Что такое противовирусная сыворотка

Противопоказания к вакцинации: острые заболевания сердечно-сосудистой системы, почек, печени, дыхательной и нервной систем, ряд хронических заболеваний, иммунодефициты и выраженные явления аллергии.

Бактериофаги- относятся к иммунобиологическим препаратам в которых в качестве активного начала используют фаги т.е. вирусы, пожирающие бактерии путём лизиса и инактивации. Препараты бактериофагов получают путём инфицирования фагом, выращенной в производственных условиях культуры бактерий, чувствительной к данному фагу. Затем их выделяют из культуральной жидкости фильтрата фага, концентрируют, проводят очистку и лиофильную сушку. Бактериофаги выпускают в жидком, таблетированном виде, дозируют числом вирусных частиц в1 мл или 1 таблетке, хранят при 4-8 0 С для предотвращения инактивации.

Бактериофаги применяют для профилактики и лечения ряда бактериальных, чаще кишечных инфекций (холера, брюшной тиф, дизентерия, энтероколит, дисбактериоз), гнойно-воспалительных, хирургических, кожных, урогенитальных заболеваний при возникновении ВБИ.

Препарат назначают перорально, а в случаях раневых инфекций (газовая гангрена, стафилококковая инфекция) им орошают раны. Эффект от лечения наблюдается через сутки. В нашей стране созданы комплексные препараты из 4-6 различных бактериофагов.

Лечебный и профилактический эффект фагов умеренный, поэтому их применяют в комплексе с другими лечебными и профилактическими мероприятиями. Фаги используют также в диагностике бактериальных инфекций с целью их фаготипирования.

В период Великой Отечественной войны использовали мази с бактериофагами, для лечения раненых. Бактериофаги- это вирусы паразитирующие внутри бактерий. Фаги обнаружены более чем у 100 видов бактерий. Проникая в микробную клетку, они размножаются в ней, одновременно уничтожая её. Затем они распространяются с кровотоком и, обнаруживая целевую бактерию, заражают её. Цикл повторяется до тех пор, пока не будут разрушены все подобные микроорганизмы, после чего бактериофаги выводятся из организма без вреда для человека. Они уничтожают только патогенную микрофлору и сохраняют нормальную микрофлору организма. Бактериофаги эффективны в отношении следующих микроорганизмов: протей, энтерококк, стафилококк, синегнойная палочка, стрептококк, клебсиелла и других.

Эубиотики- относятся к иммунобиологическим препаратам, представляют собой живую культуру непатогенных бактерий, относящихся к нормальным представителям микрофлоры человека. Их получают путём выращивания бактерий на искусственных питательных средах, концентрирования, сушки, стандартизации и изготовления готовой формы в виде порошка или таблеток. В качестве бактерий в эубиотиках, чаще используют наиболее распространённые, в организме человека кишечную палочку, бифидумбактерии, лактобациллы и их комбинации. Отсюда препараты эубиотиков называются “колибактерин”,“бифидумбактерин”,“лактобактерин”,“бификол”, одна доза эубиотиков составляет 10 7 -10 8 микробных клеток. В последнее время налажен выпуск кисломолочных продуктов (кефир, ряженка, йогурт), содержащие эубиотики. Эубиотики используют при заместительной терапии и профилактике т.к. они восполняют видовой и качественный состав бактерий, нарушенный в результате дисбактериоза. Препараты эубиотиков применяют перорально 2-3 раза в день длительными курсами (1-6 месяцев).

Иммуноглобулины и иммунные сыворотки.

Вакцинация обеспечивает выработку специфического активного искусственного иммунитета спустя 2-3 недели после первичной прививки и через 2-7 суток после ревакцинации. При необходимости экстренного создания иммунитета, а также для лечения уже развивающейся инфекции используют иммунные сыворотки и иммуноглобулины, содержащие готовые антитела

Иммунные сыворотки получают от иммунизированных животных (гетерологические сыворотки) или переболевших, а также вакцинированных людей. (гомологические сыворотки). Гетерологические сыворотки готовят путём гипериммунизации чаще всего лошадей т.е. путём многократного введения животным больших доз АГ. На пике антителообразования у иммунизированных животных забирают кровь, освобождают её от форменных элементов и фибрина, фильтруют и стандартизируют по концентрации АТ(антитоксинов, агглютининов, вируснейтрализующих АТ) содержанию белка и др. Из неё получают Ig путём выделения, очистки и концентрирования их ферментативным способом в сочетании с диализом. Для получения Гомологичных иммуноглобулинов и их активных фрагментов кровь иммунизированных (переболевших, вакцинированных) людей, специально вакцинированных доноров, а также плацентарную и абортную кровь.

Иммунные сыворотки, иммуноглобулины и их фрагменты подразделяются на антитоксические, антибактериальные и противовирусные.

Активность иммунных сывороточных препаратов выражают в единицах, определяемых в серологических, реакциях нейтрализации, агглютинации, преципитации и т.д.

Иммунные сыворотки и иммуноглобулины создают пассивный специфический иммунитет практически сразу после введения. Этот иммунитет сохраняется при введении гомологичных сывороток до 1- 1,5 месяцев и гетерологичных до 20-30 суток ( в организме чужеродные белки быстрее разрушаются). Иммунные сывороточные препараты вводят, как правило внутримышечно в больших дозах и как можно раньше после вероятного инфицирования.

Перед инъекцией сывороточных препаратов, обязательна постановка кожной пробы на чувствительность (сенсибилизацию) к препарату. В случае положительной пробы иммунные сыворотки вводят по Безредке.

Пассивную иммунопрофилактику применяют в случае необходимости создания экстренного иммунитета у лиц , контактировавших с больными в инфекционных очагах или при подозрении на возможное инфицирование.

Иммуномодуляторы- группа лекарственных средств, влияющих на функции иммунной системы. К ним относятся вещества химической и биологической природы, которые влияют на иммунокомпетентные клетки (Т- и В- лимфоциты) и их кооперативное взаимодействие, а также на течение иммунологических процессов, активизируя, подавляя или нормализуя их. В зависимости от этого иммуномодуляторы делят на 3 группы:

1.иммуностимуляторы; 2. иммунодепрессанты; 3.средства иммунозаместительной терапии.

К гомологичным иммуномодуляторам относят, природные вырабатываемые самим организмом вещества, участвующие в естественном процессе осуществления и регулирования иммунных процессов. К ним относятся вырабатываемые в организме человека так называемые регуляторные пептиды: интерлейкины, интерфероны, гормоны тимуса, ФНО. Они регулируют (активируют, супрессируют или нормализуют) работу отдельных этапов и весь процесс иммуногенеза в целом.

К гетерологичным иммуномодуляторам относят разнообразные по природе, источникам получения и принципам действия на иммунную систему вещества, которые не являются естественными т.е.свойсвенными организму. Они действуют на иммунокомпетентные клетки. К гетерологичным иммуномодуляторам относят некоторые антибиотики, нуклеат натрия. К иммуномодуляторам следует отнести также антилимфоцитарную сыворотку, подавляющую активность лимфоцитов и гормоны (адренокортикоидные) оказывающие общеспецифическое действие на иммунную систему.

Иммуномодуляторы в зависимости от их природы получают методами биотехнологии из растительного (женьшень), животного (антилимфоцитарная сыворотка) сырья, биосинтезом при культивировании бактерий и грибов (антибиотики и полисахариды).

Диагностические препараты – относятся к иммунобиологическим препаратам. Диагностические препараты, системы и наборы широко используют для диагностики инфекционных и неинфекционных заболевании, индикации, идентификации бактерий, вирусов, грибов, простейших для определения иммунного статуса, аллергических и иммунопатологических расстройств, иммунологической совместимости тканей, иммунных взаимоотношений матери и плода и т.п.

Диагностикумы применяются для выявления АГ иАТ,аллергенов, сенсибилизированных иммунокомпетентных клеток (Т- и В-лимфацитов), факторов естественной резестентности (компемент,интерферон, белки сыворотки крови), иммунорегуляторы (интерлейкины, интерфероны)

На основе перечисленных иммунологических реакции созданы современные диагностические системы с помощью которых диагностируются инфекционные (ВИЧ- инфекция, грипп, брюшной тиф, чума, холера, хламидиоз, вирусные гепатиты) и неинфекционные(онкологические, аллергические, иммунопатологические и др) заболевания

В условиях пандемии многие государства приступили к созданию лекарств и вакцин от нового коронавируса. Сообщается, что в России разработка прошла первую фазу — так ли это? Значит ли, что скоро можно ждать появления препарата? Чтобы разработать новое лекарство от неизвестного заболевания по всем правилам научного поиска нужно от 5 до 15 лет. Разобрали весь процесс на примере COVID-19 вместе с Равилем Ниязовым, специалистом по регуляторным вопросам и разработке лекарств Центра научного консультирования.

COVID-19 — инфекционное заболевание, вызываемое коронавирусом SARS-CoV-2. В тяжелых формах оно поражает легкие, иногда — сердце и другие органы. Особенно тяжело заболевание протекает, если у больного есть другие нарушения со стороны дыхательной или сердечно-сосудистой систем. Молниеносно возникшая пандемия COVID-19 поставила вопрос разработки лекарств и вакцин от новой инфекции. Это долгий процесс с множеством стадий, на каждой из которых исключают вещества-кандидатов. Только одно или небольшая группа таких веществ в итоге сможет стать безопасным и эффективным лекарством.

Шаг 1: понять, как развивается новое заболевание

Любая болезнь нарушает естественные физиологические и биохимические процессы в организме. Причины заболеваний могут быть разными, в том числе — инфекционными. Инфекционный агент (в случае COVID-19 это коронавирус SARS-CoV-2) заимствует и эксплуатирует биохимический аппарат клеток, перехватывая управление им, в результате чего клетки перестают выполнять свою физиологическую функцию. Для вируса SARS-CoV-2 основной мишенью являются клетки дыхательного эпителия, отвечающие за газообмен, то есть за дыхание.

Лекарством для лечения COVID-19 будет считаться любое вещество или комбинация веществ, которое будет способно (1) инактивировать вирус еще до того, как он успеет поразить клетку, или (2) нарушать жизненный цикл вируса внутри зараженной клетки, или (3) защищать новые непораженные здоровые клетки от инфицирования.

Чтобы создать лекарство от SARS-CoV-2, нужно хорошо знать, каков жизненный цикл вируса в организме человека:

• с какими клетками человека и через какие рецепторы на поверхности клеток он связывается, какой собственный вирусный аппарат для этого он использует;
• как вирус проникает в клетку;
• как вирус эксплуатирует биохимический аппарат клетки, чтобы воспроизводить собственный генетический материал и белки, нужные для сборки новых вирусных частиц;
• как вирус покидает инфицированную клетку, чтобы инфицировать новые клетки;
• как формируется иммунитет против вируса и какой вклад иммунитет вносит в тяжесть заболевания (чрезмерная иммунная реакция может вызывать тяжелое поражение внутренних органов).

Всё перечисленное — это совокупность фундаментальных знаний, необходимых для перехода к следующему этапу разработки лекарства — синтезу или биосинтезу веществ, которые могут нарушать свойства вирусных частиц, убивая вирус и при этом не вредя человеку. Например, так работают лекарства от ВИЧ-инфекции или гепатита C. Но при этих заболеваниях важно применять сразу несколько веществ из разных классов, чтобы вирус не становился устойчивым к терапии. Об этом нужно будет помнить и при разработке лекарств против SARS-CoV-2.

Для лечения вирусных заболеваний также могут использоваться иммуносыворотки, содержащие антитела, способные инактивировать вирус. Такие сыворотки можно получать от животных, например, лошадей или кроликов, но также и от человека, уже переболевшего заболеванием.

Однако самый эффективный подход — профилактика заболевания. Для этого используют вакцины — естественные или генетически модифицированные белки вируса, а иногда и живой, но ослабленный вирус. Вакцина имитирует инфекционное заболевание и стимулирует организм к формированию иммунитета. В последнее время также разрабатываются РНК- и ДНК-вакцины, но пока одобренных препаратов нет.

В отличие от традиционных вакцин, РНК-/ДНК-вакцины содержат не вирусные белки, а гены, кодирующие основные вирусные белки. Введение такой вакцины приводит к синтезу клетками белков вируса, на которые должна реагировать иммунная система и вырабатывать иммунитет против этих белков вируса. Гипотетически это должно препятствовать началу инфекционного процесса при заражении настоящим патогенным вирусом. Важно отметить, такие РНК- и ДНК-вакцины не должны кодировать те белки вируса, которые способны были бы привести к настоящей вирусной инфекции.

Шаг 2: поиск хитов

На ранней стадии разработки синтезируют и тестируют множество веществ — библиотеку. Основная цель этого этапа — найти группу хитов (hit — попадание в цель), которые бы связывались с нужной вирусной мишенью. Обычно это один из белков вируса. Иногда отбор идет из библиотек, состоящих из миллиардов низкомолекулярных веществ. Сейчас активно используют компьютерные алгоритмы — машинное и глубокое обучение — чтобы искать новые потенциально активные молекулы. Одна из компаний, успешно работающая в этом направлении, — InSilico Medicine, создана российскими математиками.

Другой источник потенциальных лекарств — выздоровевшие люди: в их крови содержатся антитела, часть из которых способны связываться с вирусом и, возможно, нейтрализовать его.

Шаг 3: поиск и тестирование лидов

Когда находят группу хитов, способную связываться с вирусным белком, переходят к следующему этапу скрининга. На этом шаге исключаются вещества, которые:

• нестабильны и быстро разлагаются;
• тяжелы/затратны в синтезе;
• токсичны для различных клеток человека в условиях лабораторных экспериментов на культуре клеток. Вещества не должны быть токсичны сами, токсичностью также не должны обладать продукты их метаболизма в организме, продукты их разложения и примеси, возникающие в процессе производства; вместе с тем если процесс производства способен с помощью очистки удалять продукты разложения или примеси, то такой хит может и не будет выведен из разработки;
• плохо растворимы в воде — лекарство должно в достаточном количестве растворяться в биологических жидкостях, чтобы распределиться по организму;
• быстро разлагаются в живом организме;
• плохо проникают через слизистые оболочки, клеточные мембраны или внутрь клетки, в зависимости от пути введения лекарства и расположения вирусной мишени.

Хиты, которые выдерживают эти испытания и проходят все фильтры, переводят в категорию лидов (lead — ведущий).

Лиды тестируют в еще более широкой серии экспериментов для принятия так называемых решений Go/No-Go о продолжении или остановке разработки. На этой стадии инициируются испытания на животных. Такая схема отбора нужна чтобы как можно раньше вывести из разработки бесперспективные молекулы, потратив на них минимальные время и ресурсы, поскольку каждый последующий этап является еще более затратным.

Те несколько лидов, которые успешно проходят очередные испытания, становятся кандидатами. К этому моменту разработка может длиться уже от трех до семи лет.

Шаг 4: испытания кандидатов и клинические исследования

Прежде чем перейти к испытаниям на людях, нужно выполнить исследования на животных и подтвердить отсутствие неприемлемой для человека токсичности, подобрать первоначальную безопасную дозу. На этом этапе кандидаты тоже могут отсеиваться — например, из-за генотоксичности (токсичности для генетического аппарата клетки) или канцерогенности (способности вызывать рак). Еще они могут оказаться небезопасными для беременных женщин или женщин детородного возраста, вызывать поражение головного мозга, печени, почек, сердца или легких. В зависимости от природы молекулы исследования проводят на грызунах, собаках, обезьянах, минипигах, кроликах и т.д.

В зависимости от природы заболевания, особенностей его терапии и свойств лекарства, какие-то исследования могут не проводиться или быть не значимы. Например, оценка канцерогенности лекарства не потребуется, если оно будет применяться в лечении краткосрочных заболеваний, как в случае COVID-19. Генотоксичность не оценивают для биопрепаратов или если лекарство предназначено для лечения метастатического рака и т. д. Суммарно доклинические исследования могут занимать 3–5 лет. Часть из них проводится параллельно с клиническими исследованиями.

Если доклинические исследования успешны, начинается клиническая разработка, которая условно делится на фазы. Это нужно, чтобы постепенно и контролируемо тестировать лекарство на все большем количестве людей. И снова стадийность процесса позволяет прекратить разработку на любом этапе, не подвергая риску многих людей.

• Первая фаза: здесь подтверждают первичную безопасность для людей в принципе, изучают поведение лекарства в организме человека, его биодоступность (способность достигать места действия в достаточных концентрациях), его взаимодействие с другими лекарствами, влияние пищи, половых и возрастных различий на свойства лекарства, а также безопасность для людей с сопутствующими заболеваниями (особенно важны заболевания печени и почек — эти органы отвечают за метаболизм и выведение лекарств), проверяют, не вызывает ли лекарство нарушение ритма сердца. Кроме того, на I фазе оценивают безопасный диапазон доз: эффективные дозы не должны быть неприемлемо токсичными.
• Вторая фаза: здесь начинают проверять эффективность лекарства на пациентах с заболеванием. На ранней II фазе оценивают, работает ли кандидатная молекула на людях с изучаемым заболеванием в принципе, а на поздней II фазе подбирают режим дозирования, если кандидатное лекарство было эффективным. При этом вещество, эффективное в лабораторных экспериментах, на животных моделях заболевания и даже в ранних клинических исследованиях на людях, вполне может не быть таким же рабочим в реальной медицинской практике. Поэтому и нужен длительный процесс поэтапной исключающей разработки, чтобы на выходе получить эффективное и безопасное лекарство.
• Третья фаза: здесь подтверждают эффективность и безопасность лекарства, а также доказывают, что его польза компенсирует те нежелательные реакции, которые неминуемо будет вызывать лекарство. Иными словами, в исследованиях третьей фазы надо понять, что баланс пользы и рисков положителен. Это всегда индивидуально. Например, у людей с ВИЧ в целом допустимо, если противовирусные лекарства вызывают некоторые нежелательные реакции, а в случае онкологических заболеваний приемлемы и более выраженные токсические реакции.

В случае вакцин, которые рассчитаны на здоровых людей, и особенно детей, приемлемы лишь легкие нежелательные реакции. Поэтому найти баланс трудно: вакцина должна быть высоко эффективной, и при этом вызывать минимальное число тяжелых реакций, например реже, чем 1 случай на 1000, 10 000 или даже 100 000 вакцинированных людей. Клиническая разработка может длиться до 5–7 лет, однако низкомолекулярные противовирусные лекарства для краткосрочного применения, как в случае COVID-19, можно протестировать быстрее — за 1–2 года.

Разработка многих отечественных противовирусных и иммуномодулирующих препаратов не соответствует такому научно выверенному процессу разработки.

Шаг 5: производство

Важный этап — наладить производство лекарства. Разработка процессов синтеза начинается в самом начале отбора лидов и постепенно дорабатывается, оптимизируется и доводится до промышленного масштаба.

В настоящее время против SARS-CoV-2 разрабатывается много разных методов лечения:

• низкомолекулярные соединения, которые нарушают жизненный цикл вируса. Трудность в том, что может быть нужно применять сразу несколько противовирусных лекарств. Сейчас надежды возлагают на ремдесивир. Есть данные, что может быть эффективен давно известный гидроксихлорохин, действующий не на сам вирус, а влияющий на иммунитет. Информацию, что комбинация лопинавира и ритонавира оказалась неэффективной у тяжелобольных пациентов, стоит интерпретировать с осторожностью: она может быть эффективна при более легких формах, или для профилактики, или у каких-то определенных подгрупп;
• противовирусные, в том числе моноклональные, антитела, которые связываются с ним на поверхности и блокируют его проникновение в клетку, а также помечают вирус для клеток иммунной системы. Антитела можно получать как биотехнологически, так и выделять из крови переболевших людей. Сейчас тестируются препараты, получаемые с помощью обоих методов;
• вакцины. Они могут представлять собой естественные или модифицированные белки вируса (модификации вводят для усиления выработки иммунитета), живой ослабленный вирус, вирусоподобные наночастицы, синтетический генетический материал вируса (РНК-вакцины) для того, чтобы сам организм человека синтезировал некоторые белки вируса и смог выработать антитела к нему. Одна из проблем в случае вакцин — простое введение белков вируса, пусть и модифицированных, не всегда позволяет сформировать иммунитет, способный защитить от реального заболевания — так называемый стерильный иммунитет. Даже образование антител в ответ на введение вакцины не гарантирует защиты: хорошим примером являются те же ВИЧ и гепатит C, хотя вакцина против гепатита B достаточно проста и при этом высокоэффективна. Хочется надеяться, что отечественные разработчики следуют рекомендациям Всемирной организации здравоохранения по проведению доклинических и клинических исследований вакцин, включая исследования провокации и изучение адъювантов;
• препараты для РНК-интерференции. Так называемые малые интерферирующие рибонуклеиновые кислоты (РНК) — это небольшие отрезки синтетически получаемой РНК, которые способны связываться с генетическим аппаратом вируса и блокировать его считывание, мешая синтезу вирусных белков или воспроизведению генетического материала вируса.

Процесс разработки лекарства — это научный поиск с неизвестным исходом. Он занимает много времени и требует участия большой команды профессионалов разных специальностей. Однако только реальный клинический опыт позволит оценить, удалось ли получить не только эффективное, но и безопасное лекарство, поэтому любое точное определение сроков получения лекарства — спекуляция. Получить эффективную и безопасную вакцину к концу года, если следовать всем правилам научного поиска, вряд ли удастся.

Детальные обсуждения процессов разработки новых лекарств и возникающих в связи с этим проблем — на YouTube-канале PhED.