Методы определения вида и типа вирусов
ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ
Студент должен знать:
-морфологию, экологию, физиологию вирусов, методы их изучения;
-основы эпидемиологии вирусных инфекций (типы инфекций);
-основы химиотерапии и химиопрофилактики вирусной инфекции;
-факторы иммунитета при вирусных инфекциях.
Студент должен уметь:
-проводить профилактику вирусных инфекций;
-составлять алгоритмы действия в условиях эпидемии.
Вопросы для фронтального обсуждения:
1.Дайте понятие вирусам. Охарактеризуйте особенности строения и жизни вирусной частицы.
2.Какими факторами осуществляется защита организма человека от вируса.
3.Назовите группу и механизм действия препаратов на вирусы. Приведите примеры препаратов.
4.Назовите типы инфекции, вызываемые вирусами.
5. Назовите представителей кишечных, кровяных, респираторных вирусных инфекций, инфекций кожных покровов и слизистых.
7.Назовите, как называются мероприятия, ликвидирующие эпидемический процесс.
Самостоятельная работа студентов:
Запишите определения методов исследования вирусных инфекций.
Зарисйте в атлас внутриклеточные включения при натуральной оспе (тельца Гварниери), при бешенстве (тельца Бабеша-Негри).
3.Составьте план противоэпидемических мероприятий на вирусную инфекцию (инфекцию определяет преподаватель).
Краткие теоретические положения
Введение
Расширение возможностей в лечении и профилактике вирусных болезней с использованием противовирусных препаратов, иммуномодуляторов и вакцин с различным механизмом действия нуждается в быстрой и точной лабораторной диагностике. Узкая специфичность некоторых противовирусных препаратов также требует быстрой и высокоспецифичной диагностики инфицирующего агента. Появилась необходимость в количественных методах определения вирусов для мониторинга противовирусной терапии. Помимо установления этиологии заболевания лабораторная диагностика имеет важное значение в организации противоэпидемических мероприятий.
Ранняя диагностика первых случаев эпидемических инфекций позволяет своевременно провести противоэпидемические мероприятия – карантин, госпитализацию, вакцинацию и пр. Реализация программ по ликвидации инфекционных заболеваний, например натуральной оспы, показала, что по мере их выполнения возрастает роль лабораторной диагностики. Существенную роль играет лабораторная диагностика в службе крови и акушерской практике, например, выявление доноров, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), вирусом гепатита В (HBV), диагностика краснухи и цитомегаловирусной инфекции у беременных.
Методы диагностики вирусных инфекций
Для успешного выделения вирусов клинический материал должен быть взят в соответствии с патогенезом предполагаемого заболевания и в наиболее ранние сроки.
Как правило, берутся:
– при респираторных инфекциях – носоглоточный смыв;
– при энтеровирусных инфекциях – смыв и фекалии (рео-, энтеровирусы);
– при поражениях кожи и слизистых оболочек – соскобы, содержимое пузырьков (герпес, ветряная оспа);
– при экзантемных инфекциях – смывы (корь, краснуха);
– при арбовирусных инфекциях – кровь, спинномозговая жидкость.
1.Быстрые (экспресс-методы) — прямое обнаружение вируса или его компонентов (антигенов, НК), включений непосредственно в клиническом материале.
А. Вирусоскопический метод заключается в обнаружении вируса в исследуемом материале под микроскопом. Чаще всего используют электронный микроскоп. Световая микроскопия из-за ничтожно малых размеров вирусов практически не применяется. При данном методе можно определить тип НК, размеры вириона, форму вириона, а также выявить внутриклеточные включения, которые образуются в пораженных клетках при некоторых инфекциях.
II. Вирусологический метод основан на:
культивировании вирусов в чувствительных биологических системах (клеточных культурах, курином эмбрионе, организмах лабораторных животных),их индикации по цитопатогенному действию на биологическую систему (рис.1), идентификации по ингибиции действия вирусов соответствующими противовирусными антителами (рис.2).
Рис. 1. Цитопатическое действие вирусов на клетку: А-нормальный рост, Б-ЦПД вирусов на клетку
Рис.2 Ингибиция вируса антителами
Вирусологическое исследование - это "золотой стандарт" вирусологии и должно проводится в специализированной вирусологической лаборатории. В настоящее время оно используется практически только в условиях возникновения эпидемической вспышки того или иного вирусного инфекционного заболевания.
