов. Обычно назначают Метронидазол, но более эффективными считаются медикаменты последнего поколения Тинидазол, Орнидазол и другие.

Висмута трикалия дицитрат оптимально подходит, если обнаружена бактерия Хеликобактер Пилори в слизистой желудка. Это вещество изменяет структуру и постепенно разрушает клетки патогенной флоры, ослабляет влияния выделяемых Helicobacter ферментов. Кроме того, висмута трикалия дицитрат формирует защитную пленку, которая защищает слизистую от агрессивного воздействия желудочного сока. Он также нормализует секрецию эпителиальных клеток, снижает активность пепсина и пепсиногена. Препараты данной группы ускоряют регенерацию слизистой, улучшают кровоснабжение желудка и двенадцатиперстной кишки.

Висмута трикалия дицитрат входит в состав таких медикаментов:

Препараты висмута замедляют всасывание антибиотиков из желудка, что повышает их эффективность в отношении Helicobacter.

После всасывания из тонкой кишки и прохождения через печень активные компоненты препаратов этой группы концентрируются в секреторных канальцах слизистой желудка и препятствуют чрезмерному выделению соляной кислоты.

К лекарствам данного типа относят:

• Омепразол (Омез, Ультоп);
• Контролок (Нольпаза, Ультера);
• Лансопразол (Ланцид, Эпикур, Ланзап);
• Берета (Париет, Онтайм);
• Эзомепразол (Нексиум, Эмезол).

Их широко применяют для лечения язвы желудка и других патологий пищеварительного тракта, связанных с повышенной кислотностью. Ингибиторы протонной помпы также входят во все протоколы терапии болезней, ассоциированных с вредоносными штаммами Helicobacter.

Инфекция Хеликобактер: нетрадиционные методы терапии, диета, профилактика

В некоторых случаях пациенты предпочитают избавляться от инфекции народными средствами. Особенно эффективны такие рецепты:

• Залить 100 г измельченных корней переступеня белого 3 л водки или самогона, настоять 2 недели. Принимать по 10 мл трижды в день натощак.
• Насыпать в поллитровую банку 50 г сушеницы топяной и залить доверху холодной кипяченой водой. Настаивать 18 часов, процедить и принимать по столовой ложке 3 раза в день.
• Смешать поллитровую банку лукового сока и такой же объем жидкого меда. Пить по чайной ложке трижды в сутки до еды, запивать теплой водой.

Инфекция, вызванная Хеликобактер, требует соответствующей диеты. Из рациона следует исключить:

• острые приправы и соусы;
• алкоголь;
• кофе, напитки с кофеином, газировку;
• соленья, маринады;
• жирные, жаренные блюда, майонез и другие соусы, приготовленные с использованием большого количества масла или животных жиров;
• концентрированные бульоны;
• кондитерские изделия, сдобу, мучные изделия;
• снеки;
• концентрированные соки.

Предпочтение отдают блюдам, приготовленным на пару, в духовке, нежирным сортам мяса и рыбы, сезонным овощам и фруктам. Из напитков советуют отвар шиповника, некрепкий зеленый или травяной чай, компоты, морсы. Сахар в рационе заменяют сухофруктами и медом.

В большинстве случаев избежать заражения Helicobacter можно, соблюдая основные правила гигиены. Необходимо всегда мыть руки перед едой, обращать внимание на чистоту посуды и столовых приборов в точках общественного питания, гостях и т.д. Инфекция Хеликобактер хорошо поддается терапии, особенно на ранних стадиях до появления осложнений. Поэтому важны профилактические обследования.

[youtube.player]