Микрофлора лекарственных средств.
Добавил пользователь Alex Обновлено: 06.11.2024
Микрофлора лекарственного растительного сырья.
Микробы, обитающие на лекарственном растительном сырье могут включать представителей нормальной эпифитной и фитопатогенной микрофлоры. Микробная обсеменённость растительного лекарственного сырья зависит от исходной загрязненности, но может повышаться на этапах первичной обработки, измельчения, приведения в стандартное состояние. Порча сырья происходит в основном при повышенной влажности, способствующей размножению гнилостных микроорганизмов.
Эпифитная микрофлора [от греч. epi, на + phyton, растение] представлена микроорганизмами, обитающими на поверхности растений. Микроорганизмы-эпифиты не причиняют вреда растению, а в некоторых случаях составляют конкуренцию фитопатогенным микробам. В качестве источников питания эпифитная микрофлора утилизирует выделения растений и различные их поверхностные загрязнения. Основной представитель эпифитной микрофлоры — Erwinia herbicola —подвижная грамотрицательная палочка, образующая золотисто-жёлтые колонии на МПА. Реже на поверхности растений выделяют Pseudomonas fluoresceins— подвижную грамотрицательную палочку. Бактерии образуют зелёный пигмент пиовердин, вызывающий флуоресценцию колоний при коротковолновом УФ-облучении. Пиовердин обладает свойством бактериоцина, действующего на грамположительные и грамотрицательные бактерии, а также проявляет умеренную фунгицидную активность. Иногда на поверхности растений выделяют Bacillus mesenthericus— аэробные подвижные спорообразующие грамположительные палочки. Как было указано выше (см. главу 6), наиболее обильно микроорганизмы представлены в почве, особенно в прикорневой зоне. В её состав входят различные микобактерии, псевдомонады, спорообразующие, азотфиксирующие и нитрифицирующие бактерии, актиномицеты и грибы. Вокруг корней растений находится зона интенсивного роста и повышенной активности микробов. Поверхность корневой системы колонизируют преимущественно псевдомонады и грибы. Последние вступают в симбиотические отношения с растениями и образуют микоризу (грибоко-рень), стимулирующую рост обоих партнёров.
Фитопатогенная микрофлора. Способностью вызывать болезни растений обладают различные вирусы, бактерии и грибы. Поражения, вызываемые фитопатогенными бактериями называют бактериозами. Фитопатогенные грибы вызывают микофитозы По локализации процесса выделяют общие и местные поражения. Первые вызывают гибель всего растения или отдельных его частей, вторые — отдельных участков растения. По механизму поражения бактериозы разделяют на паренхиматозные заболевания, сосудистые поражения и опухоли. Паренхиматозные заболевания. Развиваются при попадании бактерий в ткани растений через различные анатомические отверстия (устьица, чечевички, нектарники) и повреждения покровных тканей. Возбудители выделяют ферменты и токсины, облегчающие их распространение по межклеточным пространствам. Проникновение бактерий вглубь вызывает массовую гибель клеток. К ним относят гнили (основные возбудители — бактерии родов Pseudomonas и Erwinia), ожоги (основные возбудители — виды Erwinia и Corynebacterium) и пятнистости (основные возбудители — виды Pseudomonas и Xanthomonas). Сосудистые поражения. Развиваются при распространении бактерий по сосудам растений. Основные возбудители— виды Corynebacterium
Возбудители микофитозов также вызывают паренхиматозные и сосудистые поражения растений. Использование сырья, обсеменённого грибами, в качестве пищевых продуктов может вызвать тяжёлые заболевания — микотоксикозы.
Фитопатогенные вирусы вызывают мозаичные болезни, желтуху, карликовость. Их характерная особенность — появление слабоокрашенных пятен или целых участков, а также задержка роста растений. Помимо вирусов, к фитопатогенам относят и вироиды.
Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.
Проблема микробной контаминации лекарственных средств
На сегодняшний день контроль качества и безопасность лекарственных средств поступающих на потребительский рынок, становится одной из основных забот. В фармацевтической отрасли внедряется система обеспечения качества лекарственных средств, от их создания до реализации и применения их потребителем. Одним из наиболее важных параметров, характеризующих качество лекарственных форм, является его микробиологическая чистота.