III. Серологический метод — определение противовирусных антител (оптимально — IgM) и/или определение динамики нарастания их титров за определенный период заболевания в парных сыворотках. Диагностически значимым считают нарастание титра антител в 4 и более раз.
Метод парных сывороток:осуществляем сбор венозной крови в количестве 10 мл в начале болезни и в конце, приготавливаем сыворотку, определяем количество антител в первой и второй сыворотке.
При этом четырехкратное нарастание титра антител во второй сыворотке в большинстве случаев служит показателем протекающей или свежеперенесенной инфекции. При исследовании одной сыворотки, взятой в острой стадии болезни, диагностическое значение имеет обнаружение антител класса Ig М, свидетельствующее об острой инфекции.
Современные методы диагностики:
1.ПЦР-выявляют персистирующие вирусы по НК, находящиеся в клиническом материале, с трудом обнаруживаемые или не обнаруживаемые другими методами.
2.Радиоизотопный иммунный анализ (РИА)-метод основан на метке антител радиоизотопами, что обеспечивало высокую чувствительность в определении вирусного антигена. Широкое распространение метод получил в 80-е годы, особенно для определения маркеров HBV и других некультивируемых вирусов. К недостаткам метода относится необходимость работать с радиоактивными веществами и использования дорогостоящего оборудования (гамма-счетчиков).
3.Иммуноферментный анализ (ИФА) – Иммуноферментные методы определения вирусных антигенов в принципе сходны с РИФ, но основываются на мечении антител ферментами, а не красителями. Наиболее широко используется пероксидаза хрена и щелочная фосфатаза, применяют также b-галактозидазу и b-лактамазы. Меченые антитела связываются с антигеном, и такой комплекс обнаруживается при добавлении субстрата для фермента, с которым конъюгированы антитела. Конечный продукт реакции может быть в виде нерастворимого осадка, и тогда учет проводится с помощью обычного светового микроскопа, или в виде растворимого продукта, который обычно окрашен (или может флюоресцировать или люминесцировать) и регистрируется инструментально.
Поскольку с помощью ИФА можно измерять растворимые антигены, то не требуется наличия интактных клеток в образце и таким образом могут использоваться различные виды клинического материала.
Другое важное преимущество метода ИФА – возможность количественного определения антигенов, что позволяет применять его для оценки клинического течения болезни и эффективности химиотерапии. ИФА, как и РИФ, может применяться как в прямом, так и в непрямом варианте.
Твердофазный ИФА, дающий растворимый окрашеный продукт реакции, нашел наибольшее распространение. ИФА может быть использован как для определения антигена (тогда на твердую фазу – дно лунки полистиролового планшета – наносятся антитела), так и для определения антител (тогда на твердую фазу наносятся антигены).
4.Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) – Метод основан на использовании антител, связанных с красителем, например флюоресцеинизотиоцианатом. РИФ широко применяется для выявления вирусных антигенов в материале больных и для быстрой диагностики.
В практике применяются два варианта РИФ: прямой и непрямой. В первом случае применяются меченные красителем антитела к вирусам, которые наносятся на инфицированные клетки (мазок, культура клеток). Таким образом, реакция протекает одноэтапно. Неудобством метода является необходимость иметь большой набор конъюгированных специфических сывороток ко многим вирусам.
При непрямом варианте РИФ на исследуемый материал наносится специфическая сыворотка, антитела которой связываются с вирусным антигеном, находящимся в материале, а затем наслаивается антивидовая сыворотка к гамма-глобулинам животного, в котором готовилась специфическая иммунная сыворотка, например антикроличья, антилошадиная и т. п. Преимущество непрямого варианта РИФ состоит в потребности лишь одного вида меченых антител.
Метод РИФ широко применяется для быстрой расшифровки этиологии острых респираторных вирусных инфекций при анализе мазков-отпечатков со слизистой оболочки верхних дыхательных путей. Успешное применение РИФ для прямой детекции вируса в клиническом материале возможно лишь в случае содержания в нем достаточно большого числа инфицированных клеток и незначительной контаминации микроорганизмами, которые могут давать неспецифическое свечение.
5.Другие методы диагностики –
РТГА используется для диагностики заболеваний, вызванных гемагглютинирующими вирусами. Она основана на связывании антителами сыворотки больного добавленного стандартного вируса. Индикатором реакции являются эритроциты, агглютинирующиеся вирусом (формирование характерного "зонтика") при отсутствии специфических антител и оседающие на дно неагглютинированными при их наличии.
РСК является одной из традиционных серологических реакций и используется для диагностики многих вирусных инфекций. В реакции принимают участие две системы: антитела сыворотки больного + стандартный вирус и эритроциты барана + антитела к ним, а также оттитрованный комплемент. При соответствии антител и вируса этот комплекс связывает комплемент и лизиса бараньих эритроцитов не происходит (положительная реакция). При отрицательной РСК комплемент способствует лизису эритроцитов. Недостатком метода является его недостаточно высокая чувствительность и трудность стандартизации реагентов.
Для учета значимости РСК также, как и РТГА, необходимо титрование парных сывороток, то есть взятых в начале заболевания и в период реконвалесценции.
РПГА – агглютинация сенсибилизированных вирусными антигенами эритроцитов (или полистироловых шариков) в присутствии антител. На эритроцитах могут быть сорбированы любые вирусы, независимо от наличия или отсутствия у них гемагглютинирующей активности. В связи с наличием неспецифических реакций сыворотки исследуются в разведении 1:10 и более.
РНГА – агглютинация эритроцитов, сенсибилизированных специфическими антителами в присутствии вирусных антигенов. Наибольшее распространение РОПГА получила при выявлении HBs-антигена как у больных, так и у доноров крови.
Определение вида и типа вирусов в вируссодержащем материале производится путём нейтрализации вирусов специфическими сыворотками. Результат нейтрализации может быть установлен на основании следующих признаков:
1) нейтрализация ЦПД;
2) нейтрализация гемадсорбции;
3) задержка (торможение) гемагглютинации;
4) цветная проба;
5) свечение клеток, содержащих вирус, под влиянием специфических флюоресцирующих сывороток;
6) нейтрализация в опыте на животных (у опытных животных инфекция не развивается).
Возбудителями ОРВИ являются следующие вирусы:
1. Ортомиксовирусы (вирусы гриппа А, В, С).
2. Парамиксовирусы (парагриппозные вирусы, вирус эпидемического паротита, вирус Ньюкастла, вирус кори, респираторно-синцитиальный вирус).
3. Пикорнавирусы (более 110 серотипов риновирусов, некоторые серотипы вирусов Коксаки (А и В) и ЕСНО).
4. Реовирусы (3-й серотип).
6. Аденовирусы (из 41 серотипа 8 являются возбудителями ОРВИ).
Для диагностики ОРВИ применяются следующие методы:
1. Вирусологические – заражение культур клеток и куриных эмбрионов.
2. Иммунофлюоресцентный (метод ускоренной диагностики).
3. Серологические реакции – РТГА, РСК, ИФА.
4. Использование РНК-зондов.
Контрольные вопросы
Положение вирусов среди живых организмов, к какому царству они относятся? Основные особенности вирусов, присущие только им. Размеры вирусов (мелкие, средние, крупные), способы определения размеров вирусов. Как называется зрелая вирусная частица? Строение простых и сложных вирусов: типы симметрии, составные части вирусной частицы, внешняя оболочка; примеры простых и сложных вирусов. Принципы классификации вирусов. Назовите основные семейства, роды и виды РНК- и ДНК-содержащих патогенных вирусов. Методы культивирования вирусов. Виды культур тканей, их характеристика и способы получения. Питательные среды для выращивания культур тканей. Куриные эмбрионы: строение, методы и условия заражения куриных эмбрионов. Основные этапы репродукции вирусов в клетке. Методы обнаружения вирусов в культуре ткани. Что такое внутриклеточные включения? Что такое цитопатическое действие вирусов? Методы определения вида и типа вирусов. Как определить ЦПД вируса? Способы обнаружения вирусов в заражённом курином эмбрионе.
