Антигенная структура гонореи. Антигены гонококков. Генетические характеристики гонококков. Плазмиды гонококков.

Добавил пользователь Дмитрий К.
Обновлено: 14.12.2024

Медицинская микробиология:

Гонококк (Neisseria gonorrhoeae): морфологические и культурально-биохимические свойства

Бактерии рода нейссерий (Neisseria) входят в семейство Neisseriaceae. Семейство и род обязаны своим названием немецкому ученому Альберту Нейссеру (A. Neisser), в 1879 г. впервые описавшему гонококк, обнаруженный в гное больного гонореей. Виды рода нейссерий обитают на слизистых оболочках теплокровных — человека и животных. Клетки нейссерий имеют шаровидную форму (кокки), размером — до 1,8 мкм в диаметре, не имеют жгутиков, не образуют спор, некоторые виды иногда формируют защитную капсулу.

Для клеток большинства нейссерий характерно расположение в виде пар и/или тетрад. Нейссерии грамотрицательны. Представители рода нейссерий в той или иной мере прихотливы к условиям культивирования и быстро погибают во внешней среде. Нейссерии — аэробы или факультативные анаэробы; некоторые виды требуют повышенного содержания углекислого газа в атмосфере при культивировании. Биохимическая активность у разных видов неодинакова, но для всего рода характерно наличие оксидазы и каталазы.

Безусловно патогенными видами для человека являются гонококк (Neisseria gonorrhoeae) и менингококк (Neisseria meningitidis), представленные в настоящей главе. Ряд других видов рода способны вызывать заболевания у лиц с нарушениями иммунной системы, т.е. могут стать возбудителями оппортунистической инфекции. Они будут описаны в соответствующих разделах книги 3 настоящего Руководства, а в этой главе упоминаются в связи с необходимостью дифференциации патогенных нейссерий и нейссерий-комменсалов слизистых оболочек респираторного и генитального трактов.

Гонококк (Neisseria gonorrhoeae), как уже говорилось выше, был впервые описан А.Нейссером в гное больного гонореей в 1879 г. и выделен в чистой культуре Leistikow и LOeffler в 1882 г. Гонококк обитает только у человека и вызывает заболевание — гонорею. Передается при сексуальном контакте, поражает мочеполовые органы, реже слизистые оболочки прямой кишки, ротоглотки и глаза. Возможно заражение новорожденных во время родов от больных матерей с развитием острого воспаления конъюнктивы — бленнореи.

Гонококк (Neisseria gonorrhoeae)

а) Морфологические и культурально-биохимические свойства. Клетки гонококка — диплококки, по форме сходны с кофейными зернами или бобами, вогнутыми поверхностями обращенными друг к другу. Их размеры: 1,6-1,8 мкм — в длину и 0,6-0,8 мкм — в ширину.

Парное расположение особенно присуще клеткам в патологическом материале (гной, экссудат); при повторных пересевах культур склонность к образованию пар кокков утрачивается.

Как и все нейссерии, гонококки не имеют жгутиков, не образуют спор. В организме человека могут образовывать капсулоподобную структуру, содержащую полифосфат; ее пронизывают перитрихиально расположенные пили, одиночные или собранные в пучки. Пили — длинные (от 0,5 до 4,0 мкм) и очень тонкие нити (толщиной в несколько нм), поэтому их можно увидеть только в электронном микроскопе. Пили обеспечивают адгезию (прикрепление) гонококка к поверхности эпителия, фагоцитов и сперматозоидов, а также сцепление клеток друг с другом. Их сокращения ответственны за «дергающееся» передвижение гонококков по плоской поверхности.

Пили состоят из белка пилина, изменчивого и непостоянного даже у одного и того же штамма. На некоторых этапах инфекционного процесса пили у гонококка могут отсутствовать.

Гонококки грамотрицательны, но при окрашивании по Граму иногда неравномерно обесцвечиваются спиртом, что требует применения «щадящего» метода окраски в модификации Г.П.Калины.

Клеточная стенка гонококка, как и всех грамотрицательных бактерий, имеет трехслойное строение. Внешний слой ее называется наружной мембраной. Наружная мембрана — важнейшая и сложнейшая органелла клетки любой патогенной бактерии. Она содержит разнообразные биологически активные молекулы, необходимые для жизнеобеспечения клетки, а также играющие роль факторов патогенности и являющиеся специфическими антигенами. В состав наружной мембраны гонококка входят белки порины, которые формируют поры в клеточной стенке, необходимые для прохождения воды и жизненно важных соединений.

В наружной мембране находятся так называемые белки мутности колоний — Ора-белки, весьма вариабельные и играющие существенную роль как факторы патогенности. Далее, в состав наружной мембраны входят железосвязывающие белки. Ионы этого необходимого гонококку металла передаются специальной системой белков в нижние слои клеточной стенки и в цитоплазму. В наружной мембране гонококка содержится и ряд других белков, способствующих его патогенности, о чем будет сказано ниже.

Важнейшим компонентом наружной мембраны гонококка является липоолигосахарид (ДОС), аналогичный липополисахариду (ЛИС) других грамотрицательных бактерий. ЛОС нейссерий отличаются от ЛПС отсутствием длинных полисахаридных цепей, примыкающих к сердцевинной части молекулы. Сердцевинная часть ЛОС содержит ядовитый липид А, а также от 1 до 6 сахаров с разной длиной углеродной цепочки. ЛОС полифункционален. Он играет важную роль и как фактор патогенности, и как стимулятор иммунного ответа (см. ниже). Липоолигосахариды — высокомолекулярные соединения. Они способны отрываться во внешнюю среду вместе с частями клеточной стенки в виде «пузырей» как и у менингококка.

Под наружной мембраной имеется периплазматическое пространство, пронизанное нитями пептидогликана — высокомолекулярного токсического гликопротеида. Этот слой обеспечивает ригидность клеточной стенки гонококка и сохранение им шарообразной формы. Под пептидогликановым слоем располагается цитоплазма. Ее внешняя сторона — цитоплазматическая мембрана представляет собой третий, внутренний, слой клеточной стенки гонококка.

Гонококк (Neisseria gonorrhoeae)

Цитоплазма гонококка имеет нуклеоид, содержащий генетический аппарат, и обычные для бактериальной клетки включения — рибосомы, мезосомы и т.д.

Гонококк является практически абсолютным паразитом. Для своего развития он утилизирует питательные вещества непосредственно из организма человека. Для построения белков он использует готовые аминокислоты. По потребностям в аминокислотах гонококки можно разделить на ауксотипы. Гонококк считается аэробом, хотя в тканях он развивается и в анаэробных условиях. Значительную часть энергии он получает, разлагая глюкозу путем оксидации. Нуждается в лактате, источниках железа, витаминах и других ростовых факторах, пока еще не идентифицированных.

Гонококк не растет на простых питательных средах. Для его культивирования используют питательные среды, богатые продуктами триптического расщепления белков (пептиды, аминокислоты), и дрожжевой аутолизат, содержащий витамины. Обязательно добавление к средам нормальной сыворотки, крови или яичного желтка. Эти ингредиенты являются источниками железа, витаминов и ростовых факторов.

При культивировании гонококк крайне требователен к температурным условиям; при малейшем отклонении от 36-37°С его рост прекращается, и культура погибает. Оптимум pH сред — 7,2. Развитие гонококка заметно улучшается во влажной атмосфере, содержащей 5-7% СО2.

При соблюдении всех необходимых условий культивирования через 24-48 ч после посева на агаровых средах вырастают нежные выпуклые круглые (1 мм в диаметре) бесцветные колонии. На кровяном агаре колонии сероватого цвета и не дают гемолиза. Гонококки никогда не образуют пигмента. На сывороточном агаре колонии бесцветны, почти прозрачны. Микроскопия с использованием косого освещения колоний, выращенных на прозрачных питательных средах, позволяет различить несколько типов колоний — мутных, прозрачных, более или менее темных и др. Как оказалось, вид колоний зависит от наличия или отсутствия поверхностных белковых структур — пилей, Ора-белков. На обычно применяемых средах колонии неразличимы.

Гонококк мало активен биохимически — кроме присущих всем нейссериям оксидазы и каталазы, обладает способностью разлагать только глюкозу до кислых продуктов без газа.

б) Устойчивость к факторам внешней среды. Из всех видов нейссерий гонококк наименее устойчив во внешней среде. При температуре свыше 56°С погибает в течение 5 мин, при 100°С — моментально. Склонен к аутолизу в посевах, материале от больного вне организма (гной, моча), быстро гибнет при высыхании. Микроорганизм чувствителен к большинству обычно применяемых дезинфицирующих средств. Изначально вид был высоко чувствителен к сульфаниламидам и широкому спектру антибиотиков, прежде всего к пенициллину и его производным.

Нерациональное применение химиотерапии привело к возникновению и распространению сульфаниламидоустойчивых штаммов, а в последние годы отмечено повышение устойчивости гонококка к пенициллинам, тетрациклинам и другим широко применявшимся препаратам. Большая часть циркулирующих штаммов пока еще чувствительна к фторхинолонам, макролидам, цефалоспоринам третьего поколения, спектиномицину. Гонококк естественно устойчив к ристомицину, линкомицину, ванкомицину, полимиксину.

Частная мб (кроме грибов) / занятие 10 Гонорея. Гонококк

Возбудителем гонореи является Neisseria gonorrhoeae - в рабочем порядке - гонококк.

Гонококки представляют собой бобовидные формы кокки, располагающиеся попарно вогнутыми поверхностями друг к другу. По Гр(-), неподвижны, спор не образуют, имеют фимбрии, выполняющие функцию адгезии. Под действием неблагоприятных факторов морфологические и тинкоториальные свойства гонококков могут меняться. Могут образовывать L форму. Возбудители гонореи - хемоорганотрофы, требовательны к условиям культивирования, на простых средах не растут, их можно культивировать на средах, содержащих кровь, сыворотку крови или асцитическую жидкость. Оптимум температуры - 37 градусов. Рост гоннококов стимулируется при повышенной концентрации углекислого газа. На плотных средах они образуют прозрачную с ровным краем и поверхностью блестящие колонии S типа.

Биохимические свойства выражены слабо. Из углеводов расщепляют только глюкозу до кислоты. Обладают оксидазной и каталазной активностью. Антигенная структура гонококков гетерогенна и изменчива. Общепринятого деления на серогруппы и варианты не существует. Во внешней среде возбудители гонореи мало устойчивы, быстро погибают при высыхании, действии высоких температур, прямых солнечных лучей. Гонококки чувствительны к растворам нитрата серебра, пермангоната калия, хлоргексидина. В капле гноя на влажных предметах гонококки могут оставаться жизнеспособными в течении суток.

К факторам патогенности можно отнести фимбрии, посредствам которых возбудитель прикрепляется к клетке, наружные белки клеточной стенки, обладающие инвазивными свойствами, а также эндотоксин липополисахаридной природы.

Патогенез - типичное антропонозное заболевание. Источник - больной человек. Основной путь передачи - половой, крайне редко бывает контактно-бытовой. Гонококки вызывают острое гнойное воспаление органов мочеполовой системы. У мужчин в остром случае поражается слизистая оболочка уретры. Со временем может принять восходящий характер, при отсутствии адекватного лечения может вовлекаться предстательная железа, семенные пузырьки, придатки яичек. У женщин гонококки поражают уретру и цервикальный канал. Здесь возможна восходящая инфекция, могут страдать маточные трубы, яичники вплоть до развития перитонита в малом тазу. Крайне редко - генерализация инфекции. При этом возбудитель поступает в кровь, разносится по всему организму, развивается специфический артриты, эндокардиты, менингит, гонококковый сепсис.

Гонорея может развиваться не только в мочеполовых путях. Процесс может локализоваться и в прямой кишке. У новорожденных может вызывать гнойный коньюктивит - бленнорея новорожденных. Если мама больна гонореей, то ребенок может поймать на коньюктиву гонокок.

Иммунитет - перенесенное заболевание не создает невосприимчивости. Образующиеся в течении болезни антитела не обладают защитными свойствами. При гонорее отчетливо выражен фагоцитоз. Он носит незавершенный характер.

Лабораторная диагностика - при острой гонорее - основным методом лабораторной диагностики является бактериоскопический. У мужчин исследуют отделяемое уретры, у женщин - уретры и цервикального канала. Из клинического материала готовят микропрепараты и окрашивают их метиленовым синим и по Грамму. Обнаружение при микроскопии - бобовидной формы Гр(-) диплококков, расположенных внутриклеточно, подтверждает диагноз с вероятностью 99,9%.

При хронической форме - бактериоскопия очень часто дает отрицательный результат. Поэтому при ее диагностики используют бактериологический метод, как и при диагностике у детей. Перед исследованием проводят провокацию - искусственное обострение процесса - гонококковая вакцина. Она вводится внутримышечно 3 раза с интервалом в сутки, что приводит к обострению процесса. Посев материала делается на специальные среды для культивирования гоннококов, а выделенная культура идентифицируется по морфологическим, тинкториальным и биохимическим свойствам. При хронической также серологический метод. В этом случае используют либо РСК - Борде - Жангу, или РНГА. Профилактика и лечение - средств специфической профилактики не существует. Раствор хлоркесидина(0,05%). Для профилактик блинореи у новорожденных всем детям на коньюктиву капают пенициллин, нитрат серебра.

Лечение - антибиотики - макролиды, цефалоспорины, пенициллины. При хронической - еще входит гоновакцина(как лечебный препарат - инактивированная корпускулярная вакцина, которая готовится в среднем из 10 штаммов гонококка.) Также используется как диагност - когда вводят - либо обострение - не вылечены.

Гонококк - возбудитель гонореи - венерического заболевания с воспалительными проявлениями в моче- половых путях. Субстрат для колонизации - эпителий уретры, прямой кишки, конъюнктивы глаза, глотки, шейки матки, маточных труб и яичника.

Диплококки, хорошо окрашиваемые метиленовым синим и другими анилиновыми красителями, плеоморфные (полиморфизм). Очень прихотливы к условиям культивирования и питательным средам. Из углеводов ферментируют только глюкозу.

Антигенная структура очень изменчива - характерны фазовые вариации (исчезновение антигенных детерминант) и антигенные вариации (изменение антигенных детерминант). Основную антигенную нагрузку несут детерминанты пилей и поверхностных белков. С высокой антигенной изменчивостью связано отсутствие иммунной защиты против повторного заражения. Наибольшее антигенное родство - с менингококками.

Факторы патогенности. Основными факторами являются пили, с помощью которых гонококки осуществляют адгезию и колонизацию эпителиальных клеток слизистой оболочки моче- половых путей, и липополисахарид (эндотоксин, освобождающийся при разрушении гонококков). Гонококки синтезируют IgAI- протеазу, расщепляющую IgA.

Генетика. Характерна генетическая изменчивость, даже на протяжении жизни одной микробной популяции. Передача информации осуществляется преимущественно конъюгацией. Выявлены F- и R- плазмиды, в т.ч. плазмиды, несущие ген бета - лактамазы.

Лабораторная диагностика. Бактериоскопическая диагностика включает окраску по Граму и метиленовым синим. Типичные признаки гонококка - грамотрицательная окраска, бобовидные диплококки, внутриклеточная локализация. При антибиотикотерапии, хронической гонорее и некоторых других случаях как морфологические признаки, так и отношение к окраске по Граму может изменяться. Более достоверна люминесцентная диагностика с использованием прямого и непрямого иммунофлюоресцентного анализа.

Посев производят на специальные среды (КДС-МПА из мяса кролика или бычьего сердца с сывороткой, асцит- агар, кровяной агар). Характерные признаки гонококка при бактериологической диагностике - грамотрицательные диплококки, колонии которых на плотных средах обладают оксидазной активностью. Ферментируют глюкозу, но не мальтозу или сахарозу

Гонококк1

Возбудителя гонореи - инфекционного венерического заболевания с воспалительными проявлениями в мочеполовых путях открыл Альберт Нейссер в 1879 г. Первые культуры получили Лейстков и Леффлер (1882 г.), этиологическую роль доказал Бумм (1885).

Таксономия.

Семейство - Neisseriaceae Род - Neisseria Вид - N. gonorrhoeae

Морфология.

В свежих культурах гонококки представляют собой диплококки бобовидной формы, размером 1,25-1,0 х 0,7-0,8 мкм., образующие микрокапсулу. Жгутиков не имеют, спор не образуют. Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями (метиленовым синим, бриллиантовым зеленым и др.). По Граму окрашиваются отрицательно. Образуют L- формы, в том числе и под действием пенициллина. Под влиянием химиопрепаратов могут быстро менять свойства и образовывать грамположительные формы. По наличию пилей гонококки разделяются на 5 типов. Ранее их обозначали Т1-Т5, сейчас Р + ,Р ++ , Р +++ … Бактерии типов Р + ,Р ++ снабжены нитями, имеют капсулу и вирулентны, бактерии прочих типов авирулентны.

В составе клеточной мембраны (стенки) содержится до 60 % белка I, на его основе осуществляется серотипирование гонококком методом ИФА. Кроме белка I, имеется белок II, который определяет специфичность клинических проявлений заболевания.

Культуральные свойства.

По типу дыхания - аэробы. Хемоорганотрофы. Требовательны к питательным средам. Растут на свежеприготовленных, влажных питательных средах с добавлением нативного белка (кровь, сыворотка, асцитическая жидкость). Оптимум рН 7,2-7,4; температуры - 37 0 С. Большинство свежевыделенныхштаммов для роста нуждаются в присутствии в атмосфере 4-10% СО2. При дальнейшем культивировании эти свойства утрачиваются.

На плотных питательных средах через 24 часа инкубирования гонококки, содержащие в клеточной стенке белок II, образуют прозрачные колонии в виде капелек росы (диаметром 1-3 мм) с ровным краем.

На жидких питательных средах растут диффузно и образуют поверхностную пленку, через несколько дней оседающую на дно.

Биохимическая активность.

Гонококки разлагают только глюкозу с образованием кислоты, образуют каталазу и цитохромоксидазу - типичные для нейссерий ферменты. Протеолитических свойств не имеют (аммиак, сероводород, индол не образуют), не вызывают гемолиза на кровяном агаре, на средах с добавлением молока, желатина и картофеля не растут.

Антигенная структура.

а) капсульные антигены;

в) белки клеточной оболочки - на их основании выделяют 16 антигенных серотипов;

Факторы патогенности.

Токсины. Гонококки не продуцируют экзотоксинов. Клеточная стенка содержит липополисахарид - эндотоксин, который оказывает токсическое воздействие.

- Структурные и химические компоненты:

а) капсула - обладает антифагоцитарным свойством, препятствует прямому контакту бактерицидных веществ с клеточной стенкой, маскирует ее антигенные детерминанты;

б) пили - обеспечивают адгезию гонококков к клеткам эпителия, что имеет решающее значение в развитии инфекции;

в) Ig А1 - протеаза. Гонококки синтезируют Ig А1 - протеазу, действующую внеклеточно и разрушающую пропин-треониновые связи в тяжелых цепях Ig, а также расщепляющую молекулу Ig в шарпирной части. Эти эффекты инактивируют антитела, препятствующие адгезии, что облегчает приклепление гонококков к рецепторам эпителиальных клеток, а также защищает их от фагоцитоза, опосредованного антителами;

г) способность к синтезу β - лактамаз.

Резистентность.

Гонококки неустойчивы во внешней среде, вне организма человека быстро погибают. При нагревании до 56 0 С гибнут за 5 мин., низкие концентрации перманганата калия (1:50) и нитрата серебра (1:10000), сулемы, карболовой кислоты губительно влияют на гонококков. Последние плохо переносят высушивание, УФЛ. Они чувствительны к антибиотикам (β - лактамные, аминогликозиды). Однако повышение заболеваемости гонореей связывают и с появлением пенициллинорезистентных штаммов гонококков.

Эпидемиология.

Источник инфекции - больной человек. Основной путь заражения - контактный половой, возможно инфицирование плода при прохождении через инфицированные родовые пути матери. Отмечены редкие случаи заражения при несоблюдении элементарных правил личной гигиены. Врожденная невосприимчивость отсутствует.

Роль в патологии

Гонококки вызывают гонореюу мужчин и женщин и являются возбудителями бленнореи новорожденных.

Патогенез

Гонорея - инфекционное венерическое заболевание, проявляющееся воспалением слизистых оболочек преимущественно половых путей. Термин гонорея (от греч. gone - семя, +rhoia - истечение) ввел К. Гален во II в. н.э. В настоящее время гонорея - одно из наиболее распространенных инфекционных заболеваний. Гонококки поражают, в основном, клетки цилиндрического эпителия. У новорожденных могут вызывать бленнорею (конъюктивит). При экстрагенитальной локализации могут поражать прямую кишку и миндалины.Они

прикрепляются к цилиндрическому эпителию уретры, влагалищной части шейки матки, прямой кишки, конъюктивы глаза, а также к сперматозоидам и простейшим (трихомонады, амебы). Адгезия происходит за счет пилей и белков наружной мембраны клеточной стенки. Характерной особенностью гонококков является их способность проникать в лейкоциты и размножаться в них. Липополисахаридная часть клеточной стенки бактерий оказывает токсическое действие на организм человека. Капсулярные полисахариды подавляют фагоцитоз. Соединяясь с ворсинками цилиндрического эпителия слизистой уретры, а у женщин - и эндоцервикального канала, гонококки проникают внутрь клетки при участии белков наружной мембраны клеточной стенки. Это приводит к развитию острого уретрита, цервицита и поражению у женщин шейки матки, воспалению придатков (трубы, яичники), у мужчин происходит воспаление семенных семенных пузырьков, предстательной железы.

Иммунитет.

После перенесенного заболевания иммунитет не вырабатывается. Врожденная невосприимчивость к гонорее отсутствует, возможны супер- и реинфекции. Единственный чувствительный организм - человек. До сих пор остается неясным вопрос, почему антитела, определяемые в сыворотке больного (агглютинины, преципитины, опсонины), не обеспечивают защиту от повторного заражения.

Профилактика. Средства специфической иммунопрофилактики отсутствуют, что обусловлено высокой антигенной изменчивостью гонококков. Гоновакцина, на которую возлагалось много надежд, оказалась неэффективной. Общая профилактика основана на мерах предупреждения венерических заболеваний. Для предупреждения гонобленореи новорожденным сразу после рождения закапывают в конъюктивальный мешок (девочкам также в половую щель) 1-2 капли раствора сульфацила натрия или антибиотика (пенициллины, цефалоспарины)

Лечение.

Основу терапии составляет антимикробная терапия. Препараты выбора - сульфаниламиды и антибиотики, подавляющие жизнедеятельность гонококков (β - лактальные антибиотики, аминогликозиды). Для лечения хронических или осложненных форм гонореи используют гоновакцину.

Микробиологическая диагностика.

Наиболее распространенным методом является бактериоскопическое исследование. Выделение чистой культуры проводится сравнительно редко, главным образом, при хронической гонорее, когда бактериоскопия дает отрицательный результат. Кроме того, в настоящее время используют РИФ и ПЦР. Серодиагностика при хронической гонорее (РСК) проводится редко

81. Гонококки. Таксономия. Характеристика. Микробио­логическая диагностика гонореи. Лечение.

Нейсcерии - грамотрицательные аэробные кокки, относящиеся к роду Neisseria, включающему 8 видов: Neisseria meningitides, Niesseria gonorrhoeae, N. flava, N. subflava, N. perflava, N. sicca.

Морфология: неподвижные неспорогенные грамотрицательные диплококки, образующие капсулу, полиморфны - встречаются в виде мелких или крупных форм а так же в виде полочек, хорошо окрашиваются анилиновыми красителями (метиленовым синим, бриллиантовым зелёным и т. д.), под действием пенициллина образуют L-формы, могут менять свойства и превратиться в грамположительную форму.

Культуральные свойства: аэробы, хемоорганотрофы; для роста требуют свежеприготовленные влажные среды с добавлением нативных белков крови, сыворотки или асцитической жидкости . Не вызывают гемолиза на средах, содержащих кровь; на средах с добавлением молока, желатина и картофеля не растут. На плотных питательных средах через 24ч, при содержании протеина II образуют слегка мутные бесцветные колонии, не содержащие его образуют круглые прозрачные колонии в виде капель росы, на жидких питательных средах растут диффузно и образуют плёнку, через несколько часов оседающую на дно.

Биохимическая активность: крайне низкая - разлагают только глюкозу, продуцируют каталазу и цитохромоксидазу, протеолитическая активность отсутствует, H2S, аммиака, индола не образует.

Антигенная структура: Содержит А и К антигены, ЛПС обладают сильной иммуногенностью, основную антигенную нагрузку несут пили и белки мембраны. Наружная мембрана содержит протеины I, II, III классов, проявляющих сильные иммуногеннные свойства

Факторы патогенности: капсула, пили, эндотоксин, белки мембраны

Капсула обладает антифагоцитарным действием. Пили обеспечивают адгезию к эпителию. Клеточная стенка содержит эндотоксин. Поверхностный белок I класса - обеспечивает устойчивость к бактерицидным факторам слизистых оболочек. Класса II - (протеины мутности, ОРА-протеины) обуславливают прикрепление к эпителию, препятствуют фагоцитозу. N. синтезируют IgA протеазу, расщепляющую Ig.

Резистентность: очень неустойчивы в окружающей среде, чувствительны к действию антисептиков, высокочувствительны к пенициллинам, тетрациклину, стрептомицину. Способны к утилизации пенициллинов при приобретении бета-лактамаз.

Иммунитет - почти отсутствует.

Микробиологическая диагностика:

Бактериоскопическое исследование: Материалом для исследования служит гнойное отделяемое из уретры, влагалища, примой кишки, глотки, сыворотки крови. Готовят мазки, окраска по Граму, При «+» результате - обнаруживают гонококки - грам+ диплококки бобовидной формы., находятся внутри лейкоцитов. Положительный диагноз ставится при острой форме гонореи до применения антибиотиков.

Бактериологическое исследование. Материал засевают на чашки Петри со специальными питательными средами — КДС, сывороточным агаром. Среда КДС содержит питательный агар с добавлением в определенной концентрации казеина, дрож­жевого экстракта и сыворотки крови. Посевы инкубируют при 37°С в течение 24—72 ч. Гонококки образуют круглые прозрач­ные колонии, напоминающие капли росы, в отличие от более мутных колоний стрептококков или пигментированных колоний стафилококков, которые также могут расти на этих средах. Подо­зрительные колонии пересевают в пробирки на соответствующие среды для получения чистых культур, которые идентифицируют по сахаролитическим свойствам на средах «пестрого» ряда (по­лужидкий агар с сывороткой и углеводом). Гонококк ферментирует только глюкозу с образованием ки­слоты..

Серодиагностика. В некоторых случаях ставят РСК Борде — Жангу. В качестве антигена используют взвесь убитых гонокок­ков. Реакция Борде—Жангу имеет вспомогательное значение при диагностике гонореи. Она положительна при хронической и осложненной гонорее.

Лечение: антибиотикотерапия (пенициллин, тетрациклин, канамицин), иммунотерапия - Гонококковая вакцина - взвесь гонококков, убитых нагреванием, используется для вакцинотерапии хронической гонореи.

Антигенная структура гонореи. Антигены гонококков. Генетические характеристики гонококков. Плазмиды гонококков.

Антигены и генетика гонококка (N. gonorrhoeae)

а) Антигены гонококка. Антигенные свойства гонококка определяются белками его клеточной стенки и входящими в ее состав ЛОС. Поверхностные белки гонококка многочисленны и весьма изменчивы. Среди них вычленяют белки, общие для двух видов патогенных нейссерий (белок NspA и белок Rmp). Остальные белки являются типоспецифическими и штаммоспецифическими.

К их числу относятся порины (Por-белки или Р1). Имеются две генетические разновидности Por-белка: Р1.А и Р1.В. Внутри каждой выявлены антигенные разновидности, обозначаемые арабскими цифрами: 1,2,3 и т.д. На основании Рог-белков гонококки разделяют на серотипы, число которых постоянно увеличивается. Типовую специфичность штамма гонококка обозначают двумя символами, например, Р1.А-6 или Р1.В-1. Серотип удается выявить только при помощи моноклональных антител или генетическими методами. Крайне изменчивыми антигенами являются белки пилей.

Во-первых, они не всегда имеются; во-вторых, имеющиеся пили постоянно изменяют свою структуру и, следовательно, антигенную специфичность. Эта изменчивость проявляется и в организме больного, и при пересевах в искусственных условиях.

Такими же непостоянными являются Ора-белки. Описано до 10 вариантов Ора-белков (А, В, С, D и т.д.). При этом они или переходят один в другой (например, из Ора А в Ора В), или один штамм имеет одновременно несколько Ора-белков, или они вообще отсутствуют. Антигенными свойствами обладают также железосвязывающие белки.

Специфическим антигеном является и ЛОС, однако его антигенная активность невелика по причине сходства с гликосфинголипидами эритроцитов человека. Иммунная система «не узнает» этот антиген и не отвечает на него выработкой антител. При этом ЛОС также непостоянны, изменяя количество входящих в них сахаров.

Изменчивость антигенов гонококка позволяет ему «ускользать» от выработанных иммунной системой антител. Антигенный состав гонококка регулируется его генетическим аппаратом, получающим сигналы из окружающей среды (тканей и жидкостей человека) при ее изменениях.

Гонококк (Neisseria gonorrhoeae)

б) Генетика гонококка. Геном гонококка расшифрован, что позволило объяснить природу изменчивости его антигенов. Она связана с высокой частотой мутаций (10 3 в среднем на одну генерацию), а также с рекомбинациями — обменом между отдельными особями генетическим материалом, высвобождающимся при аутолизе клеток. Не исключаются рекомбинации и с соседствующими бактериальными клетками — представителями рода нейссерий. В процессе генетической трансформации участвуют пили, передающие экзогенную ДНК в клетку.

Возникшие новые генетические клоны, содержащие незнакомые организму больного (и контактирующих с ним лиц) антигены, получают преимущество при циркуляции среди населения и какое-то время беспрепятственно распространяются. К тому времени, когда к ним выработаются антитела, появляются новые генетические антигенные разновидности, в отношении которых эти антитела уже бесполезны.

У гонококков найдена конъюгативная плазмида размером 36 kb, а также плазмида резистентности к пенициллину (бета-лактамазная), транспозон устойчивости к тетрациклину и криптическая плазмида 4,2 kb.

в) Внутривидовое разнообразие. Изменчивость антигенов гонококка приводит к гетерогенности вида, причем его разновидности непостоянны — клоны быстро рассыпаются и дают начало новым, таким же разнообразным. Как уже указывалось, исследователям удалось все-таки выявить серотипы по пориновым антигенам, а также ауксотипы — по потребностям в ряде соединений. На основе сочетаний этих двух признаков была создана смешанная классификация вида по сероауксотипам. Их насчитывают более 70. Однако типирование гонококка на практике технически затруднительно (требует моноклональных антител и питательных сред строго определенного состава).

Читайте также: