Окраска мазка метиленовым синим на гонококки

1. Водный раствор метиленового синего (10 г/л): 1 г метиле нового синего растворяют в 100 мл дистиллированной воды, фильтруют через бумажный фильтр.

2. 96° этиловый спирт.

Ход определения. Материал наносят на стекло равномерным слоем и высушивают на воздухе. Препарат фиксируют 3 мин в 96° этиловом спирте, высушивают, затем наносят на него раствор метиленового синего на 1 мин, тщательно смывают оставшийся краситель под струей холодной воды, высушивают в штативе.

Микроскопическое исследование проводят под микроскопом с естественным или искусственным освещением: объектив 90 иммерсионный, окуляр 7 или 10. Ядра клеток окрашены в синий цвет, цитоплазма — в голубой цвет разной интенсивности, до бесцветной. Бактериальная флора окрашивается в синий цвет разной интенсивности. Диплококки (гонококки) темно-синего цвета, резко очерчены, бобовидной формы, сложены попарно вогнутыми сторонами друг к другу; располагаются внутриклеточно, в слизи и на эпителиальных клетках (см. Приложение I, рис. 30).

Обнаружение гонококков в исследуемом материале, окрашенном по модифицированному способу Грама

Принцип. Метод основан на свойстве гонококков и других грамотрицательных микроорганизмов при обесцвечивании их в этиловом спирте отдавать основной фиолетовый краситель и докрашиваться в дальнейшем дополнительным оранжево-красным.

1. Водный раствор кристаллвиолета (10 г/л): 1 г кристалл-виолета растворяют в 100 мл кипящей дистиллированной воды, раствор фильтруют в горячем виде через бумажный фильтр.

2. Водный раствор Люголя: 2 г йодида калия растворяют в 300 мл дистиллированной воды, в полученном растворе рас творяют 1 г чистого йода, фильтруют через бумажный фильтр.

3. 96° этиловый спирт.

4. Водный раствор нейтрального красного (10 г/л): 1 г ней трального красного растворяют в 100 мл дистиллированной воды и фильтруют через бумажный фильтр.

Ход определения. Препарат покрывают полоской фильтровальной бумаги и заливают водным раствором кристаллвиолета на I мин. Следят, чтобы между фильтровальной бумагой и стеклом не было пузырьков воздуха, их удаляют, придавливая полоску бумаги стеклянной палочкой или пипеткой. Через 1 мин бумагу снимают, препарат промывают водопроводной водой и заливают раствором Люголя, который выдерживают в течение нескольких секунд до почернения мазка. Затем остаток раствора Люголя смывают и приступают к обесцвечиванию препарата в 96° этиловом спирте. Обесцвечивание проводят под визуальным контролем, поочередно погружая и вынимая препарат из спирта, находящегося в стаканчике. Обесцвечивают препарат до тех пор, пока фиолетовые струйки красителя, стекающие с его тонких участков, не станут бледно-серого цвета. Препарат быстро промывают под струей водопроводной воды, а затем докрашивают в течение 3 мин водным раствором нейтрального красного. Препарат тщательно промывают, пока струя воды, стекающая с него, не станет прозрачной, высушивают.

При правильной окраске препарат оранжево-красного цвета на тонких участках, лилово-фиолетового на толстых. Ядра клеточных элементов (лейкоцитов, эпителиальных клеток) должны частично удерживать основную фиолетовую окраску, т. е. в центре они должны быть окрашены в фиолетовый цвет, по периферии в оранжево-красный, а гонококки, расположенные в лейкоцитах и на эпителиальных клетках, будут оранжево-красные. Хорошее качество окраски обеспечивается своевременным прекращением обесцвечивания препарата.

При недообесцвечивании, когда ядра клеток интенсивно бкрашены в фиолетовый цвет, гонококки могут сохранять фиолетовую окраску. В переобесцвеченных препаратах стафилококки _;и стрептококки могут быть окрашены в оранжево-красный цвет и приняты за гонококки.

При бактериоскопическом исследовании идентификация гонококков производится на основании их морфологии, расположения и отношения к окраске по способу Грама. Гонококк — это парный кокк, по форме имеющий сходство с кофейными зернами, сложенными вогнутыми сторонами друг к другу. Длина его 1,8 мкм, ширина 0,7—0,8 мкм, между половинками диплококка имеется щель, равная половине одного кокка. Размножаясь делением в разных плоскостях, гонококки не образуют цепочки. При нахождении гонококка внутри лейкоцита характерно их расположение парами или группами под углом друг к другу. Часто гонококки лежат на клетках плоского эпителия рядами, располагаясь перпендикулярно друг другу внутри ряда. Частота внутри- и внеклеточного расположения гонококков зависит от периода заболевания, активности фагоцитоза, от методики взятия материала. При идентификации гонококка необходимо учитывать все три его основных признака. Положительный ответ нужно давать при обнаружении только типичных форм гонококков. Следует учитывать, что при приеме антибиотиков и сульфаниламидов гонококки могут становиться грамположительными, приобретать округлую или неправильную форму, неравномерную величину.

При хронически текущей, леченной гонорее, при подтверждении гонорейного процесса у детей и женщин в менопаузе, при установлении излеченности гонореи используется культу-ральный метод диагностики.

Трихомониаз

Трихомониаз — инфекционное заболевание, вызываемое влагалищной трихомонадой. Мочеполовому трихомониазу свойственна многоочаговость — поражаются влагалище, шейка матки, уретра, парауретральные ходы. Инфекция может проникать за внутренний маточный зев. Клинически заболевание проявляется кольпитом, уретритом, вульвовагинитом. Диагноз основывается на обнаружении трихомонад. Трихомонада — простейшее грушевидной или овальной формы величиной от 8—11 до 18—20 мкм, содержит овальное ядро, четыре жгутика, ундулирующую мембрану. Осевой стержень (аксостиль) проходит через все тело, выступая на заднем конце в виде шипа. Размножается в основном путем продольного деления. Питается преимущественно путем осмоса, иногда фагоцитоза. Паразитирует чаще во влагалище, может поражать мочеиспускательный канал, мочевой пузырь и прямую кишку.

Наиболее распространенным методом выявления трихомонад является микроскопия нативных и окрашенных мазков. Материал для исследования берут из очага поражения, чаще из заднего свода влагалища.

Дата добавления: 2019-01-14 ; просмотров: 106 ;

Техника приготовления препаратов

Материал из уретры, влагалища, шейки матки, прямой кишки помещают на предметное стекло и распределяют сравнительно тонким слоем в виде равномерного сплошного мазка в центре препарата. Стекла обозначают буквамиU(urethra), V(vagina), C(cervix), R(rectum). Обычно на одном предметном стекле делают два мазка на расстоянии друг от друга. Для исследования доставляют в лабораторию 10-15 мл свежевыпущенной утренней порции мочи. Мочу центрифугируют, из осадка, нитей и хлопьев готовят нативные препараты и препараты для бактериоскопического исследования. С целью получения секрета предстательной железы и семенных пузырьков производят массаж простаты и первые капли сока берут на предметное стекло или же доставляют в небольшой порции мочи. При поражении суставов материалом для исследования служит полученный пунктат, в послеродовом периоде исследуют лохи, при заболевании глаз- гнойное отделяемое с конъюнктивы. Приготовленные мазки или собранный материал доставляют в лабораторию с направлением , в котором указывают место взятия материала и предполагаемый диагноз. В ответах из лаборатории нужно отмечать количество форменных элементов, эпителиальных клеток в мазке, присутствие или отсутствие других микроорганизмов ( и их отношение к окраске по Граму), вагинальных трихомонад, дрожжевых клеток. Обнаружение гонококков производят с помощью следующих унифицированных методов.

Мазки должны быть равномерно размазанными, нетолстыми. Гонококки в тонких слоях окрашиваются грамотрицательно или переобесцвечиваются, в толстых - грамположительно. Высушенные на воздухе мазки фиксируют на пламени горелки и окрашивают (один мазок - 1%-ным раствором метиленового синего, второй - по Граму). При окраске по Граму лучше пользоваться водным раствором кристаллического фиолетового и 1%-ным водным раствором нейтрального красного. Мазок, окрашенный метиленовым синим, используется только для предварительного ориентировочного просмотра. Окончательное заключение по результатам микроскопии делается только на основании окраски препарата по Граму. Если не учесть это замечание, то можно допустить ошибку, так как другая флора, помимо гонококка, может располагаться внутриклеточно и иметь внешнее сходство с гонококком.

Реактивы и растворы: 1. 1% водный раствор кристаллического фиолетового. (Краску растворяют в горячей дистиллированной воде, раствор охлаждают и фильтруют через двойной бумажный фильтр). 2. Раствор Люголя (1 г кристаллического йода, 2 г калия йодида, 300 мл дистиллированной воды). 3. 96% этиловый спирт. 4.1% водный раствор нейтрального красного. На высохший и фиксированный на пламени мазок кладут кусочек фильтровальной бумаги по размеру предметного стекла или несколько меньше, наливают раствор кристаллического фиолетового. Через 1-2 мин бумагу с краской снимают, мазок смывают водой и на 0,5-1 мин в зависимости от толщины мазка заливают раствором Люголя. После этого раствор сливают и мазок помещают в ванночку со спиртом для обесцвечивания под визуальным контролем, погружая и вынимая его из спирта до тех пор, пока с него не перестанут стекать струйки краски бледно-серого цвета. Препарат быстро промывают в воде, на 2 мин наливают раствор нейтрального красного, затем опять промывают в воде и высушивают на воздухе. Препарат помещают под микроскоп с иммерсионной системой при плоском зеркале и открытой диафрагме. В мазке, окрашенном по Грамму, на розовом фоне протоплазмы лейкоцитов выделяются гонококки ярко-розового цвета. Кроме того, гонококки могут локализоваться в нейтрофильных гранулоцитах. Часто они располагаются на эпителиальных клетках или под ними.

Реактивы:1г метиленового синего растворяют в 100мл дистиллированной воды , фильтруют.

На мазки, высушенные на воздухе и фиксированные над пламенем спиртовки или метиловым спиртом, на 15-20 секунд наносится 1%-ный водный раствор метиленового синего, который затем осторожно смывается водой. После высушивания мазки микроскопируются. Цитоплазма форменных элементов окрашивается в бледно- голубой цвет, ядра - в синий, гонококки - в интенсивно- синий. Аналогично окрашиваются и другие кокки. Если они находятся внутри клеток, то напоминают гонококки.

Препарат микроскопируют под иммерсионной системой при плоском зеркале и открытой диафрагме. Гонококки окрашиваются в ярко-розовый цвет, протоплазма лейкоцитов - в слабо-розовый цвет. Ядра лейкоцитов и эпителиальных клеток, поскольку они удерживают частично кристаллвиолет, окрашиваются в слабо-синий цвет. В переобесцвеченном мазке ядра лейкоцитов и эпителиальных клеток почти не имеют фиолетовой окраски. В недообесцвеченном мазке гонококки окрашиваются в фиолетовый цвет и их можно принять за грамположительные кокки. В случае неправильной окраски мазка по Граму берут препарат, окрашенный метиленовым синим, предварительно снимая с него иммерсионное масло спиртом или ксилолом, и окрашивают по Граму.

Рис. 2 Гонорея при микроскопии

Рис. 3 Электронограмма ультратонких срезов гонококка: А) видна наружная мембрана клеточной стенки в бинарное деление гонококка; Б) отделяемое уретры больного, гонококки на эпителиальной клетке.

Рис. 4 Внутри и внеклеточные диплококки

Рис. 5 Гонорея у женщин

Рис. 6 Поражение и шейки матки, с выделение гноя из половых органов

Рис. 7 Гонорейное поражение суставов.

Гонорея у мужчин

Рис. 8 Слизистые выделения Мелкие болезненные узелки

Рис. 9 Слизисто - гнойное выделение

Микроскопическое исследование на трихомонады

Трихомоноз характеризуется многоочаговостью поражения. Следовательно, материал для исследования необходимо брать из многих очагов инвазии.

Выделения, соскоб берут у мужчин из мочеиспускательного канала, у женщин — из боковой и задней частей свода влагалища, мочеиспускательного канала; у девочек — через отверстие девственной плевы желобоватым зондом или браншей вагинального пинцета. Перед взятием материала не рекомендуется туалет наружных половых органов, больного просят длительное время (не менее 3-4 ч) воздержаться от мочеиспускания.

Полученный материал помещают на предметное стекло и накрывают покровным стеклом. Если он густой, предварительно добавляют несколько капель теплого изотонического раствора натрия хлорида. Мочеполовые трихомонады необходимо рассматривать под микроскопом в свежем и окрашенном состоянии.

Нативные мазки желательно использовать немедленно. Исследуют при увеличении 10х40 обычным микроскопом или в темном поле зрения фазовоконтрастным. В свежеприготовленных неокрашенных препаратах мочеполовые трихомонады имеют грушевидную форму, величина их немного больше лейкоцита, движения — толчкообразные поступательные. При изучении препарата фазовоконтрастным микроскопом можно различить в расширенной части трихомонады жгутики.

Исследование трихомонад только в нативном мазке не исключают смешивания мочеполовых трихомонад с другими видами, встречающимися в организме человека (кишечная, ротовая). Поэтому, наряду с исследованием материала в нативном состоянии, необходимо всегда производить микроскопию окрашенных мазков. Мазки подсушивают на воздухе и фиксируют. Способ фиксации зависит от метода окраски. Для более детального исследования строения трихомонад (обнаружение ядра, ундилирующей мембраны и других органоидов) мазок окрашивают по Романовскому-Гимзе. В этих случаях препарат фиксируют спиртом и эфиром поровну.

Чаще всего мазки окрашивают 1% расвором метиленового синего или по Граму. Препарат фиксируют обычно над пламенем горелки. Окраска метиленовым синим и по Граму имеет преимущество перед другими методами, заключающееся в том, что в мазках можно одновременно исследовать гонококки и трихомонады.

Трихомонады, окрашенные по Граму, красноватого цвета, а метиленовым синим — синего. Величина их различная. Ядро овальной формы, расположено эксцентрически и окрашивается в более темный цвет по сравнению с протоплазмой. Жгутики не определяются. Часто в расширенной части трихомонады можно различить маленькую щель — цистому, а в цитоплазме — вакуоли, микроорганизмы, лейкоциты, эритроциты, сперматозооны и др. Для диагностики важным является обнаружение грамотрицательных диплококков (гонококков). При оценке препаратов, окрашенных метиленовым синим, необходимо дифференцировать трихомонады и эпителиальные клетки, которые больше по размеру, ядро расположено в центре.

Окраска гонококков метиленовым синим

Перед окраской мазки фиксируют 96-градусным этиловым спиртом в течение 3-х минут или над пламенем спиртовки. На высушенный мазок наносят 1% раствор метиленовой синьки и оставляют в течение 1 минуты. Остатки красителя смывают под струей холодной воды и высушивают в штативе. При исследовании под микроскопом ядра клеток окрашены в синий цвет, цитоплазма в голубой цвет различной интенсивности. Слизь голубого цвета. Бактериальная флора окрашивается в синий цвет различных оттенков. Гонококки темно-синего цвета, резко очерчены, бобовидной формы, парные, располагаются внутри полиморфноядерных лейкоцитов, в слизи и на эпителиальных клетках.

Окраска гонококков по Граму

Мазок фиксируют над пламенем горелки в течение 1-2 мин и окрашивают каким-либо красителем трифенилметановой группы (генцианвиолет, метилвиолет, кристаллвиолет), промывают водой 1-2 мин и заливают раствором Люголя (калия йодид — 2 г, йод кристаллический — 1 г, вода дистиллированная — 300 мл), а затем фиксируют 96% этиловым спиртом в течение 1 мин до появления серо-фиолетовых струек. После этого препарат промывают водой и дополнительно окрашивают какой-либо контрастной краской (нейтральрот). Гонококки грамотрицательны, то есть окрашиваются в красный либо розовый цвет. Грамположительные бактерии фиолетового цвета.

Гонококки (Neisseria gonorrhoeae) относятся к грамотрицательным кокам, встречающимся преимущественно парами. Бактерия вызывает триппер (гонорею). Это инфекционный процесс с преимущественным поражением слизистых оболочек мочеполового аппарата.

В редких случаях становится причиной бленнореи – гнойного патологического процесса соединительной оболочки глазного яблока. Диагностика гонококков требуется пациентам после незащищенной сексуальной близости с малознакомым партнером. Либо при подозрениях на инфицирование (иногда патологический возбудитель передается через полотенце или мочалку).

Лабораторная диагностика гонококков состоит из:

• микроскопического метода (окраска двух мазков)
• бактериологического (посев на питательные среды)
• реакции Борде-Жангу (серология)
• ПЦР

Свойства гонококка Neisseria gonorrhoeae

Гонококки – разновидность грамотрицательных диплококков, относятся к роду Neisseria. Для гонококков характерна высокая выживаемость в условиях организма. Вне приемлемой среды обитания для жизнедеятельности (во внешней среде) бактерии гибнут.

Также это происходит в результате высыхания субстрата при температуре от 40 градусов. Быстро погибают под воздействием антисептических и антибактериальных растворов, солей серебра и в мыльной воде.

Как выглядят гонококки?

Две половинки парной бактерии схожи на кофейные зерна, соприкасающиеся друг с другом вогнутой стороной. Под угрозой гибели (к примеру, на фоне антибиотикотерапии) трансформируются в L-форму.

Методы лабораторной диагностики

Инкубационный период длится от 3 до 7-ми дней с момента инфицирования. Дальнейшая клиника проявляется острыми симптомами. Это слизистые, с примесями гноя выделения из половых путей, чувство жжения, болезненность в уретре, в особенности при опорожнении мочевого пузыря).

Либо болезнь принимает бессимптомное течение. Анализ на гонококки Нейссера проводится различными способами.

Наиболее информативным считается ПЦР, так как позволяет обнаружить ДНК-возбудителя уже в первые несколько дней после проникновения бактериального агента в организм. У женщин в несколько раз чаще гонококковая инфекция имеет хроническую форму, при которой симптомы отсутствуют.

Возможность выявить гонококки в мазке ПЦР можно через 2-3 дня после сексуального контакта с зараженным партнером. Также применяются другие методы исследования, не менее информативные и позволяющие дополнительно определить чувствительность бактерий к антибиотику.

Микроскопический (бактериоскопический) метод

Анализ на гонококки проводится с использованием микроскопа и методики окраски двух мазков – по Грамму и с применением 1% жидкого раствора метиленового синего и 1% Эозина.

Для исследования наибольшую ценность представляют патологические жидкости. Забор которых производится из мочеиспускательного канала, влагалища, ануса, глотки или крови.

Метод Грамма

Обнаружить гонококки можно с помощью двойной окраски с применением двух красителей.

Первый – основной, второй считается дополнительным. Помимо красителей используется спирт и различные кислоты. Их действие заключается в обесцвечивании бактериального агента. Для выявления возбудителя гонореи применяются анилиновые красители (кристаллвиолет, метиловый фиолетовый) и дополнительные.

После обесцвечивания грамотрицательных диплококков используется фуксин. Он придает гонококкам красный окрас, определяющего идентифицирующего наличие гонококка.

Ход исследования:

1. Биоматериал наносят на предметное стекло тонким слоем
2. Следующий этап – сушка
3. Проводится окраска анилиновыми красителями, промывка водой и использование раствора Люголя
4. После высыхания материал фиксируется – необходимо для того, чтобы бактериальные клетки остались на поверхности стекла и не смылись. Для фиксации применяют один из двух методов – облучение бактериального агента высокими температурами либо применение специальных препаратов, приводящих к коагуляции цитоплазмы
5. Далее стекло промывают и дополнительно применяют контрастные краски, после чего бактерии выделяются красным либо розовым цветом, после чего их легко обнаружить

Применение метиленового синего в микроскопическом исследовании

Взятый биоматериал наносится на предметное стекло и фиксируется 96 % этанолом либо над спиртовой горелкой. После полного высыхания мазка выполняется его окрас 1% р-ром метиленовой синьки. Спустя 1 минуту предметное стекло промывают в проточной воде комнатной температуры, подсушивают и помещают под микроскоп для изучения.

Анализ мазка на гонококк позволяет отличить патологическую микрофлору, которая принимает выраженный синий окрас (может иметь различные оттенки). Под микроскопом отличаются бактерии, размещенные парно, их бобовидная форма.

Характерной особенностью остро протекающего инфекционного заболевания является месторасположение возбудителя. То есть внутри гранулоцитарных лейкоцитов, которые выявляются в больших количествах на эпителии и в слизистой.

Для хронического течения характерно отсутствие гонококков при данном исследовании. В единичных случаях бактериальный агент идентифицируется, но в нетипичном для него виде.

Гонококки представлены мелкими или крупными шарообразной формы формированиями. Также выявляется другая патологическая флора, клетки эпителия и белые кровяные клетки (лейкоциты).

Бактериологический способ

Бактериологический или культуральный метод – производится посев биоматериала больного на питательные среды с белками, имеющими нативную пространственную структуру, сыворотку.

Чаще применяются безасцитные питательные среды. Основой которых является мясопентонный агар (производится из мяса кроликов или бычьих сердец). По результатам посевов на гонококки определяется не только возбудитель инфекции, но и его чувствительность к антибиотикам.

Точность и достоверность исследования во многом зависит от правильности сбора биоматериала. Важно использовать стерильные емкости и соблюдать правила подготовки к сбору анализа.

Сдача крови производится медицинским работником в условиях лаборатории.

Мочу пациенты собирают самостоятельно, используя для этого стерильную емкость.

Доставка биоматериала должна быть быстрой.

Мазки из половых путей или уретры выполняются в лаборатории и сразу наносятся на питательные среды. Очень важно провести диагностику до начала приема антибактериальных средств. В противном случае результативность проведенного анализа дает недостоверные результаты.

Если обследование назначается для контроля проведенной терапии, следует выждать не менее 10-ти дней после приема последней дозы антибиотика. При острой необходимости анализ проводится раньше.

Для исследования, отделяемого из половых путей у женщин производится забор материала через две недели после окончания менструации. За несколько часов запрещается опорожнение мочевого пузыря.

Мужчинам перед сдачей выделяемой слизи на анализ следует удержаться от посещения туалета в течение 4-5 часов.

Через сколько времени будет готов результат?

Культуральный метод занимает от 4-х дней. Все зависит от исследуемого материала – исследование каловых масс занимает от 3-4 дней до недели.

Соскоб из уретры будет готов в течение 7-ми дней, кровь – через 10. Несмотря на длительность диагностики, предварительные результаты анализа озвучиваются на 3-ий день.

Что показывает бактериологическая диагностика?

Расшифровка исследования включает информацию о наличии бактериального агента, а также о его концентрации. Определение количества присутствующей патологической микрофлоры имеет большое значение.

Выделяют 4 степени роста гонококков:

• 1 степень (отсутствует рост бактерий на твердой среде, на жидкой – незначительный рост)
• 2 степень (рост до 10 колоний)
• 3-я (рост от 10 до 100 колоний)
• 4-я (больше 100 колоний)

Первые две степени не являются этиологическими факторами развития болезни.

В данном случае говорят о загрязненности исследуемого биоматериала. Последние две степени (3 и 4) говорят о том, что присутствующие микроорганизмы стали причиной развития инфекционных процессов.

Окончательная расшифровка (подсчет колоний КОЕ/мл) имеет следующий вид:

• 102 – 103/мл – 1 колония
• 104/мл – 0т 2 до 5 колоний
• 105/мл – от 6 до 15 колоний
• 106/мл и более – от 16 колоний

Диагностика имеет весомое значение для контроля проводимой антибиотикотерапии и позволяет оценить ее эффективность.

Серологический метод

Методика основывается на иммунологической реакции выявления антител (Реакция Борде-Жангу) в плазме крови больного с подозрением на заражение гонококковой инфекцией. Зачастую используется для диагностики бессимптомных форм патологии.

В современной исследовательской практике серологический метод мало информативен. Не применяется для контролирования состояния после медикаментозной терапии.

Диагностика методом ПЦР

Определение гонококков при анализе ПЦР наиболее точный метод. Позволяет уже в впервые дни после заражения идентифицировать бактериального возбудителя.

Для получения максимально верных результатов огромное значение имеет подготовка:

• исключить сексуальный контакт за сутки
• после приема антибиотиков должно пройти не менее 7-ми дней
• перед взятием мазка запрещается посещение туалета за 2-3 часа
• не проводится у женщин вовремя месячных

Для диагностики триппера производится забор материала из мочеиспускательного или цервикального канала, можно использовать мочу.

Если в исследуемом биоматериала обнаруживают ДНК гонококков – это говорит о наличии гонореи. Информативность диагностики составляет 98%. Анализ проводится в течение 1-3 дней, что зависит от оснащенности лаборатории и квалификации специалистов.

Основным преимуществом исследования на гонококки является возможность выявления бактериального возбудителя даже при условии его минимальной концентрации в мазке (моче). В лабораторных условиях производится размножение генов возбудителя.

Клонирование ДНК участка, даже если он единичный, позволяет выявить всю имеющуюся патологическую флору в материале. Так, в большинстве случаев исследование на гонококки определяет одновременно диплококков и трихомонад, которые также передаются при половом акте.

Анализ ПЦР высоко информативен на ранних стадиях. Поэтому диагностика рекомендуется пациентам при частой смене половых партнерах или случайной сексуальной связи, в первые дни после интимной связи. Проведенная терапия на начальных стадиях болезни предотвращает развитие неприятных симптомов и возможные осложнения.

Расшифровка анализа ПЦР на гонококки выглядит следующим образом:

• высокий уровень лейкоцитов (свыше 10-ти говорит о присутствии воспалительного очага, свыше 20 – острое воспаление)
• повышенная концентрация клеток эпителия (более 10 в поле зрения)
• наличие грамотрицательных кокков, характерной формы

О чем говорит отсутствие гонококковой инфекции в исследуемом материале?

Если в ходе обследования с применением одного из методов в мазке не были обнаружены гонококки? Это говорит о том, что пациент полностью здоров. Либо о том, что в исследуемом материале, взятом из половых путей или уретры, бактерия отсутствует, но может быть обнаружена в других частях тела.

Для подтверждения диагностики выполняется забор материала из ротовой полости, прямой кишки или конъюнктивы глазного яблока. Если симптоматические проявления локализуются вне половой системы, а присутствие гонококков исключено, выполняются другие методы обследования для идентификации возбудителя патологии.

Диагностика после проведенного лечения

При обнаружении гонококковой инфекции лечащий врач-венеролог назначает комплексное лечение. Его основой является антибиотикотерапия.

Так как бактерии быстро адаптируются к пенициллинам, применяются препараты цефалоспоринового ряда. Чаще назначается Цефтриаксон для инъекций либо перорально Цефиксим.

Длительность лечения составляет 10-14 дней. Спустя 2-3 суток после приема последней дозы исследуют мазок из урогенитального тракта на выявление гонококков. Отрицательные результаты говорят о правильно проведенном лечении.

Диагностика после лечения также проводится второй раз через две недели. Отсутствие бактериального возбудителя означает полное выздоровление, больного снимают с учета у венеролога. Обследованию подлежат все половые партнеры.

Как подготовиться к диагностике гонококков?

Для предотвращения получения в ходе диагностики ложноположительных результатов перед взятием материала пациентам необходимо как следует подготовиться.

Соблюдение подготовительного этапа одинаково требуется представителям женского и мужского пола.

Подготовка

Этап подготовки включает:

• Исключение сексуальной близости за трое суток до забора материала
• Прекращение медикаментозной терапии, не только антибактериальных средств, но и других лекарственных групп, в частности химический средств контарацепции (спермициды). При невозможности прекращения приема некоторых препаратов пациент заранее сообщает об этом врачу
• Исключается использование влагалищных суппозиториев, кремов и спреев
• Исключается спринцевание за 3 дня до процедуры
• Гигиена половых органов выполняется накануне вечером, в утро забора мазка и взятия крови подмывание запрещается
• Опорожнение мочевого пузыря производится за 3 часа до исследования. При наличии незначительного количества бактериальных возбудителей существует вероятность вымывания некоторой части совместно с мочой и получение ложноотрицательных результатов
• У женщин манипуляция проводится за 4-5 дней до начала предполагаемых месячных либо спустя несколько дней по завершению. В острых случаях проводится не зависимо от менструального кровотечения

Анализ мазка на выявление гонококка Нейссера выполняется перед началом медикаментозного лечения и несколько раз после окончания.

Методику исследования выбирает лечащий врач, который занимается расшифровкой результатов и разработкой схемы лечения. Самостоятельный прием антибактериальных средств на фоне возникшей клинической картины искажает результаты обследования.

При подозрении на гонорею обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.