Перечислите основных возбудителей острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ). Вирус гриппа: к какому семейству вирусов относится; форма, тип симметрии, схема строения, особенности генома, антигены и серологическая реакция. По каким антигенам определяют тип и подтип вирусов гриппа? Антигенная изменчивость вируса гриппа. Методы диагностики, применяемые в первые дни заболевания и для ретроспективной диагностики. Реакция гемагглютинации, способ постановки. Реакция торможения гемагглютинации, что можно определить с помощью этой реакции (два варианта)? Какие диагностические препараты нужны для этого? Составьте схему реакции торможения гемагглютинации для определения типа и подтипа вируса гриппа. Специфическая профилактика и лечение гриппа, препараты и их характеристика. Вирусы парагриппа: классификация, характеристика, вызываемые заболевания. Лабораторная диагностика и лечение. Вирус эпидемического паротита: классификация, характеристика, диагностика заболевания, специфическая профилактика. Вирус кори, его характеристика. Иммунитет. Вирусологическая диагностика кори. Профилактические препараты. Респираторно-синцитиальный вирус: классификация, характеристика, вызываемые заболевания. Лабораторная диагностика и лечение. Коронавирусы: характеристика, вызываемые заболевания и их диагностика. Аденовирусы: характеристика, вызываемые заболевания. Диагностика аденовирусных инфекций. Лечение и профилактика. Вирус краснухи, его характеристика. Иммунитет. Диагностика заболевания. Препараты для специфической профилактики. Вирусы герпеса: классификация, характеристика, вызываемые заболевания. Вирусологическая диагностика герпетических заболеваний. Профилактика и лечение.
Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
В рабочей тетради напишите по-латыни названий вирусов по теме занятия и заболеваний, ими вызываемых.
Работа студента на практическом занятии
1. Изучение морфологии вирусов по таблицам, электронограммам и слайдам. Усвойте строение различных вирусов, особенности и биологическую роль отдельных структур вирионов.
2. Изучение препаратов, применяемых для диагностики, лечения и специфической профилактики ОРВИ и герпетической инфекции.
Работа студента на практическом занятии
1. Изучение морфологии вирусов по таблицам, электронограммам и слайдам. Усвойте строение различных вирусов, особенности и биологическую роль отдельных структур вирионов.
2. Изучение морфологии элементарных телец Пашена. При микроскопии готового препарата найдите тельца Пашена, зарисуйте их, объясните, почему в данном случае вирусы видны в световом микроскопе.
3. Микроскопия и зарисовка нормальных и заражённых вирусом культур клеток. Изучите морфологию клеток культуры ткани, убедитесь в наличии одного слоя клеток, объясните преимущества однослойных культур. Сравните нормальную культуру клеток с культурой клеток, заражённых вирусом с наличием ЦПД. Изучите препарат гемадсорбции. Зарисуйте препараты.
4. Вирусологическая диагностика гриппа:
а) зарегистрируйте данные из сопроводительной записки в журнал;
б) поставьте реакцию гемагглютинации со смывом с носоглотки больного;
в) учтите результаты серологической диагностики гриппа (демонстрация): РТГА с парными сыворотками для обнаружения противогриппозных антител; РТГА для определения типа и подтипа вируса гриппа;
г) ускоренный метод диагностики гриппа с помощью иммунофлюоресценции (разбор и демонстрация).
5. Изучение препаратов, применяемых для диагностики лечения и специфической профилактики гриппа.
6. Изучение морфологии вирусов по таблицам, электронограммам и слайдам. Усвойте строение различных вирусов, особенности и биологическую роль отдельных структур вирионов.
7. Изучение препаратов, применяемых для диагностики, лечения и специфической профилактики ОРЗ и герпетической инфекции.
ЗАНЯТИЕ 34
ВОЗБУДИТЕЛИ ЭНТЕРОВИРУСНЫХ (ПОЛИОМЕЛИТА, КОКСАКИ, ЕСНО), НЕЙРОВИРУСНЫХ (БЕШЕНСТВА,
ВИРУСНЫХ ЭНЦЕФАЛИТОВ) ИНФЕКЦИЙ. ВОЗБУДИТЕЛИ ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТОВ. ВОЗБУДИТЕЛИ
ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКИ С ПОЧЕЧНЫМ СИНДРОМОМ, ЛИХОРАДКИ МАРБУРГ, ЛИХОРАДКИ ЭБОЛА
Благодаря достижениям медицинской науки, главным образом, разработке препаратов для специфической профилактики, почти полностью ликвидирован полиомиелит, в 1985 г. Всемирная организация здравоохранения объявила о полной ликвидации натуральной оспы на Земле. В то же время вирусные заболевания другой этиологии составляют более 2/3 всех случаев инфекционной патологии.
В последние годы особенно широкое распространение получили ви-
русные гепатиты, которые встречаются повсеместно, и число заболеваний ими непрерывно увеличивается. В настоящее время установлено, что этиологическими факторами вирусных гепатитов являются вирусы, отличающиеся по многим свойствам, относящиеся к различным семействам, но вызывающие заболевания, сходные по клинической картине.
Сравнительно недавно описаны возбудители лихорадок Марбург и Эбола, характеризующихся высокой летальностью. Эти вирусы вместе с возбудителем распространённой повсеместно геморрагическойлихорадки с почечным синдромом в настоящее время являются объектами повышен-
ного внимания врачей.
Цель самоподготовки
После самостоятельного изучения темы вы должны знать характеристику возбудителей энтеровирусных (полиомиелита, Коксаки, ЕСНО), нейровирусных (бешенства, вирусных энцефалитов) инфекций, возбудителей вирусных гепатитов (А, В, С, D, Е, G, Т); геморрагической лихорадки, лихорадок Марбург и Эбола схемы вирусологических исследований и специфическую профилактику этих заболеваний.
Исходный уровень знаний
Морфология, физиология вирусов, методы лабораторной диагностики вирусных инфекций.
Цель занятия
1. Усвоить разнообразие энтеровирусов, строение и свойства полиовирусов, вирусов Коксаки и ЕСНО.
2. Выработать чёткое представление о патогенезе, лабораторной диагностике и профилактике полиомиелита и полиомиелитоподобных заболеваний.
3. Изучить свойства возбудителей бешенства и арбовирусных инфекций.
4. Выработать чёткое представление о механизмах заражения, патогенезе и лабораторной диагностике бешенства и арбовирусных инфекций.
5. Ознакомиться с препаратами для идентификации, лечения и профилактики энтеровирусных и нейровирусных инфекций.
6. Изучить строение и свойства вирусов гепатитов А, В, С, D, E, G, T; особенности течения инфекций.
7. Знать пути и факторы передачи вирусных гепатитов.
8. Освоить методы лабораторной диагностики вирусных гепатитов.
9. Изучить характеристику вирусов геморрагической лихорадки с почечным синдромом, лихорадок Марбург и Эбола, патогенез вызываемых ими заболеваний и принципы диагностики, лечения и профилактики.
10. Научиться подбирать препараты для диагностики, профилактики и лечения вирусных гепатитов и геморрагических лихорадок.
План изучения темы
1. Характеристика возбудителей полиомиелита, бешенства, вирусных энцефалитов.
2. Схемы лабораторной диагностики полиомиелита, бешенства, вирусных энцефалитов.
3. Специфическая профилактика полиомиелита, бешенства, вирусных энцефалитов.
4. Характеристика возбудителей вирусных гепатитов.
5. Схемы лабораторной диагностики вирусных гепатитов.
6. Специфическая профилактика вирусных гепатитов.
7. Характеристика возбудителя геморрагической лихорадки с почечным синдромом.
Методы лабораторной диагностики вирусных инфекций подразделяются на несколько больших групп.
- Прямые методы, состоящие в выявлении непосредственно в биологическом материале самого вируса или антител к нему.
- Непрямые методы-заключаются в искусственной наработке вируса в значительных количествах, и его дальнейшем анализе.
К наиболее актуальным в повседневной практике методам диагностики относятся:
Серологические методы диагностики - выявление в сыворотке крови пациента определенных антител или антигенов в результате реакции антиген-антитело(АГ-АТ). То есть, при поиске у пациента определенного антигена используется соответствующее искусственно синтезированное антитело, и, соответственно, наоборот-при выявлении антител используют синтезированные антигены.
Реакция иммунофлуоресценции (РИФ)
Основана на использовании меченых красителями антител. При наличии вирусного антигена он связывается с мечеными антителами, и под микроскопом наблюдается специфическая окраска, которая говорит о положительном результате. При этом методе, к сожалению, невозможна количественная интерпретация результата, а только лишь качественная.
Возможность количественного определения дает иммуноферментный анализ(ИФА). Он похож на РИФ, однако в качестве маркеров используют не красители, а ферменты, превращающие бесцветные субстраты в окрашенные продукты, что и дает возможность количественной оценки содержания как антигенов, так и антител.
- Отмывают не связавшиеся антитела и антигены.
- Добавляют бесцветный субстрат, и в лунках с антигеном, который мы определяем, произойдет окрашивание, т.к. там будет связанный с антигеном фермент, после чего на специальном приборе оценивают интенсивность свечения окрашенного продукта.
По похожей схеме происходит и выявление антител.
Реакция непрямой(пассивной) гемаглютинации (РПГА).
Метод основан на способности вирусов связывать эритроциты. В норме эритроциты падают на дно планшета, образуя так называемую пуговку. Однако если в исследуемом биологическом материале находится вирус, он свяжет эритроциты в так называемый зонтик, который не упадет на дно лунки.
Теперь остановимся на методах диагностики непосредственно нуклеиновых кислот исследуемых вирусов, и прежде всего о ПЦР ( Полимеразная Цепная Реакция) .
Суть этого метода заключается в обнаружении специфического фрагмента ДНК или РНК вируса путём его многократного копирования в искусственных условиях. ПЦР можно проводить только с ДНК, то есть для РНК-вирусов предварительно необходимо произвести реакцию обратной транскрипции.
Непосредственно ПЦР проводят в специальном приборе, под названием амплификатор, или термоциклер, который поддерживает необходимый температурный режим. ПЦР-смесь состоит из добавленной ДНК, которая содержит интересующий нас фрагмент, праймеров (короткий фрагмент нуклеиновой кислоты, комплиментарный ДНК-мишени, служит затравкой для синтеза комплиментарной цепи), ДНК-полимеразы и нуклеотидов.
Стадии цикла ПЦР:
- Деннатурация-первая стадия. Температура повышается до 95 градусов, цепочки ДНК расходятся друг относительно друга.
- Отжиг праймеров. Температуру понижают до 50-60 градусов. Праймеры находят комплиментарный участок цепи и связываются с ним.
- Синтез. Температуру вновь повышают до 72, это рабочая температура для ДНК-полимеразы, которая, отталкиваясь от праймеров, строит дочерние цепи.
Цикл многократно повторяется. Через 40 циклов из одной молекулы ДНК получается 10*12 степени копий копий искомого фрагмента.
При проведении ПЦР в режиме реального времени синтезируемые копии фрагмента ДНК метятся красителем. Прибор регистрирует интенсивность свечения и по ходу реакции строит графики накопления искомого фрагмента.
Современные методы лабораторной диагностики с высокой достоверностью позволяют выявить присутствие вируса - возбудителя в организме, нередко, задолго до появления первых симптомов заболевания.
Почти каждый человек на Земле является носителем какой-либо вирусной инфекции. Это связано с тем, что ежеминутно мы контактируем с множеством вредных микроорганизмов: вирусами, грибками, бактериями. Вирусы, которые долго паразитируют в организме, разрушительно действуют на него. Причем последствия могут быть такими, что нанесенный вред организму нельзя будет устранить.
Вирусы
Вирусы - это паразитические микроорганизмы (частички нуклеиновых кислот РНК, ДНК). Паразитизм - образ их существования. Они живут и питаются за счет организма, внутри которого существуют. Вне организма вирусы (снаружи) гибнут, им просто нечем питаться.
Когда у человека сильный иммунитет, он противостоит размножению вирусов. Но при ослабленном иммунитете вирусы активизируются. Устроившись в благоприятной для себя среде, вирусы стремительно размножаются, быстро и неограниченно.
У женщин вирусы влияют на мочеполовую систему, на этой почве возникает эрозия, воспаления слизистых, мочевых путей, а дальше - бесплодие.
Вирусы чрезвычайно опасны для беременных женщин. Они поражают плод, может случиться выкидыш или родится мертвый младенец.
Иммунитет - враг вирусов
Попав в организм, вирусы подвергаются атаке иммунитетом человека. У вирусов много разновидностей, наша иммунная защита с некоторыми из них не в состоянии бороться. Поэтому отдельные виды патогенов поселяются в организме человека и живут там, затаившись. Пробуждаются к действию они тогда, когда иммунитет ослабевает. То есть человек живет и не подозревает, что заражен вирусной инфекцией, но анализ крови на вирусы выявляет ее. Если в результате установлено наличие вирусов, немедленное и грамотное лечение полностью исцелит организм. Лучше не рисковать и следить за своим физическим состоянием, в этом человеку как раз и помогают анализы на вирусы. Никогда не стоит забывать о том, что человек, у которого есть вирусная инфекция, пусть и не в острой стадии, является ее переносчиком, то есть представляет опасность для окружающих.
Самые опасные вирусы
В организме человека могут присутствовать вирусы, против которых бессилен иммунитет и медикаменты. Это гепатит, папилломавирус, герпес, ротавирус и самый опасный для жизни человека - СПИД. Они долгое время могут ничем себя не проявлять, но от этого они не менее опасны. Обнаружить их можно, только сдав анализы на вирусы и инфекции.
Способы выявления вирусных инфекций
Материалом для анализа на вирусы являются: кровь, моча, кал, слюна, соскоб слизистой оболочки, мазок.
Выявить наличие вирусов можно разными медицинскими способами диагностики. Для этого делают анализ крови на вирусы, используют метод полимеразной цепной реакции (ПЦР), метод иммуноферментного анализа (ИФА). Способы исследования ИФА и ПЦР - это высокоточные современные методы исследования крови на вирусы. Такой точный результат не даст даже общий анализ крови.
ИФА - это анализ на антитела к вирусам. В ходе исследования выявляется, есть ли в крови специфические антитела, этиология и стадия заболевания.
ПЦР - способ молекулярно-генетической диагностики, который выявляет, есть ли вирусы в человеке. Анализ показывает присутствие и природу вируса еще до начала болезни. ПЦР никогда не дает ошибочных результатов. Если вирусов нет, то анализ на вирусы будет отрицательным.
Старый способ выявления вирусов - это микробиологический посев (БАКпосев). Метод хоть и древний, но достаточно точный. Материалом для исследования служат соскобы из уретры, влагалища. Соскобы оставляют в питательной субстанции и наблюдают, будут ли расти (и как быстро) микроорганизмы.
Только квалифицированный врач, осмотрев пациента и выслушав его жалобы, может решить, какие анализы на вирусы необходимо сдать.
Данные, подтверждающие наличие вирусов
Общий анализ крови показывает развитие в организме болезни, если лимфоциты, моноциты, СОЭ превышают норму, а нейтрофилы и лейкоциты ниже нормы.
Иммунитет человека вырабатывает иммуноглобулины (IGM, IGA, IGG) в ответ на внедрение в него чужеродных микроорганизмов (то есть вирусов). Их присутствие в крови выявляет метод ИФА. Если сформировались иммуноглобулины, значит, точно присутствуют вирусы. Этот анализ на вирусы определяет стадию болезни и форму заражения (острая, хроническая, бессимптомная), степень продуктивности назначенного лечения. Недостаток этого вида исследования в том, что исследуется не сам вирус, а ответная реакция организма на него.
Каждый вирус имеет уникальную ДНК. По ней можно определить, что это за чужеродный микроорганизм. Это исследование производит метод ПЦР. В основе методики исследования лежит молекулярная биология. Если анализ показал наличие генного материала, принадлежащего вирусу, значит, этим вирусом заражен человек. Кроме типа вируса, подобный анализ на вирусы дает представление об их количестве, уязвимости к определенным медикаментозным препаратам. Это дает возможность подобрать эффективные методы и способы лечения. Метод ПЦР абсолютно точно выявляет все виды вирусов.
Как сдать анализы?
В любой поликлинике пациенту разъяснят, какие анализы сдают на вирусы. Сдать кровь на исследование возможно в любой больнице, где есть лаборатория. В настоящее время существуют платные медицинские диагностические учреждения, где тоже делают анализы. Здесь же выдадут и результаты, но расшифровать результаты должны врачи. Для подтверждения диагноза иногда нужны не только результаты анализов, но и другие способы диагностики.
К сдаче крови на анализ важно правильно подготовиться. В противном случае могут получиться ошибочно положительный или ошибочно отрицательный результат.
Основные правила, как подготовиться и сдать анализы на вирусы:
- Забор крови проводится утром (от 7 до 10 часов).
- Забор крови осуществляется только на голодный желудок. Перед процедурой нельзя ничего есть, пить можно только воду (чай, кофе, соки, напитки исключены).
- Не принимать лекарства в течение недели перед сдачей крови на анализ. Если принимать лекарства обязательно, то об этом надо сказать врачу, который дает направление на исследование.
- Не употреблять спиртные напитки, спиртосодержащие бальзамы, настойки за неделю до сдачи крови.
- Перед проведением анализов (примерно неделю) придерживаться диеты, не есть жирную, маринованную, копченую, жареную пищу.
- В идеале перед процедурой несколько дней не следует курить, но так как страстные курильщики этого придерживаться не будут, хотя бы не курить 2 часа перед забором крови.
- За месяц до анализа прекратить употребление оральных контрацептивов, свечей и мазей.
Очень хорошо перед сдачей крови пациенту находится в спокойном физическом и эмоциональном состоянии. Повышенная возбудимость или физические нагрузки отражаются на структуре крови.
Сама техника забора крови на анализ простая, ее берут из локтевой вены человека.
Основные показания для назначения анализов
Появление красноватой сыпи неизвестного происхождения на теле, раздражение, зуд, жжение слизистой оболочки, болезненность, дискомфорт в нижней части живота и в паху, нездоровые выделения из половых органов, плохой аппетит, постоянная усталость, потеря веса, регулярно повторяющиеся простуды - это все показания для проведения анализов.
Если на теле очень много папиллом, то надо обязательно сделать анализы на вирусы и на определение типа вируса. В некоторых случаях все может закончиться онкологическим заболеванием.
Расшифровка полученных результатов
Метод исследования ИФА строится на выявлении антигенов к разным вирусам. Новый микроорганизм, поселяющийся в человеке, получает от него ответ его иммунной системы. У каждого вида вируса свой антиген. Присутствие антигена LGG к вирусу говорит о том, что иммунитет к нему уже выработан, так как человек болел этой вирусной инфекцией раньше. Если есть антиген LGM, то вирус первый раз внедрился в организм, и идет процесс выработки иммунитета к этому вирусу. В острой фазе инфекции в крови присутствуют оба антигена.
Расшифровать результат исследования методом ПЦР может и не врач, если есть ДНК вируса, то есть и вирус. В некоторых случаях бывают и ошибки. Сам метод очень точный, ошибки могут быть возникнуть по вине медработников, которые делали забор крови.
Какие заболевания выявляют анализы?
Результаты исследований позволяют обнаружить: гепатит В, С; герпес; вирус Эпштейна-Барра; папилломавирус; вирус иммунодефицита; аденовирус; ротавирус; половые инфекции (в том числе и сифилис).
Больному вирусной инфекцией ни в коем случае нельзя заниматься самолечением. Лечение должен назначить квалифицированный врач, специалист по вирусным инфекциям. Лечение должно проходить под наблюдением этого врача.
Больной должен ограничить свои контакты с людьми, выполнять все процедуры, назначенные доктором.
Противопоказания
Сдавать анализы на вирусы противопоказано тем, кто болен половыми инфекциями, ВИЧ, гепатитами, туберкулезом, онкологией, после проведения прививок.
Сдавать анализы противопоказано женщинам во время менструального цикла. А также людям после удаления зуба - в течение 10 дней; после пирсинга, татуировки, иглоукалывания - один год; болевшим ОРВИ, ангиной, гриппом - один месяц; после родов - один год; после лактации - три месяца; после аборта - полгода.
Читайте также: