Гепатит с подтверждается обнаружением в сыворотке крови
При подозрении на наличие вируса необходимо прежде всего сдать анализы на гепатит С, чтобы точно быть уверенным в диагнозе, определить генотип и правильно подобрать соответствующую схему терапии. Сдается сразу несколько анализов, чтобы не было никаких сомнений в наличии заболевания.
Исследования на наличие вируса
Алгоритм диагностики и ведения пациентов с подозрением на гепатит С заключается в следующем:
- Вирусологические исследования проводятся в два этапа (линии). Первая – ИФА (иммуноферментный анализ крови на наличие маркеров гепатита С – анти-HCV). Вторая линия – ПЦР и генотипирование.
- Биохимическое исследование крови – главные показатели этого анализа АЛТ, АСТ и уровень билирубина. Для оценки общего состояния организма и возможных патологических процессов в других системах назначается общий анализ крови.
- Биопсия или ультразвуковая эластометрия.
Биохимия, общий анализ крови и эластометрия являются дополнительными исследованиями, которые позволяют составить полную картину заболевания и назначить грамотную терапию.
Позволяет подтвердить наличие или отсутствие антител (специфических белков) в сыворотке крови. Они являются основным показателем иммунного ответа на присутствие инфекции в печени.
Сразу важно понять, что наличие антител – это не 100% подтверждение присутствия вируса гепатита С в организме больного. Если анализ крови на гепатит С положительный по методу ИФА, то это является только основой для более углубленных исследований – направление на вирусологическое обследование второй линии – ПЦР.
На исследование берут только венозную кровь пациента, целесообразно проводить анализ только натощак, когда на показатели крови не оказывает влияние процесс всасывания пищи. Кроме этого пациент должен в течение трех суток соблюдать определенную диету – нельзя употреблять жирное, жареное, выпечку, спиртосодержащие напитки.
В сыворотке крови можно обнаружить несколько видов антител, все зависит от стадии заболевания. Иногда наличие определенных антител доказывает наступление ремиссии.
Можно выделить четыре класса антител, которые определяют при анализе на гепатит С:
- Иммуноглобулины G (Anti-HCV IgG) – их присутствие сигнализирует о хронической форме гепатита С, когда вирус находится в подавленном состоянии. Носителей также можно вычислить по присутствию этих антител.
- Антитела класса М (Anti-HCV core IgM) – повышенный уровень этих иммуноглобулинов говорит об остром течении инфекции, либо рецидиве хронического гепатита. Их можно обнаружить по истечению 12 недель после инфицирования.
- Суммарное определение антител к гепатиту С (Anti-HCV total) – это одновременный учет фракций класса М и G. Данное обследование сыворотки крови на вирус гепатита С позволяет установить даже минимальные концентрации антител и является универсальной методикой. Обнаружение этих антител происходит уже после 4-6 недель развития заболевания.
- Антитела к неструктурным белкам HCV (Anti-HCV NS) – этот метод применяют редко, так как суммарное определение антител дает те же результаты. В сыворотке можно определить несколько белковых соединений: Anti-NS3, Anti-NS4, Anti-NS5. Anti-NS3 можно вычленить на ранних стадиях развития заболевания. А два других распознаются уже после выявления остальных маркеров при анализе на гепатит С.
Этот анализ сыворотки крови полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяет выявить наличие РНК вируса гепатита С. Если результат негативный, то обследование больного прекращается. Повторная сдача анализа ПЦР HCV РНК назначается через полгода.
Первый этап – это качественный ПЦР, если сдать этот анализ на гепатит С, то он покажет наличие или отсутствие вируса в крови. Лучше выбрать обычную чувствительность до 60 МЕ/мл.
Если качественный ПЦР дал позитивный результат анализа крови на гепатит С, то проводится дополнительный количественный. Он помогает определить вирусную нагрузку на организм, узнать концентрацию вируса в крови. Данный метод более дорогостоящий, поэтому его стоит проводить после получения результатов качественного ПЦР.
Алгоритм сдачи Качественного и Количественного ПЦР.
Интерпретация исследований ПЦР количественный:
- Низкие показатели вирусной нагрузки – до 400 тыс. МЕ/мл.
- Средние показатели до 800 000 МЕ/мл.
- Высокая степень – свыше 800 тысяч МЕ/мл.
Таким образом два вида анализа на гепатит С (на присутствие и количество вирусных вирионов в крови) позволяют поставить правильный диагноз.
Для того чтобы начать грамотное лечение необходимо сдать анализы на гепатит С, только случае получения положительных результатов по нескольким методикам (окончательным является ПЦР) можно говорить о верно поставленном диагнозе.
В таблице представлены расшифровки анализа крови на присутствие гепатита С. Если сдается проба на Anti-HCV total и ПЦР, то можно сделать следующие выводы:
Расшифровка результатов исследований | Исследование Anti-HCV total | ПЦР диагностика |
Гепатита С нет, можно проводить повторное исследование через 6 месяцев. | негативный | отрицательный |
Период выздоровления, после качественно проведенной терапии противовирусными препаратами прямого действия, либо произошло самоизлечение. | позитивный | негативный |
Активное течение вирусного гепатита С, клиническая картина ярко выражена. | позитивный | положительный |
Схема терапии, комбинация медикаментов и продолжительность лечения напрямую зависят от генотипа. Существует 6 генотипов, при использовании лекарственных формул с прямым противовирусным действием удается успешно излечить все генотипы.
Исследование проводится методом ПЦР Real time, то есть основой для определения генотипа становится РНК вируса – это высокоточный метод диагностики.
Для данного исследования используется венозная или капиллярная кровь. Сдается анализ на голодный желудок (нельзя кушать в течение 12 часов перед сдачей крови). Желательно за три дня до проведения обследования не употреблять алкоголь, за 30 минут до забора крови нельзя курить.
После получения результатов они анализируются: при увеличении содержания определённых ферментов можно говорить о наличии процессов, связанных с поражениями определенных участков печени. Нормальные показатели указаны в таблице:
Категория пациентов | АЛТ (Ед/л) | АСТ (Ед/л) |
Дети до месяца | До 38 | До 32 |
Дети с 1-12 месяцев | Меньше 27 | Меньше 36 |
С года до 16 лет | До 22 | До 31 |
Женщины | Меньше 18 | Меньше 22 |
Мужчины | До 15 | До 17 |
Гистологическая картина после определения биохимических показателей крови показывает неспецифические воспалительно-некротические изменения, сочетание жировых и гидропических дистрофических состояний, образование лимфоидных фолликул, общую оценку работоспособности печени.
Биопсия – это более старый и травматичный метод исследования печени, который позволяет определить тяжесть ее поражения при гепатите С.
С 2013 года крупные клиники в России стали устанавливать оборудование для ультразвуковой эластографии. Этот метод позволяет получить более точный результат и без травмирования клеток печени.
Существуют две шкалы оценки степени фиброза, не важно каким методом получены результаты – по Knodell и METAVIR. Второй способ более чувствительный и разработан для оценки влияния гепатита С на работу печени. Он выделяет, в отличии от Knodell, в отдельную стадию – умеренную активность. Она характеризует фиброз портальных трактов с единичными септами, таким образом оценка будет более детальной.
Шкала METAVIR:
- А0 – некровосполительной активности нет;
- А1 – активность минимальна;
- А2 – умеренная;
- А3 – выраженная.
По шкале METAVIR тяжесть фиброза оценивается следующим образом:
- F0 – фиброз отсутствует – 5,8 кПа;
- F1 – фиброз без вовлечения в патологический процесс перегородок (септ) – от 5,9 до 7,2 кПа;
- F2 – с вовлечением нескольких септ – диапазон показателей 7,3-9,5 кПа;
- F3 – в фиброз вовлечено несколько перегородок – 9,6-12,5кПа;
- F4 – цирроз – выше 12,6 кПа.
Кроме вышеперечисленных методик врач может назначить УЗИ, но не простое, а с цветным допплеровским картированием. Это исследование позволяет оценить скорость и вектор движения крови внутри органа, области, где кровообращение отсутствует.
Особенности диагностики гепатита
Чем бы ни был вызван гепатит, разрушения, произведенные им, практически всегда одинаковы — клетки печени перестают выполнять свои функции и гибнут.
Самая распространенная группа гепатитов. Разрушения в клетках печени происходят из-за проникновения в организм специфических вирусов. Различают несколько форм вирусного гепатита — A, B, C, D, E и G.
А, В, D и Е проявляются относительно одинаково — диарея, тошнота и рвота, нарастающая слабость, боль в области желудка и правого подреберья, пожелтение кожных покровов и белков глаз, увеличение печени в размерах. Гепатиты С и G более коварны и нередко долгие годы единственным симптомом является непреходящая усталость.
Лабораторные методы диагностики являются основными при выявлении заболевания. Обязателен ПЦР-анализ на выявление фрагментов РНК вируса и иммунологическое исследование, определяющее наличие антител к вирусу. Также необходимо сделать биохимический анализ крови, определить уровень билирубина и ферментов (например, АлТ, АсТ).
Не только вирусы, но и токсины растительного и искусственного происхождения могут вызвать гепатит. Различные отравляющие вещества, яды, которые содержатся в растениях и грибах, способствуют гибели клеток печени. Диагностика гепатита этого типа проводится путем выявления уровня билирубина, альбумина и протромбина, а также ферментов.
Одним из проявлений лучевой болезни, которая возникает из-за радиационного воздействия, является лучевой гепатит. В клинической практике данное заболевание встречается редко. Чтобы возник риск развития этой болезни, человек должен достаточно долго (в течение 3-4 месяцев) получать дозы радиации, превышающие 400 рад. Главный лабораторный метод диагностики лучевого гепатита — биохимический анализ крови и анализ на билирубин.
Это редкая форма гепатита, и наука до сих пор не может объяснить, почему такое заболевание возникает. При аутоиммунном гепатите защитная система дает сбой и начинает атаковать клетки печени так, словно это чужеродные организмы. Данная форма гепатита часто сопровождает другие аутоиммунные заболевания, но может развиваться и самостоятельно. Для лабораторной диагностики аутоиммунного гепатита исследуется уровень гамма-глобулинов и IgG (болезнь можно заподозрить, если их показатели выше нормальных вдвое и больше), АсТ, АлТ.
Поскольку вирусные гепатиты распространены шире всего, остановимся на лабораторных методах их диагностики подробнее. Следует сказать, что именно анализ крови может дать больше всего информации об этом заболевании. Инструментальные методы (КТ, МРТ, УЗИ) для диагностики гепатита малоэффективны, они могут дать информацию о состоянии и структуре печени, но не о том, какой именно вирус поразил организм и как давно это произошло.
- Общий и биохимический анализ крови . Для этого типа гепатита характерны низкий уровень лейкоцитов и высокая скорость оседания эритроцитов (СОЭ), пониженный альбумин и билирубин.
- Выявление антител к вирусу . Антитела к вирусу гепатита А Анти-НАV IgM можно обнаружить в самом начале заболевания, при появлении первых симптомов, сразу после окончания инкубационного периода. Самый надежный метод диагностики — ПЦР-анализ, позволяющий побнаружить в сыворотке крови антитела даже тогда, когда их концентрация ничтожно мала. Более того, метод ПЦР дает информацию о том, когда именно произошло заражение.
- Анализ на определение РНК вируса . ПЦР-анализ дает возможность обнаружить и фрагменты РНК вируса гепатита А.
- Общий и биохимический анализ крови . Как и при гепатите А, этот анализ позволяет оценить изменения в работе и состоянии печени.
- Анализ на антигены. HBsAg — самый ранний маркер этого вируса, его можно обнаружить уже в инкубационном периоде. Количественное определение этого антигена используют не только для подтверждения диагноза, но и для определения стадии — острой или хронической.
- Анализ на антитела к антигенам вирус а. Наличие антител к HB-core Ag может говорить о том, что человек когда-то переболел гепатитом В, поскольку эти антитела сохраняются в крови еще очень долго после выздоровления, иногда — всю жизнь.
- Общий и биохимический анализ крови.
- Анализ на антитела . При проведении выявляется наличие антител IgM.
- Анализ на определение РНК вируса . Проводится методом ПЦР, позволяет выявить болезнь на ранней стадии и избежать ее перехода в хроническую форму.
- Определение интерлейкина 28 бета . Анализ, проводится методом ПЦР, позволяет спрогнозировать возможную эффективность лечения.
- Общий и биохимический анализ крови.
- Определение антител к антигенам. В момент, когда заболевание находится в острой стадии, анализ показывает высокое содержание антител IgM. После этого в течение какого-то времени могут быть обнаружены другие антитела — IgG.
- Определение РНК вируса. При помощи ПЦР-метода РНК вируса можно обнаружить даже при его малой концентрации. Анализ дает информацию не только о типе вируса, но и о стадии болезни.
- Общий и биохимический анализ крови.
- Анализ на определение антител. Это основной лабораторный метод диагностики гепатита Е. Он показывает наличие антител IgM и IgG.
Лабораторные исследования — крайне важная часть диагностики гепатита, и если у вас есть подозрение на это заболевание, необходимо срочно сдать анализы. От их результатов зависит схема и эффективность лечения гепатита.
Очень часто диагностика гепатита включает в себя не только лабораторные, но и инструментальные исследования — как правило, УЗИ печени. Однако этот метод считается лишь вспомогательным.
Диагноз гепатита С ставится на основе данных лабораторных исследований крови. От того, какие анализы на гепатит С сдаются, зависит, будет ли вовремя выявлено заболевание и назначено лечение. Эффективность лечебных мероприятий тоже оценивают по результатам анализов.
О гепатите С
Болезнь вызывает вирус гепатита С (HCV, hepatitis C virus). Этот РНК-содержащий вирус проникает в организм человека через кровь. Возможно инфицирование через вагинальную слизь, сперму, микротравмы слизистых оболочек.
Попадая в организм одним из этих путей, вирус поражает печень. Все вирусы являются внутриклеточными паразитами. И HCV – не исключение. Он размножается внутри печеночных клеток, гепатоцитов, из которых состоит печеночная ткань, паренхима.
После проникновения вируса в гепатоцит начинается многократное копирование с исходной материнской вирусной РНК новых дочерних РНК. Данный процесс называют репликацией. Затем вокруг образовавшихся РНК формируется капсула (капсид) и другие структурные элементы вирусной частицы (вириона).
Для репликации РНК и достройки вирионов требуются органические вещества. Вирус берет их у клетки. В конечном итоге гепатоцит не выдерживает такой нагрузки и погибает. Вышедшие из него вирусы проникают в новые гепатоциты.
Иммунная система, конечно, борется с HCV. И если у пациента крепкий иммунитет, вирус может быть уничтожен. Но это происходит редко. У большинства, несмотря на иммунное противоборство, вирусная активность сохраняется. Устойчивость вируса в немалой степени обусловлена его генетической изменчивостью. От набора генов, генотипа, закодированного в РНК вируса, в немалой степени зависит, как будет протекать болезнь, и насколько результативным будет лечение.
На фоне воспалительного процесса в паренхиме возрастает количество жировой ткани (стеатогепатоз). По мере гибели гепатоцитов паренхима замещается фиброзной тканью, и функции печени нарушаются. Крайняя степень фиброза, цирроз, сопровождается печеночной недостаточностью, вторичными изменениями других органов, расстройствами кровообращения и обмена веществ.
Поначалу незаметные для пациента, патологические изменения в печени формируются в течение долгих лет. Все это время вирус продолжает циркулировать в крови. Благодаря этому есть возможность сдать анализ на гепатит С.
Какие анализы нужно сдать на гепатит С
Показания к лабораторной диагностике – пищеварительные расстройства, тяжесть в правом подреберье, общая слабость, и другие признаки гепатита С. Тревогу должен вызвать тот факт, если этим симптомам предшествовали косметические и медицинские манипуляции. Болезнь не передается бытовым путем. Но если был интимный незащищенный контакт с инфицированным, анализ крови на гепатит С необходим. Лабораторная диагностика включает в себя несколько видов анализов:
Он самый простой и наименее информативный. Неспецифические отклонения в общем анализе лишь косвенно свидетельствуют в пользу гепатита, и могут быть при других заболеваниях. Высокий уровень лейкоцитов (лейкоцитоз) вместе с ускоренным оседанием эритроцитов (СОЭ) – признак активного воспалительного процесса в печени. Повышение удельного веса лимфоцитов отмечается при вирусных инфекциях. А снижение уровня эритроцитов и гемоглобина возможно при угнетении кроветворной функции печени.
Здесь важны два показателя – билирубин и трансаминазы. Билирубин – продукт естественного распада гемоглобина. В норме он обезвреживается печенью, и в составе желчи удаляется через кишечник. При поражении печени уровень билирубина повышается главным образом за счет свободной, не связанной с глукуроновой кислотой, фракции (непрямой билирубин). Хотя при хроническом течении гепатита С билирубин лишь слегка повышен или даже остается в пределах нормы.
Не менее важный показатель – трансаминазы (АСТ, АЛТ), внутриклеточные ферменты. При разрушении гепатоцитов они в большом количестве обнаруживаются в крови. Также в рамках биохимического анализа исследуют уровень и соотношение фракций белков, жиров (триглицеридов). В сравнении с общим анализом биохимия более информативна. Но по изменениям биохимических показателей нельзя судить, что у пациента именно гепатит С.
А вот это уже специфический анализ крови на гепатит С. В рамках этого анализа обнаруживают антитела к вирусу. А если есть антитела, значит, есть и HCV. Антитела – это белки-иммуноглобулины, которые выделяются в ответ на антигены вируса гепатита С. Взаимодействие антигенов и антител приводит к образованию иммунных комплексов.
Чтобы реакция антиген-антитело была заметной для диагностики, используют антитела, меченные ферментами. Отсюда и название анализа. Практический интерес представляют иммуноглобулины класса М и G (IgM и IgG). В острой стадии гепатита С выделяются IgM. У большинства пациентов болезнь спустя несколько месяцев переходит в хроническую форму.
При этом IgM исчезают, и обнаруживаются IgG. Таким образом, ИФА позволяет не только диагностировать гепатит С., но и определить стадию заболевания. Но на основе ИФА нельзя судить о тяжести гепатита. Нельзя определить и генотип вируса. Ведь сам вирус не обнаруживается, а лишь антитела к нему.
Анализ ПЦР на гепатит С – самый сложный, но самый достоверный. Суть его заключается в обнаружении РНК вируса в сыворотке крови пациента. Принцип ПЦР заключается в многократном воспроизведении или амплификации участков РНК вируса. Это напоминает естественную репликацию, но только в искусственных условиях с применением дорогостоящего оборудования.
В зависимости от целей проведения разработаны три разновидности анализа.
1. Классическая ПЦР. Качественный анализ на гепатит С. Здесь определяется сам факт наличия вируса. Обнаружена РНК HCV – человек болен, не обнаружена – здоров.
2. Количественная ПЦР. Здесь измеряют вирусную нагрузку – концентрацию вирусных частиц в объеме крови. Для этого проводят ПЦР в реальном времени, и определяют количество образовавшихся РНК копий. Вирусную нагрузку определяет в МЕ (международных единицах) в 1 мл сыворотки крови:
- Низкая: менее 3 х 104 МЕ/мл
- Средняя: 3 х 104-8 х 105 МЕ/мл
- Высокая: более 8 х 105 МЕ/мл.
Нормы количественных показателей ПЦР зависят от используемого оборудования, и могут различаться в разных лабораториях. Но в любом случае, чем выше уровень вирусной нагрузки, тем тяжелее протекает заболевание, и тем больше риск фатальных осложнений.
3. Генотипирование. В данном исследовании с помощью ПЦР определяется генотип и подтип или квазитип HCV. В зависимости от этого назначается схема лечения. Анализ на генотип гепатита С проводится методом секвенирования, когда определяют последовательность нуклеотидов в цепи вирусной РНК.
Где сдать анализы на гепатит С?
Общий анализ, биохимию, и ИФА делают в любом лечебном учреждении. ПЦР возможна только в крупных лечебно-диагностических центрах, где есть соответствующее оборудование. С результатами диагностики можно ознакомиться спустя 3-5 дней.
Что делать, если анализ положительный
Если выявил анализ крови гепатит С, возможно два варианта. Первый вариант – обследуемое лицо действительно инфицировано вирусом. Второй вариант – ложноположительный результат связан с диагностическими ошибками. В большей степени это характерно для ИФА. В ходе выполнения этого анализа иногда развиваются перекрестные иммунные реакции, когда иммуноглобулины реагируют на другие антигены, сходные с антигенами HCV. Среди конкретных причин:
- аутоиммунные заболевания
- опухолевые процессы
- туберкулез
- недавняя вакцинация
- простудные заболевания
- глистные инвазии
- беременность.
Ошибочный результат анализа на гепатит С может быть связан с неправильной подготовкой. Кровь для исследования сдается утром натощак. Последний прием пищи допускается не позднее, чем за 12 ч. до исследования. В течение последних нескольких дней следует воздержаться от приема алкоголя, переедания с употреблением жирной, жареной пищи с острыми приправами, пряностями.
Если результат анализа на гепатит С позитивный, необходима ПЦР. Если РНК вируса при ПЦР не обнаруживается, а ИФА показывает наличие антител, то, скорее всего, ответ ИФА ложноположительный.
Исключение составляют излечившиеся от гепатита С. У них нет вируса, следовательно, ПЦР не обнаружит РНК. Но выделившиеся во время болезни JgG могут еще долго циркулировать в крови. Достоверность ПЦР максимальна, 98-99%. Но не абсолютна – в 1-2% случаев возможны ошибки. Поэтому при подозрении на ложный ответ спустя 3-4 мес. нужно повторить ИФА и ПЦР.
Что делать, если результат отрицательный
Здесь тоже возможны варианты. Первый – обследуемый всегда был здоров. Второй – у пациента был гепатит С, но он полностью излечился, снова здоров, и в лечении не нуждается. Третий – имеется ложноотрицательный результат. В данном случае ложный анализ тоже может быть обусловлен сопутствующими заболеваниями, неправильной подготовкой и техникой проведения. Но есть еще причины, связанные со сроком сдачи крови.
Для ИФА характерно т.н. диагностическое окно, когда вирус уже присутствует в организме, но антитела выработаны в малом количестве, и пока не обнаруживаются. Для ИФА продолжительность диагностического окна составляет 3-4 нед. Но в некоторых случаях этот период может длиться до 6 мес.
При подозрении на ложноотрицательный анализ нужно переходить к ПЦР. Здесь РНК выявляют спустя 10-14 дней, а в некоторых случаях через 3-4 дня после заражения. Поэтому если ИФА не показывает наличие антител, а РНК вируса при ПЦР обнаруживаются, значит, пациент инфицирован. Следует заметить, что в самом начале гепатита возможно проведение только качественной ПЦР. Количественная ПЦР и генотипирование будут информативными лишь спустя 4-6 нед. после заражения.
Какие анализы нужно сдавать во время лечения
По общему и биохимическому анализу крови можно судить о динамике воспалительного процесса, и о том, как восстанавливается печень и ее функции. Но ведущая роль принадлежит ПЦР. Количественную ПЦР проводят на 1, 2, 3, и 4 нед. лечения. По изменению вирусной нагрузки судят об эффективности лекарств и о вероятном исходе заболевания. Если вирусная нагрузка быстро снижается, это благоприятный признак, свидетельствующий о скором выздоровлении.
Какие анализы сдавать после лечения
Курс лечения гепатита С в зависимости от тяжести и вирусного генотипа длится 12 или 24 нед. После этого нужна ПЦР. Если качественный анализ ПЦР не показывает наличие РНК HCV в крови, пациент считается вылечившимся. Специфическое лечение не требуется. Нужны неспецифические мероприятия, направленные на восстановление печени.
Чем лечить?
Для того чтобы выздороветь, нужно полностью уничтожить вирус. И тогда результаты анализа ПЦР станут отрицательными. Сделать это можно только с помощью противовирусных средств последнего поколения. SoviHep D, Velakast, Ledifos – эти и другие препараты производят индийские компании по американским лицензиям. Они содержат Софосбувир с Даклатасвиром, Велпатасвиром или Ледипасвиром. Все эти препараты подавляют фазы размножения HCV внутри гепатоцитов.
Всего лишь одна таблетка в день в течение 12 или 24 нед., и выздоровление наступает в 95-99% случаев при любом генотипе вируса и форме заболевания. Стоят индийские лекарства недорого. Купить препараты может любой пациент со средним достатком.
Но аптеки не продают их. У нас вы можете приобрести индийский Софосбувир. МедФарма работает на правах официального представителя компаний из Индии. Мы поможем выбрать нужное лекарство, и доставим его по вашему адресу в течение 3-5 дней.
Антитела к вирусу гепатита С ( суммарные)
Антитела к вирусу гепатита С в сыворотке в норме отсутствуют
Суммарные антитела к вирусу гепатита С представляют собой антитела классов IgM и IgG, направленные к комплексу структурных и неструктурных белков вируса гепатита С.
Это исследование является скрининговым для выявления пациентов с ВСГ. Суммарные антитела к вирусу гепатита С можно выявить в первые 2 недели заболевания, и их присутствие свидетельствует о возможной инфицированности вирусом или перенесенной инфекции.
Однозначный ответ на основании результатов данного теста получить невозможно, так как тест определяет суммарные антитела IgM и IgG. Если это ранний период острого вирусного гепатита С, то об этом свидетельствуют антитела IgM, а если это период реконвалесценции или состояние после перенесенного ВГС, то на это указывают антитела IgG.
Антитела IgG к ВГС могут сохраняться в крови реконвалесцентов на протяжении 8-10 лет с постепенным снижением их концентрации. Возможно позднее обнаружение антител спустя год и более после инфицирования. При хроническом гепатите С суммарные антитела определяются постоянно. Поэтому для уточнения сроков инфицирования необходимо отдельно определить антитела класса IgM к ВГС.
Оценка результатов исследования
Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие суммарных антител (JgM и JgG) к ВГС в сыворотке крови. Положительный результат – выявление суммарных антител (JgM и JgG) к ВГС свидетельствует о начальной стадии острого вирусного гепатита С, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, перенесенном вирусном гепатите С или хроническом вирусном гепатите С.
Однако обнаружение суммарных антител к ВГС недостаточно для постановки диагноза ВГС и требует подтверждения для исключения ложноположительного результата исследования. Поэтому при получении положительного результата скринингового исследования на суммарные антитела к ВГС в лаборатории проводится подтверждающий тест. Окончательный результат определения суммарных антител к ВГС выдается совместно с результатом подтверждающего теста.
Антитела к вирусу гепатита С JgM
Антитела к вирусу гепатита С JgM в сыворотке в норме отсутствуют. Наличие антител класса JgM к ВГС в крови пациента позволяет верифицировать активную инфекцию. Антитела класса JgM могут выявляться не только при остром ВГС, но и при хроническом гепатите С.
Антитела класса JgM к ВГС появляются в крови пациента спустя 2 недели после развития клинической картины острого вирусного гепатита С или обострения хронического гепатита и обычно исчезают спустя 4-6 месяцев. Снижение их уровня может свидетельствовать об эффективности лекарственной терапии.
Оценка результатов исследования
Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител JgM к ВГС в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител JgM к ВГС свидетельствует о начальной стадии острого вирусного гепатита С, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции или активном хроническом вирусном гепатите С.
Обнаружение вируса гепатита С методом ПЦР (качественно)
Вирус гепатита С в крови в норме отсутствует.
В отличие от серологических методов диагностики ВГС, где обнаруживают антитела к ВГС, ПЦР позволяет выявить наличие непосредственно РНК ВГС в крови как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих служит консервативный участок генома гепатита С.
Обнаружение только антител к ВГС подтверждает лишь факт инфицирования пациента, но не позволяет судить об активности инфекционного процесса (о репликации вируса), о прогнозе заболевания. Кроме того, антитела к вирусу ГС обнаруживают как в крови больных острым и хроническим гепатитом,так и у тех пациентов, кто болел и выздоровел, а нередко антитела в крови появляются только спустя несколько месяцев после появления клинической картины заболевания, что затрудняет диагностику. Обнаружение вируса в крови методом ПЦР – более информативный метод диагностики.
Качественное выявление ВГС методом ПЦР в крови свидетельствует о виремии, позволяет судить о размножении вируса в организме и является одним из критериев эффективности противовирусной терапии.
Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 50-100 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выделение ДНК-пробы, специфичность – 98%. Обнаружение РНК вируса гепатита С с помощью ПЦР на ранних этапах развития вирусной инфекции (возможно уже через 1-2 недели после заражения) на фоне полного отсутствия каких-либо серологических маркеров может служить самым ранним свидетельством инфицирования.
Однако изолированное выявление РНК вируса гепатита С на фоне полного отсутствия каких-либо других серологических маркеров не может полностью исключить ложноположительный результат ПЦР. В таких случаях требуется всесторонняя оценка клинических, биохимических и морфологических исследований и повторное неоднократное подтверждение наличия инфекции ПЦР.
Согласно рекомендациям ВОЗ для подтверждения диагноза вирусного гепатита С необходимо троекратное выявление РНК вируса гепатита С в крови пациента.
Обнаружение РНК вируса гепатита С методом ПЦР используется в целях:
Обнаружение вируса гепатита С методом ПЦР (количественно)
Количественный метод определения содержания РНК вируса гепатита С в крови дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к антивирусным препаратам. Аналитическая чувствительность метода составляет от 5.102 копий/мл вирусных частиц в сыворотке крови, специфичность – 98%.
Уровень виремии оценивают следующим образом: при содержании РНК ВГС от 10^2 до 10^4 копий/мл – низкий; от 10^5 до 10^7 копий/мл – средний и выше 10^8 копий /мл – высокий.
Количественное определение содержания РНК ВГС в сыворотке крови методом ПЦР имеет важное значение для прогноза эффективности лечения интерфероном-альфа. Показано, что наиболее благоприятный прогноз заболевания и наибольшую вероятность положительного ответа на противовирусную терапию имеют лица с низким уровнем виремии. При эффективном лечении уровень виремии снижается.
Генотипирование вируса гепатита С - определение генотипа
Метод ПЦР позволяет не только выявить РНК ВГС в крови, но и установить его генотип. Наиболее важное значение для клинической практики имеют 5 субтипов ВГС – 1а, 1b, 2а, 2b и 3а. В нашей стране наиболее часто встречается субтип 1b, далее идут 3а, 1а, 2а.
Определение генотипа (субтипа) вируса имеет важное значение для прогноза течения ВГС и подбора пациентов с хроническим ВГС к проведению лечения интерфероном-альфа и рибавирином.
При инфицировании пациента субтипом 1b хронический ВГС развивается примерно в 90% случаев, при наличии субтипов 2а и 3а – в 33-50%. У пациентов с субтипом 1b заболевание протекает в более тяжелой форме и часто заканчивается развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы. При инфицировании субтипом 3а у больных более выражен стеатоз, поражение желчевыводящих путей, активность АЛТ и менее выражены фиброзные изменения в печени, чем у пациентов с субтипом 1b.
Показаниями к лечению хронического ВГС интерфероном–альфа являются:
При лечении интерфероном-альфа больных вирусным гепатитом С с субтипом 1b эффективность терапии отмечается в среднем в 18% случаев, у инфицированных другими субтипами – в 55%. Использование комбинированной схемы лечения (интерферон-альфа + рибавирин) повышает эффективность терапии. Стойкий ответ наблюдается у 28% больных с субтипом 1b и у 66% - с другими субтипами ВГС.
Читайте также: