Авидность антител к токсоплазмозу в инвитро

Исследование, направленное на определение авидности антител класса IgG к Toxoplasma gondii для определения срока первичного инфицирования и длительности токсоплазменной инфекции (токсоплазмоза).

Антитела класса IgG к Toxoplasma gondii; иммуноглобулины класса G к Toxoplasma gondii; авидность антител.

Toxoplasma gondii Antibodies, IgG; Anti-Toxoplasma gondii – IgG; Anti-Тoxo-IgG; avidity.

Электрохемилюминесцентный иммуноанализ (ECLIA).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Микроорганизм Toxoplasma gondii (T. gondii) является облигатным внутриклеточным паразитом, возбудителем токсоплазмоза. Токсоплазмоз – это заболевание, характеризующееся преимущественно хроническим течением с поражением нервной системы, печени, селезенки, лимфатических узлов, скелетных мышц, миокарда. Инфицированность населения возбудителем токсоплазмоза в различных странах составляет от 7,5 % до 95 %. Токсоплазмоз также входит в группу TORCH-инфекций (перевод первых букв латинских названий токсоплазмы – Toxoplasma, краснухи – Rubella, цитомегаловируса – Cytomegalovirus, герпеса – Herpes), являющихся потенциально опасными для развития плода и вызывающих тяжелые поражения органов у новорождённых детей.

Инфекция человеку передается алиментарным путем при употреблении пищи, особенно сырого, недостаточно термически обработанного мяса и воды, содержащих цисты микроорганизмов. Также возможно заражение ооцистами T. gondii при контакте с инвазированными кошками, их испражнениями при несоблюдении правил личной гигиены. Возможен трансплацентарный путь передачи от матери к плоду при первичном остром заражении женщины во время или непосредственно до беременности. Известны случаи проникновения возбудителей через поврежденную кожу у лиц, относящихся к группе риска (сотрудников диагностических лабораторий), и людей, находящихся в антисанитарных условиях.

Окончательным хозяином возбудителей токсоплазмоза являются домашние и дикие кошки. Человек является промежуточным хозяином инфекции. В организме людей токсоплазмы проходят ограниченный период жизненного цикла и формируют неактивные цисты во внутренних органах: миокарде, скелетных мышцах, головном мозге, глазах. У большинства здоровых лиц при нормальном функционировании иммунной системы возможно бессимптомное, латентное течение инфекции или с наличием неспецифических симптомов. При этом иммунная система хозяина способна сохранять цисты в покоящемся состоянии и защищать организм от развития инфекции. У людей с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией, пациентов после трансплантации органов, ослабленных больных токсоплазменная инфекция может протекать в тяжелой форме с развитием серьезных осложнений.

Различают приобретенный и врождённый токсоплазмоз. Приобретенный токсоплазмоз может протекать в острой, хронической и латентной форме. Острая форма инфекции встречается редко, для нее характерны следующие клинические проявления: слабость, недомогание, миалгии, реже лихорадка, лимфаденопатия, увеличение селезенки, печени, поражение сердца, нервной системы с развитием энцефалита. Хроническая форма токсоплазмоза характеризуется длительным, вялотекущим течением, лихорадкой, головной болью, увеличением периферических и мезентериальных лимфатических узлов, печени, селезенки, поражением скелетных и сердечной мышц, глаз, желудочно-кишечной, центральной и периферической нервной системы. У лиц с нарушением иммунной системы и ослабленных пациентов возможно развитие менингитов, энцефалитов, абсцессов головного мозга.

Врождённая форма токсоплазмоза возникает в результате трансплацентарной передачи инфекции от матери плоду при первичном инфицировании возбудителем T. gondii женщины во время первой беременности или незадолго до нее. При этом вероятность заражения плода составляет 30-40 %. Оно может привести к выкидышу, мертворождению, развитию серьезных проявлений и осложнений у новорождённых. К ним относятся тяжелая интоксикация, лихорадка, увеличение селезенки, печени, желтуха, миалгии, миозит, энцефалит, поражение глаз, нервной системы. У большинства детей, инфицированных в поздние сроки беременности, симптомы токсоплазмоза проявляются только через несколько лет после рождения и проявляются поражением глаз с развитием хориоретинитов, потерей слуха и задержкой умственного развития.

Диагностика токсоплазмоза, вызванного T. gondii, основана на сочетании анамнестических, клинических данных, результатах инструментального и лабораторного обследования. К современным методам диагностики данной инфекции относится выявление специфических антител к T. gondii серологическими иммунологическими методами, а также определение генетического материала возбудителя методом полимеразной цепной реакции.

Серологическая диагностика основана на выявлении антител классов IgA, IgM и IgG к антигенам возбудителя T. gondii. В первые дни от начала инфекции начинается выработка антител класса IgM, затем их количество нарастает в течение первых двух недель, впоследствии постепенно снижаясь до нормального уровня спустя несколько месяцев. Антитела класса IgG вырабатываются спустя несколько недель после первичного инфицирования, их уровень нарастает соответственно длительности и активности заболевания, снижаясь при выздоровлении или при переходе в латентную форму заболевания. Выявление антител класса IgG в сыворотке крови свидетельствует о контакте пациента с антигенами T. gondii, в результате перенесенной, хронической или латентной формы токсоплазмоза.

Важным значением в диагностике токсоплазменной инфекции является определение авидности антител класса IgG к возбудителю T. gondii. Авидность антител характеризует прочность связывания специфических антител с антигенами токсоплазм, находящихся на поверхности клеточной мембраны возбудителя. Определение авидности антител класса IgG играет роль в определении длительности течения токсоплазмоза и срока первичного инфицирования. Это связано с тем, что в первые месяцы после инфицирования синтезируются антитела с низкой авидностью, то есть имеющие слабую прочность связывания антигенов. Затем начинается выработка антител с пограничной (средней) авидностью и высокоавидных антител. Авидность, или индекс авидности, выражается в процентах прочно связанных антител с антигенами T. gondii к общему числу антител, принятых за 100 %. Определение антител с высокой авидностью свидетельствует о давности перенесенной инфекции не менее трех-четырех месяцев назад до момента исследования. Низкоавидные антитела свидетельствуют о первичном инфицировании и инфекции в течение последних трех-четырех месяцев. Выявление антител со средней авидностью свидетельствует о присутствии антител как с низкой, так и с высокой авидностью.

У новорождённых детей в первые шесть месяцев жизни возможно обнаружение в крови материнских антител класса IgG к возбудителю T. gondii, что делает затруднительным и в ряде случаев нецелесообразным проведение данного исследование на авидность. У лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией результат исследования может быть недостоверным вследствие низкого уровня антител класса IgG. В данном случае рекомендуется проведение дополнительных тестов по выявлению токсоплазмоза.

Для чего используется исследование?

Для диагностики токсоплазмоза, вызванного возбудителем Toxoplasma gondii;
Для дифференциальной диагностики острого и хронического токсоплазмоза;
Для диагностики длительности инфекции от момента первичного инфицирования Toxoplasma gondii при текущей, хронической, латентной форме токсоплазмоза;
Для подтверждения или исключения недавнего инфицирования возбудителем Toxoplasma gondii беременных женщин или женщин, планирующих беременность, в комплексной лабораторной диагностике токсоплазмоза.

Когда назначается исследование?

При подозрении на токсоплазменную инфекцию и при симптомах токсоплазмоза: слабость, недомогание, лихорадка, миалгии, увеличение периферических и мезентериальных лимфатических узлов, печени, селезенки, поражение скелетных и сердечной мышц, глаз, желудочно-кишечной, центральной и периферической нервной систем;
При необходимости оценки длительности и давности инфицирования возбудителем Toxoplasma gondii;
При подозрении на текущую, хроническую, латентную формы токсоплазмоза;
При подозрении на токсоплазмоз у беременных женщин;
При планировании беременности в целях профилактики заражения плода и развития врождённого токсоплазмоза;
При обследовании детей, родившихся от матерей с токсоплазмозом (рекомендуется проведение исследования у детей старше шестимесячного возраста);
При положительных результатах определения антител к Toxoplasma gondii классов IgM и IgG.

Что означают результаты?

Выявление антител класса IgG с низкой авидностью свидетельствует об инфицировании возбудителем Toxoplasma gondii менее трех-четырех месяцев назад до момента исследования, возможно наличие первичного инфицирования;
Выявление антител класса IgG с высокой авидностью свидетельствует об инфицировании возбудителем Toxoplasma gondii три-четыре и более месяцев назад до момента исследования, отсутствие первичного инфицирования;
Обнаружение материнских антител класса IgG к Toxoplasma gondii у новорождённых в первые шесть месяцев жизни.

Отсутствие инфицирования возбудителем Toxoplasma gondii;
Отсутствие или снижение иммунного ответа у лиц с иммунодефицитными состояниями, пациентов после трансплантации органов, ВИЧ-инфекцией;
При отрицательном результате исследования, но при сохраняющемся подозрении на острую токсоплазменную инфекцию рекомендуется проведение повторного теста через две недели.

Что может влиять на результат?

Возраст обследуемых лиц: у новорождённых детей в первые шесть месяцев жизни возможно обнаружение в крови материнских антител класса IgG к возбудителю Toxoplasma gondii;
Длительность заболевания от момента первичного инфицирования возбудителем Toxoplasma gondii;
Нарушения со стороны иммунной системы, аутоиммунные заболевания, иммунодефицитные состояния, ВИЧ-инфекция.

Диагностика токсоплазмоза, вызванного T. gondii, основана на сочетании анамнестических, клинических данных, результатах инструментального и лабораторного обследования;
Определение авидности антител необходимо производить при положительных результатах выявления антител классов IgM и/или IgG к антигенам возбудителя Toxoplasma gondii;
При обнаружении антител с пограничной (средней) авидностью необходимо повторить исследование через две-четыре недели;
У новорождённых детей в первые шесть месяцев жизни возможно обнаружение в крови материнских антител класса IgG к возбудителю T. gondii, что делает затруднительным и в ряде случаев нецелесообразным проведение данного исследования на авидность. У лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией результат исследования может быть недостоверным вследствие низкого уровня антител класса IgG. В данном случае рекомендуется проведение дополнительных тестов по выявлению токсоплазмоза

36 Toxoplasma gondii, IgG (количественно)

28 Toxoplasma gondii, IgM

42 Toxoplasma gondii, IgА

33 Toxoplasma gondii, ДНК [реал-тайм ПЦР]

77 Антитела к Toxoplasma gondii (IgG) с определением авидности

Кто назначает исследование?

Акушер-гинеколог, инфекционист, педиатр, терапевт, врач общей практики, офтальмолог, невропатолог, анестезиолог-реаниматолог.

Литература

Rahbari AH1, Keshavarz H, Shojaee S, Mohebali M, Rezaeian M IgG avidity ELISA test for diagnosis of acute toxoplasmosis in humans / Korean J Parasitol. 2012 Jun;50(2):99-102.
Emelia O, Rahana AR, Mohamad Firdaus A, Cheng HS, Nursyairah MS, Fatinah AS, Azmawati MN, Siti NA, Aisah MYIgG avidity assay: a tool for excluding acute toxoplasmosis in prolonged IgM titer sera from pregnant women / Trop Biomed. 2014 Dec;31(4):633-40.
Fauci, Braunwald, Kasper, Hauser, Longo, Jameson, Loscalzo Harrison’s principles of internal medicine, 17th edition, 2009.
Покровский В.И., Творогова М.Г., Шипулин Г.А. Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Справочник / М. : БИНОМ. – 2013.
Шувалова Е.П. Инфекционные болезни / М.: Медицина. – 2005. – 696 с.

Токсоплазма (Toxoplasma gondii) – это внутриклеточный паразит, размножающийся в полости кишечника кошек, но часть жизненного цикла он может провести в организме человека и любого теплокровного животного. Согласно исследованиям примерно трети людей на планете заражены токсоплазмой. Однако, если у взрослых и у детей сильный иммунитет, паразит не проявляет симптомов болезни, а сама болезнь проходит без осложнений. В случае заражения ослабленного организма могут наступить тяжелые нейрологические патологии и даже смерть.

На поверхности мембраны токсоплазмы находятся молекулы – антигены, по ним иммунокомпетентные клетки человека распознают паразита и начинают вырабатывать антитела, которые связываются с антигенами, нарушают структуру мембраны, и клетка токсоплазмы погибает. Прочность, с которой антитела связываются с антигенами, называют авидностью антител.

Индекс авидности

Для лабораторной диагностики важна авидность антител igg, так как дает возможность определять, когда произошло заражение пациента. Авидность антител igg к toxoplasma gondii количественно оценивается с помощью индекса, который выражается в долях или процентах.

Индекс авидности к токсоплазме показывает число антител из ста, которые крепко связываются с мембранами токсоплазм.

Виды авидности

Авидность антител igg к токсоплазмозу имеет три варианта:

Высокая, когда индекс выше 40% (0,4). Она означает, что токсоплазмоз перенесен не менее четырех месяцев назад. В данном случае можно утверждать, что у человека мощная иммунная защита от повторного инфицирования.
Низкая – менее 30% (0,3). Это свидетельствует о том, что с момента первичного инфицирования произошло менее трех месяцев. Антитела постепенно разрушаются, а им на смену иммунокомпетентными клетками синтезируются высокоавидная разновидность, которая сохраняется в организме на протяжении всей жизни.
Средняя (серая зона) – 31-40% (0,3 – 0,4). Данные антитела являются переходными, так как в крови человека одновременно циркулируют обе разновидности, что не дает возможности точно определять давность инфицирования. Таким образом, пациенту необходимо еще раз сдать анализ через две-четыре недели.

Токсоплазма при беременности

Анализ на авидность к токсоплазме имеет большое значение во время беременности, так как риск нарушений в развитии плода особо высок при первичной инфекции в сравнении с хронической или скрытой формой.

Если при беременности у женщины диагностируется токсоплазма, то родить полноценного человека, шансов мало. Но все последующие дети будут защищены образовавшимися антителами.

Целесообразно проводить обследование при планировании беременности. Если при расшифровке результатов обнаружен IgG, то плод будет защищен. Если результат отрицателен, то нужно быть осторожной, проводить все мероприятия по профилактике.

Расшифровка анализа у грудничков имеет свою специфику и позволяет определить наличие или отсутствие врожденного токсоплазмоза.

Лаборатория ИНВИТРО берет материала на анализ у мужчин, женщин, детей, быстро и качественно проводит исследование. При этом цены у нас вполне доступные.

Единицы измерения: результаты теста приводят в виде процентов авидности. В комментарии дают заключение по вероятности недавнего первичного инфицирования.

Проценты авидности Toxo-IgG-антител:

> = 60 % - присутствие высокоавидных Toxo-IgG-антител - результат позволяет исключить первичное инфицирование Toxoplasma gondii в течение последних 4 месяцев;

50- 60 % - пограничная авидность Toxo-IgG-антител в пробе; рекомендуется повторить исследование через 2 недели.

Для gondii: этот результат говорит о наличии устойчивого иммунитета.

Повтор через 2 недели. Появление (сероконверсия) подтверждает первичную инфекцию. Отсутствие IgG через 2-3 недели говорит о вероятности неспецифического результата в тесте

Провести исследование авидности антител

Исследование авидности IgG антител

Авидность IgG низкая

Авидность IgG высокая

Вероятность первичного инфицирования в период беременности нельзя исключить

Вероятность недавнего первичного инфицирования (за предшествующие 3-4 месяца) можно исключить

Токсоплазмоз входит в группу репродуктивно значимых инфекций, обозначаемых как TORCH-комплекс (название образовано начальными буквами в латинских наименованиях - Toxoplasma, Rubella, Cytomegalovirus, Herpes); первичное инфицирование данными возбудителями, либо обострение уже имеющейся хронической инфекции из этой группы во время беременности является потенциально опасным для развития плода. По возможности, обследование на TORCH целесообразно проходить за 5-6 месяцев до планируемой беременности, чтобы иметь представление о состоянии иммунитета по отношению к ним, при необходимости провести лечение, либо обеспечить профилактику и контроль. Обследование на TORCH-комплекс входит в план обследования женщин в период беременности.

Подтверждение или исключение факта недавнего инфицирования особенно важно при обследовании беременных женщин, поскольку именно при первичном инфицировании во время беременности высок риск вертикальной передачи инфекции и развития патологии плода. Использование авидности IgG-антител в качестве индикатора срока первичного инфицирования в настоящее время введено в практику серологических исследований на TORCH-инфекции.

Авидность (лат. - avidity) - характеристика прочности связи специфических антител с соответствующими антигенами (определяется числом связывающих участков и силой связывания). В ходе иммунного ответа организма на проникновение инфекционного агента стимулированный клон лимфоцитов начинает вырабатывать сначала специфические IgM-антитела, а несколько позже и специфические IgG-антитела. IgG-антитела обладают поначалу низкой авидностью. Затем развитие иммунного процесса постепенно (это могут быть недели или месяцы) идёт в сторону синтеза лимфоцитами высокоавидных IgG-антител, более прочно связывающихся с соответствующими антигенами и, соответственно, более надежно их элиминирующих. Высокая авидность специфических IgG-антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование.

В основе теста на авидность IgG антител лежит метод дифференциации высоко- и низкоавидных антител с помощью обработки комплексов антиген-антитело раствором, вызывающим денатурацию белка. После такого воздействия связь низкоавидных антител с антигеном нарушается, а высокоавидных – сохраняется. Авидность IgG-антител в пробе оценивают с помощью расчетного показателя – индекса авидности, который представляет собой отношение результата определения концентрации IgG-антител, включающего стадию обработки диссоциирующим раствором, к результату измерения концентрации IgG-антител без такой обработки.

Положительные результаты IgM целесообразно перепроверять с применением иных технологий и/или с помощью теста на авидность антител. Выявление в крови высокоавидных IgG антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование. Низкоавидные IgG-антитела обычно характерны для первых 3-5 месяцев от начала инфекции (это может в определенной степени зависеть от чувствительности метода определения), но иногда они вырабатываются и в течение более длительного срока. Само по себе выявление низкоавидных IgG-антител не является безусловным подтверждением факта свежего инфицирования, но служит дополнительным подтверждающим свидетельством в ряду остальных серологических тестов и клинико-анамнестических данных.

Следует иметь в виду, что у новорожденных и грудных детей в период до полугода и более в крови присутствуют пассивно приобретенные IgG материнского происхождения, поэтому интерпретация результатов исследования IgG и авидности IgG в этом возрасте затруднительна. У иммунокомпрометированных лиц (в т.ч. СПИД) уровень антител часто низок, иногда неопределим. В этих случаях следует дополнительно использовать ПЦР-методы.

Выявление в сыворотке одновременно IgG- и IgM-антител обычно трактуют как свидетельство недавнего первичного инфицирования, поскольку, как известно, срок исчезновения IgM-антител обычно составляет около 3 месяцев от начала инфекционного процесса. Но период циркуляции IgM антител может значительно варьировать в зависимости от инфекционного возбудителя и индивидуальных особенностей иммунного ответа организма. При инфицировании Toxoplasma gondii следовые количества IgM-антител в некоторых случаях выявляются в течение 18 месяцев и более. Кроме того, специфичность даже лучших коммерческих тест-систем для обнаружения IgM-антител не абсолютна. В некоторых ситуациях, как следствие очень высокой чувствительности тестов, возможны неспецифические ложноположительные результаты (сывороточные интерференции в пробах беременных – далеко не редкость). Таким образом, присутствие специфических IgM антител в крови беременной женщины не всегда является подтверждением первичного инфицирования в период беременности. Положительные результаты IgM целесообразно перепроверять с применением иных технологий и/или с помощью теста на авидность антител. Выявление в крови высокоавидных IgG антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование. Низкоавидные IgG-антитела обычно характерны для первых 3-5 месяцев от начала инфекции (это может в определенной степени зависеть от чувствительности метода определения), но иногда они вырабатываются и в течение более длительного срока. Само по себе выявление низкоавидных IgG-антител не является безусловным подтверждением факта свежего инфицирования, но служит дополнительным подтверждающим свидетельством в ряду остальных серологических тестов и клинико-анамнестических данных.

Читайте также:

Определение IgG и IgM в первичном исследовании.

Профилактика. Контроль 1 раз в триместр.