Многие лекарственные препараты служат средой для развития микроорганизмов. Загрязненные (контаминированные) микроорганизмами лекарственные препараты представляют опасность для больного. В процессе эволюции организм взрослого человека с помощью различных систем приспособился к защите от микрофлоры (шелушение эпидермиса, кислая среда желудка, лизоцим в слезной жидкости и т.д.), но наиболее важные органы и биологические жидкости (мозг, сердце, кровь, спинномозговая жидкость) всегда остаются стерильными. Защитные механизмы новорожденного несовершенны, а у больного человека ослаблены, поэтому резко возрастает опасность инфицирования при применении нестерильных наружных лекарственных форм (мазей, масел и др.). Велика опасность инфицирования организма и при введении инъекционных растворов, при лечении травм, ожогов, обморожений.
Микроорганизмы, содержащиеся в лекарственной форме, могут вызвать разложение действующих и вспомогательных веществ. Это приводит к потере терапевтического эффекта препарата, изменению внешнего вида лекарственной формы, иногда к образованию токсичных продуктов. В отличие от патогенных микроорганизмов многие сапрофиты обладают большим набором ферментов и способны разлагать самые разнообразные вещества, белки, липиды и др.
Интенсивность разрушения лекарственных форм и веществ зависит от их концентрации, влажности, температуры окружающего воздуха, а так же природы и степени начальной контаминации. Немаловажное значение имеет и срок хранения лекарственных препаратов.
Источники микробного загрязнения:
• воздух помещений. Известно, что 1 л воздуха в большом городе содержит от 1 тыс. до 1 млн. разных частиц, которые являются носителями микрофлоры – один микроорганизм приходится на 1000 взвешенных частиц;
• исходные лекарственные и вспомогательные вещества животного, растительного и синтетического происхождения (например, сильно контаминированы – панкреатин, пепсин, глюкоза, тальк, крахмал, агар и др.);
• дисперсионные среды, в том числе вода очищенная, микробная контаминация которой происходит при транспортировке, хранении;
• вспомогательные материалы (фильтрующие – вата, бумага, марля; упаковочные – бумага, флаконы, банки, коробки, пробки);
• человек. В спокойном состоянии человек в 1 мин выделяет до 200 тыс. разных частиц (чешуйки, клетки эпидермиса и др.), при движении – до 1 млн., поэтому присутствие в торговом зале аптеки значительного количества посетителей, занос извне пыли, грязи приводит к увеличению в воздухе микрофлоры, проникающей и в производственные помещения;
• персонал аптеки. Даже в специальной одежде в чистых помещениях в окружающую среду сотрудники выделяют до 2 млн. частиц размером от 0,5 мкм до 5 мкм, 300 тыс. частиц размером 5 мкм и более 160 частиц, на которых находятся микроорганизмы.
• Источники загрязнения в основном – рот и нос. При разговоре количество частиц, выделяемых человеком, возрастает;
• технологический процесс (оборудование, приборы, аппараты).
В последние годы проблема микробной контаминации лекарственных препаратов стала предметом обсуждения международных симпозиумов, совещаний Всемирной федерации фармацевтов и других комиссий, поскольку многочисленные фармацевтические продукты служат субстратом для размножения микроорганизмов.
Т.к. аптека является учреждением здравоохранения, то она должка соответствовать высокому санитарному уровню. Поэтому мероприятия, направленные на снижение микробной контаминации воздуха аптечных помещений, оборудования, рук персонала, имеют большое значение для снижения, а в ряде случаев полного устранения микробной контаминации лекарственных препаратов.
Микрофлора лекарственных средств.
Санитарно-бактериологический контроль аптек осуществляют не реже двух раз в квартал.
Объектами исследования в аптеке являются:
• Вода дистиллированная для приготовления ЛС, кроме инъекционных растворов и глазных капель.
• Вода дистиллированная для приготовления инъекционных растворов и глазных капель — инъекционные растворы до стерилизации; глазные капли, приготовленные в асептических условиях на стерильных основах (то есть изготовляемые в самих аптеках).
• Сухие ЛС, используемые для приготовления инъекционных растворов.
• Аптечная посуда, пробки, прокладки, прочие вспомогательные материалы.
• Инвентарь, оборудование, руки и санитарная одежда персонала.
• Воздух аптечных помещений.
Объекты санитарно-микровиологического исследования в аптеке
Вода дистиллированная для приготовления ЛС, кроме инъекционных растворов и глазных капель. Пробы отбирают из бюретки, заполненной исследуемой водой; выводной конец которой предварительно обжигают ватно-спиртовым факелом. Пробы забирают в стерильные бутылки в объёме 300 мл. Если результаты оказываются неудовлетворительными, то пробы отбирают из приёмника дистиллятора. Определяют содержание МАФАМ, плесневых и дрожжевых грибов. Результаты оценивают по общему количеству микроорганизмов путём суммирования числа выросших колоний бактерий и грибов. Предельно допустимо содержание 10-15 КОЕ в 1 см3. Наличие бактерий группы БГКП в дистиллированной воде не допускается.
Вода дистиллированная для приготовления инъекционных растворов и глазных капель. Отбор проб проводят в стерильные флаконы в объёме 15~20мл непосредственно из тех ёмкостей, б которых осуществляют стерилизацию.
• Инъекционные растворы до стерилизации отбирают во время их приготовления, но не позднее 1,5 ч и доставляют в тех флаконах, в которых их будут стерилизовать.
• Инъекционные растворы, глазные капли после стерилизации и приготовленные асептическим способом доставляют в аптечной упаковке.
• Глазные капли из торгового зала аптек доставляют в тех упаковках, в которых их отпускают (3-4 наименования как со стола ассистента, так и с прилавка).
Исследование сухих ЛС проводят по показаниям, например в случае неоднократных неудовлетворительных бактериологических анализов. Отбор проб проводят стерильными ложками в количестве 30-50 г, затем растворяют стерильной дистиллированной водой до концентрации, используемой в соответствующем растворе инъекций и глазных капель.
Исследование аптечного оборудования. Посуду, пробки, прокладки, воронки, цилиндры исследуют в момент подготовки к разливу инъекционных растворов и глазных капель. Посуу отбирают в укупоренном виде, но без содержимого в количестве трёх штук одинаковой ёмкости; пробки и уплотнители по пять штук, помещая их в стерильную закупоривающуюся посуду. Исследование проводят путём споласкивания оборудования 10 мл стерильной водопроводной воды. В смывной жидкости определяют МАФАМ и БГКП. Бактерий группы МАФАМ не должно быть более 150 КОЕ в смывах, с трёх флаконов, пяти пробок и пяти прокладок. Присутствие БГКП не допускается.
Исследование воздуха. Пробы отбирают в асептическом блоке, стерилизационной комнате, в ассистентской, фасовочной, материальной, моечной, в зале обслуживания. Отбор проводят аспирационным методом в чистом, подготовленном к работе помещении (не ранее чем через 30 мин после влажной уборки помещения), при закрытых дверях и форточках. Уровень отбора проб — высота рабочего стола, скорость протягивания воздуха — 25 л/мин. ОМЧ определяют в 100 л воздуха, золотистый стафилококк — в 250 л, плесень и дрожжи — в 250 л.
Прочие объекты. Санитарно-микробиологическим исследованиям также подлежит тара для хранения аптечного оборудования, ступки, весы, руки персонала, полотенца, спецодежда и рабочие места. Проводят исследования на наличие БГКП, синегиойной палочки, протеев и золотистого стафилококка (по показаниям). Пробы берут методом смыва с помощью ватных тампонов, помещённых в пробирки с 2 мл 0,85% раствора NaCl или 0,1% пептонной воды. Проводят посев на жидкие и плотные питательные среды. В исследуемых образцах наличие бактерий группы БГКП, синегнойной палочки, протеев и золотистого стафилококка не допускается.
Микрофлора лекарственных средств
Современный арсенал ЛС включает большой ассортимент препаратов. При этом технология их производства далеко не всегда гарантирует полную микробную чистоту. Инъекционные и офтальмологические препараты должны быть абсолютно стерильными, что учитывают при их изготовлении. Для остальных препаратов микробное загрязнение также крайне нежелательно, но возможно, так как регламент их изготовления не требует поддержания строгой стерильности. Основные источники загрязнения ЛС: сырьё (чаще растительного и животного происхождения), технологическая вода, производственное оборудование, воздух в производственных помещениях, рабочий персонал, контейнеры и упаковка готовой продукции.
• Микробная контаминация лекарственного препарата может вызвать заболевание у принимающего его человека. В клинической практике известны случаи заболевания, вызванные энтеробактериями, синегнойной палочкой, золотистым стафилококком, споровыми анаэробами, плесневыми грибами и др.
• Микробная контаминация ЛС нарушает его стабильность.
В жидких и мягких лекарственных формах условия для роста и размножения микроорганизмов более подходящие. Это связано с высоким содержанием воды, растительных масел и отсутствием консервантов в составе многих мазей. Более того, содержание в составе мазей антимикробных веществ не всегда гарантирует их микробную чистоту. Размножение микробов изменяет консистенцию мазевых основ, вызывает их прогоркание, появление неприятного запаха и т.д. В жидких лекарственных формах метаболиты микроорганизмов могут изменить его химический состав, а также привести к образованию токсичных продуктов. В твёрдых лекарственных формах риск микробной порчи минимален, так как отсутствуют условия для размножения микробов. Высокая загрязнённость сырья, его неправильное хранение может приводить к изменению свойств. Микробная обсеменённость растительного лекарственного сырья зависит от исходной загрязненности, но может повышаться на этапах первичной обработки, измельчения, приведения в стандартное состояние. Порча сырья происходит в основном при повышенной влажности, способствующей размножению гнилостных микроорганизмов.
ПУТИ ПОВЫШЕНИЯ МИКРОБНОЙ ЧИСТОТЫ НЕСТЕРИЛЬНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
В зависимости от источников и путей попадания микроорганизмов в ЛС возможны различные подходы к обеспечению требуемого уровня микробной чистоты нестерильных ЛС. Если микробное обсеменение вызвано попаданием вместе с сырьём, то для достижения требуемого уровня микробной чистоты достаточно очистить от микроорганизмов сырьё. Если обсеменение микробами происходит в процессе изготовления, то проводят деконтаминацию готовой лекарственной формы. Предварительной деконтаминации можно достичь прессованием сыпучих материалов (при отсутствии споровых микроорганизмов, низкой влажности исходного порошка и высоком давлении). На практике применяют четыре способа деконтаминации сырья и готовых ЛС.
Термический способ. Широко распространённый метод промышленной деконтаминации. Не пригоден для обработки термолабильных лекарственных форм, для которых применяют прогревание до 60-70°С горячим воздухом, инфракрасное и высокочастотное излучение.
Химический способ. Более пригоден для стерилизации посуды, трубопроводов и прочих изделий из полимерных материалов. Стерилизующий агент — окись этилена или смесь окиси этилена и бромистого метила (в соотношении 1:25). Для непосредственной деконтаминации ЛС этот способ применяют ограничено, так как окись этилена взаимодействует с веществами, содержащими галогенные, гидроксильные и карбоксильные группы.
УФ-облучение.Существенным ограничением для более широкого использования метода признана его неэффективность при обработке светонепроницаемых веществ (бактерицидное действие реализуется лишь на глубине 1 мм). Наиболее часто его используют для обработки упаковочного материала и технологической воды. Возможна обработка УФ-лучами формообразующих веществ (крахмала, талька, сахара) в дисперсном состоянии (при перемешивании).
Ионизирующее излучение. Наиболее перспективный способ деконтаминации сырья и готовых лекарственных форм. Ионизирующее излучение обладает высокой проникающей способностью. При облучении не образуются канцерогенные, мутагенные, токсичные вещества, сохраняются физико-химические и биологические свойства обрабатываемых лекарств. Метод используют для обработки антибиотиков, витаминов, ферментов, гормонов и алкалоидов.
3. Микрофлора лекарственного сырья и готовых лекарственных препаратов
Растительное лекарственное сырье может загрязняться микроорганизмами на всех стадиях его заготовки (сбор, сушка, измельчение, упаковка, хранение). Преобладают на сырье представители микрофлоры воздуха, часто встречаются споровые и неспоровые палочки, кокки, пигментные бактерии, плесневые грибки, дрожжи. Находясь на растительном лекарственном сырье, микробы не только механически загрязняют его, но и при неправильном хранении (повышенная влажность, запыленность помещения, наличие насекомых, грызунов и т.д.) размножаются на нем, используя его для жизнедеятельности. При этом под действием микробных ферментов разрушаются фармакологически важные активные вещества, что приводит к снижению его лечебной ценности. Признаками порчи являются изменение консистенции, цвета, запаха. Особенно быстро портится свежее сырье.
Источники контаминации готовых препаратов – нестерильный воздух аптек, оборудование, сырье, посуда, пробки, вода, руки персонала. Существенное значение приобретает также возможность распространения микробов, особенно патогенных, через рецепты.
Микробной порче подвергаются:
порошки (особенно тальк, крахмал), сборы
растворы, микстуры, настои, отвары, капли
мази, пасты, шарики, свечи
стерильные инъекционные препараты
Наибольшее количество микробов может быть в водных настоях, отварах, наименьшее – в настойках. Поэтому хранение настоев и отваров в холодильнике не должно превышать 2-е суток.
Находясь в готовых лекарственных препаратах, микроорганизмы размножаются в них, разрушая при этом активные компоненты препарата. Наиболее частыми признаками порчи настоев и отваров являются появление мути, изменение цвета, образование пленки, осадка, кислого запаха и т.д. Особенно ярко эти признаки порчи выражены при добавлении сахарного сиропа и при хранении в теплом помещении. Микробная загрязненность готовых препаратов во многом зависит от соблюдения в аптеках санитарно-гигиенического режима.
Для предупреждения микробной загрязненности лекарственных средств необходимо соблюдать следующие правила:
обеззараживать воздух с помощью бактерицидных ламп,
соблюдать правила личной гигиены,
соблюдать технологию приготовления лекарственных препаратов,
правильно хранить лекарственное сырье и готовые лекарственные формы,
при необходимости применять консерванты.
3.1. Определение микробной контаминации лекарственных средств
Согласно требованиям ВОЗ и Государственной Фармакопеи Республики Беларусь существуют определенные нормативы, ограничивающие микробную контаминацию лекарственных препаратов. Для выявления микроорганизмов в лекарственных препаратах используют методы микробиологического анализа. Обычно определяют количество микроорганизмов в 1 г сухого препарата или в 1 мл раствора. Методики микробиологического анализа конкретной лекарственной формы индивидуальны. Это связано с бактерицидным и бактериостатическим действием самих препаратов, а также с чувствительностью или резистентностью микроорганизмов к данному лекарственному средству.
Микробиологическая чистота лекарственных средств, субстанций и вспомогательных материалов для производства лекарственных средств должна соответствовать требованиям, изложенным в статье 5.1. Государственной Фармакопеи Республики Беларусь «Общие тексты по стерилизации» (таблицы 3-4).
Таблица 3 – Микробиологическая чистота лекарственных средств
Рекомендуемые нормы ГФ РБ
- Для парентерального введения
- Глазные лекарственные средства
- Для нанесения на открытые раны и ожоги
- Другие лекарственные средства, к которым предъявляется требование «стерильность»
- Для применения местно, трансдермально
- Для применения интравагинально
- Для ведения в полости yxa,ноca
- Для введения в дыхательные пути (за исключением тех лекарственных средств, которые должны быть стерильными)
- Общее число аэробных бактерий и грибов (суммарно) - не более 10 2 в 1 г или в 1 мл
- Отсутствие бактерий семейств Enterobacteriaceae в 1 г или в 1 мл
- Отсутствие P. аеruginosa в 1 г или в 1 мл
- Отсутствие S. aurеus в l г или в 1 мл
Для приема внутрь или введения ректально
А. Лекарственные средства uз субстанций синтетического происхождения
Б. Лекарственные средства из субстанций природного происхождения (растительного, животного, минерального), за исключением средств, включенных в Категорию 4
Общее число аэробных бактерий не более 10 3 в 1 г или в 1 мл
- Общее число грибов не более 10 2 в 1 г или 1 мл
- Отсутствие E. соli в 1 г или 1 мл
- Общее число аэробных бактерий не более 10 4 в 1 г или в 1 мл
- Общее число грибов не более 10 2 в 1 г или в 1 мл
- Отсутствие E. соli в1 г или в1 мл
- Отсутствие бактерий рода Salmonella в 10 г или в 10 мл
- Отсутствие P. aeruginosa в 1 г или в 1 мл
- Отсутствие S. aureus 1 г или в1 мл
- Энтеробактерий - не более 10 2 в 1 г или в 1 мл
В. Детские лекарственные средства
- Общее число аэробных бактерий не более 500 в 1 г или в 1 мл
- Общее число грибов - не более 50 в 1 г или в 1 мл
- Отсутствие бактерий семейства Enterobacteriaceae в 1 г или в 1 мл
- Отсутствие S. aureus в 1 г или в 1 мл
Лекарственные средства, состоящие из одного вида сырья (фасованная продукция) или нескольких (сборы), также растительное сырье «ангро»
А. Лекарственные растительные средства или лекарственное сырье «ангро», применяемые в виде настоев и отваров, приготовленные с использованием термической обработки
В. Лекарственные растительные средства или лекарственное сырье «ангро», применяемые без термической обработки
- Общее число аэробные бактерий не более 10 7 в 1 г или в 1 мл
- Общее число грибов не более 10 5 в 1 г или 1 мл
E. соli - не более 10 2 в 1 г
- Общее число аэробных бактерий не более 10 в 1 г или в1 мл
- Общее число грибов не более 10 4 в 1 г или в 1 мл
- Отсутствие E. соli в 1 г или в 1 мл
- Отсутствие бактерий рода Salmonella в 10 г или в 10мл
Таблица 4 – Микробиологическая чистота субстанций и вспомогательных материалов для производства лекарственных средств
лекарственных средств
Нестерильных лекарственных средств, относящихся к Категории 2
- Общее число аэробных бактерий и грибов
(суммарно) не более 10 2 в 1 г или в 1 мл
- Отсутствие бактерий семейства Enterobacteriaсеае в 1 г или в 1 мл
Нестерильных лекарственных средств, относящихся к Категории 3В
- Отсутствие S. aureus 1 г или в 1 мл
Субстанции синтетического
происхождения для производства нестерильных лекарственных средств
- Общее число аэробных бактерий не более 10 2 в 1 г или в1 мл
- Общее число грибов не более 10 2 1 г или в 1 мл
Субстанции природного
происхождения (растительного, животного или минерального)
Вспомогательные материалы (мука пшеничная, крахмал, тальк и т.д.)
- Общее число аэробных бактерий не более 10 2 в 1 г или в 1 мл
- Общее число грибов не более 10 в 1 г или в 1 мл
- Энтеробактерий не более 10 2 1 г или в 1 мл
Как видно из таблиц, стерильными должны быть инъекционные препараты, мази, пленки, глазные капли и все лекарственные формы для новорожденных, для местного лечения гнойных ран, язв, ожогов.
Лекарственные формы для приема per os не должны содержать патогенных и условно-патогенных микроорганизмов.
Допускается не более 100 микробных клеток в 1 г (мл) препарата для лекарственных форм местного, интравагинального применения, а также для применения в полости уха и носа.
В состав некоторых нестерильных лекарственных препаратов входят компоненты и консерванты, обладающие антимикробным действием. Чтобы избежать неправильной оценки результатов испытания на микробиологическую чистоту предварительно определяют действие лекарственного средства в отношении следующих тест-культур: Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtilis (cereus), Candida albicans. Для культивирования тест-культур применяют соответствующие среды (таблица 5).
Читайте также: